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Universidad Nacional Autnoma de Mxico

Escuela Nacional Preparatoria


Plantel 5: Jos Vasconcelos

Prctica de
microbiologa:
bacterias,
hongos y
protistas
Temas Selectos de Biologa

Equipo:
Jimnez Aguirre Laura Iliana
Ramrez Ramrez Ana Laura
Saldaa Prez Fabiola
Trujillo Olvera Claudia Ximena

Profesora: Martha
Corona Tinoco

Introduccin general

Grupo: 612-a

La microbiologa es una ciencia que tiene unos 200


aos
de
antigedad.
Estudia los
microorganismos en cualquiera de sus aspectos:
morfologa, estructura y composicin qumica,
fisiologa, gentica, taxonoma y ecologa, as como
su interaccin con el hombre. Se ocupa,
fundamentalmente, de los protistas eucariontes y
procariontes, constituido por las bacterias y las
arqueas, as como hongos, algas microscpicas
virus y sus variantes.
Las primeras observaciones fueron hechas por
Anton Van Leeuwenhoek mediante unos lentes de
aumento,
construidos
por
l
mismo.
Posteriormente se increment el inters por los
microorganismos, siendo entre 1857 y 1914 el
periodo denominado La edad de oro de la
microbiologa en el cual se desarrollaron avances
rpidos encabezados, principalmente, por Louis
Pasteur y Robert Koch, que condujeron al
establecimiento de la microbiologa como ciencia.
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Tienen
funciones
fundamentales
para
el
bienestar de los habitantes del mundo, entre
ellas: ayudan a mantener el equilibrio de los
organismos vivos y las sustancias qumicas del
ambiente,
degradan
residuos
orgnicos,
incorporan nitrgeno del aire a los compuestos
orgnicos, reducen la contaminacin, etc.
Algunos de ellos son patgenos, aunque son la
minora. Tambin tienen usos comerciales, en
productos qumicos, industrias alimentarias, y en
la salud.

Objetivo:
Preparar adecuadamente los medios de
cultivo para bacterias.
Observar e identificar la morfologa de
bacterias que se desarrollan en alimentos
como frutas y verduras jugosas.
Distinguir su composicin de pared celular,
mediante
tincin
Gram
y
as
dar
clasificacin taxonmica.
Planteamiento del problema:

Clasificar las bacterias resultantes de los


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cultivos de acuerdo a la diferencia de


coloracin, dada por la composicin
bioqumica
de
su
pared
celular.

Hiptesis:
Si la pared de las bacterias obtenidas se tie
de morado, entonces es Gram positiva, si se
tie de rosa, entonces es Gram negativa.

Marco Terico: 2

Las bacterias son organismos unicelulares


procariontes, por lo tanto, carecen de ncleo.
Tienen un dimetro de alrededor de 0.2 a 10
micrmetros. Puede formar pares, cadenas,
racimos u otros agrupamientos, cada gnero
tiene su formacin particular. Estn recubiertas
por paredes celulares constituidas, en gran
parte, de pptidoglucano. Su reproduccin es
asexual por fisin binaria y para su nutricin la
mayora utiliza sustancias qumicas orgnicas,
aunque algunas pueden producir su propio
alimento mediante fotosntesis y otras se nutren
a partir de sustancias inorgnicas. Pueden
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moverse mediante los flagelos.

Cclasificaciones:

Forma y agrupacin:
Se clasifican en 3 tipos: cocos, bacilos y
espirilos:
Cocos:
pueden
agruparse
en
pares
(diplococos),
en
cadenas
lineales
(estreptococos) y en racimos (estafilococos.)
Bacilos: por pares (diplobacilos), en cadenas
lineales (estreptocacilos).
Espirilos: cortos y largos.
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Pared Celular
Contribuye al mantenimiento de la forma de la
clula y est compuesta por pptidoglucano, que
es un disacrido repetitivo unido por polipptidos
que rodean y protegen a la clula. Su composicin
qumica permite establecer diferencias entre los
diferentes tipos de bacterias, un mtodo para ello
es la tincin diferencial de Gram, en la cual se
agregan diferentes reactivos que tie de cierto
color la pared celular dependiendo de la
estructura y composicin qumca de la bacteria,
de acuerdo a esto se dividen en Gran positivo y
Gram negativo.
Gram positiva: compuestas por varias capas de
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pptidoglucano que forman una estructura rgida


y gruesa, contiene cidos teicoicos. Tincin color
morado, ya que el alcohol desidrata el
ptidoglucano y los torna ms impermeables a los
cristales violeta.
Gram negativa: Compuesta por pocas capas de
pptido glucano, contiene una membrana externa
que impide el paso de algunos antibiticos.
Tincin color rosa ya que se tornan incoloras
despus del lavado de alcohol y al agregar la
safranina adquiere su color rosado.

Taxonoma:
Esta clasificacin se basa en las caractersticas
de la pared celular, se dividen:
Fermicutes: bacterias con pared celular
gruesa, tincin morada (gram +).
Gracilicutes: pared celular delgada, tincin
rosa (gram -)
Mendocicutes: vara el grosor de la pared
celular, tincin rosa y morado.
Tenericutes: no tienen pared celular, por lo que
no responden a la tincin gram.
Diseo Experimental:
Material:
Uso de bata en todo el procedimiento del diseo
experimental.
Cabello recogido.
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Esterilizar rea de trabajo al inicio y final de la


prctica.

Para medio
de cultivo:
Agar
Mac
Conkey
Agar
Bacteriolgico
Pesa
de
monoplano
Vidrio de reloj
Guantes
Agua destilada
Algodn
Matraz
Erlenmeyer
Mechero
de
Bunsen
Hisopo
Tubos
de
ensayo
Marcador
indeleble
Encendedor

Siembra:
Medios de
cultivo
natural
(frutas /y
verduras
jugosas)
Caja
de
petri
Tubos
de
ensayo
Asa
Algodn
Lmpara de
alcohol

Tincin
Gram:
Cristal
violeta
Azul
de
metilo
Portaobjetos
Agua
Alcohol
Safranina
Lugol
Guantes
Cubre boca
Microscopio
ptico

Procedimientos:
Para medio de cultivo:
Para ello se requerir ocupar: agar de sal
manitol.
Recordar que el rea de trabajo debe estar
previamente limpio por lo cual limpiamos antes
el lugar con cloro.
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Agar Sal manitol


Medir 11g de sal manitol sobre la pesa de
monopolio.
En el matraz Erlenmeyer se aade los 11 g de
Sal manitol.
Se agregara agua destilada ( en este caso se
ocup agua hervida) caliente para llevar
acabo la disolucin sern 100 ml
Disolver perfectamente con unos pequeos
movimientos en el matraz con un agitador de
vidrio
Al disolver perfectamente se coloca un tapn
de algodn en la boca del matraz, este debe
quedar bien sellado.
Se lleva al autoclave para esterilizar

La preparacin se coloca en cajas de Petri.


* para la colocacin de la preparacin en las
cajas Petri lo primero que tenemos que hacer:
-Tener un mechero encendido y colocarlo cerca
de las cajas y esterilizarlas.
-Destapar la boca del matraz y acercarlo al
fuego para esterilizar.
-Enseguida se coloca la preparacin en las
cajas.
-El matraz se vuelve a cerrar con el tapn de
algodn.
-Y las cajas tambin se cierran.
-una vez que hayan secado podrn utilizarse.

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Para siembra: cuadrante cruzada


*Recordar que hay que tener el rea de trabajo
previamente desinfectada con cloro.
1. En el rea de trabajo se debe tener una lmpara
de alcohol.
2. Las cajas Petri se colocan junto a la lmpara.
3. Necesitaremos un Cabo de Kolle o portasa de
alambre de platino en forma de crculo este debe
ser muy pequeo.
4. El asa se acerca a la lmpara para esterilizar
despus el asa debe tocar la colonia de bacterias.
En este caso la colonia estaba en en un tubo de
ensayo por lo cual la boca del tubo debe
acercarse al fuego para ser esterilizado.
5. Se destapa la caja de Petri y se acerca a la
lmpara para esterilizar.
6. Luego se toma el asa y se pasa cuidadosamente
sobre el medio de cultivo para no rasparlo. En
forma de un estriado cuadrante radial.
7. Al finalizar se tapa la caja Petri y el asa se acerca
a la flama para esterilizar nuevamente.
8. La caja Petri se tapa y con un plumn se marca
de que colonia de bacterias fue.

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Para tincin:
REALIZACIN DEL FROTIS
1. Colocar una pequea gota de agua en el centro de un
portaobjetos limpio.
2. Flamear el asa de siembra, tomar, en condiciones
aspticas, una pequea cantidad del cultivo bacteriano en
medio slido y transferirlo a la gota de agua. Remover la
mezcla con el asa de siembra hasta formar una suspensin
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homognea que quede bastante extendida para facilitar su


secado.
Si la muestra se toma de un cultivo en medio lquido, no es
necesario realizar los dos primeros pasos ya que basta con
colocar y extender una gota de la suspensin bacteriana, que
se toma con el asa de siembra, directamente sobre el
portaobjetos.
3. Esperar hasta que el lquido se evapore o acelerar su
evaporacin acercando el porta objetos a la llama del
mechero. En este caso hay que tener mucha precaucin de no
calentar demasiado el porta objetos pues las clulas pueden
deformarse o romperse.
FIJACIN DE LAS BACTERIAS AL PORTAOBJETOS
4. Cuando este seco debe agregarse cristal- violeta por un
minuto.
5. Debe eliminarse el exceso.
6. Lavado.
7. Se agrega lugol por un minuto.
8. Se elimina el exceso.
9. Lavado.
10. Se agrega alcohol-cetona de 5 a 10 gotas.
11. Lavar.
12. Agregar safranina por un minuto.
13. Eliminar exceso.
14. Lavar.
16. Secar.

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Anlisis de resultados:
MEDIO
DE
CULTIVO:
Agar Mc
Conkey

SIEMBRA
S: Estra
simple y
en
cuadrant
e
cruzada.

Paso 5:

Paso 4:
Azul de
metilo (1
min)

Eliminar
exceso

Paso 6:
Lugol
(1min)

Paso
13:
Result
ados

TINCI
N
GRAM:

Paso 3:
Cristal
violeta
(1min).

Paso 8:
Alcohol (510 gotas)

Paso 7:
Eliminar
exceso

Paso

Paso

Observ
ar en
micros
copio

Secar
al aire

Paso 11:
Eliminar
exceso

Morfologa
colonial
13:
12: en placa de agar.

Paso 1: Poner
en portaobjetos
un poco de
cultivo
bacteriano.

Paso 2:
Fijar
muestra
(Frotis).

Paso 9:
Eliminar
exceso

Paso
10:
Safrani
naPgina

Pera
Forma: fusiforme
Bordes: ondulado
Elevacin: plana
Textura: granulosa
Color: amarillo
Salsa:
Crecimiento superficial: floculento
Opacidad: ligera
Sedimento: compacto
Cantidad de sedimento: abundante
Pltano:
Forma: puntiforme
Bordes: crenado
Elevacin: plana
Textura: granulosa
Color: naranja-cafe
Aguacate:
Forma: fusiforme
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Bordes: lobulado
Elevacin: plana
Textura: butirosa
Color: blanco
Exudado:
Forma: puntiforme
Bordes: ondulado
Elevacin: plana
Textura: granulosa
Color: blanco

Conclusin:
Podemos decir que la hiptesis planteada fue correcta,
ya que el resultado fue que en la tincin sali color
morado en las muestras realizadas lo cual nos dice
que es positiva y al dar positivo, la bacteria es
fermicute pues su paredes celulares eran gruesas.
Si el resultado fuera negativo saldra de color rosa y
sera una gracilicutes lo cual no fue el caso.
As mismo cada una de las muestras se pudo clasificar
morfolgicamente como se vio anteriormente.

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Bibliografa:

Tortora, Funke, Case. Introduccin a la microbiologa 9


edicin. Buenos Aires: Mdica Panamericana, 2007. 988 pp.

Velasco M., Lpez R., Romero M., Salamanca C. Biologa 2


Bachillerato: Editex, Espaa 2006.

Audesirk, Byers. Biologa: la vida en la tierra. Pearson


Educacin de Mxico, 2008.

Pia Lpez C.: Diversidad microbiana, tipos de microbios.


http://www.unad.edu.co/fac_ingenieria/pages/Microbiologia_m
utimedia/bact_clasif.htm

Franco Martnez F.: UNAM Facultad de Odontologa,

Microbiologa, gua de estudio 2002.


http://132.248.225.10/licenciatura/guiasyprogramas/guias/2_
microbiologia.pdf

Microbiologa clnica:

http://danival.org/600%20microbio/6200microclin/bhim/bhim_
2-3.html

http://es.scribd.com/doc/30061600/concepto-y-definicionde-microbiologia

http://www.mcd.com.mx/pdfs/AGAR%20MAC
%20CONKEY.pdf

http://www.mcd.com.mx/pdfs/agar_bacteriologico.pdf
http://www.joseacortes.com/practicas/frotisbact.htm
.

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PRCTICA

DE

HONGOS
OBJETIVO:
Crear cultivos exitosos de hongos a partir de
frutas
y
verduras
jugosas
en
descomposicin.
Observar e identificar la morfologa de los
hongos que se desarrollan en los alimentos
utilizados.
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA:
Crear
cultivos
exitosos
de
hongos
identificarlos
en
alimentos
jugosos
descomposicin por medio del microscopio.

e
en

HIPOTESIS:
Si se reproducen hongos en las preparaciones
realizadas, entonces podremos observar e
identificar los hongos resultantes.

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MARCO TEORICO:
La ciencia que se dedica a su estudio es la micologa.
Son eucariontes, es decir, que tienen un ncleo
delimitado por una membrana nuclear. Pueden ser
unicelulares o pluricelulares, estos ltimos son
grandes como las setas, son semejantes a las plantas
pero sin la posibilidad de hacer fotosntesis. Los
hongos
verdaderos
tienen
paredes
celulares
compuestas de glucano y sobretodo, de quitina.
Forman una masa visible llamada micelio que est
compuesta por filamentos largos (hifas) que se
ramifican e entrelazan. Su reproduccin puede ser
sexual (esporas sexuales) o
asexual (por
fragmentacin de sus hifas) y en ambos casos hay
formacin de esporas (pueden ser sexuales o
asexuales), la cual despus de separarse de la clula
que le dio origen y germina para formar un hongo
filamentoso nuevo (en caso de tratarse de un hongo
filamentoso), se forman a partir de hifas areas de
distintas formas dependiendo de la especie, por ello,
se pueden diferenciar dependiendo del tipo de espora.
Las esporas tambin les sirven para proteger al
hongo cuando se encuentra en condiciones poco
favorables para su existencia, pueden permanecer en
forma de espora por aos, aunque no soportan
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condiciones muy extremas Su mtodo de nutricin


mediante la absorcin de soluciones de materia
orgnica de su entorno (quimiohetertrofos). Pueden
ser aerobios o anaerobios. Descomponen la materia
muerta y de ese modo se reciclan los ciclos vitales de
vida, Tambin nos sirven de alimento, para producir
otros alimentos, para la creacin de sustancias
farmacolgicas entre otras. De las ms de 100,000
especies, 200 son patgenas para humanos y
animales.
Clasificacin Taxonmica:

De acuerdo a su reproduccin de dividen en:


Ascomycota

Basidiomicota

Hongos filamentosos
con hifas tabicadas y
algunas
levaduras.
Con esporangios tipo
asca. Asexualmente se
reproducen
por
gemacin,
fisin,
fragmentacin
y
desarrollo de conidios
que producen esporas.
Sexualmente
por
conjugacin,
gametangia
y
gametangogamia.
Poseen
hifas
tabicadas.
Las
basidioesporas
se
forman
sobre
un
basidio que son sus
rganos frtiles donde
llevan a cabo su
reproduccin sexual y

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Zygomycota

Oomycota

Deuteromycot
a

pueden ser bispricos


o
tetraspricos,
dependiendo
del
nmero de esporas
que alberguen.
Hongos filamentosos
saprfitos que poseen
hifas cenocticas. Las
esporas asexuales son
esporangiosporas,
cuando el esporangio
se abre, estas se
dispersan y si caen
sobre
un
medio
apropiado germinarn
formando
un
tallo
nuevo.
Las esporas
sexuales
son
las
zigosporas.
Son flagelados. Grupo
de mohos formado por
seres vivos libres y
parsitos de algas y
pequeoa
animales
acuticos.
Producen
zoosporas
y
se
reproducen
sexualmente por el
contacto
de
los
gametangios.
Producen
reaccin
alcohlica
y
se
reproducen
por
gemacin. Produccin
de micelio septado y/o
levaduras.
Reproduccin asexual
mediante conidios.

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Acrasiomycota

Mohos mucilaginosos
celulares, suelen darse
en el estircol, suelo,
restos vegetales, etc.
No tienen ncleo y
suelen
carecen
de
flagelos.

DISEO EXPERIMENTAL:

Medio de cultivo: fruta en descomposicin.


Cajas de petri
Asas
Porta y cubreobjetos
Microscopio
Marcador
Diurex
Agua
Xilol
Mecheros
Eosina
Hematoxilina
Alcoholes ( 10, 30, 50, 75)
Bata
Cubre bocas
Cabello recogido

PROCEDIMIENTO
Hongos
El equipo se prepara, siguiendo
las indicaciones de utilizar: bata,
guantes, cubre boca, y cabello
recogido.
Se pasan por alcoholes de 75,
50,
30 y para
10 para
queexcesos
se
Se lava
quitar
rehidrate.

Se esteriliza la zona de
trabajo antes de iniciar con
la prctica.
Se coloca una muestra en un
porta objetos, y se flamea la
muestra,
se truena
el
Ya
que sesiseco
la muestra,
Pgina
portaobjetos
utilizaxilol
unoa
se
procede a se
ponerle
nuevo.
la
muestra (1)

Fruta en
descomposicin

Exudado
farngeo.

Se encienden los
mecheros, dejando entre
s un espacio de aprox.
40 cm

Previamente, en una placa


de petri y mediante un
estriado cuadrante radial
se coloc una muestra del
medio de cultivo.

Se le pone hematoxilina y
eosina (1) (30 s)
respectivamente
Se en
lava
Alcoholes
orden
creciente

Se seca

Se cubre con el
cubreobjetos y
se mira en el
microscopio

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ANALISIS DE RESULTADOS:
Medio de cultivo tortilla, naranja y pan

Eliminar
exceso

Sin siembra.
Poner
directamente del
cultivo.

Calentar hasta
emisin de
vapores

LAVADO

Para empezar la
muestra, se pone
a calentar el asa de
siembra para
desinfectarla

Agregar verde
malaquita (esperar
5minutos)
Tincin:
Agregar alcohol

Ziehl-neelsen

cido (esperar tres


minutos)
Fijacin por calor

Frotis

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Eliminar
exceso

Lavado
Agregar azul de
metileno
(esperar 1

Eliminar exceso

minuto)

Lavado
Finalmente observar
al microscopio

Secar

En cuanto a los hongos, dio positivo en una de


las muestras, una en la fruta en descomposicin
y la otra de exudado farngeo, no arrojo
resultados que nos indicaran que haba hongos
malignos.
En la primera muestra, los hongos tenan forma
puntiforme, elevacin convexa y un color
amarillento en el medio.

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En la segunda, tenan borde ondulado en forma


puntiforme y elevacin plana
Esto se debe a que los materiales que se
utilizaron en la preparacin de las cajas petri
favorecen la observacin a simple vista de los
hongos y al teirlas se logra identificar el tipo de
hongos que son.

CONCLUSIONES:
A pesar de que en la muestras de fruta, se
utilizaron diferentes de las mismas, se
encontraron hongos con diferentes formas,
bordes y elevaciones por lo que se podra decir
que dependiendo del lugar donde se encuentra
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el hongo es como varia el tipo del mismo, por lo


tanto la hiptesis se cumpli.
En cuanto al exudado, fue bueno que no se
presentaran hongos, ya que eso significara que
la persona estaba enferma.
El equipo logr resultados satisfactorios, porque
realiz bien la prctica.
Tambin sta, nos ayudar para darnos cuenta
de cmo son los hongos y poder identificarlos
con mayor facilidad en un futuro.
Bibliografa:
http://redalyc.uaemex.mx/src/inicio/HomRevRed.jsp?iCveEntRev=2130
http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/vinculos.html
Flores J.: Temas selectos de ciencias de la salud ll., Prentince Hall,
Mxico, 2003

Audesirk, Byers. Biologa: la vida en la tierra.


Pearson
.
.
Educacin de Mxico, 2008.

Tortora, Funke, Case. Introduccin a la


microbiologa
9
edicin.
Buenos
Aires:
Mdica
Panamericana, 2007. 988 pp.

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Objetivos:
Realizar
adecuadamente
la
tincin
hematoxilina-eosina para la fijacin del
tejido biolgico, a fin de que sea posible su
estudio por medio del microscopio.
PLATEAMIENTO DEL PROBLEMA:
Mantener la composicin estructural y
qumica lo mas inalterada posible, de tal
forma que sus componentes celulares
mantengan las mismas caractersticas que
cuando el tejido estaba en su medio
habitual.
Hiptesis:
Si se pueden observar protozoarios en el
microscopio, entonces el agua utilizada
tiene las condiciones necesarias para la vida
de los mismos.
Marco terico:
Las clulas procariotas son las clulas ms extendidas y
abundantes de la biosfera y se encuentran en nuestro medio
en grandes cantidades activas o en forma de esporas.

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Su actividad tiene gran inters para la vida del hombre tanto


por su participacin en mltiples procesos fisiolgicos y
patolgicos, como por su intervencin en muchos fenmenos
de naturaleza industrial
Las bacterias, son clulas procariotas, pertenecientes al reino
mnera que se caracterizan por su pequeo tamao y por
incluirse en una de estas tres formas bsicas: bacilos cocos y
espirilos. Con frecuencia las bacterias se encuentran
agrupadas en acumulos o en cadenas
Tincin hematoxilina - eosina
La tincin hematoxilina y eosina es un mtodo popular de
tincin utilizado en histologa y medicina diagnostica.
El mtodo supone la aplicacin de la tincin de hematoxilina,
que tie estructuras acidas (basofilas) en tonos azul y
prpura, y el uso de eosina que tie componentes bsicos
(acidofilos) en tonos de color rosa.

Hematoxilina
Se utiliza en histologa para teir los componentes aninicos
(cidos) de los tejidos, a los que da una coloracin violeta.
Tie intensamente los ncleos de las clulas, dado que estos
contienen cidos nucleicos ricos en radicales cidos.
Eosina
Se trata de una solucin de eosina.
Colorante cido. Utilizado como colorante de contraste de la
hematoxilina en la tincin Hematoxilina-Eosina.
Aplicaciones:

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Colorantes y soluciones para: anatoma, citologa, histologa,


hematologa Kits para bacteriologa y productos para qumica
clnica
Tcnica
Sumergir los preparados histolgicos en xilol para eliminar los
excesos de parafina. Luego pasan por una serie de alcoholes
(100. 95 y 70). Se lava en agua para eliminar exceso de
alcohol Se sumerge en hematoxilina por 1 minuto, luego se
lava en agua para eliminar excesos y se pasa rpidamente por
alcohol cido. Se lava nuevamente Se sumerge 30 segundos
en eosina.
Se pasa por otra serie de alcoholes, en orden creciente (70,
95 y 100).
Finalmente se deja remojar 10 minutos en xilol, antes de
realizar el montaje final.

Esterilizacin por calor


Purificacin de
objetos. Con fuego.
El calor generado a Altas Temperaturas afecta a las membranas y
desnaturaliza las protenas y Acidos Nucleicos
Se eliminan

Espora
s
Bacteri
as

METOD

FIJACION DE PLACA CON

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Lavar y secar la placa


de petri para
esterilizacin
Uso de una olla presin
con cierta cantidad de
agua
Hasta que comience a

DISEO EXPERIMENTAL:

Uso de bata, guantes y cubre bocas en todo el


procedimiento del diseo experimental.
Cabello recogido.
Esterilizar rea de trabajo al inicio y final de la
prctica.

Materiales

Microscopio
Mechero de alcohol
Portaobjetos
Cubreobjetos
Asa microbiolgica o pipeta Pasteur.
Frasco lavador
Solucin de azul de metileno
Solucin de fucsina
Pinzas para portaobjetos
Agua de lago

Procedimientos:
Preparacin del material:
Limpiar bien el portaobjetos
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Con la ayuda de una pipeta Pasteur o un hisopo de plstico


o madera colocar una gota de agua destilada sobre el porta
limpio
Esterilizar el asa microbiolgica a la llama del mechero
calentndola hasta que produzca una chispa
Con el asa esterilizada y tras haberla dejado enfriar unos
segundos, tomamos una pequea muestra de agua de lago y
la colocamos sobre la gota de agua destilada, revolviendo la
gota con el material sobre toda la superficie del porta
objetos.
Fijacin del material
Sujetamos el portaobjetos con la muestra por uno de sus
extremos y lo pasamos sobre la llama del mechero, por
la cara opuesta a donde se encuentra la muestra con el
agua destilada, hasta que se seque el material sin que el
calor sea excesivo.
o De esta manera las bacterias mueren, se altera la
permeabilidad de las membranas y el colorante
llega mejor a su interior.
Tincin
Colocamos el porta, en el soporte y lo cubrimos con el
colorante segn sea el caso, con azul de metileno o fucsia.
Lavamos la preparacin para quitar el exceso de colorante
Utilizamos como colorante el xilol, se puede obtener una
tincin negativa. Para ello colocamos un poco de agua de lago
y un poco de xilol en un extremo del portaobjetos, mezclando
y homogeneizando el material y el colorante.

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NOTA: La tincin se llevo a cabo en tiempo de 1 minuto a 30 segundos

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RESULTADOS:
Esterilizar el
rea de trabajo

Medio de
cultivo

Siembra

USAR BATA,
GUANTES Y
CUBREBOCAS

Deshidratacin
gradual 10, 30, 50,
70, 96.

Xilol

Producto

Lavado

Hematoxilina

Hematoxilina

Lavado

Fijar muestra

Eosina

Xilol
Hidratacin
gradual 96, 70,
50, 30, 10.10, 30,
50, 70, 96.

Lavado

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Imgenes
obtenidas de las
muestras

Conclusin:
Nuestros productos fueron diversos tipos de
protozoos
o
protozoarios;
organismos
hetertrofos que viven en ambientes hmedos
o directamente en medios acuticos, ya sean
aguas saladas o aguas dulces, por lo tanto,
podemos decir que nuestra hiptesis fue
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correcta, ya que si se encontraron diversas


especies de ellos, significa que el agua de lago
utilizada en las muestras tiene las condiciones
necesarias para la vida de ellos, ya que como
mencionamos
anteriormente,
los
mejores
medios para que se desarrollen son hmedos o
acuticos.

Bibliografa:

Tortora, Funke, Case. Introduccin a la microbiologa 9


edicin. Buenos Aires: Mdica Panamericana, 2007. 988 pp.

Audesirk, Byers. Biologa: la vida en la tierra. Pearson


Educacin de Mxico, 2008.
7. 988 pp.
http://www.euita.upv.es/varios/biologia/tecnicas_de_histologia_vegetal/Document
os/Fijacion.htm
http://egg.umh.es/frvalera/manualDePracticas.pdf
Atlas de Histologa Vegetal y Animal.Depto. de Biologa Funcional y Ciencias
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