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Pruebas de aglutinación

ASO,FR,PCR
Dr. Edwin Francisco Mejía Mejía
Anti-estreptolisina o (ASO)
• El ASO-Latex Test es una prueba rápida de aglutinación en porta para
la detección directa y la semi-cuantificación de niveles clínicamente
significativos de anticuerpos anti-estreptolisina O (ASO) en suero.

• El anticuerpo anti-estreptolisina O se encuentra presente en casi


todas las personas en títulos bajos, debido a que las infecciones
estreptocócicas son comunes.
• Sin embargo un título alto o creciente de anti-estreptolisina O, indica
una infección reciente producida por un estreptococo beta he-
molítico de grupo A, como amigdalitis, escarlatina, sepsis puerperal,
erisipela.
• FUNDAMENTOS DEL METODO:
Los anticuerpos anti-estreptolisina O se detectan en suero por su
reacción con la estreptolisina O adsorbida sobre soporte inerte de
látex. Los anticuerpos anti-estreptolisina reaccionan con la
estreptolisina produciendo una aglutinación visible
macroscópicamente.
• MUESTRA:
Suero
a) Recolección: obtener suero de la manera usual.
b) Aditivos: no se requieren.
c) Sustancias interferentes conocidas: los sueros marca-damente
lipémicos o contaminados pueden dar resultados falsamente positivos.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la anti-estreptolisina
en suero es estable 24 horas refrigerada (2-10°C) o congelada por
períodos prolongados.
• LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO:
.- Tiempos de reacción mayores al tiempo indicado pueden producir
reacciones falsamente positivas por efecto del secado de los reactivos
.- Se pueden producir falsos negativos en niños mayores de 6 meses y
menores de 6 años o en infección reciente
.- Debe tenerse en cuenta que en este tipo de infecciones, un resultado
aislado sólo constituye un dato auxiliar, por lo que se recomienda efectuar
determinaciones seriadas cada 15 - 20 días durante 4 ó 6 semanas
.- Cualquier alteración en la proporción Muestra/Reactivo, puede conducir
a resultados erróneos.
• INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS:
Negativo: suspensión homogénea.

Positivo: aglutinación que aparece dentro del tiempo indicado.


(Titulo x Factor)
¿Preguntas?
Factor Reumatoideo (FR)
• Los factores reumatoideos (FR) son un grupo heterogéneo de
autoanticuerpos dirigidos contra el fragmento Fc de la IgG.
Generalmente pertenecen al tipo IgM aunque también se han hallado
FR de todos los tipos de inmunoglobulinas (IgG, IgA, IgD e IgE).

• Los FR se encuentran en un 70-80% de los pacientes adultos con


artritis reumatoidea, en un 10% de jóvenes con artritis reumatoidea
juvenil y en una variedad de otras enfermedades del tejido conectivo
tales como: LES, síndrome de Sjögrems, esclerosis sistémica,
polimiositis, etc.
• Los FR son los auto-anticuerpos más comúnmente encontrados en
pacientes con artritis reumatoidea y por ello representan la
determinación serológica más requerida para el diagnóstico de dicha
enfermedad.

• Su hallazgo aislado no determina la presencia de la enfermedad y es


sólo uno de los tantos criterios necesarios (clínicos, radiológicos y de
laboratorio) para el diagnóstico de artritis reumatoidea.
• FUNDAMENTOS DEL METODO:
Los factores reumatoideos presentes en la muestra son capaces de
aglutinar las partículas de látex recubiertas con γ-globulina humana. La
turbidez causada por la aglutinación de las partículas de látex es
proporcional a la concentración de FR en la muestra y puede ser
medida espectrofotomé-tricamente.
• MUESTRA:
Suero
a) Recolección: obtener suero de la manera usual. No deben usarse muestras
inactivadas por calor.
b) Aditivos: no se requieren.
c) Sustancias interferentes conocidas: hemólisis y ciertas proteínas (distintas del factor
reumatoideo) pueden ser causa de resultados erróneos. Referirse a la bibliografía
de Young para los efectos de las drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el suero debe ser preferentemente
fresco. En caso de no procesarse en el momento puede conservarse en el
refrigerador (2-10°C) durante no más de una semana contada desde su recolección.
• LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO:
• La contaminación bacteriana de controles y muestras, así como la congelación
y descongelación del Reactivo FR-Látex, son causas generales de resultados
positivos falsos.
• Trazas residuales de detergentes en las tarjetas visualizadoras pueden
ocasionar asimismo falsas positividades. Lavar las tarjetas bajo el grifo hasta
que se hayan eliminado todos los residuos y enjuagarlas con agua destilada.
Secar al aire, evitando el empleo de solventes orgánicos puesto que modifican
el acabado especial de las placas.
• La suspensión de Látex no debe utilizarse con posterioridad a su fecha de
caducidad, puesto que un almacenamiento más prolongado puede afectar su
sensibilidad
• INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS:
Negativo: suspensión homogénea.

Positivo: aglutinación que aparece dentro del tiempo indicado.


(Titulo x Factor)
¿Preguntas?
Proteína C Reactiva (PCR)
• La Proteína C Reactiva (PCR) es una proteína termolábil que no
atraviesa la barrera placentaria y cuya movilidad electroforética se
encuentra entre las zonas de las α y β globulinas.

• Su nombre se debe a la capacidad para precipitar los polisacáridos C


de los pneumococos. Es una de las llamadas proteínas de fase aguda y
se incrementa en suero, en una gran variedad de enfermedades
inflamatorias o como respuesta a necrosis tisular.
• Su determinación es importante debido a que aumenta rápidamente
al comienzo de la enfermedad, 14 a 26 horas luego de la inflamación
o injuria tisular y desaparece en la etapa de recuperación,
apareciendo sólo durante la fase activa del proceso inflamatorio.

• La PCR se encuentra comúnmente aumentada en: artritis


reumatoidea activa, infecciones virales, tuberculosis, fiebre reumática
activa, infarto agudo de miocardio, etc. También se la puede hallar
luego de una operación quirúrgica y en gran porcentaje luego de
transfusiones sanguíneas. La determinación de PCR no sólo indica la
intensidad de la enfermedad sino también la respuesta del paciente a
un tratamiento dado.
• FUN­DA­MEN­TOS­DEL­ME­TO­DO:
La PCR se detecta en suero por reacción con un anticuerpo específico
adsorbido sobre un soporte inerte de látex. La PCR se une a los
anticuerpos adsorbidos produciendo la aglutinación de las partículas de
látex.
• MUESTRA
Suero
a)­Recolección: obtener suero de la manera usual.
b)­Aditivos:­no se requieren.
c) ­Sustancias ­interferentes­conocidas: los sueros marcadamente
lipémicos o contaminados pueden dar resultados falsamente positivos.
d) ­Estabilidad ­e ­instrucciones ­de ­almacenamiento: el suero debe ser
preferentemente fresco. En caso de no pro-cesarse en el momento
puede conservarse hasta 24 horas en refrigerador (2-10°C) y hasta 4
semanas congelado a -20oC.
• LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO:
• La contaminación bacteriana de controles y muestras, así como la congelación
y descongelación del Reactivo FR-Látex, son causas generales de resultados
positivos falsos.
• Trazas residuales de detergentes en las tarjetas visualizadoras pueden
ocasionar asimismo falsas positividades. Lavar las tarjetas bajo el grifo hasta
que se hayan eliminado todos los residuos y enjuagarlas con agua destilada.
Secar al aire, evitando el empleo de solventes orgánicos puesto que modifican
el acabado especial de las placas.
• La suspensión de Látex no debe utilizarse con posterioridad a su fecha de
caducidad, puesto que un almacenamiento más prolongado puede afectar su
sensibilidad
• INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS:
Negativo: suspensión homogénea.

Positivo: aglutinación que aparece dentro del tiempo indicado.


(Titulo x Factor)
¿Preguntas?

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