Procedimientos Operativos Estndar para Los Laboratorios Clnicos Del Primer Nivel de Atencin

PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTNDAR PARA
LOS LABORATORIOS CLNICOS DEL PRIMER NIVEL

DE ATENCIN
MINISTERIO DE SALUD
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD

RED NACIONAL DE LABORATORIOS CLNICOS
PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTNDAR PARA

LOS LABORATORIOS CLNICOS DEL PRIMER NIVEL
DE ATENCIN
CONTENIDO:
POE TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE VENOSA.
POE PREPARACIN DE FROTIS SANGUNEO Y FRMULA
DIFERENCIAL.
POE FROTIS DE SANGRE PERIFRICA.
POE EXAMEN GENERAL DE HECES.
POE EXAMEN GENERAL DE ORINA.
EL SALVADOR, C.A.
PRIMERA EDICIN, 2013
Red Nacional de Laboratorios Clnicos
Corriendo por un diagnstico oportuno
AUTORIDADES DEL MINISTERIO DE SALUD

DRA. MARA ISABEL RODRGUEZ
MINISTRA DE SALUD
DR. EDUARDO ANTONIO ESPINOZA FIALLOS
VICEMINISTRO DE SALUD
DRA. ELVIA VIOLETA MENJVAR
VICEMINISTRA DE SERVICIOS DE SALUD
DR. JULIO ROBLES TICAS
DIRECTOR NACIONAL DE HOSPITALES
DRA. ARGELIA DUBN
DIRECTORA DEL PRIMER NIVEL DE ATENCIN
DRA. ELIETTE VALLADARES
SUBDIRECTORA DEL INSTITUTO NACIONAL DE SALUD
INTRODUCCIN
Los Laboratorios Clnicos representan un apoyo de diagnstico para el

rea mdica, de manera que a travs de los anlisis realizados se puede
establecer un diagnstico, pronstico y valorar ecacia del tratamiento que se
le administra al paciente. Conscientes de la gran importancia y con la nalidad
de alcanzar un trabajo de calidad, es indispensable la estandarizacin de
los procedimientos a travs de Procedimientos Operativos Estndar (POE).
Los POE son instrucciones escritas que describen en forma detallada la
serie de procedimientos y actividades que se deben realizar en un lugar
determinado. Esto ayuda a que cada persona dentro del laboratorio Clnico
pueda saber con exactitud qu le corresponder hacer cuando se efecte
la aplicacin del contenido del POE. Los POE garantizan la realizacin de las
tareas respetando un mismo procedimiento, adems sirven para evaluar al
personal y conocer su desempeo. Al ser de revisin peridica, sirven para
vericar su actualidad.
El propsito de un POE es suministrar un registro que demuestre el control del
proceso, minimizar o eliminar desviaciones o errores y riesgos, y asegurar que
la tarea sea realizada en forma segura.
Los Procedimientos Operativos Estndar contenidos en este documento se
han desarrollado con la nalidad de contar con un instrumento que contenga
la secuencia de los pasos necesarios, que aseguren la correcta ejecucin
de todos los procedimientos tcnicos de cada uno de los Laboratorios, y de
esta manera contribuir al ordenamiento y estandarizacin de los mismos.
Los contenidos de esta publicacin deben incorporarse en las actividades
diarias de los Laboratorios Clnicos de los establecimientos del Primer Nivel de
Atencin, a n de garantizar la emisin de resultados conables, comparables
y oportunos, que colaboren a mejorar la condicin de salud de la poblacin.
Es importante sealar, que este documento est sujeto a actualizacin en la
medida que se presenten variaciones en la ejecucin de los procedimientos,
en la normatividad establecida, o en algn otro aspecto que inuya en la
operatividad del mismo, con el n de cuidar su vigencia operativa.
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL:
Proporcionar a la Red de Laboratorios Clnicos del Ministerio de Salud, un
instrumento que facilite el desarrollo adecuado, sistematizado y estandarizado
de los procedimientos tcnicos que se realizan en los Laboratorios del Primer
Nivel de Atencin.
OBJETIVOS ESPECFICOS:
-
Brindar una herramienta que permita la ejecucin de los procedimientos

tcnicos de laboratorio uniformemente, de manera que se eviten
desviaciones en su desarrollo.
Contribuir a la aplicacin de medidas de bioseguridad y control de calidad

que deben cumplirse cuando se desarrolle un procedimiento tcnico.
Contar con un instrumento que sirva de gua para la evaluacin y monitoreo

de actividades de laboratorio.
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1.
TOMA DE MUESTRA DE SANGRE VENOSA
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OBJETIVO
Obtener una muestra de sangre venosa adecuada para los anlisis que se
requiera.
2.
CAMPO DE APLICACIN
Establecimientos de salud del Ministerio de Salud que colecten muestras

para exmenes de Laboratorio Clnico.
3.
RESPONSABLES
Profesional en Laboratorio Clnico, Tcnicos en Laboratorio Clnico y otro

personal capacitado en ebotoma.
4.
DEFINICIONES Y SIGLAS
Deniciones:
-
Anticoagulantes: Son sustancias que mantienen la sangre en estado

lquido y generalmente ejercen su accin anticoagulante, evitando la
accin del calcio, ion fundamental para la coagulacin de la sangre.
Ayuno: Es aquel acto de abstencin voluntaria de ingerir toda o algn

tipo especco de comida durante un perodo de tiempo determinado.
Bioseguridad: Norma de comportamiento encaminada a lograr actitudes

y conductas que disminuyan el riesgo de los trabajadores de la salud en
el medio laboral.
Citrato de sodio: Anticoagulante que se utiliza generalmente en

concentraciones al 3.8% en estudios de coagulacin. Funciona evitando
la ionizacin del calcio.
EDTA: El anticoagulante el EDTA (cido etiln-diamino tetraactico)

cuyo mecanismo de accin es eliminar completamente el calcio de la
muestra, es utilizado para la biometra hemtica, pruebas de banco de
sangre y otras pruebas.
Toma de Muestras de Sangre Venosa
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Flebotoma: Describe una incisin practicada en la vena por motivos

diversos, en laboratorio clnico se realiza con el objetivo de obtener una
muestra de sangre para la realizacin de anlisis clnicos.
Hemlisis: Salida de hemoglobina y otras protenas del interior de los

hemates por rotura de los mismos causada por algn efecto mecnico
o sicoqumico.
Heparina: Se utiliza tanto en algunos estudios de rutina como especializados.

Su presentacin puede incluir heparina con concentraciones de sodio o
litio. En general, la heparina con litio es utilizada para estudios de qumica y
la heparina sdica se utiliza para estudios de linfocitos. Acta acelerando
la inhibicin del factor Xa por la antitrombina.
Muestra: Parte de un espcimen que utilizamos para realizar pruebas de

laboratorio clnico con la nalidad de obtener informacin del estado
de salud del paciente.
Plasma: Es la porcin acuosa de la sangre que se obtiene tras centrifugar

la muestra mezclada con anticoagulante (EDTA, citrato, heparina). Al
impedir la coagulacin de la sangre, el bringeno, tras la centrifugacin
queda en la fraccin acuosa.
Sangre completa: La sangre obtenida mediante puncin contiene clulas,

plasma, protenas, sustratos, electrolitos, etc. Mezclada con el anticoagulante
constituye la muestra de sangre completa.
Suero: Es el componente de la sangre resultante tras dejar reposar la sangre

el tiempo suciente para formar el cogulo (aproximadamente 10 minutos)
y centrifugar el tubo a continuacin.
Tubo sin aditivos (sin anticoagulante): Utilizados para la obtencin de

suero (pruebas de qumica clnica, inmunolgicas y otras); no llevan
anticoagulante aunque pueden contener activadores, que facilitan la
retraccin del cogulo; y gel separador, que facilita la separacin de
suero y cogulo tras la centrifugacin.
Siglas:
-
INS: Instituto Nacional de Salud.
POE: Procedimiento operativo estndar.

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DESARROLLO DEL PROCEDIMIENTO
Fundamento:
La sangre es el espcimen ms usado habitualmente para los estudios
analticos por la riqueza de datos que puede aportar, por su funcionalidad
y por ser relativamente fcil su obtencin. Dependiendo del tipo de estudio
que se vaya a realizar, el tipo de muestra puede coincidir con el espcimen
(sangre total) o ser una parte del mismo (plasma, suero).
Los especmenes de sangre se obtienen para realizar en ellos una gran variedad
de pruebas, entre las que estn los cultivos microbiolgicos (hemocultivos),
los recuentos celulares, las determinaciones de sustancias qumicas (sustratos,
enzimas, hormonas y protenas), la caracterizacin de subpoblaciones
celulares, los estudios de coagulacin y las pruebas inmunolgicas.
Muestra requerida:
Sangre completa obtenida de manera adecuada y acorde a las pruebas
que se van a realizar.
Materiales:
- Jeringa estril con aguja de calibre adecuado (las ms utilizadas son las
de calibre 21G).
- Si se utiliza sistema de extraccin de sangre al vaco: dispositivo para aguja
(holder), aguja de calibre adecuado.
- Torundas de algodn.
- Plumn marcador permanente para rotular tubos.
- Lapicero.
- Torniquete.
- Tubos con o sin anticoagulante.
- Gradilla para tubos.
- Sillas para toma de muestras.
- Mesa para ubicar materiales necesarios para realizar la extraccin.
- Descarte para material cortopunzante (recipiente con paredes rgidas).
- Descarte para material bioinfeccioso (bolsa roja).
- Descarte para desechos comunes (bolsa negra).
- Equipo de proteccin personal como: guantes, gabacha, gafas, zapato
cerrado.
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Reactivos
-
Alcohol etlico (70%).
Procedimiento:
1. Lavar y secar las manos.
2. Colocarse el equipo de proteccin personal adecuadamente.
3. Preparar el material necesario para la extraccin.
4. Sentar cmodamente al paciente.
5. Leer atentamente la Boleta nica para Pruebas de Laboratorio Clnico.
(Anexo 1)
6. Antes de iniciar la extraccin preguntar al paciente su nombre y apellidos,
comprobando que coinciden con los indicados en la Boleta nica para
Pruebas de Laboratorio Clnico.
7. Vericar la preparacin previa del paciente de la prueba a realizar. (Ver
apartado de cuidados especcos para cada rea)
8. Identicar el tubo de acuerdo a la Boleta nica para Pruebas de
Laboratorio Clnico.
9.
Explicar al paciente sobre el procedimiento que se le va a realizar.
10. Seleccionar la vena apropiada para la puncin (las principales son

la ceflica, la mediana cubital y la baslica. La vena de eleccin es la
mediana cubital por su grosor y supercialidad). (Anexo 2)
11. Seleccionar el calibre adecuado de aguja a utilizar, esto se har en base
al tipo de paciente a puncionar:
- En pacientes con vena adecuada se puede utilizar aguja calibre 21G
x 1 o 22G x 1.
- En pacientes peditricos o con venas difciles se pueden utilizar agujas
de menor calibre 23G x 1. (Anexo 3)
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12. Realizar asepsia con torunda de algodn humedecida con alcohol etlico
al 70% de adentro hacia fuera. (Anexo 4)
13. Colocar el torniquete rmemente alrededor del brazo a 8 o 10 cm del rea
de puncin, y pedir al paciente que abra y cierre la mano varias veces
para favorecer la dilatacin de las venas. La aplicacin del torniquete
no debe durar ms de dos minutos.
14. Colocar la aguja con el bisel hacia arriba sobre la vena a puncionar.
(Anexo 5)
15. Proceder a puncionar la vena seleccionada. (La muestra no debe tomarse
en venas con hematomas, fstulas o catter)
16. Introducir la aguja en el centro de la vena y penetrar a lo largo de la
vena de 1 a 1.5 cm.
17. Tirar hacia atrs el mbolo de la jeringa muy lentamente para que penetre
la sangre en la jeringa hasta llenar con la cantidad de sangre necesaria.
Si utiliza sistema de sangrado al vaco, introducir el tubo en el dispositivo
(holder) de manera que al ejercer presin se atraviese el extremo inferior
de la aguja, para que la sangre uya hacia el tubo por efecto del vaco.
(ver orden de llenado de tubos colectores de muestras)
18. Retirar torniquete tirando del extremo doblado y colocar una torunda
de algodn seca sobre la piel donde se encuentra oculta la punta de
la aguja.
19. Extraer la aguja con un movimiento rpido por debajo de la pieza de
algodn, pedir al paciente que presione rmemente la torunda durante 3
minutos con el brazo extendido para prevenir la formacin de hematomas.
20. Separar la aguja de la jeringa cuidadosamente, llenar los tubos deslizando
la sangre por las paredes del mismo. (ver orden de llenado de tubos
colectores de muestras)
21. Llenar el tubo hasta la marca sealada por el fabricante.
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22. Mezclar los tubos recin extrados varias veces por inversin para asegurar
una perfecta mezcla de la sangre con el anticoagulante.
23. Distribuir las muestras con su respectiva boleta nica en las diferentes
reas de laboratorio clnico si este fuera el caso.
24. Si la muestra extrada se enviara fuera de laboratorio deber prepararse
en triple embalaje de la siguiente manera: (Ver Anexo 8).
-
Recipiente primario: Es el tubo que contiene la muestra, ste debe

envolverse en papel absorbente suciente para absorber uido en caso
de derrame.
Envase secundario: Debe ser impermeable y duradero que encierra

y protege al recipiente primario, se pueden colocar varios recipientes
primarios envueltos en un embalaje secundario, pero ste deber usar
suciente material absorbente para absorber todo el uido en caso de
rotura.
Envase exterior: Los embalajes secundarios se colocan en embalajes

exteriores, con un material amortiguador adecuado, los embalajes exteriores
protegen las muestras de daos fsicos, mientras se encuentran en trnsito.
Cada embalaje debe ir acompaado de las Boletas nicas para Pruebas de
Laboratorio Clnico correspondientes a las muestras transportadas.
Orden de llenado de tubos colectores de muestras
Llenar los tubos en el orden siguiente para evitar la contaminacin de las
muestras por anticoagulantes no deseados. (Ver Anexo 6)
1. Tubo para obtencin de suero: sin anticoagulante (tubo tapn rojo).
2. Tubo para pruebas de coagulacin: anticoagulante citrato de sodio
(tubo tapn celeste).
3. Tubos restantes con anticoagulantes: EDTA, Heparina de litio, Oxalato
de potasio u otros.
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Condiciones ambientales:
El rea de sangra debe contar una silla de toma de muestras con apoyo de
brazos y una mesa para ubicar los materiales necesarios para la extraccin.
Debe ser un rea limpia con buena iluminacin (luz blanca).
El rea donde se realice el procedimiento debe estar organizada y tener
espacio adecuado para asegurar el desarrollo de trabajo, reuniendo los
requisitos de bioseguridad.
El Laboratorio debe hacer seguimiento, controlar y registrar las condiciones
ambientales (temperatura, humedad) cuando se requiera en especicaciones
pertinentes o cuando puedan inuir en la calidad de los resultados.
Fuentes de error:
-
Prolongada aplicacin del torniquete.
Extraccin violenta de la sangre, que puede provocar hemlisis.
Empleo de tubos mal lavados.
Depositar la sangre en el tubo en forma violenta.
Dejar los tubos con muestras destapados.
Que el paciente no cumpla con las indicaciones de acuerdo al anlisis

qumico a realizar.
Mezcla inadecuada de la sangre.
Relacin inadecuada de sangre y anticoagulante.
Precauciones de Bioseguridad
-
Manipular todas las muestras clnicas como si fuera material potencialmente

infeccioso.
Usar correctamente el equipo de proteccin personal: guantes, gabacha

manga larga, gafas, zapato cerrado.
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Todo objeto cortopunzante contaminado se debe colocar en un recipiente

de paredes rgidas con tapadera y seguir el procedimiento normado para
el descarte de stos.
Todo material contaminado con sangre debe eliminarse en el descarte

de desechos bioinfecciosos (bolsa roja).
Todo material que no est contaminado con sangre se deposita en el

recipiente de desechos comunes (bolsa negra). (Ver Anexo 7)
Cuidados especcos para cada rea de laboratorio clnico

Qumica clnica
-
La muestra utilizada para anlisis de qumica clnica debe tomarse en

tubos sin anticoagulante (tubo tapn rojo) para obtener suero o tubos
con Heparina de Litio (tubo tapn verde) para obtener plasma.
El tamao de los tubos a utilizar pueden ser de 12x75 y 13x75 mm con

capacidad para 2, 3 y 5mL o de 16x100 mm que son para un volumen
de 10mL.
Se debe vericar el ayuno previo de 8-12 horas para las pruebas de

glucosa, colesterol y triglicridos.
Serologa
-
La muestra para anlisis serolgicos debe tomarse en tubo sin anticoagulante

(tubo tapn rojo) para obtener suero, se pueden utilizar de tamao 12 o
13 x75 con capacidad para 2, 3 y 5 mL o los de 16x100 que son para un
volumen de 10 mL.
Las pruebas serolgicas no necesitan preparacin previa del paciente.
Hematologa
-
La muestra para anlisis de hematologa debe tomarse en tubo con

anticoagulante EDTA (tubo tapn morado) para obtener sangre completa.
ste tiene un tamao de 13x75 mm y una capacidad para 2, 3, 4 y 5 mL.
Las pruebas de hematologa no necesitan preparacin previa del paciente.

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Asegurarse llenar el tubo hasta la marca, para asegurar la relacin

anticoagulante/ muestra, si sta no se guarda los resultados reportados
no seran conables, al agregar menos muestra de la indicada en la
marca del tubo sta se diluye y disminuye el valor del hematocrito y el
recuento celular, si se agrega ms sangre que la indicada se corre el
riesgo de formar microcogulos.
La muestra obtenida debe estar libre de cogulos para ello se recomienda

una buena mezcla de la muestra con el anticoagulante y una adecuada
proporcin de los mismos.
Coagulacin
-
La muestra para pruebas de coagulacin debe ser tomada en tubo con

anticoagulante Citrato de sodio al 3.8% (tubo tapn celeste). El tamao ms
utilizado es el de 13x75 mm, con un volumen aproximado de aspiracin de 4.5 mL.
La muestra para pruebas de coagulacin es el plasma con citrato de

sodio al 3.8 %.
Asegurarse de haber llenado el tubo hasta la marca debido a que

los estudios de coagulacin son afectados por el llenado incorrecto
del tubo. La relacin sangre anticoagulante debe ser 1:10 (una parte
de anticoagulante + nueve de sangre), est preparada para que el
citrato impida la accin del calcio cuya funcin en la coagulacin es
ser mediador de la unin entre algunos factores de la coagulacin y los
fosfolpidos de la membrana.
Si el contenido de sangre es menor al indicado en la marca del tubo, el

citrato sobrante impide la accin del calcio que se aade en las pruebas
de coagulacin alterando las pruebas Tiempo de protrombina (TP) y el
Tiempo de tromboplastina parcial activada (TTPA).
El tubo de citrato, destinado a pruebas de coagulacin, debe extraerse

siempre antes que los que llevan otros anticoagulantes, de manera que
no se contamine con EDTA o Heparina de Litio, lo cual puede interferir en
el estudio de coagulacin.
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6. FORMULARIOS Y REGISTROS
Boleta nica para Pruebas de Laboratorio Clnico.
7. REFERENCIAS
1. EL SALVADOR, MINISTERIO DE SALUD. Manual de Procedimientos Tcnicos
de Laboratorio Clnico del Primer Nivel de Atencin. El Salvador, C.A. 2007.
Pg. 31-33.
2. EL SALVADOR, MINISTERIO DE SALUD. Manual de Procedimientos de
Bioseguridad para los Laboratorios Clnicos. El Salvador, C.A. 2008. Pg.49.
3. AZNAR, JAVIER. NUEZ ROLDAN, ANTONIO. LEON JUSTEL, ANTONIO. Manual
de Obtencin y Manejo de muestras para el Laboratorio Clnico. Servicio
Andaluz de Salud. Junta de Andaluca. Espaa. 2009. Pg. 12-14.
4. ROS TAMAYO, RAFAEL. PREZ ZENNI, JAVIER Y COLABORADORES. Gua
Laboratorio Servicio de Hematologa y Hemoterapia. Servicio Andaluz de
Salud. Junta de Andaluca. Espaa. 2011. Pg. 8-11.
5. MANUAL DE PREANALTICA. E.P. Hospital de Poniente. Consejera de Salud.
Junta de Andaluca. Espaa. 2010. Pg. 23,24.
6. DEL SOL, MARIANO. LILLO, EUGENIO Estudio de las Venas de la Fosa Cubital
a travs de la Tomografa Computada Helicoidal y su Aplicacin Clnica
Facultad de Medicina, Universidad de La Frontera, Temuco, Chile, 2012.
10
MINISTERIO DE SALUD
8.
ANEXOS
ANEXO 1
11
ANEXO 2
Venas para la toma de muestra.
ANEXO 3
Calibre de agujas utilizadas en Flebotoma.
12
MINISTERIO DE SALUD
ANEXO 4
Movimiento indicado para realizar asepsia en venopuncin.
ANEXO 5
Posicin correcta de bisel de aguja para extraccin sangunea.
ANEXO 6
Tipos de tubos utilizados para la recoleccin de muestras de sangre.
13
Tubo estril sin anticoagulante.
Determinacin de pruebas
bioqumicas e
inmunolgicas
Primeros en tomarse.
Tubo estril con anticoagulante citrato

de sodio.
Pruebas de coagulacin.
Segundos en tomarse.
Tubo estril con anticoagulante EDTA.
Hemograma.
Terceros en tomarse.
Tubo estril con anticoagulante

heparina sdica.
Determinacin de
amoniaco.
ANEXO 7
Descartes de desechos.
Descarte para material
cortopunzante (agujas, vidrio)
Descarte para desechos

bioinfecciosos (material
contaminado con sangre)
Descarte de desechos comunes
ANEXO 8
Triple embalaje.
Muestra
Recipiente primario a prueba
de filtraciones y derrame
Material
absorbente de
amortiguacin
Envase secundario a prueba de

filtraciones y derrames (p. ej., bolsa
de plastico sellada)
Embalaje exterior
Flechas de orientacin
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PREPARACIN DE FROTIS SANGUNEO Y

FRMULA DIFERENCIAL
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OBJETIVO
Establecer y evaluar las caractersticas morfolgicas de cada tipo de clulas

y la frecuencia de las diferentes lneas leucocitarias por medio de la frmula
diferencial.
2.
CAMPO DE APLICACIN
Laboratorios Clnicos del Ministerio de Salud.

3.
RESPONSABLES
Profesionales y Tcnicos en Laboratorio Clnico capacitados para la realizacin

de la prueba.
4.
Deniciones:
-
Baslo: Son glbulos blancos de tipo granulocito. Miden de 10-14 m y

representa del 0-1% del total de leucocitos en la sangre.

el medio laboral.
Coloracin de Wright: Es la utilizada con mayor frecuencia para colorear

frotis de sangre.
EDTA: El anticoagulante el EDTA (cido etiln-diamino tetraactico)

cuyo mecanismo de accin es eliminar completamente el calcio de la
muestra, es utilizado para la biometra hemtica, pruebas de banco de
sangre y otras pruebas.
Eosinlo: Son leucocitos de tipo granulocito, tiene una vida media en

la circulacin sangunea de 3 a 4 das, mide de 12-17m, representa del
0-5% del total de leucocitos.
Frmula diferencial: Es el recuento y clasicacin de 100 leucocitos

consecutivos en un frotis de sangre coloreado con Wright, y el informe
de los diferentes tipos de leucocitos observados en porcentajes.
Preparacin de Frotis Sanguneo y Frmula Diferencial
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FRMULA DIFERENCIAL
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Linfocito: Es un tipo de leucocito mononucleares con tamao de 7-18 m,

representa el 20-40% del total de leucocitos en sangre.
Monocito: Son leucocitos mononucleares, con un tamao de 12-20 m,

representa de 2-8% del total de leucocitos.
Neutrlo: Son glbulos blancos de tipo granulocito. Miden de 10-15 m

y representa del 50-70% del total de leucocitos en la sangre.
RNA: cido ribonucleico.
Siglas
-
JVPLC: Junta de Vigilancia para la Profesin de Laboratorio Clnico.
5.
Fundamento:
Preparacin de un frotis sanguneo coloreado por la tincin de Wright, la cual
est compuesta de eosina y azul de metileno por lo cual se le denomina tincin
policrmica. Las reacciones de tincin dependen del pH, la tincin real de
los componentes ocurre cuando se le agrega una solucin buffer a la tincin.
El azul de metileno libre es bsico y tie de azul los componentes celulares
cidos, por ejemplo el RNA. La eosina libre es cida y tie de rojo los
componentes bsicos, como la hemoglobina o los grnulos de los eosinlos.
Los neutrlos poseen grnulos citoplasmticos que tienen pH neutro y admiten
algunas caractersticas de ambas tinciones.
Muestra requerida:
Sangre capilar o venosa recin extrada sin anticoagulante o sangre con
anticoagulante EDTA.
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FRMULA DIFERENCIAL
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La muestra debe estar libre de micro cogulos, ya que al estar presentes,

las clulas sanguneas quedan atrapadas en el cogulo por consiguiente
pueden reportarse falsos valores bajos en la frmula diferencial.
Materiales:
-
Portaobjeto de vidrio con extremo esmerilado de 3 x 1x 1 mm.
Torunda de algodn.
Lpiz graso.
Lapicero.
Bandeja o soporte para la coloracin.
Perilla de hule.
Papel toalla.
Equipo de proteccin personal como: guantes, gabacha, gafas, zapato

cerrado.
Rack para colocar tubos.
Reactivos:
-
Alcohol etlico al 70%.
Metanol absoluto.
Colorante de Wright.
Fosfato de sodio monobsico.
Buffer pH 7.
Fosfato de potasio di hidrgeno.
Aceite de inmersin.
Agua destilada.
Hipoclorito de sodio al 0.5%.
NAOH 1N.
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FRMULA DIFERENCIAL
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Preaparacin de reactivos
Colorante de Wright (1 litro)
- Pesar 3 gr colorante de Wright.

- Mezclar y disolver poco a poco con
metanol absoluto.
- Completar a 1 litro con el metanol.
Guardar en garrafa color mbar con
nombre y fecha de preparacin.
Buffer pH 7.
Stock:
Pesar
- 38 gr fosfato de sodio monobsico.
- 30 gr fosfato de potasio de hidrgeno.
- Mezclar y disolver poco a poco con
agua destilada de infusor en Hot plate.
- Completar a 1 litro con agua destilada
de infusor.
- Ajustar a pH 7 con NaOH 1N.
Solucin de trabajo:
-
Medir 10 ml de solucin Stock.

Agregar 990 ml de agua destilada de
infusor.
Mezclar.
Equipo:
-
Microscopio con objetivo 10x, 40x, 100x.
Contmetro diferencial.
Cronmetro.
Procedimiento:
-
Colocarse el equipo de proteccin personal antes de manipular la muestra

de sangre.
Al recibir la muestra en el laboratorio o en el rea de Hematologa, se

debe vericar que los datos contenidos en la muestra sean los mismos que
contenga la Boleta nica para Pruebas de Laboratorio Clnico.
Rotular tubo y boleta segn nmero correlativo.
Para poder observar las clulas sanguneas se debe realizar primero un frotis
sanguneo.
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Preparacin del frotis sanguneo (Ver Anexo 3)

1. Antes de utilizar los portaobjetos de vidrio, limpiarlos con alcohol, aclarar
con agua y dejar secar.
2. Identicar la lmina adecuadamente en el extremo del portaobjeto
(parte esmerilada).
3. Colocar en el portaobjeto una pequea gota de sangre de 2 mm de
dimetro a una distancia de 2 a 3 mm del extremo del portaobjeto y
hacer rpidamente el extendido.
4. Para evitar la coagulacin, se puede utilizar sangre con EDTA (siempre
conviene realizar cuando menos dos frotis), aunque la muestra ideal es
sin anticoagulante.
5. Poner la lmina extensora de bordes redondeados a un ngulo de 45
del portaobjeto y moverla hacia atrs para que haga contacto con la
gota, que debe extenderse rpidamente.
6. Distribuir a lo largo del portaobjeto. El extendido debe cubrir alrededor
de dos tercios a tres cuartos de la lmina.
7. Dejar secar a temperatura ambiente.
8. Colocar la preparacin de sangre, completamente seca, sobre un soporte
para coloracin. (No necesita jacin previa pues el metanol del Wright
ja la preparacin).Cubrir todo el frotis con colorante de Wright y dejarlo
en reposo 3 minutos (o el tiempo necesario segn la maduracin del
colorante).
9. Agregar una cantidad igual de buffer (pH 7) evitando derramar el Wright,
mezclar con una perilla de hule con suavidad para asegurar una mezcla
uniforme, aparecer una pelcula verde metlico, dejarlo en reposo por
5 minutos o el tiempo necesario segn la maduracin del Wright.
10. Lavar la lmina con agua de chorro hasta quitar el exceso de la mezcla.
11. Limpiar la parte posterior del portaobjeto con una torunda de algodn
impregnada con alcohol, para eliminar todos los restos de colorante.
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12. Dejar secar la preparacin al aire colocando la lmina en posicin vertical

en una rejilla para portaobjeto.
El frotis debe quedar liso, sin irregularidades, agujeros o rayas.
Examen microscpico del frotis sanguneo para frmula diferencial
1. La observacin inicia con el objetivo 40x para obtener un cuadro general
del nmero de clulas, la distribucin de las mismas y la calidad de la
tincin.
2. Seleccionar las reas a observar con objetivo de inmersin 100x buscando
una distribucin homognea de las clulas.
3. Realizar el recuento diferencial identicando los tipos y grado de desarrollo
de las clulas blancas. (Anexo 4 y 5)
4. Observar y registrar cualquier anormalidad presente en el frotis (ver POE
QY23/I59/POE3/2013 Frotis de Sangre Perifrica) en la Boleta nica para
Pruebas de Laboratorio Clnico. (Anexo 1)
Condiciones ambientales
El procedimiento se deber realizar en las instalaciones del laboratorio clnico
(seccin de Hematologa si se dispone) la cual debe contar con iluminacin
y ventilacin adecuada.
Forma de reporte:
El recuento diferencial de leucocitos se reporta en valores porcentuales segn
las diferentes lneas observadas, para lo cual tiene que contarse un mnimo
de 100 leucocitos.
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Opcionalmente pueden convertirse en nmero de clulas por mm (nmero

o valores absolutos).
Valores de referencia:
Valores porcentuales
Leucocitos
Neutrfilos segmentados
Neutrfilos en banda
Linfocitos
Eosinfilos
Basfilos
Monocitos
Nios (1-8 aos)

(%)
20 - 45
0-4
40 - 60
1-5
0-1
2-8
Adultos
(%)
50 - 70
0-5
20 - 40
0-5
0-1
2-8
Nios (1-8 aos)

(mil x mm3)
0.8 - 4.6
0 - 0.4
Adultos
(mil x mm3)
2.3 - 8.1
0 - 0.6
0.8 - 4.8
0 - 0.4
0 - 0.1
0.5 - 1.3
Valores absolutos
Leucocitos
Neutrfilos segmentados
Neutrfilos en banda
Linfocitos
Eosinfilos
Basfilos
Monocitos
2.1 - 8.0
0 - 0.4
0 - 0.1
0.5 - 1.3
Clculo de valores absolutos:

Los valores absolutos de los leucocitos se pueden calcular aplicando la
siguiente frmula:
Nmero absoluto de GB X cantidad de clulas de c/lnea en la frmula diferencial (N, L, B, M, E)
100
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GB: Glbulos Blancos.

N: Neutrlos.
L: Linfocitos.
B: Baslos.
M: Monocitos.
E: Eosinlos.
Esto nos dar como resultado el valor absoluto de leucocitos por milmetro
cbico, donde la suma es igual al recuento del total de los leucocitos.
Validacin de resultados:
El profesional responsable del reporte debe realizar una revisin minuciosa
del informe nal. Deber registrar adems la rma, sello de la JVPLC, y el sello
del establecimiento, antes de entregar el reporte.
Archivo de resultados:
Los resultados se registrarn en el Registro y Tabulador Diario de Actividades
de Laboratorio (Anexo 2) en el que se deben completar los datos requeridos.
Se conservarn dichos registros por un perodo de 5 aos.
Fuentes de error:
-
Falta de mezclado de la sangre previo a la elaboracin del frotis.
Irregularidades en la supercie del frotis y espacios en blanco.
Que el frotis se extienda hasta el borde de la lmina.
Extendidos gruesos o muy delgados.
Tiempos de coloracin inadecuados.
Mal lavado de la lmina.
Buffer con pH muy cido o alcalino.
Falta de ltracin del colorante del Wright.
Uso de portaobjetos con polvo, grasa o huellas dactilares.

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Observacin de los leucocitos en los extremos de la lmina.
Realizar el recuento diferencial con un objetivo que no sea el de inmersin.
Hacer la frmula diferencial en base a menos de 100 clulas blancas.
Utilizar microscopio en malas condiciones.
-

infeccioso.

El descarte de los materiales reutilizables debe hacerse en un recipiente de

descarte conteniendo hipoclorito de sodio al 0.5% (leja al 5% diluida 1:10).

Control de calidad en la preparacin y coloracin del frotis:

Realizar el extendido con sangre recientemente extrada 2-3 horas.
El tamao de la gota de sangre es importante ya que las gotas demasiado
grandes forman extendidos muy largos o gruesos, mientras que las demasiado
pequeas forman extendidos muy cortos o delgados.
Determinar los tiempos de coloracin de los frotis con colorante Wright,
siempre que se cambie el lote de colorante.
Observar a la luz el portaobjetos coloreado, el borde en pluma del frotis
debe tener una apariencia de arco iris, esto es indicativo de una buena
coloracin.
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6.

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FORMULARIOS Y REGISTROS

Registro diario de actividades de laboratorio.
Tabulador diario de actividades de laboratorio.
7.
REFERENCIAS

de Laboratorio Clnico del Primer Nivel de Atencin. El Salvador, C.A.
2007. Pg.52-60.
2. EL SALVADOR, MINISTERIO DE SALUD. Manual de Procedimientos de Bioseguridad para los Laboratorios Clnicos. El Salvador, C.A. 2008. Pg.49.
3. CARR, JACQUELINE H. RODAK, BERNADETTE F. Atlas de Hematologa Diagnstica. 3 Edicin. Buenos Aires. Editorial Mdica Panamericana. 2010.
Pg. 2,31, 43-113.
10
MINISTERIO DE SALUD
8.
ANEXOS
ANEXO 1
11
ANEXO 2
12
MINISTERIO DE SALUD
ANEXO 3
Forma correcta de elaborar el extendido sanguneo.
A. ngulo
adecuado para
sujetar la lmina
extensora (30-45).
B. Distribucin
a lo largo del
portaobjeto.
C. Terminacin
del frotis en cua.
13
30-45
ANEXO 4
Caractersticas morfolgicas de las clulas sanguneas contadas en una frmula
diferencial.
Tipos celulares
Tamao
(m)
Ncleo
Cromatina
Citoplasma
Grnulos
10-15
2-5 lbulos
conectados por
filamentos delgados
sin cromatina visible.
10-15
Forma C o S;
estrechado pero no en
forma de filamento
delgado; la cromatina
debe ser visible en el
filamento.
7-18
Redondo a oval; puede

ser ligeramente dentado;
en ocasiones se le
observa nuclelo.
Monocitos
12-20
Variable, puede ser

redondo, en herradura o
en forma de rin.
A menudo tiene
circonvuluciones similares
a las del cerebro.
Similar a
encaje.
Gris azulado; puede

tener pseudpodos,
las vacuolas pueden
estar ausentes o ser
numerosas.
Muchos grnulos
finos, con
frecuencia
dan un aspecto
de vidrio
esmerilado.
Eosinfilos
12-17
2-3 lbulos conectados

con filamentos delgados
Grumos
gruesos.
Rosa; puede
presentar bordes
irregulares.
1- Inusuales.
2-Abundantes.
Rojos anaranjados,
redondos, grandes.
Basfilos
10-14
En general, 2 lbulos
Neutrfilos
segmentados
Neutrfilos
en banda
Linfocitos
conectados por
filamentos delgados
Grumos
gruesos.
Azul plido
a rosa.
1- Inusuales.
2- Abundantes
Color lila.
Grumos
gruesos.
Azul plido
a rosa.
1- Escasos.
2-Abundantes.
Color lila.
Condensada
a intensamente
condensada.
Escaso a
moderado;
celeste cielo;
puede
presentar vacuolas.
Grumos
gruesos.
Color lavanda
a incoloro.
Escasos
azurfilos.
1- Inusuales.
2-Variable en
nmero con
distribucin
irregular; puede
ocultar el ncleo
o desprenderse
durante la tincin.
Azul oscuro a
negro.
14
MINISTERIO DE SALUD
ANEXO 5
Morfologa microscpica de las clulas sanguneas contadas en una frmula
diferencial.
Lnea Blanca
Neutrfilo
Eosinfilo
Basfilo
Linfocito
Monocito
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Frotis de Sangre Perifrica
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1.
FROTIS DE SANGRE PERIFRICA
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OBJETIVO
Observar detalladamente las caractersticas morfolgicas de todos los elementos

de la sangre, as como presencia de parsitos intra o extracelulares, con el n
de evaluar la condicin hematolgica del paciente.
2.
CAMPO DE APLICACIN

3.
RESPONSABLES

de la prueba.
4.
Deniciones:
-
Acantocito: Eritrocito con espculas irregulares de ancho, longitud y

cantidad variables; por lo general densas. Se asocian con enfermedad
heptica, deciencia de vitamina B12, deciencia de folato, neonatos.
Anillo de cabot: Inclusin eritrocitaria en forma de ocho, bucle o anillo, de

color azul oscuro a violeta, pueden haber de 1 a 2 por clula. Se cree que
estn compuestos por el huso mittico; estn asociados con sndrome mielo
displsico y anemia megaloblstica.
Anisocitosis: Variacin en el tamao de los glbulos rojos.

el medio laboral.
Clulas en Lgrima: Eritrocito similar a una lgrima o pera, puede

presentar una proyeccin roma. Est asociada con mielobrosis con
metaplasia mieloide, talasemias, anemias mieloptisicas, y otras causas
de hematopoyesis extramedular.
Anomala de Chediak Higashi: Es un trastorno hereditario que se asocia

a albinismo, trastornos neurolgicos y mayor incidencia de infecciones
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pigenas. Los leucocitos contienen grnulos gigantes de color gris

azulado posiblemente por fusin y son decientes en sus actividades de
quimiotaxis y fagocitosis. Quienes la padecen presentan neutropenia. Los
grnulos gigantes resultan de una fusin aberrante de los lisosomas, el
trastorno afecta a los melanocitos ocasionando albinismo y a las neuronas
originando trastornos nerviosos.
-
Cristales de hemoglobina C: Son formas hexagonales de glbulos rojos, de

color oscuro, compuestos por hemoglobina C. Se asocian a la enfermedad
de hemoglobina C homocigota.
Cuerpos de Dohle: Son bandas rectangulares de retculo endoplasmatico

rugoso que persisten en los granulocitos maduros y que se tien de color
azul grisceo, aparecen en el curso de infecciones o procesos inamatorios
graves y leucemias.
Cuerpos de Howell-Jolly: Inclusiones eritrocitarias compuestas por DNA

de forma redonda u ovalada y color azul oscuro a violeta de tamao
de 1m, pueden ser nicos o pueden haber varios en una sola clula,
generalmente se ubican en la periferia del eritrocito. Se asocian a
esplenectoma, hipoesplenismo, anemia megaloblstica y anemia
hemoltica.
Dianocito: Eritrocito con forma de tiro al blanco o diana; concentracin

de hemoglobina rodeada de un rea incolora, con un anillo perifrico de
hemoglobina que se asemeja a un diana. Se asocia con hemoglobinopatas,
talasemia, anemia por deciencia de hierro, esplenectoma, enfermedad
heptica obstructiva.
Drepanocito: Clula alargada con una punta en cada extremo; puede

ser curvada o con forma de S. Est compuesta por hemoglobina S y se
asocia con enfermedad de la hemoglobina S homocigota.
Eliptocito: Eritrocito en forma de cigarro. Asociado con eliptocitosis

hereditaria, talasemia mayor, anemia por deciencia de hierro, anemias
megaloblsticas, anemias mieloptsicas.
Equinocito: Eritrocito con forma similar a un erizo, con proyecciones

cortas espaciadas uniformemente. Asociado con uremia, deciencia
de piruvatocinasa, anemia hemoltica microangioptica, neonatos
(especialmente prematuros), artefactos.
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Esferocito: Eritrocitos con forma redonda y sin zona de palidez central. Se

asocia con esferocitosis hereditarias, ciertas anemias hemolticas, clulas
transfundidas, quemaduras graves.
Esquistocito: Son eritrocitos fragmentados, en un frotis presentan muchos

tamaos y formas, con frecuencia presentan extremos puntiagudos. Estn
asociados con anemia hemoltica microangioptica, quemaduras graves,
rechazo de trasplante renal.
Estomatocito: Eritrocito con un rea central plida similar a una hendidura

(boca o estoma). Asociado con estomatocitosis hereditaria, alcoholismo,
enfermedad heptica, artefacto.
Granulacin txica: Es el hallazgo de un refuerzo de la granulacin txica

de los neutrlos que se ha querido valorar como respuesta a un proceso
infeccioso.
Hipersegmentacin Nuclear: Se dene por un exceso de lobulacin del

ncleo, se puede encontrar en ms de 5 segmentos es un fenmeno
secundario a un trastorno del ADN que puede observarse en: deciencia
de vitamina B12 o de folatos, quimioterapia, neoplasias enfermedad renal
crnica, en anemia ferropnica.
Hipercromia: Glbulo rojo que se tie ms intensamente, ausencia de

palidez central.
Hipocromia: Glbulo rojo que se tie menos debido a la disminucin de la

cantidad de hemoglobina, aumento del halo claro central del eritrocito.
Macroplaquetas: Son clulas sanguneas que tienen un tamao mayor

que el normal aproximadamente unas 6 micras.
Macrocitos: Glbulo rojo con tamao mayor de lo normal (15 a 22 micras).
Microcitos: Glbulos rojos de tamao menor de 7 micras.
Normocitos: Glbulos rojos de tamao normal (7-8 micras).
Pelger Huet: Es una anomala congnita, en el que los ncleos de los

granulocitos no segmentan normalmente, el ncleo puede ser redondo
o puede ser bilobulado, la funcin de la clula es normal.
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Plaquetopenia: Es un baja del nmero normal de plaquetas, debajo de

150.0000 por milmetro cbico.
Plaquetosis: Es una alza del numero normal de plaquetas, arriba de 450,000

por milmetro cubico.
Poiquilocitosis: Variacin en la forma de los glbulos rojos.
Policromasia o glbulos rojos policromticos: Son eritrocitos grandes de

color grisceo, debido a la variacin en la anidad eritroctica hacia el
colorante, que indican la presencia de reticulocitos en circulacin.
Punteado baslo: Grnulos nos o gruesos en el interior de los eritrocitos,

estn compuestos por RNA, son de color azul oscuro a violeta, son
numerosos con distribucin bastante uniforme. Se asocia a intoxicacin
con plomo, talasemia, sntesis anormal de hemo.
Roleaux: Es un trmino mdico para una condicin donde los glbulos

sanguneos se agrupan juntos de manera que parecen una hilera de
monedas. Esto representa un estado no saludable porque las clulas no
estn libres para absorber y transportar oxgeno.
Vacuolizaciones: Es frecuente observarla en los granulocitos maduros en

enfermos con infecciones graves por lo general es debida a procesos de
formacin de fagosomas en los que se vuelca el contenido enzimtico
de los lisosomas.
Siglas
-
5.
Fundamento:
Por medio de la observacin microscpica de un frotis teido con colorante
Wright observar las caractersticas morfolgicas de los elementos formes de
la sangre.
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Muestra requerida:
Frotis de sangre perifrica coloreado con Wright, el frotis a observar debe
haber quedado liso, sin irregularidades y libre de rayas, adems es necesario
contar con un extendido bien teido para lograr una interpretacin exacta
de la morfologa celular.
Materiales:
-
Papel limpia lente.
Lapicero.

cerrado.
Reactivos:
-
Aceite de inmersin.
Equipo:
-
Microscopio con objetivo 10x, 40x, 100x.
Procedimiento:
1. Colocarse el equipo de proteccin personal antes de manipular el frotis.
2. Se debe vericar que los datos contenidos en la identicacin de la
lmina sean los mismos que contenga la Boleta nica para Pruebas de
Laboratorio Clnico.
3. Examinar el frotis con el objetivo 10x, lo que permite la rpida deteccin de
grandes clulas anormales, como blastos, linfocitos reactivos y parsitos.
4. Luego se debe examinar con el objetivo 40x, con el propsito de buscar
un rea del frotis en la cual los eritrocitos se encuentren uniformemente
distribuidos y en donde apenas se toquen unos con otros (dos o tres clulas
pueden superponerse).
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5. Finalmente debe examinarse con el objetivo 100x o de inmersin, para

realizar la evaluacin morfolgica de la lnea roja, lnea blanca y lnea
plaquetaria.
Lnea Roja: (Anexo 3)
6. En cuanto al tamao de los eritrocitos podemos observar: microcitosis,
macrocitosis y normocitos. El grado de variacin en tamao se reduce
al trmino de anisocitosis.
7. En cuanto a la forma podemos observar: eritrocitos de morfologa normal
o anormal como: esferocitos, codocitos, eliptocitos, drepanocitos,
acantocitos, equinocitos y otros. El grado de variacin en forma se reduce
al trmino de poiquilocitosis.
8. Con relacin a la concentracin de hemoglobina podemos observar:
Grado importante de hipocroma, e hipercroma aparente, observar
el aumento aparente o evidente de la proporcin de glbulos rojos
policromticos.
9. Otros hallazgos anormales como inclusiones intracitoplasmticas: punteado
baslo, anillo de Cabot, cuerpos de Howell-Joly. La presencia de ncleos
(etritroblastos), clulas parasitadas, formacin de Rouleaux, y otros.
10. Anotar los hallazgos en la Boleta nica para Pruebas de Laboratorio
Clnico.
Lnea Blanca: (Anexo 4)
11. Observar la madurez de los leucocitos, el nmero promedio, anormalidades
morfolgicas, signos de malignidad, la variante de leucocitos que
predominan.
12. Comparar el recuento de leucocitos por milmetro cbico con lo observado
en el frotis.
13. Anotar los hallazgos en la Boleta nica para Pruebas de Laboratorio Clnico.
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Lnea plaquetaria: (Anexo 5)

14. Observar si se encuentran en cantidades aproximadamente normales
(de tres a ocho plaquetas por cien glbulos rojos).
15. La disminucin de las plaquetas en un frotis puede deberse a la manera
de realizarlo, pero su falta o su disminucin considerable, en un frotis bien
hecho pueden hacer sospechar plaquetopenia.
16. Debe observarse si las plaquetas que se encuentran parecen normales
o existen muchas formas gigantes (macroplaquetas) o notablemente
pequeas.
17. Deben reportarse los grumos plaquetarios.
18. Comparar el recuento de plaquetas por milmetro cbico con lo observado
en el frotis.
19. Anotar los hallazgos Boleta nica para Pruebas de Laboratorio Clnico
(Anexo 1).
(seccin de Hematologa si se dispone) la cual debe contar con iluminacin
Forma de reporte:
Los resultados de la prueba debern reportarse en la Boleta nica para
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Lnea roja:
-
Anisocitosis: Leve, moderada o severa (reportar predominio).
Poiquilocitosis: Leve, moderada o severa (reportar predominio).
Hipocroma: Leve, moderada o severa.
Otros: Reportar cualquier hallazgo anormal como presencia de parsitos

intra o extracelulares.
Lnea blanca:
-
Madurez de los leucocitos.
Variante de leucocitos que predomina.
Alteraciones encontradas en los leucocitos.
Presencia de parsitos intra o extracelulares.
Lnea plaquetaria:
-
Cantidad.
Tamao: Macro o micro plaquetas.
Valores de referencia:
-
Eritrocitos normocticos, normocrmicos.
Leucocitos maduros sin presencia de anormalidades.
Plaquetas distribucin y tamao normal, comparar los observado en

recuento en mm.
del informe nal. Debe correlacionar los datos obtenidos en el hemograma
con lo observado en la sangre perifrica.
Deber registrar adems la rma y el sello de la JVPLC, y el sello del
establecimiento, antes de entregar el reporte.
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Los resultados se registrarn en el Registro y Tabulador Diario de las Actividades
Fuentes de error:
-
Observar los elementos celulares en la parte ms gruesa del frotis.
Coloracin defectuosa del frotis.
Reportar observando el extendido con un objetivo diferente al de inmersin.
Equipo en mal estado.
Aceite de inmersin de mala calidad o en malas condiciones.
-

infeccioso.

El descarte de los materiales reutilizables debe hacerse en un recipiente de

descarte conteniendo hipoclorito de sodio al 0.5% (leja al 5% diluida 1:10).

Control de calidad
-
Al examinar el frotis con el objetivo 10x, se debe determinar la calidad

general del frotis, incluida la distribucin anormal de los eritrocitos que
sugiere la presencia de roleaux, o un nmero desproporcionado de
grandes clulas nucleadas (p. ej., monocitos o neutrlos) en los bordes
del extendido. Si esto ltimo sucede, debe prepararse otro frotis.
La sangre es el control de calidad por excelencia para el hemograma por lo

que hay que relacionar los resultados obtenidos en ambos procedimientos.
9
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6.
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7.
REFERENCIAS
1. EL SALVADOR, MINISTERIO DE SALUD. Manual de Procedimientos

Tcnicos de Laboratorio Clnico del Primer Nivel de Atencin. El Salvador,
C.A. 2007. Pg.52-60.

3. CARR, JACQUELINE H. RODAK, BERNADETTE F. Atlas de Hematologa

Diagnstica. 3 Edicin. Buenos Aires. Editorial Mdica Panamericana.
2010. Pg. 2,31, 43-113.
10
8.
ANEXOS
ANEXO 1
11
MINISTERIO DE SALUD
ANEXO 2
12
ANEXO 3
Lnea Roja.
Variaciones en el tamao de los eritrocitos

Morfologa y tamao normal
Macro eritrocitos
Micro eritrocitos
Inclusiones eritrocitarias
Cuerpos de Howell- Jolly
Punteado basfilo
Anillos de Cabot
Infecciones parasitarias
Malaria
Gametocito de
Plasmodium vivax
Filariasis
Microfilaria de Wuchereia
bancrofti
Chagas
Tripomastigote sanguneo
de Tripanosoma cruzi
13
MINISTERIO DE SALUD
Variaciones en la forma y el color de los eritrocitos

Acantocito
Cristales de HbC
Dianocito
Drepanocito
Eliptocito
Equinocito
Esferocit
Esquistocito
Estomatocito
Ovalocito
Roleaux
Aglutinacin
14
Clulas en lgrima
Hipocroma
Policromasia
Eritroblastos
ANEXO 4
Lnea Blanca
Maduracin mieloide
Mieloblasto Promielocito
Mielocito
Metamielocito
Banda
Segmentado
Basfilos
Neutrfilos
Eosinfilos
Maduracin linfoide
Linfoblasto
Prolinfocito
Monoblasto
Promonocito
Linfocito
Linfocito
Monocito
Monocito
15
MINISTERIO DE SALUD
Anormalidades en la lnea blanca
Levaduras de Histoplasma sp.
Cocos intracelulares
Agranulacin en neutrfilos
Granulacin txica
Ncleo en apoptosis
Inclusiones vacuolares
16
Blastos
Linfocito reactivo
Blastos
Linfocito reactivo
Chediak Higashi
Cuerpos de Dohle
Chediak Higashi
Cuerpos de Dohle
Hipersegmentacin nuclear
Pelger Huet
Hipersegmentacin nuclear
Pelger Huet
ANEXO 5
Lnea Plaquetaria
Lnea Plaquetaria
Morfologa normal
Morfologa normal
Macroplaquetas
Grumos plaquetarios
Macroplaquetas
Grumos plaquetarios
Lnea Plaquetaria
17
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1.
EXAMEN GENERAL DE HECES
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OBJETIVO
Determinar el color, consistencia, mucus, sangre, restos alimenticios o

parsitos en estado larvario, a travs del estudio macroscpico de las
heces; y a travs del estudio microscpico determinar la presencia de
leucocitos, parsitos, protozoarios y metazoarios en sus diferentes estados.
2.
CAMPO DE APLICACIN

3.
RESPONSABLES

de la prueba.
4.
Deniciones:
-

el medio laboral.
Enema: Es el procedimiento de introducir lquidos en el recto y el colon a

travs del ano para tratar la retencin fecal, o el estreimiento.
Escbalos: Excrementos duros y redondeados que se acumulan en el

intestino a causa de un estreimiento rebelde.
Laxante: Preparacin usada para provocar la defecacin o la eliminacin

de heces.
Parasitismo: Proceso que permite a una especie mejorar su capacidad

de supervivencia a costa de otra especie.
Quiste: Forma infectante de los protozoarios; son las estructuras de

resistencia en el medio externo, que no tienen actividad metablica y
no se reproducen.
Trofozoito: Es el estadio patgeno, que se reproduce, tiene actividad

metablica y no sobrevive al medio externo.
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Siglas:
-
5.
Fundamento:
El Examen General de Heces es realizado para la deteccin de parasitismo
intestinal, demostrando principalmente, la presencia de parsitos de formas
evolutivas mviles, de tamao microscpico (trofozoitos, quistes de protozoos
as como larvas y huevos de helmintos).
Muestra requerida:
3-5 gramos de heces obtenidas por evacuacin espontanea, recin emitidas.
Instruir al paciente que colecte en el frasco adecuado la porcin de muestra
que evidencia el dao intestinal (mucus o sangre).
No son recomendables las muestras obtenidas con laxantes, enemas o
contaminadas con orina.
Materiales:
-
Frascos plsticos de boca ancha y tapn de rosca con capacidad para

3-5 gramos.
Aplicadores de madera.

cerrado.
Lpiz Graso.
Plumn indeleble a prueba de agua para rotular frascos.
Papel lente.
2
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Lminas porta objeto 3 x 1x 1 mm.
Laminillas cubre objeto 22 x 22 mm.
Papel lente.
Equipo:
-
Microscopio.
Reactivos:
-
Solucin salina 0.85%.
Solucin de Lugol para heces.
Hipoclorito de sodio al 0.5%.

Preparacin de Reactivos
Solucin de lugol para heces
Solucin salina al 0.85%
Pesar
Pesar
- 10 gr de yodo cristales.
- 20 gr de yoduro de potasio.
- 8.5 gr Cloruro de Sodio.

Mezclar y disolver poco a poco con
agua destilada.
Mezclar y disolver poco a poco con agua

destilada.
Completar a 1 litro con agua destilada.
Guardar en garrafa color mbar con
nombre y fecha de preparacin
Completar a 1 litro con agua destilada.

Guardar en refrigeracin (2-8 C) con
nombre y fecha de preparacin.
Procedimiento:
-

de heces.
Al recibir la muestra en el laboratorio o en el rea de coprologa, se

debe vericar que los datos contenidos en el frasco sean los mismos que
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Rotular segn nmero correlativo de laboratorio en la vieta del frasco,

nunca en la tapadera.
Al Examen General de Heces se le realizan dos procedimientos: Examen fsico
y examen microscpico.
Examen Fsico:
1. Observar el color de la muestra.
2. Observar la consistencia de la muestra.
3. Utilizar un aplicador de madera para buscar la presencia de mucus en
la muestra.
4. Observar la presencia de restos alimenticios en la muestra.
5. Anotar los hallazgos en la boleta de peticin y resultados de pruebas de
laboratorio. (Anexo 1)
Examen microscpico.
1. Identicar la lmina porta objeto.
2. Colocar en el extremo izquierdo de la lmina portaobjeto una gota de
solucin salina al 0.85%.
3. Seleccionar la parte ms representativa de la muestra (mucus o sangre,
si hay presencia de estos).
4. Con un aplicador de madera colocar de 1 a 2 mg de material fecal
seleccionada y emulsionar.
5. Cubrir la preparacin con una laminilla cubreobjeto, colocndola en
ngulo de 45sobre el borde de la preparacin y bajndolo con cuidado
a n de que no queden burbujas entre el cubre y el porta objeto.
6. Colocar en el extremo derecho del portaobjeto, una gota de lugol para
heces y repetir los pasos 3, 4, 5.
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7. Observar en forma sistemtica al microscopio, con el objetivo 10x y luego

con el 40x.
8. Reportar todo lo observado en la Boleta nica para Pruebas de Laboratorio
Clnico. (Anexo 3).
Con solucin salina 0.85%, los trofozoitos se observan en forma mvil y los quistes
de los protozoarios se observan en forma natural y con lugol se visualizan las
estructuras internas, ncleos y vacuolas.
(seccin de Coprologa si se dispone) la cual debe contar con iluminacin
Forma de reporte:
Examen Fsico
-
Color: Caf, amarillo, verde, rojo, aclico (blanco), negro.
Consistencia: Dura, escbalos, blanda, pastosa, lquida.
Presencia de mucus: Negativo o Positivo.
Restos alimenticios macroscpicos: Escasos, moderados o abundantes.
Examen Microscpico
-
Identicacin de Parsitos: Anotar el gnero y especie, as como su estado

evolutivo.
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Gnero: La primera letra en maysculas.
Especie: Todo con letras minsculas.

Todo el nombre del parsito debe ir subrayado.
Estado evolutivo: Quiste, trofozoito; si es protozoario.

Huevo, larva; si se trata de helmintos.
Notas:
-
Entamoeba dispar es morfolgicamente idntica a E. histolytica, ambas

especies son indiferenciables, por lo que deben reportarse como
Entamoeba histolytica/ E. dispar.
Se puede reportar como Entamoeba histolytica, solo si se observan trofozoitos

con glbulos rojos en su interior ya que es la especie patgena.
-
Blastocystis hominis presenta diferentes estados evolutivos, pero la forma

vacuolar es la que se detecta habitualmente en los exmenes de heces,
por lo tanto, este estado es el que ha de reportarse.
Leucocitos: Reportar el nmero de leucocitos por campo, se reportan

con el objetivo 40x.
Eritrocitos: Reportar el nmero de eritrocitos por campo, se reportan con

el objetivo 40x.
Restos alimenticios microscpicos: Escasos, moderados o abundantes,

se reportan con el objetivo 10x.
Levaduras: Escasas, moderadas o abundantes.
Restos de grasa: Reportar de moderado a abundante.
Valores de Referencia.
Examen macroscpico:
-
Color: Caf.
Consistencia: Pastosa a blanda.
Presencia de mucus: No debe observarse.

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Restos alimenticios: Escasos.

Examen microscpico:
-
Leucocitos: No se deben observar.
Eritrocitos: No se deben observar.
Restos alimenticios: De escasos a moderados.
Levaduras: No se deben observar.
Restos de grasa: Reportar de moderado a abundante.
Una vez nalizado el examen directo al fresco y nicamente si la muestra

es de consistencia dura o pastosa y no se encontr estructuras parasitarias,
proceder a realizar un mtodo de concentracin de heces.
Validacin de Resultados:
del informe nal. Deber registrar adems la rma, sello de la JVPLC, y el sello
del establecimiento, antes de entregar el reporte.
Los resultados se registrarn en el Registro y Tabulador Diario de Actividades
Fuentes de error:
-
Ingesta de medicamentos y algunos alimentos con colorantes.
Desecacin de la preparacin.
Preparacin muy gruesa o delgada.
Intensidad de luz inadecuada.
Contaminacin de la muestra con orina.
Muestras obtenidas con laxantes o enemas.
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Dejar transcurrir ms de 3 horas despus de la recoleccin para observar

formas activas en la muestra.
Omitir la preparacin y observacin con lugol.
No examinar en forma sistemtica.
Muestra de heces escasa o seca en el frasco.
No colocar la lmina cubreobjeto.
-

infeccioso.

Descarte de materiales:
-
Los frascos con las muestras de heces ya procesadas, se colocan en bolsa

plstica roja con la tapa del frasco bien cerrada.
Posteriormente colocar las bolsas en cajas sanitarias rojas retornables

la cual debe ser entregada al personal de recoleccin de desechos
bioinfecciosos.
Los palillos se descartan en un recipiente conteniendo hipoclorito de

sodio al 0.5% (leja al 5% diluida 1:10).
Las lminas y laminillas se descartan de la misma manera que los palillos

pero en un recipiente aparte.
Control de calidad en Coprologa.

-
El tiempo transcurrido entre la toma de la muestra y la observacin

microscpica debe ser no mayor de tres horas para observar formas
activas.
Tener especial cuidado en la utilizacin de frascos adecuados y limpios.
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El control de calidad de los reactivos (solucin salina y lugol, se realiza

en cada lugar de trabajo). La solucin salina debe ser estril, evitar la
contaminacin, observar si presenta turbidez, de ser as descartar.
El Laboratorio Nacional de Referencia proporciona lugol para heces para

el establecimiento que lo solicite. Se debe almacenar adecuadamente,
si pierde el color (concentracin) descartar y solicitarlo nuevamente.
Los Laboratorios Clnicos del Ministerio de Salud deben participar en la

Evaluacin Externa de la Calidad enviado por el Laboratorio Nacional
de Referencia.
6.

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REFERENCIAS

de Laboratorio Clnico del Primer Nivel de Atencin. El Salvador, C.A.
2007. Pg.9-13.
Bioseguridad para los Laboratorios Clnicos. El Salvador, C.A. 2008. Pg. 49.
3. BOTERO DAVID, RESTREPO MARCOS. Parasitosis Humanas. 4 Edicin.
Colombia. Corporacin para Investigaciones Biolgicas. 2006. Pg. 31.
4. BERENGUER, JAIME GALLEGO. Manual de Parasitologa. Morfologa de los
Parsitos de Inters Sanitario. Universidad de Barcelona. 2006. Pg. 213.
5. CHIODINI, PETER L. MOODY, ANTHONY H. Atlas of Medical Helminthology
and Protozoology. 4 Edicin. Londres. Editorial ELSEVIER. 2003.
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MINISTERIO DE SALUD
8.
ANEXOS
ANEXO 1
11
ANEXO 2
12
MINISTERIO DE SALUD
ANEXO 3
Parsitos que pueden encontrarse en heces en sus diferentes estados
Entamoeba coli
Quiste
Trofozoito
Entamoeba histolytica/E.dispar.
Quiste
Trofozoito
13
Blastocystis hominis
Endolimax nana
Forma vacuolar
Quiste
Giardia lamblia
Quiste
Trofozoito
Chilomastix mesnili
Quiste
Trofozoito
Iodamoeba butschlii
Quiste
Trofozoito
14
Examen General de Orina
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1.
EXAMEN GENERAL DE ORINA
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OBJETIVO
Detectar a travs del anlisis de la orina la presencia de elementos celulares

y de sustancias qumicas que se eliminan disueltas en ella, para orientar el
diagnstico de procesos patolgicos a nivel de rin y vas urinarias.
2.
CAMPO DE APLICACIN

3.
RESPONSABLES

de la prueba.
4.
Deniciones:
-

el medio laboral.
Cetoacidosis: Es una complicacin aguda de la Diabetes Mellitus,

originada por un dcit de insulina que conduce a una hiperglucemia y
acidosis derivada del aumento de la oxidacin de cidos grasos hacia
cuerpos cetnicos.
Cilindro urinario: Son cilindros de protenas que se forman en el tbulo

contorneado distal y en los tbulos colectores de la nefrona del rin,
se forman por medio de la precipitacin de la mucoprotena de TammHorsfall.
Cistitis: La cistitis es la inamacin aguda o crnica de la vejiga urinaria,

con infeccin o sin ella.
Glucosuria: Presencia de glucosa en la orina a niveles elevados.
Hematuria: Presencia de glbulos rojos en la orina.
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Hemoglobinuria: Presencia de hemoglobina en la orina.
Mioglobinuria: Presencia de mioglobina en la orina.
Oliguria: Es la disminucin de la produccin de orina (diuresis). Esta

disminucin puede ser un signo de deshidratacin, fallo renal o retencin
de orina.
Piuria: Presencia de glbulos blancos en la orina.
Poliuria: Emisin de un volumen de orina superior al esperado.
Quiluria: Presencia de grasa en la orina.
Siglas
-
5.
Fundamento:
El examen fsico de la muestra de orina permite determinar el color y el
aspecto de sta.
El examen qumico permite determinar las sustancias qumicas, as como su
densidad y pH, a travs de las zonas de reaccin presentes en una tira reactiva.
El examen microscpico permite observar, si estn presentes, elementos
celulares, cilindros, cristales, parsitos, lamentos mucoides y bacterias.
Muestra requerida:
-
20-30 mL de orina de chorro intermedio en pacientes promedio.
5-10 mL de orina en pacientes oligricos o peditricos.
Indicaciones para recoleccin de muestra de orina de chorro intermedio:
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- Limpiar cuidadosamente los genitales.

- Descartar el inicio y el nal de la miccin; recolectar la orina de la
porcin intermedia. (En el caso de la mujer separar los labios genitales).
- Depositar la muestra de orina en un frasco plstico, transparente, limpio,
de boca ancha con tapn de rosca y capacidad de 30 a 40 mL.
- Tapar el frasco inmediatamente.
Se debe colectar preferiblemente la primera orina de la maana.
La muestra debe procesarse en un plazo menor a dos horas de

haberse obtenido, de no ser as conservar en refrigeracin (2-8C).
La muestra debe estar libre de contaminacin con heces, sangre

menstrual, cremas, aceite u otras sustancias.
Materiales:
-
Frascos plsticos transparentes de boca ancha, con capacidad de 30 mL.

cerrado.
Tubos cnicos con capacidad de 15 mL.
Gradilla para tubos.
Papel toalla.
Lpiz graso.
Tiras reactivas para orina.
Lminas porta objeto 3 x 1x 1 mm.
Laminillas cubre objeto 22 x 22 mm.
Equipo:
-
Cronmetro.
Macrocentrfuga.
Microscopio.
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Procedimiento:
-

de orina.
Al recibir la muestra en el laboratorio o en el rea de urianlisis, se debe

vericar que los datos contenidos en el frasco sean los mismos que
Rotular segn nmero correlativo de laboratorio en la vieta del frasco,

nunca en la tapadera.
Al examen general de orina se le realizan tres procedimientos:
-
Examen fsico.
Examen qumico.
Examen microscpico.
Examen fsico:
1. Vericar que el frasco est completamente tapado.
2. Mezclar la orina contenida en el frasco realizando movimiento circular
sobre la mesa de trabajo.
3. Observar color y aspecto.
4. Anotar lo observado en la Boleta nica para Pruebas de Laboratorio
Clnico (Anexo 1).
Examen qumico:
1. Identicar el tubo cnico.
2. Mezclar la orina contenida en el frasco realizando movimiento circular
sobre la mesa de trabajo.
3. Verter de 5-10 mL de la muestra de orina en el tubo cnico.
4. Introducir la tira reactiva en la orina.
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5. Eliminar el exceso de orina colocando la tira sobre un papel absorbente.

6. Esperar el tiempo recomendado por el fabricante para su lectura.
7. Anotar lo observado en la boleta de peticin y resultados de la pruebas
de laboratorio.
Nota: Los cambios de color que aparecen despus de dos o ms minutos
carecen de importancia diagnstica.
8. Descartar las tiras de orina en un descarte de desechos bioinfecciosos
(bolsa roja).
Examen microscpico del sedimento urinario
1. Centrifugar la orina contenida en el tubo cnico durante 5 minutos a
2,500 rpm (equilibrando adecuadamente los volmenes de orina de los
tubos que se encuentren frente a frente).
2. Descartar el sobrenadante de orina en un recipiente conteniendo
hipoclorito de sodio al 0.5% (leja al 5% diluida 1:10).
3. Suspender el sedimento urinario golpeando ligeramente con la mano.
4. Identicar una lmina portaobjetos.
5. Colocar una gota de sedimento en la lmina porta objeto.
6. Cubrir la gota de sedimento con una laminilla cubre objeto, cuidando
que no se formen burbujas.
7. Observar la preparacin con el objetivo 10x para lograr una visin general
del sedimento.
8. Identicar los elementos formes a mayor aumento 40x.
9. Anotar lo observado en la Boleta nica para Pruebas de Laboratorio
Clnico.
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(seccin de Urianlisis si se dispone) la cual debe contar con iluminacin y
ventilacin adecuada.
Forma de reporte:
Los resultados de la prueba debern reportarse en la Boleta nica para
Examen Fsico:
-
Color: Colocar el color que presente la orina (amarillo, anaranjada, roja,

caf, etc.).
Aspecto: Limpio, leve turbio, turbio.
Examen Qumico
-
pH: De 5 a 9.
Densidad: De 1.000 a 1.030.
Leucocitos: 0 a 500 Leucocitos por l.
Nitritos: Positivo o Negativo.
Protena: 0 a 1000 mg por dL.
Glucosa: 0 - 1000 mg por dL.
Cuerpos cetnicos: De una cruz a tres cruces.
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Urobilingeno: De <1 a 12 mg por dL.
Bilirrubina: De una cruz a tres cruces.
Sangre/hemoglobina: De 0 a 250 eritrocitos por L.
Nota: Siempre que en la tira reactiva no se observe un cambio de color se

reportar como negativo o normal segn el parmetro observado.
Examen Microscpico (Ver anexo 3)
-
Clulas epiteliales, escamosas y redondas: Reportar escasas, moderadas

o abundantes.
Glbulos rojos: Reportar el nmero estimado por campo.
Leucocitos: Reportar el nmero estimado por campo.
Cilindros: Se pueden encontrar en la orina los siguientes cilindros: Hialinos,

granulosos nos y gruesos, leucocitarios, hemticos, grasos y creos.
Reportar el nmero de cilindros observados por campo.
Filamentos mucoides: Reportar escasos, moderados o abundantes.
Cristales: Se pueden encontrar en la orina los siguientes cristales: Oxalatos

de calcio, cido rico, uratos amorfos, fosfatos amorfos, fosfatos triples,
urato de amonio, leucina, cistina y tirosina.
Reportar en la forma siguiente: escasos, moderados o abundantes.
Levaduras: Reportar escasos, moderada y abundantes.
Parsitos: Se pueden encontrar en orina Trichomonas vaginalis, Phithirus

pubis, huevos y quistes de parsitos por contaminacin con heces.
Identicacin de parsitos:
Anotar el gnero y especie, as como su estado evolutivo.
-
Gnero: La primera letra en maysculas.
Especie: Todo con letras minsculas.

Todo el nombre del parsito debe ir subrayado.
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Estado evolutivo:
Trofozoito en el caso de Trichomonas vaginalis.

Huevo: Si se trata de helmintos o tremtodos como Schistosoma
haematobuim.
Acaro: Si se observara Phithirus pubis.

-
Bacterias: Reportar la presencia de bacterias moderadas o abundantes,

solamente cuando se observen ms de 10 leucocitos por campo.
Valores de referencia
Examen Fsico
-
Color: Amarillo.
Aspecto: Limpia.
Examen Qumico
-
pH: de 5 a 6.
Densidad: De 1.005 a 1.010.
Leucocitos: 0 Leucocitos por l.
Nitritos: Negativo.
Protena: Negativo.
Glucosa: Normal.
Cuerpos cetnicos: Negativo.
Urobilingeno: <1 mg por dL.
Bilirrubina: Negativa.
Sangre: 0 eritrocitos por L.
Examen Microscpico
-
Clulas epiteliales, escamosas: Escasas a moderadas.
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Clulas epiteliales redondas: No deben observarse.
Glbulos rojos: No deben observarse.
Leucocitos: 0-5 por campo.
Cilindros: No deben observarse.
Filamentos mucoides: No deben observarse.
Cristales: Podran observarse oxalatos, uratos y fosfatos amorfos de escasa

a moderada cantidad.
Levaduras: No deben observarse.
Parsitos: No deben observarse.
Bacterias: Escasas o no presentes.
Valores de alerta:
Color:
-
Amarillo intenso: Orina ms concentrada, puede existir bilirrubina.
Rojizo: Debido a hematuria, hemoglobinuria, mioglobinuria, uso de

frmacos o consumo de alimentos.
Naranja o marrn: Debido a pigmentos biliares, uso de antimicrobianos

u otros medicamentos.
Pardo o negro: Puede ser debido a hematuria, ebre hemoglobinrica

del paludismo, ingesta de medicamentos que contengan hierro.
Azul verdoso: Infeccin por especies de Pseudomonas, ingesta vitaminas

o azul de metileno.
Blanco lechoso: Quiluria, piuria intensa.
Incoloro o transparente: poliuria o uso de diurticos.
Densidad: Una baja proporcin de protenas o cetoacidosis tienden a elevar

los valores de referencia.
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pH: Pueden resultar ms alto en caso de insuciencia renal, o al contrario

tender hacia valores cidos en caso de diabetes.
Protenas: Pueden aumentar en estados febriles, embarazos, esfuerzo fsico
intenso o enfermedad renal.
Glbulos rojos: Pueden estar presentes en la orina de individuos afectados
por anemia hemoltica, cistitis.
Glbulos blancos: Pueden estar presentes en la orina indicando presencia
de infeccin o inamacin.
Glucosa: La glucosuria se maniesta generalmente cuando hay una elevada
concentracin de azcar en sangre, o en caso de una funcionabilidad renal
alterada.
del informe nal. Deber registrar adems la rma y el sello de la JVPLC, y el
sello del establecimiento, antes de entregar el reporte.
Los resultados se registrarn en el Registro y Tabulador Diario de las Actividades
Fuentes de error:
-
Frascos sucios.
Toma de muestra inadecuada.
Muestras medicamentosas.
Muestras contaminadas con heces, sangre menstrual.
Tiempo transcurrido desde la toma de la muestra hasta la observacin

mayor de 2 horas.
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Frascos y tubos mal lavados.
Tiras reactivas de mala calidad o vencidas.
Cortar las tiras reactivas.
Leer las tiras reactivas despus del tiempo indicado por el fabricante.
Usar portaobjetos y cubreobjetos sucios.
Desecacin del sedimento urinario.
Uso excesivo de luz.
Centrifugacin inadecuada.
-

infeccioso.

Descarte de muestras:
-
Al terminar el examen general de orina descartar la muestra de orina en

un recipiente conteniendo hipoclorito de sodio al 0.5% (leja al 5% diluida
1:10).
Dejar en reposo sin tapar por 30 minutos como mnimo.
La orina ya tratada puede ser descartada luego en la red de drenaje.
Control de calidad en urianlisis:

El tiempo transcurrido entre la toma de la muestra y el procesamiento de la
misma debe ser idealmente no mayor de dos horas.
Correlacionar de lo observado en el examen qumico y microscpico de los
siguientes parmetros:
-
Nitritos positivos con bacterias presentes en el sedimento.

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Leucocitos por L con leucocitos presentes en el sedimento.
Correlacionar la presencia de leucocitos con la presencia de bacterias

observadas en el sedimento urinario.
6.

7.
REFERENCIAS

Laboratorio Clnico del Primer Nivel de Atencin. El Salvador, C.A. 2007.
Pg. 22-29.
3. KING STRASINGER, SUSAN. SCHAUB DI LORENZO, MARJORIE. Anlisis de la
orina y de los lquidos corporales. 5 Edicin. Editorial Panamericana, 2008.
4. BOTERO DAVID, RESTREPO MARCOS. Parasitosis Humanas. 5 Edicin.
Colombia. Editorial Corporacin para Investigaciones Biolgicas. 2013.
12
8.
ANEXOS
ANEXO 1
13
MINISTERIO DE SALUD
ANEXO 2
14
ANEXO 3
Elementos microscpicos evaluados en un examen general de orina.
Clulas epiteliales
Escamosas
Redondas
Elementos formes encontrados en orina

Eritrocitos
Leucocitos
15
MINISTERIO DE SALUD
Cilindros
Hialinos
Creos
Son los ms comunes, se pueden observar

en orina de individuos normales pero mal
hidratados o que han realizado ejercicios
fsicos muy rigurosos. Son de forma cilndrica
y claros, con un ndice refractivo bajo.
Aparecen cuando hay un muy bajo fluido

urinario y se los relacionan con alguna
enfermedad renal avanzada e insuficiencia
renal crnica.
Hemticos
Leucocitarios
Son cilindros con glbulos rojos en su interior,

su presencia en orina es siempre de origen
patolgico, y puede ser un signo claro de
dao glomerular, lo cual puede ocurrir en
una glomerulonefritis.
Son cilindros con glbulos blancos en su

interior, su presencia en orina es indicativo
de infeccin.
Granuloso
Se forman de la descomposicin de restos de clulas a los cuales se les adhieren agregados
de protenas. Tienen la forma de cigarro y son ms grandes que los cilindros hialinos.
Fino
16
Grueso
Cristales encontrados en orina normal

Cristal
pH (orina)
Forma
Descripcin
cido
rico
cido
Por lo general son de

forma hexagonal,
presentan un
color amarillo-marrn,
pero puede ser incoloro.
Uratos
amorfos
cido
Tienen aspecto granular

y color amarillo rojizo.
Carecen de significacin
clnica.
cido/neutro
Son incoloros, de forma

octadrica o de sobre,
pueden existir
normalmente en la orina
despus de ingerir
alimentos ricos en
oxalato, como tomate,
ajo, naranjas y
esprragos.
Alcalino/neutro
Son de apariencia
granular, similar a los
uratos amorfos.
Alcalino
Tienen forma de prisma

que frecuentemente se
asemeja a un "atad" , a
medida que se
desintegran, pueden
desarrollar un aspecto
plumoso.
Oxalatos de
calcio
Fosfatos
amorfos
Fosfatos
triples
17
MINISTERIO DE SALUD
Cristales encontrados en orina normal

Cristal
Biurato de
amonio
pH (orina)
Forma
Alcalino
Descripcin
Tiene forma de esferas
cubiertas de espculas,
son de color
amarillo-marrn se
asocian con la presencia
de amonaco producido
por bacterias.
Cristales patolgicos
Cristal
pH (orina)
Cistina
cido
Tirosina
cido/neutro
Leucina
cido/neutro
Forma
Descripcin
Tienen forma de placas
hexagonales incoloras.
Se asocia a un trastorno
metablico que previene
la reabsorcin de cistina
por los tbulos renales.
Tienen forma de agujas

finas, altamente
refringentes, aparecen en
acmulos de color negro
en el centro, pero pueden
tomar una coloracin
amarilla en presencia de
bilirrubina. Se asocian a
enfermedades hepticas
graves.
Son esferoides oleosos,

altamente refractarios, de
color amarillo o castao
con estriaciones radiales y
concntricas. Son de
origen patolgico.
18
Cristales patolgicos
Cristal
pH (orina)
Forma
Descripcin
Colesterol
cido
Tienen forma de placas

rectangulares con una
muesca en una o ms
esquinas. Estn asociados
con trastornos que causan
quiluria, tales como el
sndrome nefrtico
Bilirrubina
cido
Aparecen como agujas

agrupadas o grnulos con
el color amarillo
caracterstico de la
bilirrubina. Estn presentes
en los trastornos hepticos
que producen dao renal
tubular, tal como la
hepatitis vrica.
Microorganismos en orina
Huevos de Schistosoma haematobium
Trofozoitos de Trichomonas vaginalis
Hifas de hongos
Phthirus pubis
Otros elementos encontrados en orina

Filamentos mucoides
Espermatozoides en orina
19

Procedimientos Operativos Estndar para Los Laboratorios Clnicos Del Primer Nivel de Atencin

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PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTNDAR PARA

LOS LABORATORIOS CLNICOS DEL PRIMER NIVEL

INSTITUTO NACIONAL DE SALUD

PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTNDAR PARA

AUTORIDADES DEL MINISTERIO DE SALUD

Los Laboratorios Clnicos representan un apoyo de diagnstico para el

Brindar una herramienta que permita la ejecucin de los procedimientos

Contribuir a la aplicacin de medidas de bioseguridad y control de calidad

Contar con un instrumento que sirva de gua para la evaluacin y monitoreo

TOMA DE MUESTRA DE SANGRE VENOSA

Establecimientos de salud del Ministerio de Salud que colecten muestras

Profesional en Laboratorio Clnico, Tcnicos en Laboratorio Clnico y otro

Anticoagulantes: Son sustancias que mantienen la sangre en estado

Ayuno: Es aquel acto de abstencin voluntaria de ingerir toda o algn

Bioseguridad: Norma de comportamiento encaminada a lograr actitudes

Citrato de sodio: Anticoagulante que se utiliza generalmente en

EDTA: El anticoagulante el EDTA (cido etiln-diamino tetraactico)

Toma de Muestras de Sangre Venosa

TOMA DE MUESTRA DE SANGRE VENOSA

Flebotoma: Describe una incisin practicada en la vena por motivos

Hemlisis: Salida de hemoglobina y otras protenas del interior de los

Heparina: Se utiliza tanto en algunos estudios de rutina como especializados.

Muestra: Parte de un espcimen que utilizamos para realizar pruebas de

Plasma: Es la porcin acuosa de la sangre que se obtiene tras centrifugar

Sangre completa: La sangre obtenida mediante puncin contiene clulas,

Suero: Es el componente de la sangre resultante tras dejar reposar la sangre

Tubo sin aditivos (sin anticoagulante): Utilizados para la obtencin de

INS: Instituto Nacional de Salud.

POE: Procedimiento operativo estndar.

TOMA DE MUESTRA DE SANGRE VENOSA

DESARROLLO DEL PROCEDIMIENTO

Toma de Muestras de Sangre Venosa

TOMA DE MUESTRA DE SANGRE VENOSA

Alcohol etlico (70%).

Explicar al paciente sobre el procedimiento que se le va a realizar.

10. Seleccionar la vena apropiada para la puncin (las principales son

TOMA DE MUESTRA DE SANGRE VENOSA

Toma de Muestras de Sangre Venosa

TOMA DE MUESTRA DE SANGRE VENOSA

Recipiente primario: Es el tubo que contiene la muestra, ste debe

Envase secundario: Debe ser impermeable y duradero que encierra

Envase exterior: Los embalajes secundarios se colocan en embalajes

TOMA DE MUESTRA DE SANGRE VENOSA

Prolongada aplicacin del torniquete.

Extraccin violenta de la sangre, que puede provocar hemlisis.

Empleo de tubos mal lavados.

Depositar la sangre en el tubo en forma violenta.

Dejar los tubos con muestras destapados.

Que el paciente no cumpla con las indicaciones de acuerdo al anlisis

Mezcla inadecuada de la sangre.

Relacin inadecuada de sangre y anticoagulante.

Manipular todas las muestras clnicas como si fuera material potencialmente

Usar correctamente el equipo de proteccin personal: guantes, gabacha

Toma de Muestras de Sangre Venosa

TOMA DE MUESTRA DE SANGRE VENOSA

Todo objeto cortopunzante contaminado se debe colocar en un recipiente

Todo material contaminado con sangre debe eliminarse en el descarte

Todo material que no est contaminado con sangre se deposita en el

Cuidados especcos para cada rea de laboratorio clnico

La muestra utilizada para anlisis de qumica clnica debe tomarse en

El tamao de los tubos a utilizar pueden ser de 12x75 y 13x75 mm con

Se debe vericar el ayuno previo de 8-12 horas para las pruebas de