Docente: Blga. Martha Castillo M.Sc Sembrado por agotamiento.- • El objetivo es obtener, a partir de un elevado número de bacterias, un número reducido de ellas distribuidas individualmente sobre la superficie de la placa. Al incubar ésta , cada una de las bacterias originará una colonia. • Después de llevar la placa a incubar obtendremos una placa como la que se muestra en la foto en la que en las últimas estrías hemos conseguido colonias perfectamente aisladas unas de otras. Una vez que dispongamos de colonias aisladas es preciso cerciorarse de que cada una esta formada por un solo tipo de microorganismo Sembrado por agotamiento.- Esta técnica se basa en coger una vez una cantidad representativa de muestra y extenderla por toda la placa petri en cuatro zonas de tal forma, que cada vez que pasamos de una zona a otra la cantidad de microorganismo se reduce mucho. De esta manera, conseguimos que en la ultima zona de extensión, solo haya bacterias aisladas, que formen colonias independientes y distinguidas unas de otras.
La supervivencia y crecimiento continuo de microorganismos depende de un suministro adecuado de nutrientes y un ambiente favorable para su crecimiento. Un medio de cultivo es una solución que contiene los nutrientes necesarios para permitir el crecimiento de microorganismos, en condiciones favorables de pH y temperatura. Materiales.-
Hisopo Mechero Pipetas Incubadora Agar sangre Muestra de microorganismo RESUMEN.-
Al igual que los seres humanos, los microorganismos necesitan
nutrientes de acuerdo a sus necesidades para realizar su ciclo de vida, esto debe ser proporcionado por el ambiente en el cual se encuentran, que puede ser denominado medio de cultivo. En la práctica microbiológica se busca sembrar los microorganismos para estudiar de manera aislada las características que posean, su desarrollo y capacidad de multiplicación para la formación de colonias, ya que el aspecto de las colonias sirve para diferenciar distintas especies microbianas. Para esto se han desarrollado diversos medios de cultivos y técnicas de aislamiento. Resultados.- El resultado, es un cultivo por agotamiento de microorganismos, en el cual, en la primera extensión hay mucha densidad bacteriana, por lo que no es de mucha utilidad. En la segunda y tercera extensión, disminuye la densidad, pero sigue sin ser optimo para la identificación de colonias y por tanto, de bacterias. En la ultima extensión, la densidad ha disminuido lo suficiente como para ver colonias aisladas y poder identificar e incluso cogerlas y cultivarlas de forma aislada para hacer un cultivo puro. Precauciones •No introducir el asa de siembra mas de la primera vez en una zona ya extendida, puesto que sino volveríamos a coger muestra y queremos que se agote. •Tener cuidado al poner en contacto el asa de siembra esterilizada con la muestra, si esta muy caliente destruirá la muestra, por lo que hay que atemperarla. •Usar siempre guantes para manipular las muestras. •No encender el mechero bunsen con guantes. •Asegurarnos de no tocar nada con el asa de siembra cuando contenga muestra, puesto que es un inoculo de bacterias. En caso de entrar en contacto con algo, desinfectar inmediatamente. Referencias Bibliográficas:
1. Santambrosio E, Ortega M, Garibaldi P. Siembra y recuento de microorganismos. Argentina: Universidad
Tecnológica Nacional, Departamento de Ingeniería Química; 2009. 2. Bernal M. Universidad nacional de Colombia: Departamento de Microbiología. (Onine).; 2014 (cited 2015 02 03. Available from: HYPERLYNK http://www.medicina.unal.edu.co/Departamentos/microbiología/ Docs/W_IDENTIFICACIÓN_BACTERIANA%20I%2014.pdf 3. Solano C. Guía de Práctica: Microbiología general. España: UPNA/CSIC, Instituto de Agrobiotecnología y Recursos Naturales.; 2006.
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