BIOQUÍMICA

Departamento Académico de Cursos Básicos

Determinación de la
concentración de urea

Semana 05
Sesión 10
Contenido
1. Generalidades de Urea
2. Método
3. Muestra
4. Procedimiento experimental
5. Apliquemos lo aprendido
6. Integremos lo aprendido
7. Actividad asincrónica
 Resultado de aprendizaje de la sesión

Al finalizar la sesión, el estudiante

1. Describir la técnica de cuantificación de la

concentración de urea en suero.
2. Explicar el fundamente de la técnica empleada para
medir urea.
3. Relacionar el significado clínico de los resultados de
https://acortar.link/ApV0gB
esta prueba.
Siguiendo procedimientos experimentales 03
Reflexión desde la experiencia

https://acortar.link/N4pskc

04
Introducción:
Urea
Introducción

GENERALIDADES
o Principal producto final del catabolismo de la proteínas y
aminoácidos.
o Su síntesis se lleva a cabo en el hígado mediante el ciclo de
la urea

CARACTERÍSTICAS
o Constituye la mitad del total de sólidos (25 g) en la orina.
o Representa del 80-90% del total de Nitrógeno Urinario.
o Es permeable a las membranas celulares y a las paredes
capilares.
06
o Las nefronas concentran con un gradiente 50 veces más
que en el plasma.
https://acortar.link/yMdX3K
 ¿Por qué varían los niveles de urea?

U
R
U E
M
I
R A
MEDICIÓN ANALÍTICA
BUN -> UREA -> 60/28 = 2,14
UREA-> BUN -> 28/60 = 0,467
E BUN = Blood Urea Nitrogen

A
07
 Método y
Procedimiento técnico

08

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 Determinación del nivel de urea en suero

MUESTRA

o Suero, plasma u orina diluida 1:100. El plasma debe

obtenerse utilizando anticoagulantes libres de amonio.
No utilizar fluoruro pues inhibe la acción de la enzima
ureasa.

o La urea es estable en el suero por a lo menos 24 horas a

temperatura ambiente, varios días entre 2° y 8° C,
más de seis meses a ‐20° C.

09

https://acortar.link/mXkG3n
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

010
Determinación del nivel de urea en suero.

FUNDAMENTO

La urea presente en la muestra, es desdoblada a amonio por acción de la

enzima ureasa, según la proposición de Faucet y Scott.

(NH2)2CO + 2 H2O -> 2 NH3 + CO2 + H2O

El amonio producido reacciona con salicilato e hipoclorito en ambiente

alcalino, formándose un complejo de color verde. La intensidad del color
producido es directamente proporcional a la cantidad de urea presente en
la muestra, y su absorbancia se lee a 600 nm (580‐620 nm).

011

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 PROCEDIMIENTO TÉCNICO

Muestras Blanco Estándar Desconocido ¿Cómo se realiza la

Estándar ________ 10 µL _________ preparación del reactivo de
trabajo?
Desconocido _______ 10 µL

Reactivo de 1 mL 1 mL 1 mL Mezclar 1 mL de Reactivo 1 con 50 ul de

trabajo Reactivo 3, o preparar el volumen
Incubar 5 minutos a temperatura ambiente (20° a 25°C.), requerido manteniendo la proporción. (i.e.
o 3 minutos a 37° C. Agregar a cada tubo: 30 mL. Reactivo 1 + 1,5 mL. Reactivo 3)
Reactivo 2 1 mL 1 mL 1 mL
Mezclar e incubar 10 minutos a temperatura ambiente
(20° a 25°C.) o 5 minutos a 37° C. Leer las absorbancias
600 nm dentro del plazo de una hora.
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 PROCEDIMIENTO TÉCNICO
Muestras Blanco Estándar Desconocido
Estándar ________ 10 µL _________ ¿Qué materiales
utilizaríamos de acuerdo a la
Desconocido _______ 10 µL técnica?

Reactivo de 1 mL 1 mL 1 mL • 03 Tubos de ensayos 12 x 75 mm

trabajo • Pipeta automática de 10 o 20 uL
Incubar 5 minutos a temperatura ambiente (20° a 25°C.), o 3 • Puntas o tips
minutos a 37° C. Agregar a cada tubo: • Pipeta serológica o graduada de 5 mL
Reactivo 2 1 mL 1 mL 1 mL • Temporizador
Mezclar e incubar 10 minutos a temperatura ambiente (20° a 25°C.) o 5 • Baño de maría
minutos a 37° C. Leer las absorbancias 600 nm dentro del plazo de una hora. • Espectrofotómetro
• Cubetas
PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE TRABAJO: Mezclar 1 mL de
Reactivo Salicilato con 50 uL de Suspensión de Ureasa, o preparar el
volumen requerido manteniendo la proporción. (i.e. 30 mL. Reactivo
11
Salicilato + 1,5 mL. Suspensión Ureasa). Almacenar entre 2° y 8°C
y protegido de la luz.
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 PROCEDIMIENTO TÉCNICO
Blanco Estándar Desconocido
10 µL 10 µL
1. Identificamos
B S D los tubos de
ensayos

o Primera incubación por 5 minutos a

temperatura ambiente
o Segunda incubación por 10 minutos a
temperatura ambiente
Reactivo de trabajo o Leer las absorbancias 600 nm dentro
https://acortar.link/eph4Y1
Adicionar 1 mL de del plazo de una hora.
reactivo de trabajo
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 Cálculos para hallar la concentración de urea (mg/dL)

• Concentración del estándar urea= 66 mg/dL Nitrógeno ureico= 33 mg/dL

• Abs del estándar= 0.430 abs

• FC=? (153.48 mg/dL) FC BUN=76, 74 mg/dL

• Concentración de urea del desconocido= ? 153.48 mg/dL x 0.200 = 30,69 mg/dL=31 mg/dL
• Concentración del BUN (Desconocido)= 76,74 mg/dL x 0.200= 15.34 mg/dL=15.3 mg/dL
• Abs del desconocido= 0.200 Abs

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:
RANGOS DE REFERENCIA
Suero o plasma: Urea : 10 a 50 mg/dL 13
Nitrógeno Ureico : 4.5 a 22.7 mg/dL
Apliquemos lo aprendido
 Apliquemos lo aprendido

¿Cuál es la concentración de urea

del paciente?

¿Cómo se encuentran los valores

de urea del paciente de acuerdo
https://acortar.link/62oCbG

con los intervalos de referencia?

Correlación clínico-patológico
 Correlación clínico-patológico

• Variaciones Fisiológicas: Glucocorticoides (anti-anabólico)

Hormona tiroides (catabólico)
- Estado de Gravidez INCREMENTAN FORMACIÓN
DE UREA
- Ingesta Dietética de proteínas
- Estado de Hidratación
Andrógenos y GH (anabólico):
DISMINUTYEN FORMACIÓN
DE UREA

• Variaciones Patológicas:
Aumento significativo de
Las concentraciones de
AZOEMIA NPN 15
(UREA y CREATININA)
 Correlación clínico-patológico

CLASIFICACIÓN DE LAS AZOEMIAS

- Azoemia Pre-renal
- Azoemia Renal
-Azoemia Post – renal ETIOLOGÍAS:
- Deshidratación
AZOEMIA PRE-RENAL - Fallo Cardíaco Congestivo
❖ Función Renal Normal - Shock
❖Perfusión Inadecuada del Riñón - Hemorragia Gastrointestinal
❖ Retención de Urea - Fiebre, estrés, quemaduras
16
- Hipertensión
 Correlación clínico-patológico

ETIOLOGÍAS:
AZOEMIA RENAL
-Enfermedad renal aguda o Crónica
❖Función Renal Anormal
-Glomerulonefritis aguda y/o Crónica
❖ Disminución del Filtrado Glomerular
-Esclerosis Renal
❖ Retención de Urea
-Nefrosis Necrotizante

AZOEMIA POST-RENAL «REABSORCIÓN DE UREA A CIRCULACIÓN»

❖ Obstrucción del Tracto Urinario
ETIOLOGÍAS: Cálculos renales, Tumores de Vejiga y/o próstata e Infecciones
Graves 17
 Correlación clínico-patológico

DISMINUCIÓN:
- Mala Nutrición
- Alta Ingesta de Líquidos
- Enfermedad Hepática Grave

Uremia:
Azoemia prolongada
Acidosis, desequilibrio hidroelectrolítico, náuseas, vómitos, anemia,
Alteraciones neuropsiquiátricas, coma.
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Apliquemos lo aprendido
 Apliquemos lo aprendido

Participemos en las siguientes preguntas

¿Cuál es el fundamento de la técnica para medir

urea?

¿Para qué sirve la cuantificación de urea en sangre?

¿Qué indican los valores de úrea fuera de los rangos

de referencia?

https://acortar.link/sztuLB

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Integremos lo aprendido
 Integremos lo aprendido
Participemos en las siguientes conclusiones
¿Qué aprendiste en clase hoy?
o La urea es una molécula generada del metabolismo de
los aminoácidos.

o Existen dos formas de expresar la cuantificación de urea:

urea y BUN.

o Niveles bajos o elevados de urea pueden ser indicadores

de enfermedades, principalmente del riñón.

o Reconocer los niveles de urea es importante pra el

https://acortar.link/RmX8nu diagnóstico de enfermedades principalmente renales y/o
hepaticas.
Actividad Asincrónica

N°
 Actividad Asincrónica

Realizar un informe (trabajo colaborativo). Este informe, debe presenter las siguientes partes:

o Portada (título: Determinación de la concentración en suero de urea, persona quien lo

realizó, sección-hora-docente)
o Introducción
o Objetivos
o Materiales y métodos (Procedimiento experimental)
o Resultados
o Discusión
o Conclusiones
o Recomendaciones
o Referencias

Fecha y hora de entrega será establecido por el docente. N°

 Referencias Bibliográficas
DE CONSULTA

Cuadros Trillos, G. (2019). Mapas conceptuales en bioquímica (1.a ed.). El Manual

Moderno http://elibro.net.cientifica.remotexs.co/en/lc/ucsur/titulos/128368

Melo, V. y Cuamatzi, O. (2019). Bioquímica de los procesos metabólicos. Reverté, S.A.

https://elibro.net/es/ereader/ucsur/127790

Müller-Esterl, W. (2020). Bioquímica: fundamentos para medicina y ciencias de la vida. Reverté, S.A.
http://elibro.net.cientifica.remotexs.co/en/lc/ucsur/titulos/129564

Piña Garza, E., Martínez Montes, F., Riveros Rosas, H., Laguna, J. y Pardo Vázquez, J.P. (2018). Bioquímica de Laguna y Piña
(7.a ed.). El Manual Moderno.

Pulido Villamil, X. C. (2019). Prácticas de bioquímica y estudios de casos en ciencias de la salud. Universidad de Tolima.
http://elibro.net.cientifica.remotexs.co/en/lc/ucsur/titulos/142510

Simes, L. E. (2020). Introducción a la bioquímica: interpretación de análisis clínicos. Universitas.

N°
http://elibro.net.cientifica.remotexs.co/en/lc/ucsur/titulos/172171
 Referencias Bibliográficas
OBLIGATORIAS

Bittencourt, J. (2018). The Power of Carbohydrates, Proteins, and Lipids (4.a ed.). CreateSpace, An Amazon.com
Company. https://www.researchgate.net/publication/322473648

Macías Alvia, A., Hurtado Astudillo, J. R., Cedeño Holguín, D. M., Cedeño Holguín, F. A., Scott ÁLava, M., Vallejo Valdivieso,
P. A., Macías Alvia, M. J., Santana Sornoza, J. W., Espinoza Macías, M. J., Ubillús Saltos, S. P., Arteaga Espinoza, S. X.,
Torres Macías, O. E., Pigüave Reyes, J. M., Pigüave Reyes, Chavarría Cedeño, D. I., & Intriago Sánchez, K. J. (2018).
Introducción al estudio de la bioquímica (1.a ed.). Área de Innovación y Desarrollo, S.L
https://doi.org/10.17993/CcyLl.2018.28

Nelson, D. L., y Cox, M. M. (2017). Lehninger Pinciples of Biochemistry (7.a ed.). W.H Freeman Macmillan Learning.

Navarro, M., Salazar, J., Salazar, Y. Zarkovic, G. (2022). Manual de prácticas de laboratorio. Bioquímica. Universidad
Científica del Sur.

N°