METODOS DIAGNÓSTICOS

• Bandeado
• Cariotipo
• Corpusculo de Barr
• Fish
• PCR
• Secuenciación

BANDEADO

Es una técnica que determina las distintas bandas de los cromosomas y en base a esas bandas, se realiza una
clasificación de los cromosomas. Los cromosomas se clasifican en series de acuerdo a las bandas.

Hay varios tipos de bandeo: Q, G R, T y C, esto esta relacionado con la tinción que se utilice para detectar distintas
bandas.

BANDEO METODO CARACTERISTICAS

Q Tinción quinacrina Bandas fluorescentes brillantes
G Tinción con Giemsa, tras Las bandas G oscuras
pretratamiento del cromosoma con corresponden a las Q brillantes.
tripsina
R Naranja de acridina, Giemsa Patrón inverso al Q y G, útil para
modificado definir los extremos de los
cromosomas
T Varias técnicas Resaltan las regiones teloméricas
C Extracción de ADN/ proteínas, Resaltan las regiones
tinción con Giemsa centroméricas
Por ejemplo: El bandeo C se basa en el uso de colorante Giemsa que tiñe regiones con heterocromatina
constitutiva y permite observar los centrómeros.

El bandeo G, R y Q se realiza primero un tratamiento de los cromosomas

(tratamiento enzimático) y luego se tiñe con Giemsa (para G, R) o con
colorantes fluorescentes como la quinacrina (para Q).

Estas bandas son las más estudiadas en animales y en el hombre.

CARIOTIPO
Es lo que más se utiliza para el estudio de alteraciones cromosómicas, es un patrón cromosómico de una especie
(es decir, es caracteristico de cada especie) que esta expresado a través de
un código universal que describe las características de sus cromosomas.

El cariograma es un esquema, foto o dibujo de los cromosomas en metafase

ordenados de acuerdo a su morfologia y tamaño.

TECNICA DEL CARIOTIPO

Se hace a través del bandeo cromosómico que son técnicas citológicas
especiales para tinción de los cromosomas, que evidencian “bandas”
transversales (oscuras y claras) a lo largo de los mismos correspondientes
a los distintos tipos de cromatina.

Los cromosomas se distribuyen en el cariotipo a través de distintas maneras y podemos determinarlos a través del
bandeo. Se han ordenado de distintos grupos que se designan por letras.

Por ejemplo:

• Grupo A constituido por los pares 1, 2 y 3, son los cromosomas mas grandes. El 1 y 3 son metacéntricos,
mientras que el 2 es submetacéntricos.
• El grupo B está constituido por los pares 4 y 5, los cuales son submetacéntricos
• El grupo C está constituido por los pares del 6 al 12 y son cromosomas submetacentricos y debido a su
tamaño, en este grupo se incluye al cromosoma X por ser del mismo tamaño de los cromosomas del grupo
C
• El grupo D constituidos por los pares 13, 14 y 15, son cromosomas acrocéntricos
• El grupo E esta constituido por los pares 16, 17 y 18 y son submetracéntricos, pero los cromosomas del
par 16 tienen el centrómero más hacia el centro.
• El grupo F por los cromosomas 19 y 20 son metacéntricos
• El grupo G constituido por los pares 21 y 22. Son los cromosomas más pequeños y allí se incluye el
cromosoma Y por su tamaño, aunque no tiene satélites.

CORPUSCULO DE BARR

Es la cromatina sexual inactiva presente en las células somáticas de las personas de sexo femenino.

FISH
Técnica de hibridación in situ y fluorescencia, se utilizan fluorocromos y permite detectar secuencias de
aminoácidos útiles para determinar algunos tipos de patologías e incluso hacer diagnósticos de enfermedades.

PCR
Reacción de cadena de polimerasa, es una técnica de biología molecular, en ella se realiza una amplificación de
un segmento de ADN para hacer un mejor estudio de este fragmento. Se puede combinar con otras técnicas y se
usa ampliamente para el diagnostico de infecciones, sobre todo para infecciones virales, pero es útil para una
gram variedad de enfermedades.
En el PCR tenemos lo que vamos a estudiar y entonces se toma un segmento que es la secuencia de ADN que
debemos amplificar. Para esto, se utiliza unos primers o partidores que se unen (luego de la separación de la
secuencia de ADN) a porciones de esta secuencia de ADN. El proceso de separación de componentes de la
secuencia se realiza a través de la desnaturalización y luego los primers o partidores se fijan para amplificar la
secuencia de ADN, estos sintetizan un ADN para permitir la elongación de las cadenas y esto es lo que permite
la amplificación de lo que se quiere determinar. Una vez que sucede la amplificación se puede hacer el PCR por
fluorescencia o por electroforesis. El que más se utiliza en la práctica clínica es el de electroforesis.

Las muestras se colocan en un campo en donde hay dos polos opuestos y la migración de estas sustancias hacia
un polo u otro es lo que va a permitir que lo podamos identificar

SECUENCIACIÓN
Es una técnica que permite determinar el orden o secuencia de los nucleótidos. Es un segmento de ADN lo que
se estudia.

Es una técnica de alto costo y más difícil de realizar.

No se utiliza de rutina o práctica clínica para el diagnóstico de enfermedades, sino para la investigación.

En la secuenciación se utiliza primero una técnica de desnaturalización

para separar las hebras de ADN y se utiliza el fluorocromo para permitir
la fluorescencia, esto permite determinar la secuencia de los aminoácidos
en ese segmento que estamos estudiando. Se hace luego, a través de
electroforesis y se observan por medio de los fluorocromos, cada color
corresponde a una banda y esto es igual a un desoxinucleotido de ese
fragmento.

Permite establecer el codigo genetico de lo que estamos estudiando.

INDICACIONES DE ESTUDIO GENETICO

• Problemas en el crecimiento y desarrollo

• Nacidos muertos
• Muertes neonatales
• Infertilidad y abortos a repetición
• Antecedentes familiares de enfermedades genéticas o cromosómicas
• Mujeres en edad avanzada que quieran embarazarse. (Ya que muchas alteraciones genéticas están
relacionadas con la edad materna, sobre todo en el Síndrome de Down (trisomía 21)

PERIODO PRENATAL

• Debe indicarse un estudio genético cuando

• Edad materna sea mayor de 35 años
• Triple Screening alterado: Se realiza una amniocentesis y se realiza un estudio para determinar las
alteraciones cromosómicas. Si está alterado se realiza un estudio genético.
• Oligoamnios y poliamnios: Las alteraciones del liquido amniótico está relacionado con alteraciones
cromosómicas
 • Retraso de crecimiento intrauterino
• Sospecha ecográfica de cromosomopatía (es decir, al hacer la ecografía se ve como una malformación u
otra alteración)
• Antecedentes de cromosomopatía (pareja con una cromosomopatía)

PERIODO NEONATAL

• Malformaciones mayores aisladas: Por ejemplo, malformaciones cardiacas, renales.

• Presencia de 3 o más defectos genéticos
• Menores, como alteraciones del pabellón auricular
• Recién nacido con rasgos dismórficos
• Recién nacido con genitales ambiguos
• Parto con producto muerto de causa inexplicable: Nace muerto sin causas.
• Muerte neonatal de causa inexplicada

PERIODO DE LACTANCIA

• Niños con dificultades para el aprendizaje

• Niños con rasgos dismórficos
• Niños con retraso psicomotor

PERIODO ADOLESCENTE

• Ginecomastia
• Falta de desarrollo puberal: Características sexuales que no se dan durante la pubertad (caracteres sexuales
secundarios)
• Amenorrea primaria o secundaria
• Retraso mental
• Rasgos dismórficos

PERIODO DE ADULTEZ

• Padres de niños con cromosopatías estructurales

• Abortos a repetición
• Infertilidad inexplicable
• Diagnóstico prenatal (líquido amniótico y biopsia de corión): Cuando la mujer está embarazada se realiza
es estudio de liquido amniótico o cuando el niño nace, se realiza una biopsia de corión (también se puede
realizar en el periodo prenatal) Para determinar si hay alguna alteración cromosómica en el feto.

En estos casos está recomendado el estudio genético para hacer el diagnostico de cromosomopatía o
enfermedades genéticas que son importantes para el manejo de un niño con alteraciones genéticas o para
realizar el consejo genético en padres que tiene un gen anómalo o alteración cromosómica