MANIPULACIÓN GENÉTICA DEL METABOLISMO SECUNDARIO DE

FLAVONOIDES
DOCENTE Ms.C. Ricardo Tuñoque Baldera

ESCUELA Biotecnología.

CURSO Ingeniería metabólica

ALUMNOS Mendoza Medina, Segundo A.

ESTRUCTURA QUÍMICA DE UN FLAVONOIDE
 I. Revisión bibliográfica: FLAVONOIDES RECOMBINANTES DE RELEVANCIA FARMACÉUTICA
María Elisa Drago Serrano

Ruta fenilpropanoide chalconas flavononas flavonoides

 La síntesis de la estructura básica de los esqueletos flavonoides recae solo en tres grupos de
enzimas: oxigenasas, citocromo P450 hidroxilasas y reductasas NADPH.
 Inicio de la ruta fenilpropanpoide:
Fenilalanina PAL ácido cinámico ácido 4-cumárico 4 cumaroil-CoA naringenina-
chalcona flavononas naringeninas. 3 moléculas de malonil-CoA
CHI

 La obtención de flavononas recombinantes en E. coli, se logró mediante un “cluster”

artificial, formado por ensamblaje de los genes: pal de Rhodotorula rubra, chs de
Glycyrrhiza echinata y 4 cl de Streptomyce coelicor A3.
 Este “cluster” de genes en E. coli dió lugar a 452.6 μg/l de naringenina a partir de tirosina y
751.9 g/l de pinocembrina (flavonona).
 El estudio extensivo de enzimas que participan en rutas metabólicas de biosíntesis ha
permitido realizar manipulación genética con el fin de producir flavonoides generados por
ingeniería genética, a fin de obtener flavonoides recombinantes en E. coli como sistema de
expresión.

II. “Biología molecular, una herramienta para la bioprospección del

metabolismo secundario de plantas en Colombia”. Ejemplo práctico en plantas
colombianas de interés medicinal. Autor: Natalia Palacios Rojas
 Dada la importancia ecológica de los compuestos fenólicos y alcaloides. Este trabajo se
enfocó en la enzimas Triptófano descarboxilasa (TDC) y Tirosina Descarboxilasa (TyDC).
 Para que la TDC y TyDC realicen descarboxilación requieren del cofactor piridoxal-5’-
fosfato. Dentro del sitio de unión del piridoxal fosfato se encuentran los residuos de
histidina y prolina. Basado en ello se diseñaron cebadores degenerados para clonar las
isoenzimas de las especies tropicales.
 Se utilizó el PCR para amplificar enzimas descarboxilasas dependientes del piridoxal
fosfato involucrados en síntesis de los compuestos mencionados.
 Resultados:
 El material se colectó en campo utilizando sílica gel para secarlo.
 Se utilizó varias técnicas para la extracción de ADN.
 Utilizaron la homología existente entre las enzimas descarboxilasas de aminoácidos
aromáticos dependientes de fosfato piridoxal, para diseñar cebadores degenerados que se
usaron en RT-PCR.
 Los fragmentos principales fueron clonados y secuenciados, corroborándose la identidad de
las enzimas descarboxilasas de aminoácidos aromáticos en todas las muestras.
 Webgrafía
1. https://ediciones.inca.edu.cu/index.php/ediciones/article/viewFile/699/pdf
Reseña bibliográfica FLAVONOIDES: CARACTERÍSTICAS QUIMICAS Y APLICACIONES – O. Cartaya e Inés Reynaldo

2. https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/22131
Biología molecular, una herramienta para la bioprospección del metabolismo secundario de plantas en Colombia. Ejemplo práctico en plantas colombianas
de interés medicinal
3. Flavonoides recombinantes de relevancia farmacéutica
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