UNIVERSIDAD

AUTNOMA BENITO
JUREZ DE OAXACA

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

LABORATORIO DE INMUNOLOGA

EQUIPO # 5:
CUEVAS VSQUEZ SOLEDAD
GARCA VILLAGOMEZ JUAN PABLO
HERNNDEZ PREZ PILAR
HERRERA BLAS BERTHA
RUZ BLAS SARA
RUZ PREZ NGEL RODOLFO

PRCTICA #6: Factor Reumatoideo y Protena C Reactiva

INTRODUCCIN:
Los factores reumatoideos (FR) son autoanticuerpos antifragmento Fc
de la IgG que dan lugar a la formacin de inmunocomplejos
capaces de fijar complemento y de actuar sobre las membranas
celulares, la pared vascular y la sinovial. Provocan alteraciones
(aumento de la permeabilidad y reacciones inflamatorias) que
finalmente, conducen a la destruccin de la membrana sinovial,
cartlago y hueso. Son anticuerpos contra antgenos no especficos
de rgano que puede encontrarse en suero y en lquido sinovial. Se
postula que su aparicin puede deberse a factores genticos,
persistencia de antgenos heterlogos y a la modificacin de una
inmunoglobulina IgG con especificidad a un determinado antgeno.
La unin con este antgeno provocara un cambio conformacional
en su estructura que hace que sea reconocida como extraa por el
sistema

inmune.

Tienen

distinto

tamao

molecular

distinta

especificidad.
La Protena C Reactiva (PCR) es una protena de fase aguda que
aumenta en el suero resultado de la liberacin de interleuquina 6.
Indica presencia de inflamacin pero algunos tumores malignos
como enfermedad de Hodgkin y carcinoma renal pueden producir
IL-6 que inducen una respuesta de fase aguda, con fiebre y altas
concentraciones de PCR. Es una protena no glicosilada de sntesis
heptica, la sntesis extraheptica no contribuye a los niveles en
suero. La sntesis normal diaria es de 1-10 mg/da incrementando a 1
gr/ da en casos de inflamacin aguda. La vida media en circulacin
es de 19 horas. La funcin biolgica es la unir una gran cantidad de

sustancias endgenas y exgenas y su remocin de la sangre y los

tejidos por opsonizacin.

OBJETIVOS:
Determinar mediante un mtodo de aglutinacin con ltex la
presencia de Factor Reumatoideo y Protena C Reactiva como
auxiliares en el diagnstico de transtornos inflamatorios.

FUNDAMENTO:
Factor Reumatoideo en ltex: es una prueba rpida de aglutinacin
basada en una modificacin de la tcnica de Singer, para la
deteccin directa y la semicuantificacin en placa de los factores
reumatoideos (FR) presentes en el suero. La determinacin se efecta
ensayando una suspensin de partculas de ltex recubiertos con
gamma globulina humana frente a los sueros problema. La presencia
o ausencia de aglutinacin visible es indicativa de la presencia o
ausencia de FR en las muestras
ensayadas.
Protena C Reactiva en ltex: es una prueba rpida de aglutinacin
en placa basada en la tcnica de Singer, para la deteccin directa
y la semicuantificacin de la protena C-reactiva (PCR) en suero.
La determinacin se efecta ensayando una suspensin de ltex
recubierto con anticuerpos anti-PCR, frente a los sueros problema. La
presencia de aglutinacin es indicativa de un aumento del nivel de
PCR por encima del lmite superior del intervalo de referencia de las
muestras ensayadas

EQUIPO, MATERIAL Y REACTIVOS NECESARIOS:

Reactivo de ltex-Factor Reumatoideo
Reactivo de ltex-Protena C reactiva

Solucin amortiguadora de glicina-cloruro de sodio pH 8.2

Solucin salina isotnica

MATERIALES:

Placa serolgica de fondo oscuro

Aplicadores de madera

Tubos para toma mltiple sin anticoagulante con gel

separador

Agujas para venopuncin

Torniquete

Torundas de algodn

MATERIAL BIOLGICO:

Suero de paciente.

APARATOS E INSTRUMENTOS
Centrfuga.
Pipetas automticas de volumen variable 10 a 100 uL

PROCEDIMIENTO:
PREPARACIN DE LAS MUESTRA BIOLGICA.
1. Extraccin de una muestra de sangre venosa.
1.- Se realizo la extraccin de una muestra de sangre total por
puncin venosa en un tubo sin anticoagulante y se espero por 15 min
para que la muestra coagulara completamente.

2.- Una vez concluido el tiempo se

procedi a centrifugar la muestra para
obtener el suero durante 5 minutos a
2500 r.p.m. una vez que se concluyo el
proceso de centrifugacin se verifico
que el gel separador se encontrara
entre las dos fases que son sangre total
y el suero (transparente y sin indicios de
hemolisis)

PROCEDIMIENTO.
Factor Reumatoideo (FR).
Una vez obtenido el suero por el mtodo de aglutinacin en latex en
placa, se utilizo una suspensin estabilizada de partculas de latex
sensibilizadas con IgG humana.

El suero se inactivo previamente calentando en bao serolgico a

56C por 15 min. Ya inactivado se diluye 1:20 con amortiguador de
glicina-cloruro de sodio colocando 0.1 ml de suero y 1.9 ml del
amortiguador.

Se coloca una gota de la dilucin

en la placa de vidrio oscura y se
aade una gota del reactivo ltexFR.

Se mezcla y se agita suavemente

con movimientos rotatorios durante
dos minutos.
Se
busca
la
macroscpica.

aglutinacin

En el caso de la muestra analizada

dio como resultado NEGATIVA en
la aglutinacin por lo tanto no se continuo haciendo diluciones.

RESULTADOS:
La sangre de la compaera de quien se tom la muestra fue negativa, se da
este resultado debido a que la muestra se mantuvo homognea durante 2
minutos en contacto con el reactivo de ltex y al no haber aglutinacin se
reporta negativa , determinando que nuestro paciente no presenta ninguna
relacin con una enfermedad de este tipo. Pero aun que no fue
diagnosticado pero la presencia de este factor tampoco se descarta debido
a que mltiples factores influyen en el.
Aproximadamente un 20% de individuos con AR no presenta valores
detectables de FR o bien los presenta a muy baja concentracin. En estos
casos, puede ser necesario determinar el anti-CCP para confirmar la
enfermedad.

CONCLUSIN:
Los factores reumatoides son un grupo de anticuerpos,
mayoritariamente de clase IgM, dirigidos contra determinantes de la
porcin Fc de la inmunoglobulina IgG del paciente. Aunque estn
presentes en diversas enfermedades se hallan elevados
principalmente en pacientes con artritis reumatoide.
En el diagnstico clnico, los resultados de la determinacin de los
factores reumatoides deben ser considerados siempre en relacin a
los hallazgos clnicos y otras pruebas de laboratorio, para as poder
tener resultados prudentes que puedan favorecer a diversos
tratamientos.
En la prctica realizada acerca de este factor, obtuvimos un
resultado negativo, debido a que la prueba no present aglutinacin

alguna, indicando ausencia de FR en las muestras ensayadas,

determinando que nuestro paciente no presenta ninguna relacin
con una enfermedad de este tipo.
Es importante mencionar que su presencia no diagnostica la
enfermedad, pero su ausencia tampoco la descarta.

ANEXOS:
1. Por qu se inactiva el suero?
Fundamento de la prueba de factor reumatoide en ltex El FR-Ltex
Test es una prueba rpida de aglutinacin basada en una
modificacin de la tcnica de Singer, para la deteccin directa y la
semicuantificacin en porta de los factores reumatoides (FR)
presentes en el suero. La determinacin se efecta ensayando una
suspensin de partculas de ltex recubiertos con gamma globulina
humana frente a los sueros problema. La presencia o ausencia de
aglutinacin visible es indicativa de la presencia o ausencia de FR en
las muestras ensayadas.

2. Explique el fundamento de cada una de las pruebas.

FACTOR REUMATOIDEOS
Los factores reumatoideos (FR) son autoanticuerpos antifragmento Fc
de la IgG que dan lugar a la formacin de inmunocomplejos
capaces de fijar complemento y de actuar sobre las membranas
celulares, la pared vascular y la sinovial. Provocan alteraciones
(aumento de la permeabilidad y reacciones inflamatorias) que
finalmente, conducen a la destruccin de la membrana sinovial,
cartlago y hueso. Son anticuerpos contra antgenos no especficos
de rgano que puede encontrarse en suero y en lquido sinovial. Se
postula que su aparicin puede deberse a factores genticos,
persistencia de antgenos heterlogos y a la modificacin de una

inmunoglobulina IgG con especificidad a un determinado antgeno.

La unin con este antgeno provocara un cambio conformacional
en su estructura que hace que sea reconocida como extraa por el
sistema inmune. Tienen distinto tamao molecular y distinta
especificidad.
PCR
La Protena C Reactiva (PCR) es una protena de fase aguda que
aumenta en el suero resultado de liberacin de interleuquina 6.
Indica presencia de inflamacin pero algunos tumores malignos
como enfermedad de Hodgkin y carcinoma renal pueden producir
IL-6 que inducen una respuesta de fase aguda, con fiebre y altas
concentraciones de PCR. Es una protena no glicosilada de sntesis
heptica,
la sntesis extraheptica no contribuye a los niveles en suero. La
sntesis normal diaria es de 1-10 mg/da incrementando a 1 gr/ da en
casos de inflamacin aguda. La vida media en circulacin es de 19
horas. La funcin biolgica es la unir una gran cantidad de sustancias
endgenas y exgenas y su remocin de la sangre y los tejidos por
opsonizacin.
La Protena C-Reactiva (PCR) es una protena de fase aguda,
presente en el suero de pacientes sanos, la cual puede
incrementarse significativamente en la mayora de los procesos
infecciosos bacterianos y virales, tejidos daados, inflamacin y
neoplasias malignas. El incremento de la concentracin de esta
protena se produce despus de unas horas de desarrollarse la
enfermedad pudiendo alcanzar niveles de 300 mg/L de 12 a 24
horas.
El mtodo se fundamenta en una reaccin de aglutinacin de una
suspensin de partculas de ltex poliestireno sensibilizadas con
anticuerpos altamente purificados de anti-proteina C-reactiva. La
aglutinacin es visible a una concentracin de PCR en suero igual o
superior a 6 mg/L
3. Explique el significado clnico de una prueba FR positiva y el de una
PCR positiva
PCR
El examen de protena C-reactiva es un examen general para
verificar si hay una inflamacin en el cuerpo. No es un examen

especfico. Eso significa que puede revelar que usted tiene una
inflamacin en alguna parte del cuerpo, pero no puede sealar la
localizacin exacta. El examen de protena C-reactiva a menudo se
realiza junto con el examen de VSG o de eritro-sedimentacin, que
tambin sirve para buscar inflamacin.

Le pueden realizar este examen para:

Buscar exacerbaciones de enfermedades inflamatorias
como artritis reumatoidea, lupus o vasculitis.
Determinar si un antinflamatorio est funcionando para tratar
una enfermedad o afeccin.
Sin embargo, un nivel de PCR bajo no siempre significa que no se
presente una inflamacin. Los niveles de PCR pueden no estar
elevados en personas con artritis reumatoidea y lupus. La razn de
esto no se conoce.
Un examen de PCR ms sensible, llamado anlisis de la protena C
reactiva de alta sensibilidad, est disponible para determinar el
riesgo de cardiopata en una persona.

FACTOR REUMATOIDE
Este examen se usa con mayor frecuencia para el diagnstico de
la artritis reumatoidea o el sndrome de Sjogren.
Puede aparecer POSITIVO el Factor Reumatoide (FR) en:

Artritis Reumatoide
Dermatomiositis
Escleroderma
Hepatitis crnica
Infeccin viral crnica
Mononucleosis infecciosa
Leucemia
Lupus Eritematoso Sistmico LES
Sndrome de Sjogren
Sndrome Nefrtico
Tuberculosis

Los niveles del factor reumatoideo superiores a los normales se

pueden ver en personas con otros problemas de salud. Sin embargo,
dichos niveles ms altos del FR no se usan para diagnosticar estas
otras afecciones:

SIDA, hepatitis, influenza, mononucleosis

infecciosa y
infecciones virales
Ciertas enfermedades del rin
Endocarditis, tuberculosis y otras infecciones bacterianas
Infecciones parasitarias
Leucemia, mieloma mltiple y otros cnceres
Enfermedad pulmonar crnica
Enfermedades crnicas del hgado

otras