Docente Johanna Marcela Flórez Castillo

CARACTERÍSTICAS
 Especificidad y selectividad
 Actúan en soluciones acuosas
 Condiciones suaves de T y pH

Imagen tomada de: http://www.differencebetween.info/difference-between-cofactor-and-coenzyme

Imagen tomada de: https://es.khanacademy.org/science/biology/energy-and-enzymes/introduction-to-enzymes/a/enzymes-
and-the-active-site
 [E]+ [S] [ES] [P] + [E]

[ES]
[E]+ [S]

[P] + [E]

Imagen tomada de: https://es.khanacademy.org/science/biology/energy-and-enzymes/introduction-to-enzymes/a/enzymes-and-the-active-site

Tabla tomada de Feduchi, E. et al. Bioquímica conceptos esenciales. Editorial panamericana. Pg. 132
 1. Sustitución nucleofílica.

Imagen tomada de Horton, E. et al. Principios de bioquímica. Cuarta edición Editorial Pearson education. Pg. 159
 2. Reacciones de ruptura.

Imagen tomada de Horton, E. et al. Principios de bioquímica. Cuarta edición Editorial Pearson education. Pg. 160
 3. Reacciones de oxido-reducción.

Oxidación: Pérdida de
electrones.
(Deshidrogenación es la
forma más común de
oxidación biológica).

Reducción: Ganancia de
electrones.

Imagen tomada de Feduchi, E. et al. Bioquímica conceptos esenciales. Editorial panamericana. Pg. 135
Imagen tomada de Horton, E. et al. Principios de bioquímica. Cuarta edición. Editorial panamericana. Pg. 162
 1. Residuos polares en sitios activos.

Imagen tomada de Horton, E. et al. Principios de bioquímica. Cuarta edición. Editorial panamericana. Pg. 163
https://www.hidden-nature.com/clasificacion-de-los-aminoacidos/
Imágenes tomadas de Zaparoli, G. et al. 2011. Biochemestry 50, 9901-9910.
 2. Catálisis ácido-base.

Imagen tomada de Horton, E. et al. Principios de bioquímica. Cuarta edición. Editorial panamericana. Pg. 165
 Invertasa

Estructura tridimensional del monómero de

Representación del sitio activo de la invertasa de
invertasa de S.cerevisiae (tomado de Protein Arabidopsis thaliana
Data Bank. Código de acceso: 1TUW.pdb)

Imagen tomada de Flórez-Castillo, JM. Universidad Industrial de Santander. Tesis de grado. 2008.
 3. Catálisis covalente.

Imagen tomada de Horton, E. et al. Principios de bioquímica. Cuarta edición. Editorial panamericana. Pg. 165
 Triada catalítica quimotripsina

Imagen tomada de Horton, E. et al. Principios de bioquímica. Cuarta edición. Editorial panamericana. Pg. 185
Imagen tomada de Horton, E. et al. Principios de bioquímica. Cuarta edición. Editorial panamericana. Pg. 185-187
 Cofactores

Iones
Coenzimas
esenciales

Iones metálicos
Iones Grupos
de Co-sustratos
activadores prostéticos
metaloenzimas
Imagen tomada de David L. Nelson y Michael M. Cox. Principios de Bioquímica de Lenhinger. 6 edicición. 2014 pág. 191.
Imagen tomada de Horton, E. et al. Principios de bioquímica. Cuarta edición. Editorial panamericana. Pg. 195
 Modelo llave-cerradura
Imagen tomada de: http://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz2.htm#llc
Imagen tomada de Feduchi, E. et al. Bioquímica conceptos esenciales. Editorial panamericana. Pg. 138
 Modelo ajuste inducido

Imagen tomada de: http://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz2.htm#ai

Imagen tomada de Feduchi, E. et al. Bioquímica conceptos esenciales. Editorial panamericana. Pg. 138
Imagen tomada de Escorcia Cabrera, Andrés. Universidad Industrial de Santander. Tesis de grado 2015.
Imagen tomada de Escorcia Cabrera, Andrés. Universidad Industrial de Santander. Tesis de grado 2015.
 CINÉTICA ENZIMÁTICA
El estudio de la cinética se basa en el análisis de la velocidad de una reacción, la cual varía
directamente con la concentración de los reactivos.

[E]+ [S] [ES] [P] + [E]

Victor Henr Leonor Michaelis Maud Menten

1872-1940 1875-1949 1879-1960
Imagen tomada de: https://en.wikipedia.org/wiki/Victor_Henri
https://www.sciencehistory.org/historical-profile/leonor-michaelis-and-maud-leonora-menten
1. Máxima tasa catalítica de una
enzima
2. Variación de las constante cinéticas a
determinado pH y T determinan la
naturaleza de los aminoácidos del
sitio activo.
3. Es posible elucidar el mecanismos
catalítico de las enzimas
4. Determinar el papel de una enzima
en las rutas metabólicas
 Constante de Michaelis-Menten

Imagen tomada de David L. Nelson y Michael M. Cox. Principios de Bioquímica de Lenhinger. 6 edicición. 2014 pág. 203.
  El valor de Km varía
considerablemente de una enzima a
otra y para una misma enzima
difiere según los sustratos.
 Representa la concentración de
sustrato a la cual la mitad de los
centros activos de la enzima están
ocupados por moléculas de
sustrato.
 Medida de la afinidad de la enzima
por el sustrato, que será
inversamente proporcional a su
afinidad.

Imagen tomada de Feduchi, et al. Bioquímica conceptos esenciales. 1 edición. 2001 pág 146.
 [E]+ [S] [ES] [EP] [P] + [E]

“Número de moléculas de sustrato que son transformadas

en producto en unidad de tiempo en una sola molécula de
enzima cuando la concentración de sustrato es elevado”

Tomado de Feduchi, et al. Bioquímica conceptos esenciales. 1 edición. 2001 pág 146.
http://www.oocities.org/pelabzen/regenz.html
 Valor elevado en esta relación implica una
alta capacidad de formación de sustrato
en producto y una elevada afinidad de la
enzima por el sustrato

Imagen tomada de David L. Nelson y Michael M. Cox. Principios de Bioquímica de Lenhinger. 6 edicición. 2014 pág. 207.
Para estudiar la actividad enzimática
de una enzima se han creado
versiones mutantes de dicha enzima
y se han medido las constantes
cinéticas.
Basándose en los datos de la tabla y
teniendo en cuenta la naturaleza de
los aminoácidos en la función de la
enzima, conteste las siguientes
preguntas:

1. ¿Qué enzima mutante tiene la

mayor afinidad por el sustrato?
2. ¿Qué enzima mutante tiene la
mayor actividad catalítica?
3. ¿Qué residuo aminoacídico de la
enzima de tipo salvaje participa
directamente en la conversión de
sustrato en producto?
INHIBICIÓN ENZIMÁTICA
El ibuprofeno es una sustancia que ejerce su acción antipirética y antiinflamatoria por un mecanismo de
inhibición competitiva sobre la enzima ciclooxigenasa. Esta enzima cataliza la primera etapa de la
conversión de ácido araquidónico en peróxidos cíclicos que darán lugar a prostaglandinas y tromboxanos,
mediadores en los procesos inflamatorios. Se ha realizado un ensayo para estudiar los parámetros
cinéticos de esta enzima en presencia y ausencia de ibuprofeno y se han obtenido los datos que se
reflejan en la siguiente gráfica:

a) ¿Podría esta gráfica reflejar los parámetros cinéticos de la ciclooxigenasa en presencia y ausencia de
ibuprofeno?
b) Señalar que gráfica corresponde a los ensayos en presencia de inhibidor
c) Calcular Vmax, Km y Kmi
EFECTO pH

Efecto del pH sobre el log Vo de las reacciones catalizadas

por la pepsina y la glucosa-6-fosfato

Imagen tomada de David L. Nelson y Michael M. Cox. Principios de Bioquímica de Lenhinger. 6 edicición. 2014 pág. 212.
EFECTO DE LA TEMPERATURA
REGULACIÓN ENZIMÁTICA
 Enzimas reguladoras presentan un
aumento o una disminución de la
actividad en respuesta a ciertas señales

 La actividad de estas enzimas pueden

controlarse de dos maneras:
1. Enzimas alostéricas

2. Modificación covalente reversible

Imagen tomada de Segel, E. 1976. pág.. 147.

 Aspartato
transcarboamilasa

Imagen tomada de David L. Nelson y Michael M. Cox. Principios de Bioquímica de Lenhinger. 6 edicición. 2014 pág. 227.
http://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz22.htm
 Las enzimas alostéricas
participan en la inhibición
por retroalimentación

Inhibición por retroalimentación de la treonina deshidratasa.

Imagen tomada de David L. Nelson y Michael M. Cox. Principios de Bioquímica de Lenhinger. 6 edicición. 2014 pág. 228.