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LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

Semana 13-Sección 13-2020

Determinación de la concentración de urea

Cursos Básicos de Ciencias

Bioquímica – Dra. María del Pilar Navarro
mnavarro@cientifica.edu.pe
SECCIÓN DE REFERENCIA

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Logro de la sesión de aprendizaje
•Determinar la concentración en suero de urea.
Introducción:

UREA
GENERALIDADES
 Principal producto final del catabolismo de la proteínas y aminoácidos.
 Su síntesis se lleva a cabo en el hígado mediante el ciclo de la urea

CARACTERÍSTICAS
 Constituye la mitad del total de sólidos (25 g) en la orina.
 Representa del 80-90% del total de Nitrógeno Urinario.
 Es permeable a las membranas celulares y a las paredes capilares.
 Las nefronas concentran con un gradiente 50 veces más que en el plasma.

MEDICIÓN ANALÍTICA
BUN UREA 60/28 = 2,14
UREA BUN 28/60 = 0,467
E
R

A
U
DISMINUCIÓN AUMENTO
I
E
R

A
U

M
Introducción:

´MÉTODO:
• Determinar el nivel de urea en suero.
MUESTRA: Suero, plasma u orina diluida 1:100. El plasma debe obtenerse utilizando anticoagulantes libres de
amonio. No utilizar fluoruro pues inhibe la acción de la enzima ureasa. La urea es estable en el suero por a lo
menos 24 horas a temperatura ambiente, varios días entre 2° y 8° C, más de seis meses a ‐20° C.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:

• Determinar el nivel de urea en suero.

FUNDAMENTO:
La urea presente en la muestra, es desdoblada a amonio por acción de la enzima
ureasa, según la proposición de Faucet y Scott.    
   UREASA
(NH2)2CO  +  2 H2O                    2 NH3 + CO2 + H2O

El amonio producido reacciona con salicilato e hipoclorito en ambiente alcalino,

formándose un complejo de color verde.    La intensidad del color producido es
directamente proporcional a la cantidad de urea presente en la muestra, y su
absorbancia se lee a 600 nm (580‐620 nm).
 ¿Qué materiales utilizaríamos de
acuerdo a la técnica?

PROCEDIMIENTO TÉCNICO:

Muestras Blanco Estándar Desconocido

Estándar ________ 10 µL _________

• 03 Tubos de ensayos
desconocido _______ 10 µL 12 x 75 mm
• Pipeta automática de 10 o
Reactivo de trabajo 1 mL 1 mL 1 mL 20 uL
• Puntas o tips
Incubar 5 minutos a temperatura ambiente (20° a 25°C.), o  3 minutos a 37° C. Agregar a cada • Pipeta serológica o
tubo:
graduada de 5 mL
Reactivo 2 1 mL 1 mL 1 mL • Temporizador
• Baño de maría
Mezclar e incubar 10 minutos a temperatura ambiente (20° a 25°C.) o 5 minutos a 37° C. Leer • Espectrofotómetro
las absorbancias 600 nm dentro del plazo de una hora.
• Cubetas

PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO: Mezclar 1 mL de Reactivo Salicilato con 50 uL de

Suspensión de Ureasa, o preparar el volumen requerido manteniendo la proporción. (i.e. 30
mL. Reactivo Salicilato + 1,5 mL. Suspensión Ureasa). Almacenar entre 2° y  8°C y protegido de
la luz.  

Cálculos para hallar la concentración de urea (mg/dL)

Parte experimental:

Hallar la concentración de Urea:

•Concentración del estándar úrea= 66 mg/dL Nitrógeno ureico= 33 mg/dL

•Abs del estándar= 0.430 abs

•FC=? (153.48 mg/dL) FC BUN=76, 74 mg/dL

•Concentración de úrea del desconocido= ? 153.48 mg/dL x 0.200 = 30,69 mg/dL=31 mg/dL
•Concentración del BUN (Desconocido)= 76,74 mg/dL x 0.200= 15.34 mg/dL=15.3 mg/dL
•Abs del desconocido= 0.200 Abs

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

RANGOS DE REFERENCIA

Suero o plasma: Urea :   10 a 50 mg/dL

Nitrógeno Ureico : 4.5 a 22.7 mg/dL
 CORRELACIÓN CLÍNICO-PATOLÓGICO
Variaciones Fisiológicas:
- Estado de Gravidez
- Ingesta Dietética de proteínas
- Estado de Hidratación
Glucocorticoides (anti-anabólico)
Hormona tiroides (catabólico)
INCREMENTAN FORMACIÓN
DE UREA
Andrógenos y GH (anabólico):
DISMINUTYEN FORMACIÓN
DE UREA

 Variaciones Patológicas:
Aumento significativo de
Las concentraciones de
AZOEMIA NPN
(UREA y CREATININA)
 CLASIFICACIÓN DE LAS AZOEMIAS
- Azoemia Pre-renal
- Azoemia Renal
-Azoemia Post – renal
ETIOLOGÍAS:
- Deshidratación
AZOEMIA PRE-RENAL - Fallo Cardíaco Congestivo
 Función Renal Normal - Shock
Perfusión Inadecuada del Riñón - Hemorragia Gastrointestinal
 Retención de Urea - Fiebre, estrés, quemaduras
- Hipertensión
AZOEMIA RENAL
Función Renal Anormal
 Disminución del Filtrado
Glomerular
 Retención de Urea
ETIOLOGÍAS:
-Enfermedad renal aguda o Crónica
-Glomerulonefritis aguda y/o Crónica
-Esclerosis Renal
-Nefrosis Necrotizante

AZOEMIA POST-RENAL «REABSORCIÓN DE UREA A

CIRCULACIÓN»
 Obstrucción del Tracto Urinario

ETIOLOGÍAS: Cálculos renales, Tumores de Vejiga y/o próstata e

Infecciones Graves.
DISMINUCIÓN:
- Mala Nutrición
- Alta Ingesta de Líquidos
- Enfermedad Hepática Grave

Uremia:
Azoemia prolongada
Acidosis, desequilibrio hidroelectrolítico, náuseas, vómitos, anemia,
Alteraciones neuropsiquiátricas, coma.
 Actividad Asincrónica
Realizar un informe (trabajo colaborativo). Este informe debe presenter las
siguientes partes:

•Portada (titulo: Determinación de la concentración en suero de urea , persona

quien lo realizó, sección-hora-docente)
•Introducción
•Objetivos
•Materiales y métodos (Procedimiento experimental)
•Resultados
•Conclusiones
•Referencias

Fecha y hora de entrega será establecido por el docente.

GRACIAS

Cursos Básicos de Ciencias

Bioquímica – Dra. María del Pilar Navarro