PRÁCTICA N°8:

PREPARACIÓN, TINCIÓN Y
OBSERVACIÓN DEL FROTIS
SANGUÍNEO
Blgo. Johnny Antonio Ysique Cubas
 ¿Qué es un frotis sanguíneo?
■ Es la preparación microscópica delgada y transparente,
extendida entre dos cristales (portaobjetos) obtenida a partir de
una gota de sangre, de tal manera que las células de ésta se
dispongan formando una sola capa de ellas.
Utilidad de las extensiones
El estudio de las extensiones sanguíneas es esencial para:

– El estudio de las características citológicas de las células de

la sangre (línea eritrocítica, leucocitaria y megacariocítica)

– Realización del recuento diferencial leucocitario

– Comprobación de las alarmas que proporcionan los

analizadores hematológicos (pseudotrombocitopenia
producida por agregados plaquetarios.)

– El diagnóstico correcto de una enfermedad.

– Monitorear el proceso de recuperación del paciente.

Partes de una extensión
■ CABEZA
– Es la zona inicial de la extensión.
– Es la región más gruesa.
– En ella se encuentra una mayor proporción de linfocitos, y
los hematíes forman aglomerados (pilas de monedas).
Partes de una extensión
■ CUERPO
– Es la zona media del frotis.
– Su espesor es el apropiado.
– En ella existe una adecuada proporción entre los distintos
tipos de leucocitos.
– Contiene la "zona ideal" de observación, que corresponde
a la porción que limita con la cola
Partes de una extensión
■ COLA.
– Es la zona final de la extensión.
– Suele tener un aspecto redondeado.
– Es la región más fina.
– En ella se encuentra una mayor proporción de
leucocitos grandes (granulocitos y monocitos), y
además. los hematíes están deformados y presentan una
tonalidad uniforme.
– En su porción terminal suelen ser más abundantes las
plaquetas, sobre todo si son grandes.
 Defectos de una extensión
■ Excesiva longitud y escaso grosor o escasa longitud y excesivo
grosor
– Inadecuado tamaño de la gota de sangre
– Un error en la velocidad
– Un fallo en el ángulo de extensión de la misma.
■ Presencia de escalones o estrías
– Falta de uniformidad en el deslizamiento de la gota.
■ Existencia de abundantes zonas redondeadas que carecen de sangre
– Presencia de restos de grasa o de suciedad en el porta
■ Extremo final excesivamente dentado.
Escasa longitud y excesivo grosor:
Inadecuado tamaño de la gota de sangre
Falta de uniformidad en el deslizamiento de la gota.
Presencia de restos de grasa o de suciedad en el porta
REALIZACIÓN
DE UNA
EXTENSIÓN
SANGUÍNEA
 TINCIÓN
HEMATOLÓGICA:
WRIGHT
TINCIÓN DE WRIGHT.

Es una solución de:

■ Eosina: colorante ácido
■ Una mezcla de:
– Azul de metileno (del 50 al 75%)
– Azur B (del 10 al 25%)
■ Alcohol Metílico: que permite la fijación de las célula
■ Preparación buffer de fosfatos (que rehidrata a las células
después de la exposición con metanol)
Tinción de Wright
■ Colorantes ácidos:
– Cargados negativamente, tienen afinidad por las estructuras
cargadas positivamente (básicas) de las células y que tiñe de
rosado las partes alcalinas: citoplasma (hemoglobina)
– El principal de ellos es la eosina.
■ Colorantes básicos:
– Tienen una especial afinidad por las estructuras ácidas de las
células, tiñe de color azul las partes ácidas de las células:
ácido nucleico (núcleo ADN-RNA), proteínas, mitocondrias,
ribosomas.
– Uno de ellos es el Azul de Metileno.
 PRÁCTICA N°9:
HEMOGRAMA: RECUENTO
DIFERENCIAL LEUCOCITARIO
 GLOBULOS BLANCOS

GLOBULOS ROJOS

PLAQUETAS
 Serie blanca
■  La serie blanca de la sangre son las células sanguíneas encargadas
de la defensa contra la infección, bien como productoras de
anticuerpos (linfocitos), o participando en la destrucción de
microorganismos (los neutrófilos, los eosinófilos, los basófilos y los
monocitos). Además, los eosinófilos también participan en las
reacciones de hipersensibilidad.
 FISIOLOGÌA DEL GLOBULO BLANCO
CLASIFICACION GENERAL

• POR LA PRESENCIA DE GRANULOS GRANULOCITOS

AGRANULOCITO
S
• POR SU ORIGEN MIELOIDE

LINFOIDE
• POR LAS CARACTERISTICAS DEL NUCLEO
MONONUCLEARES

POLIMORFONUCLEARES

• SEGÚN SU FUNCIÓN PROCESOS FAGOCITICOS

PROCESOS INMUNITARIOS
 EXAMEN CON OBJETIVO DE 40 X
■ Número de leucocitos/mm3 de sangre

• Buscar un campo donde los g.r. se encuentren

uniformemente distribuidos y en donde apenas se toquen
unos con otros (2 o 3 células pueden superponerse).
• Examinar 10 campos y determinar su promedio.
• Multiplicar el número promedio de leucocitos por campo
x 2000
 EXAMEN CON OBJETIVO DE 100 X
■ Recuento diferencial de leucocitos

• Se realiza en la misma área en donde se realizó el

recuento de g.b.
• Contar y clasificar 100 leucocitos consecutivos e
informar con %.
 EXAMEN CON OBJETIVO DE 100 X
■ Recuento de plaquetas/mm3 de sangre

•Examinar 10 campos y determinar su promedio.

•Multiplicar el número promedio de plaquetas por
campo x 10 000.
 ANORMALIDADES DE LOS LEUCOCITOS
GRANULACIÓN TÓXICA (azurófila)
- Aumento del tamaño y de
la intensidad de los gránulos
de los neutrófilos.

Se observan cuando hay una

Infección bacteriana.
HIPERSEGMENTACIÓN ( macropolicito )
Neutrófilos con mas de
cinco lóbulos.

Es un índice de un proceso
megaloblástico.

Se observan en
anemia megaloblástica
GRACIAS