Técnicas de localización

cromosómica e identificación
génica
J. Pablo Iturri MSc.
Biólogo Molecular
Outline
• Organización general del genoma
• Cromosomas y su composición
• Técnicas de bandeo
• Proyecto Genoma humano y secuenciación de genomas enteros
• Exploración del genoma

• Localización génica
• Mapeo físico
• Mapeo genético
22 autosomas y 1 par sexual
Diferencias en la topología génica
Cariotipo
• Representación gráfica de cromosomas en metafase
• Técnicas de localización
• Hetero y eucromatina
• ¿Por qué la eucromatina está mas laxa?
FISH
• Hibridación fluorescente in situ
• Se utiliza una sonda específica
Proyecto genoma humano
• Inicio: 1990
• Finalización: 2003
• 18 paises en un esfuerzo global
• 5 mil millones de $
• En Marzo 2009 se completaron algunos
huecos
• 2020, 2021 y 2022 (cromosoma Y )
Objetivos del HGP
• Obtener un mapa físico del genoma
• Desarrollar las técnicas de secuenciación
• Obtener la secuencia del genoma humano
• Analizar la variabilidad en la secuencia humana
• Identificar genes y regiones codificantes
Mapeo físico
• Utiliza vario métodos tanto experimentales como bioinformáticos
• Asigna genes y marcadores a localizaciones particulares en un
cromosoma
• Para conocer las distancias entre genes
• Para esto es necesario fragmentar en genoma mediante métodos
químicos (enzimas de restriccion) o físicos (sonicación)
Enzimas de restricción
Mapeo genético
• El rearreglo de los genes basados en relación a su ligamiento
• Marcadores de ADN o sondas son usadas para la construcción de
mapas geneticos
• Detectar cambios en la secuencia (polimorfimo) entre diferentes
individuos
• Se necesita el uso de marcadores genéticos (que se quiere estudiar)
• Estos estudios iniciaron con la identificación de individuos enfermos
que eran portadores de un gen deleteo
• MAPEO GENETICO
• Proceso para determinar el orden
y las distancias relativas entre
marcadores geneticos en un
cromosoma basado en su patrón
de herencia
• Marcadores: genes
• Mapas genéticos dependen del
ligamiento
• Mapas genéticos dependen en la
recombinación
• Mapas genéticos basados en la
frecuencia recombinación
• Menos preciso
• MAPEO FÍSICO
• Tecnicas para encontrar el orden
y la distancia física entre pares
de bases y marcadores de ADN
• Marcadores: Sitios de restricción
• Se usan marcadores visuales que
son secuencias cortas de ADN
• Se basan en la distancia de ADN
del genoma
• Se basan en digestión por
restricción
• Determinan en lnu