TEMA: UROCULTIVO

GRUPO # 1

El Urocultivo se utiliza para diagnosticar bacteriuria, la orina constituye un método excelente para cultivar la mayor parte de microorganismos que infectan el aparato urinario. La combinación de piuria con bacteriuria considerable sugiere la presencia de una infección urinaria

La etiología de las infecciones urinarias varía relativamente según se hayan adquirido extra o intra hospitalariamente

En primer caso, son casi siempre monomicrobianas, y en el segundo acostumbran a ser polimicrobianas.

Entre los cocos Gram positivos destacan estreptococcus faecalis sobre estaphilococcus, que se presentan en la misma proporción plasma coagulasa positivo que negativo.

Dentro de ellos bacilos Gram negativos predomina la E. coli, seguido de proteus mirabilis, y con menor frecuencia klebsiella pneumoniae, pseudomona aeruginosa y el resto Enterobacteriaceae.

Las bacterias que se encuentran en la parte baja de la uretra y pueden contaminar la orina sin producir por lo general infecciones, pertenecen a los géneros lactobacilos, Bacillus, y corynebacterium.

Otros microorganismos que también se hallan en la orina, sobre todo de mujeres y que proceden de vagina son trichomonas, la gardnerella vaginalis, y neisseria gonorrhoeae.

C / ml se considera infección.C/ ml: se considera probable contaminación Entre 10.000 U.C/ml es dudoso y se debe repetir el estudio Mayor a 100.‡ BACTERIURIA SIGNIFICATIVA Se refiere a la cantidad de bacterias que hay que encontrar en una orina para considerar que esta infectada.000 U.F. . Los limites aceptados en los estudios de la parte media de micción manital de niños y adultos son los siguientes: Recuentos inferiores de 10.000 y 100.F.F.000 U.

si es así anotar nombre del ATB y dosis control o sospecha de algún germen anterior . suprapúbica. recibió antibióticos en los últimos 7 días.Normas básicas generales:          Las muestras deben venir acompañadas de su respectiva hoja de pedido donde deben llenarse todos los datos solicitados por el laboratorio: Nombre y Apellido completo Nº de Historia Clínica edad sexo servicio y cama tipo de muestra: catéter. etc.

La micción se efectúa manteniendo los labios separados desechando la primera porción y recogiendo la central en un recipiente estéril. . La operación se debe repetir 3 veces. y se eliminan los restos de lavado con una esponja seca.OBTENCION DE LA MUESTRA En la mujer: consiste en apartarlos labios uretrales y lavar cuidadosamente la vulva con una esponja empapada en una solución jabonosa no bactericida.

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En el hombre: se retira el prepucio. después se seca con una gasa estéril y se recoge la parte intermedia de la micción en un recipiente estéril. y se lava el glande con una esponja empapada en solución no bactericida. . durante 3 veces consecutivas.

frotándole los músculos para espinales los cuales estimulan sus deseos de orinar (reflejo de Pérez). y en pacientes con dificultades para orinar se recurre a la toma de muestras por punción suprapubica. Si o resulta se Colca una bolsa estéril. que debe efectuarla un especialista. . No es recomendable extraer la orina por sondaje o catéter. repitiendo la acción 3 veces y secándolo con una gasa estéril. sobre los genitales del niño esperando que la orina fluya espontáneamente. ya que fácilmente se puede provocar una infección. En recién nacidos.En niños: Se lava la región genital con una esponja empapada en detergente no bactericida. Se le sostiene boca a bajo. en nilos.

que debe efectuarla un especialista. no es recomendable extraer la orina por sondaje o catéter. en niños y en pacientes con dificultades para orinar. ya que fácilmente se puede provocar una infección.  En recién nacidos. se recurre a la toma de muestras por punción suprapúbica. . A menos que sea necesario.

ASPIRACIONES SUPRAPÚBICAS  Las aspiraciones suprapúbicas están reservadas casi con exclusividad para neonatos. en las cuales las muestras por captura limpia han fallado para establecer un diagnóstico. niños pequeños y en ocasiones para adultos con sospechas clínicas de infección de las vías urinarias. .

. durante 24 horas. son de alto costo y tienen el inconveniente de interferir con algunas determinaciones de la tira reactiva de orina. Una muestra puede mantenerse refrigerada. Los preservantes que inhiben la multiplicación bacteriana no han resultado mejores que la refrigeración. por lo que las muestras deben procesarse antes de 2 horas de obtenidas. las muestras deben refrigerarse a 4°C.Transporte de la muestra   La orina es un buen medio de cultivo que permite la multiplicación de los microorganismos incrementando el recuento bacteriano. Si ello no es factible. sin que se altere el recuento bacteriano.

Se describen al menos 5 métodos para la obtención de orina a cultivar. los que se muestran en la Figura 1.Metodos para la obtención de muestras   Se considera una etapa crucial en el procesamiento de los urocultivos ya que la posibilidad de contaminación con bacterias de la flora comensal de piel. periné y uretra distal. . La Sociedad Americana de Microbiología considera aceptable un porcentaje de contaminación en las muestras de orina no superior a 5%. es muy alta e induce a la generación de resultados falsamente positivos.

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pH y temperatura óptima para su crecimiento in vitro. .MATERIALES MEDIOS ƒ ƒ Las bacterias para su desarrollo requieren de sustancias nutritivas cuyos componentes básicos deben satisfacer las mínimas exigencias nutricionales y condiciones de atmósfera (aerobiosis. anaerobiosis. microaerofília). Los errores cometidos durante este paso del ciclo de procedimientos pueden invalidar la lectura e interpretación de los cultivos. La elección de los medios de cultivo se realiza en función a la localización de las infecciones y las bacterias a investigar.

se pueden usar las siguientes medidas: 0.001 ml ( 1ul) para detectar colonias mayores de 1000 UFC/ml 0.01 ml (10ul) para detectar colonias entre 100 ± 1000 UFC/ml .ƒ Los medios usados son: í Placas con agar sangre de carnero (AS) í Placas con agar Mc Conkey (McC) Otros medios: para hongos si es necesario Agar Sabouraud ƒ Asa calibrada: asas de de platino o descartable .

ETAPA ANALITICA I. económico.MICROSCOPIA Y OTROS METODOS DIRECTOS Tinción de Gram y Examen directo de la muestra Es un método rápido. Para determinar el tipo y conteo de bacterias y células en la orina. sensible y específico para detectar bacteriuria. Se recomienda realizarlo como respaldo frente a discordancias o hallazgos especiales ƒ ..

ƒ La presencia de muchas células epiteliales y morfotipos microbianos diferentes sugieren contaminación .000 UFC/ml en ~ 85% de los casos. pueden colocarse hasta 10 muestras por lámina.ƒ Debe aplicarse a la muestra recién agitada sin centrifugar. ƒ La presencia de una bacteria/campo de inmersión tiene buena correlación con > 100. con el mismo asa de 1µl (o de 10 µl) empleado en la siembra del urocultivo. depositando este volumen en un portaobjetos. Estas se tiñen y pueden ser observadas cuando existen discordancias entre el urocultivo y el examen directo.

las muestras deben sembrarse con asa de 1 µl en placas de un medio enriquecido como Agar Sangre y algún medio selectivo-diferencial: Agar Mac Conkey. las muestras pueden sembrarse con asa de 10µ (1 colonia = 100 ufc/ml) y 1 µl (1 colonia = 1000 ufc/ml).Cultivo microbiológico     La metodología de la inoculación de la muestra en medios de cultivo o siembra microbiológica depende de la forma de obtención de la muestra: Para orinas de segunda micción. recolector y catéter a permanencia. El desarrollo de una colonia en el cultivo debe multiplicarse por 1000. Para orinas obtenidas por cateterización vesical. se recomienda la siembra en agar sangre más un medio selectivo-diferencial para bacilos Gram negativos o siembra directa de 100 µl (1 colonia = 10 ufc/ml). Para orinas obtenidas por punción vesical. .

dejar enfriar. .INOCULACIÓN ƒ ƒ ƒ ƒ Usar el asa calibrada. luego proceder con los otros cuatro cuadrantes siguientes. mantener en posición vertical introducir solo el aro debajo del nivel de la orina previa mezcla de la orina sin centrifugar. Estriar en la placas de cultivo de la siguiente manera: Estriar de arriba hacia el centro de la placa y estriar la orina en una serie de pasos de ángulo de 90º a través del inóculo (solo para el método de 0.001 ml). Otra forma es dejar la muestra con el asa en el primer cuadrante y estriar en V. flamear.

Incube 48 horas. . Incubación Una vez sembradas las placas deben incubarse durante 24 horas a 35 .Sin flamear el asa estriar atravesándola línea del inoculo en el sentido de las flechas.37° C.

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.Examinación del medio de cultivo       Al momento de informar los urocultivos. Es necesario definir qué se entiende por sedimento sugerente de ITU para poder evaluar las discordancias entre el sedimento y el urocultivo: Piocitos: > 10 /ul ó > de 5-6 por campo de 40x Leucocitos: > 10 /ul ó > de 5-6 por campo de 40x Bacterias: Regular o abundante cantidad La presencia de células descamativas y/o mucus en una paciente mujer. sugiere que la muestra está contaminada con secreción vaginal. se recomienda revisar el resultado del sedimento para que ambos informes sean concordantes.

 .UROCULTIVO POSITIVO  Recuento de colonias de acuerdo al asa calibrada usada. tener en cuenta que el máximo de una asa de 0.001 mL 1 colonia = 1000 UFC/ml 0.01 mL 1 colonia = 100 UFC/ml Cuando las colonias son tan numerosas para el recuento.001 es > 10 UFC/ml y el máximo para el asa de 0.01 es >10 UFC/ml. multiplicar según la dilución. 0.

donde ha crecido un Escherichia Coli en cultivo puro.000 UFC/ml. con un recuento superior a 100. (cultivo sembrado con asa calibrada de 1/1000).Placas de agar McConkey y de agar CLED. .

c) Cultivos positivos. Reportar: de acuerdo al asa calibrada utilizada. reportar: ƒ Si solo se observa flora microbiota de piel o urogenital: 10000 UFC/ml microbiota urogenital normal. ƒ ƒ ƒ . b) Cultivos Negativos.ETAPA POST-ANALITICA POSTREPORTE DE RESULTADOS a) Reporte de la Tinción Gram: resultados de bacterias y células. Notificar al clínico posibles hallazgos inusuales (Ejm: Salmonella tiphy o Burkholderia pseudomallei). Reportar el recuento de colonias de cada patógeno separadamente seguido por la identificación presuntiva o definitiva con la susceptibilidad Cuando se observa inhibición por antimicrobianos. Negativo dil 1/100UFC/ml o Negativo dil 1/1000 UFC/ml. reportar: Se detectó inhibidor antimicrobiano con su recuento respectivo. por 24 o 48 horas.

Tabla 1. Interpretación microbiológica del urocultivo y conducta recomendada Recuento de colonias (UFC/ml) 0 Cualquier recuento 1.000 Segunda micción en paciente especial* Orina por catéter permanente Segunda micción Independiente del resultado < 2 especies uropatógenas Idem > 10.000 Patológico Idem .000 Patológico < 2 especies uropatógenas < 2 especies uropatógenas Idem > 10.000 Condición clínica o método de recolección Punción suprapúbica Cateterización transitoria Sedimento urinario Microorganismo aislado Interpretación/ Conducta recomendable Urocultivo negativo Identificación y estudio de susceptibilidad Idem Independiente del resultado Independiente del resultado Independiente del resultado Cualquier microorganismo < 2 especies uropatógenas > 10.

000 --- --- >3 microorganismos. Solicite nueva muestra > 100. sin predominio de alguno .000 Segunda micción Patológico 2 uropatógenos + otra bacteria con recuento 10 veces menos < 2 especies uropatógenas Identificación y susceptibilidad sólo de los uropatógenos Identificación y estudio de susceptibilidad Polimicrobismo.000 Segunda micción Sin antecedente del sedimento > 100.Recuento de colonias (UFC/ml) Condición clínica o método de recolección Sedimento urinario Microorganismo aislado Interpretación/ Conducta recomendable > 100.

de borde entero de dos a tres mm. traslucida. ESTREPTOCOCCUS: Convexa o pulvinada. butirosa .TIPOS DE COLONIAS DE ALGUNAS BACTERIAS STAPHILOCOCCUS: Convexa. amarillenta. cremosa.

olor a chocolate quemado. que se despliega como una delgada pelicula sobre la superficie del agar. .PROTEUS: Plana. gris.

MICROORGANISMOS MÁS FRECUENTES AISLADOS EN UROCULTIVOS .

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