Centro Medico Naval Cirujano Mayor Santiago Tvara

SERVICIO DE MICROBIOLOGIA POE 001

TITULO OBJETIVO

CULTIVO DE ORINA (UROCULTIVO) La finalidad de un Urocultivo es para identificar en orina la presencia de microorganismos patgenos causantes de infeccin y determinar su sensibilidad antimicrobiana. Orina asptica.

MUESTRA REACTIVOS

- Medios de cultivo: placa con agar sangre de carnero (AS), placas con Agar Mc Conkey (Mac C), placas con Agar Muller Hinton (MH) - Medios y pruebas de identificacin para grmenes Gram positivos y Gram - Paneles 55 y 33 para identificacin y sensibilidad antimicrobiana urinaria. MATERIALES - Mechero de Bunsen - Asa Calibrada de 0.001 ml. (1 ul), factor de dilucin 1000 - Asa calibrada de 0.01 ml. (10 ul), factor de dilucin 100 (para muestras de puncin suprapbica) - Guantes de ltex - Pinza EQUIPOS -Incubadora 37 c -Microscan (identificacin y sensibilidad microbiana) PROCEDIMIENTO 1. Mezclar bien la muestra y cerca de un mechero de Bunsen abrir la tapa del envase, y tomar una muestra de orina introduciendo y retirando verticalmente una asa calibrada de 1ul. 2. Con el asa se inocula en el centro de una placa de AS y Mac Conkey, realizndose un trazo de arriba hacia abajo, luego se estra mediante una serie de pases perpendiculares a la siembra original. 3. En el agar Mller Hilton sembrar por estera bacillus sutilis y poner all la orina con la asa. 4. Colocar 1 ul de orina sobre una lmina portaobjeto, realizar el examen directo, dejar secar y colorear con Gram 5. Incubar las placas inoculadas a 35 C en condiciones aerbicas hasta el da siguiente. 6. Observar el crecimiento de microorganismos, si no hay colonias en los medios reportar como negativo algunos cultivos requerirn incubar hasta las 48 horas. 7. Verificar presencia de antibiticos en la muestra con la presencia de un halo en el medio Mller Hilton. 8. Si existe crecimiento en agar sangre y no en mc Conkey realizar un gran de la colonia para verificar presencia de cocos luego realizar paneles, si existe crecimiento en agar mc Conkey (bacilo) separar para realizar paneles de identificacin y antibiograma.

Int. TM. Sandy Georgeth H Toscano Universidad Alas Peruanas

Centro Medico Naval Cirujano Mayor Santiago Tvara INTERPRETACION Sedimento urinario Debe haber concordancia entre el resultado del sedimento urinario y el crecimiento bacteriano, es decir en una infeccin urinaria encontraremos presencia de flora microbiana, leucocitos elevados y otros. Usar criterio profesional para evitar posibles contaminaciones o confusiones de una muestra por otra, siempre rotular las muestras (laminas) ante cualquier duda consultar con otro personal calificado del rea de microbiologa. Esta coloracin se realiza para evaluar la presencia de bacilos y cocos Gram + y Gram -, nos gua en cuanto a que tipo de microorganismo esperamos que crezca o ha crecido en el Coloracin Gram medio de cultivo seleccionado. Agar sangre En este medio crece todo tipo de microorganismos, se evala el crecimiento de colonias pequeas y con caractersticas tpicas de cocos siempre y cuando no exista crecimiento en agar mc Conkey. una vez formada las colonias se separa y se pasa a paneles para su identificacin y antibiograma Agar mc Conkey Medio diferencial evala presencia de bacilos, una vez formada las colonias se separa y se pasa a paneles para su identificacin y antibiograma. Agar Mller Hilton En este agar crece todo tipo de microorganismos es por ello que se utiliza para detectar si los pacientes estn consumiendo antibiticos ya sea por automedicacin o por control de un tratamiento, la formacin de un halo significa que el antibitico presente en esa orina es capaz de evitar el crecimiento del bacillus sutilis por lo tanto se reporta como PCA (paciente con antibitico) el crecimiento del bacillus sutilis sin formacin de halo indica que no ha habido consumo de medicamentos. flora microbiana . Estafilococo coagulasa negativo. normal en tracto . Estreptococo y - hemolticos. urinario . Bacilos coniformes . Difteroides . Enterococos . Proteus . Bacillus, lactobacilos . Mycobacterium smegmatis . Levaduras saprofitas . Treponema refringens. patgenos . E. coli, Klebsiella sp. Proteus sp., Enterobacter, Serratia y Citrobacter. asociados a . Estafilococo aureus y S. Saprophyticus. infecciones del . S. Faecalis, Pseudonomas, Alcalgenes y Acinetobacter tracto urinario . Salmonella Shiguella . M. Tuberculosis . Chlanydia Trachomatis (uretritis) . N. Gonorrhoeae (uretritis) REFERENCIAS http://www.sampac.es/sites/default/files/docs/UROCULTIVO.pdf http://www.slideshare.net/Prymer/urocultivo-3625692

Int. TM. Sandy Georgeth H Toscano Universidad Alas Peruanas