AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE

ENTEROBACTERIAS

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS.

Son las que se aslan con mayor

frecuenciaDesarrollan bien en: Agar sangre,
chocolate, medios selectivos (Mac
Conkey).
Algunas son patgenas clsicas,
otros si colonizan sitios sensibles
provocan enfermedades.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.
Consideraciones generales, anatoma de las
ITU y FMN de la uretra anterior:

Estafilococos coagulasa negativos

Estreptococos viridans y no hemolticos
Lactobacilos
Difteroides
Neisseria sp.
Bacilos Gram negativos
Anaerobios
Mycobacterium sp.
Ocasionalmente levaduras.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.
VIAS DE INFECCION:
VIA ASCENDENTE:
- Escherichia coli
- Klebsiella
- Proteus mirabilis
- Otras enterobacterias: Citrobacter, Serratia
marcensces,
- Pseudomonas aeruginosa
- Staphylococcus saprophyticus
- Enterococcus.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.

VIA DESCENDENTE:
- Staphylococcus aureus
- Candida albicans
- Listeria
- Mycobacterium tuberculosis
- Salmonella

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.
RECOLECCION Y TRANSPORTE DE
MUESTRAS:
La calidad del diagnstico laboratorial depende
directamente de la muestra enviada.

METODOS DE OBTENCION DE LA ORINA:

Aspiracin suprapbica
Segundo chorro o chorro medio
Cateterizacin vesical
Bolsa recolectora

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.
I. DIANOSTICO PRESUNTIVO: PRUEBAS DE
SELECCIN RAPIDA PARA ITU:

Gram de gota fresca Washington:

- colocar 1 gota de orina fresca en lmina porta

objetos, no extender y dejar secar
- Seguir los pasos de Gram.
- Resultado: La presencia por lo menos de 01
bacteria/campo (20 campos), se
correlaciona con bacteriuria significativa
(>100,000 UFC/ml orina)

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.

Sedimento:

- Colocar 6 ml. Aprox. De orina en un tubo y

centrifugar a 2500 rpm x 3`
- Decantar y hacer un preparado hmedo del
sedimento.
- Resultado: - Leucocitos: > 5 10/c
(piuria significativa)
- Bacterias: Escasas, moderadas y
abundantes
- Celulas epiteliales, hematies,
cilindros,
cristales, etc.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.

Prueba de Griess:
- Colocar tira reactiva en la orina
- Resultados: Determina enzimas
reductoras de Nitratos y
esterasa
leucocitaria, pH, proteinas, etc.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.
II. DIAGNOSTICO
DEFINITIVO:
CULTIVO DE ORINA
UROCULTIVO.
A. Aislamiento usar asa
calibrada de 1, 10, y
100 ul., cargar con la
muestra e inocular al
medio de cultivo
Incubar a 35 37 C x
18 24 hrs.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.

Medios de cultivo:
- Gram negativos: Agar
Mac Conkey,
Chromocult, EMB.
- Gram positivos, Gram
negativos:
Agar tripticasa soya
(TSA), Agar sangre
- Otros medios de
cultivo: A. sabouraud,
ogawa

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.
B. Lectura - Resultados:
1. Recuento de colonias =
UFC/ml de orina = n de
colonias totales x factor
(10, 100, 1000)
Ejemplo:
Recuento=103 col. X 1000
=103,000
UFC/ml orina.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.
CRITERIOS DE INTERPRETACION DE UN RECUENTO EN
UROCULTIVOS:
CHORRO MEDIO:
Urocultivo negativo:<10,000 UFC/ml orina
Urocultivo dudoso: Entre 10,000 100,000 UFC/ml orina
Urocultivo positivo:>100,000 UFC/ml orina
PUNCION SUPRAPUBICA:
Cualquier nmero es importante.
CATETERIZACION VESICAL:
- Recuentos mayores de 100 UFC/ml de orina se
consideran positivos

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.
2. Identificacin del
microorganismo aislado agente
etiolgico.
- Macromorfologa
- Micromorfologa
- Identificacin bioqumica

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.
3. Pruebas de
sensibilidad a los
antibiticos:
Determinar si agente
etiolgico de la ITU
es sensible,
moderadamente
sensible o resistente
a las diferentes drogas.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS. UROCULTIVO.
INTEGRACION DE LOS RESULTADOS:
I.
Dx. Presuntivo: Ex. Directo.
II.
Dx. Definitivo: Urocultivo:
- Recuento de colonias
- Agente etiolgico de la ITU
- Sensibilidad o antibiograma

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS.
COPROCULTIVO.
I. DX. PRESUNTIVO:
No es relevante (Vibrio cholerae)
II. DX. DEFINITIVO: Transporte (cary blair)
A. Enriquecimiento de la muestra:
- Caldo selenito
- Agua peptonada alcalina
- Caldo tetrationato
inocular e incubar 35 37C x 6
12
hrs.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS.
COPROCULTIVO.
B. Aislamiento: Sembrar por estria
y agotamiento.
- Mac Conkey
- EMB
- SS
- TCBS, etc.
incubar 35 -37C x 18 24 hrs.

AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
ENTEROBACTERIAS.
COPROCULTIVO.
C. Identificacion:
1. Macromorfologa
2. Micromorfologa
3. Est. Bioqumico metablico
4. Serologa
D. Antibiograma.