ANALISIS DE

LABORATORIO
Esquemas de estudio
Fabiola Rojas Jimenez
MICROBIOLOGIA II

Objetivos
Identificar correctamente el prodecimiento de aná lisis de laboratorio
rutinarios(LCR, Urocultivo, cooprocultivo, Hemocultvo, esputo, )
LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO
Es un líquido amortiguador del sistema nervioso central y los huesos
circundantes. El LCR es un líquido que baña el encéfalo y la médula espinal.

 En adultos se poseen de 90 a 150ml.

 En recién nacidos de 10 a 60ml.

-Se produce a partir del plasma por filtración selectiva.

Toma de muestra;

-Líquido descrito como agua de reoca completamente transparente.

-Se puede extraer de 2 a 20ml si la presión es normal.

-Se recolecta por punción lumbar entre la 3era y la 4ta vértebra lumbar o
entre la 4ta y la5ta. Se recomienda obtener 20 ml en 4 tubos estériles.

1. Tubo para exámenes químicos y serológicos

Puebas a realizar: VDRL, GLUCOSA (40-64), PROTEINAS (15 -40),
GLOBULINA (alcohol 95% con gota de LCR)

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 2. Tubo Pruebas microbiológicas.
Análisis del LCR (Macroscópico)

 Aspecto normal, claro y cristalino.

 Otros colores, significancia clínica;
 Turbio o lechoso: Denota un incremento proteico o lipídico, también
infección por la presencia de glob blancos.
 Sanguinolento: Hemorragia o punción traumática.
 Xantocromico: (sobrenadante rosa, naranja o amarillo) Productos de
degradación de los glóbulos rojos.

Se reporta: Normal/Xantocromía/hemolizado/turbio.

Examen Microscópico.

Por lo general se analiza el LCR para la búsqueda cualitativa o

cuantitativa de células hematológicas o células malignas.

Tinciones: tinción de gran, tinta china, tinción acido resistente, tinción

gremse Wright.

3. Estudios moleculares para agentes infecciosos.

TINCION GB - TINCION GB+

A.CHOCOLATE  NEISERIA A.SANGRE  S.PNEUMONIAE

MENNINGITIDIS  S.PYOGENES
 HAEMOPLYLUS  S.
INFLUENZAE AGALACTIAE
 LISTERIA
MAC  E. COLI A.MAC S. AUREUS
CONCKEY  PSEUDOMONAS CONCKEY
AEROGINOSAS
A.SANGRE E. COLI

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 4. Recuento de células sanguíneas.
Análisis de imunilogia, ADN y genéticos. Asi como el recuento celuar
en cámara N.A

 Analizarlo lo más pronto posible (prioridad)

TRANSPORTE:

-Si se va a conservar debe de refrigerarse.

-Se deben de tener las medidas de seguridad necesarias ya que son

muestras

potencialmente infecciosas.

Algunas células de importancia en

LCR son:
 Linfocitos: Pueden denotar, meningitis viral,
tuberculosa o micótica también
 Neutrófilos: Meningitis bacteriana.

Células Malignas: Carcinomas metastásicos (grupos

con unión de los bordes
celulares y núcleos)

Enfermedades como: Infecciones meníngeas, carcinomatosis y hemorragias,

también enfermedades desmielizantes del sistema nervioso- alteran la

barrera

hematoencefálica y cambian la composición del LCR.

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UROCULTIVO

Analisis especifico de orina

Se efectúa para demostrar la presencia de un numero significativo de

bacterias

El criterio de Kass; Un numero de bacterias mayor a 100,000 UFC/ML de

orina se considera infección urinaria verdadera..

 En condiciones normales la orina dentro del cuerpo es estéril, pero

siempre se da una leve contaminación bacteriana al obtener la
muestra.
 Piuria: Leucocitos altos
 Bacteriuria: Bacterias elevadas en orina.

Bacterias:

 ESCHERICHIA COLI – A. sangre.

 KLEBSIELLA SPP - A. MacConkey
 PROTEUS SPP
 PNEUMONA SPP
 ENTEROBACTER SPP
 CITROBACTER SPP
 STHAPHYLOCOCCUS AUREUS
 ACINETOBACTER SP

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Se utiliza el Agar Sangre. ---------- Bacterias más frecuentes
encontradas en orina.

-De 10.000 a 100.000 UFC.

Se puede observar:
- Un patógeno sin células epiteliales: informar microorganismo, número de
colonias, antibiograma y valorar clínicamente

- Dos patógenos: informar microorganismos, número de colonias y solicitar

nueva muestra.

- Más de dos patógenos: informar “Cultivo mixto, probable contaminación”.

Variaciones de análisis:

-La orina de punción suprapúbica:

es la muestra adecuada para investigación de Anaerobios o de

mycoplasmas genitales.

 En embarazadas adicionar (sembrando con escobillón) medio de

Granada o Agar sangre nalidíxico.

El propósito del análisis microbiológico de una muestra de orina es en

primer, lugar determinar si existe una infección y, si existe, identificar el
microorganismo que la produce.

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COPROCULTIVO

 Inocular una porción anormal de heces (moco, sangre o pus) o de

muestras similar, directamente en una placa de MacConkey y SS.

 Ya diseminadas de esta manera las muestras en la superficie de las

placas incubar a 36C por 18 a 24 horas en la incubadora.

Demostra la presencia bacterias enteropatógenos, es decir que infecta en el

intestino penetrando o no su mocosa. Esto causa diarreas, dolor abdominal
fiebre e inclusive la muerte.

Las bacterias más importantes son:

 Shigella Flexneri (Shigella del grupo B)

 Salmonella Typhi (agente de la tifoidea)
 Shigella sonnei (shigella del grupo D)
 Salmonella enteritidis
 Shigella dysenteriae tipo 1
 Escherichia coli hemorrágica.

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Las bacterias de la familia Enterobacteriaceae habitan normalmente en el
intestino humano por lo que se conocen popularmente como
“enterobacterias”

Medio Color del Colonias Colonias Colonias

Agar Lactosa + Lactosa - Ácido
sulfhídrico

MacConkey Rosado Rojo Incoloras No cambia

SS Rosado ligero Rojo Incoloras Negro

amarillo

Hektoen Verde claro Anaranjado Verde azulado Negro

Salmón

XLD Rojo Amarillas Rojas Negro

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HEMOCULTIVO

Detección de microorganismos en la sangre y posteriormente realizar la

identificación y la susceptibilidad microbiana. 

Bacteriemia y fungemia se producen cuando los microorganismos invaden el

torrente sanguíneo.
Bacteriemia: la presencia de bacterias en la sangre que se pone de
manifiesto por el aislamiento de estas en hemocultivos. 

Fungemia: Designa la presencia de hongos y levaduras en sangre. 

Septicemia o sepsis: Expresiones para determinar el síndrome clínico con

el que habitualmente se expresan as bacteriemias y fungemias. 

 Las bacteriemias pueden ser transitorias, continuas o intermitentes

según la forma en que aparecen los microorganismos en sangre. 

El diagnostico definitivo de la bacteriemia se establece cuando se aisla el

microorganismo causal en la sangre del enfermo mediante el cultivo de este. 

Indicaciones de los Hemocultivos. 

 La muestra de sangre para hemocultivo debe extraerse de una vena,

la extracción no debe realizarse por medio de catéteres intravenosos,
intraarteriales salvo en los casos de sospecha de bacteriemia
asociada a catéter.
 Pacientes con fiebre mayor a treinta y ocho grados e inferiores a
treinta y seis grados Celsius.
 Neonatos ente cualquier cospecha de infección

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Enfermedades :
 Sepsis
 meningitis
 Osteomielitis
 Pielnefritis
 Infeccion Intraabdominal
 Artritis
 Neumonia
 Endocarditos

Asepsia de la piel: El principal problema para la identificación correcta de

los hemocultivos es su contaminación con la microbiota cutánea durante la
extracción. Para evitar esta contaminación se limpia la zona con alcohol
isopropílico 70 por 30segundos, después una solución yodada (tintura de
yodo 1-2%) por 30 segundos. 

Transporte del Hemocultivo. 

 2 frascos con la información correcta del paciente (# de historia

clínica, nombre y apellidos, servicio, # de cama, etc.)
 Los frascos deben de ser transportados al lab de inmediato, si no se
estudian o se transportan inmediatamente se deben de incubar de 35
a 37 grados. 

Criterios de Rechazo.

1. Dudas en la identificación del paciente, servicio, nombre, cédula, etc. 

2. Frascos dañados o evidentemente contaminados. 

Hemocultivos Positivos:

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  Tinción de Gram y otras; Cuando se observa crecimiento o los
equipos señalan +, se aspira asépticamente de 3 a 5ml de caldo de
frasco, se introduce en un tubo estéril y se deposita una gota en un
portaobjetos para realizar tinción de Gram. 
 tinción con naranja de acridina, que permite detectar un número
menor de bacterias (brucella, campylobacter)

Subcultivos 

-Se usan agares sólidos como: Agar Sangre, Chocolate & Sangre
enriquecido. 

Resultados

-Microorganismos patógenos como Staphylococcus aureus, Escherichia coli,

Enterobacterias, Pseudomona aeruginosa & Streptococcus pneumoniae son
responsables de bacteriemias verdaderas en más del 90% de los casos. 

-Dudosas las que son microbioya del paciente, como los Estafilococcos
coagulasa negativa, Streptococcus del grupo viridans,Corynebacterium spp,
Propionibacterium acnes, Bacillus spp y algunas especies de Clostridium
suponen menos del 5% de bacteriemias verdaderas. 

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ESPUTO
Vias respiratorias, se relaiza tinción de gram y se cultiva en jarra con
candela.

Es necesario el ayuno, se le solicita al paciente se enjuegue la boca solo

con agua, se acuesta e intentar botar una flema en un recipiente de boca
ancha.

Organismos de Analisis:

Agar sangre Streptococcus pneumonie y pyogenes:

CATALASA -, OXIDASA-, COCOS GRAM +
Agar manitol sal Staphylococcus Aureus:
Manitol sl 6,5%, Coagulasa+, catalasa+, cocos
gram+
Agar MacConckey Klepsiella pneuminiae:
BG-, indol-, RM-, lactosa+, VP+, Citrato+,
TSI A/A g++ H2S- (Genera mucosa)
Agar Chocolate Haemophilus Influenzae:
BG-, Pueba de MT: BAAr, BK, Tincion Ziehl
Nielsel, Lowens Teinjensen

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