UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

ESCUELA

Anexo 3 - Tarea 4
Grupo en campus 401542_19

Daniela Ortiz Hernández

1112105478

Cali valle del cauca, 15 de mayo de 2024

 Desarrollo de los ejercicios de la Tarea 4 - Técnicas
cromatográficas específicas

Ejercicio 1 – Descripción de las técnicas cromatográficas:

Cromatografía Iónica y de Fluidos Supercríticos.
Tabla 1. Ejercicio 1

Artículo elegido
de la base de
datos

Base de datos
consultada

Link grabación
del vídeo.

Ejercicio 2. Parámetros para el análisis e interpretación de datos de

Cromatografía Iónica y de Fluidos Supercríticos.

Tabla 2. Ejercicio 2A

Intercambiadores Se utilizo una resina de intercambio aniónico

aniónicos

Intercambiadores Se utilizo una columna de resina de

catiónicos intercambio catiónico.

Fase de equilibrio. Alcohol

Fase de aplicación Muestras inyectadas Mezcla de (A)

y lavado NaCl 0.1 mM , KCl ,¿ , ácido cítrico, L-ácido málico,
sal de calcio del ácido L-láctico pentahidrato,
acido succínico, estándar de iones fosfato,
estándar de iones silicato, acetato de potasio
mM y etanol al 1.99%. (B) muestra de cerveza

numero 1; (C) muestra de cerveza número 25.

La fase de lavado en este contexto sería un

procedimiento para limpia y prepara el sistema
 cromatográfico antes de la inyección de la
muestra, asegurando así resultados precisos y
reproducibles en el análisis cromatográfico.

Fase elución éter 18-corona-6 al eluyente de ácido ftálico 2

mM.

Fase Regeneración Molibdato de potasio 0,1 M y ácido sulfúrico 1

M diluido con agua ultrapura

Tipo de columna Tosoh TSKgel Super IC-A/C

Longitud de 6 mm I.D. × 150 mm

columna

Tipo de resinas Resina de intercambio catiónico ácida en forma

H+ (tamaño de partícula, 3 μm; capacidad de
intercambio catiónico, 0,1 meq/ml).

Tiempos de Aumentó de 2,68 a 32,0 min a 5,17–64,3 min

retención a 0,6 ml/min de caudal
−¿ , ¿

Gradientes
−¿, ( 3) NO3 ¿

( 1 ) SO2−¿
4
, ( 2 ) Cl ¿
(4) ion fosfato (5) ácido
pirúvico, (6) ion silicato, (7) ácido cítrico, (8)
ácido málico, (9) ácido L-láctico, (10) etanol,
(11) acético ácido, (12) ácido succínico, (13)
+¿¿ +¿¿ +¿ ¿ + ¿¿
Na , (14) NH 4 , (15) K , (16) Mg 2 y (17)
+¿¿
Ca2

Ítem escogido – Análisis del efecto del gradiente sobre la

correlación con el retención de compuestos.
artículo

Análisis del efecto En cromatografía, el gradiente de elución se

de la variable refiere a la variación gradual de la composición
sobre la retención del solvente a lo largo del tiempo durante el
de compuesto análisis. Este gradiente puede afectar la
(análisis según retención de los analitos en la columna
ítem seleccionado) cromatográfica, lo que a su vez influye en la
separación y la resolución de los componentes
de la muestra. Al realizar modificaciones de las
condiciones del gradiente, como la
concentración y la velocidad de cambio de los
componentes del solvente, para observar cómo
estas modificaciones afectan la retención de los
 aniones orgánicos/inorgánicos, cationes
inorgánicos y etanol en la columna
cromatográfica.

Referentes de Kozaki, D., Tanihata, S., Yamamoto, A.,

información Nakatani, N., Mori, M., & Tanaka, K. (2019).
(norma APA 7.0) Single injection ion-exclusion/cation-exchange
chromatography for simultaneous
determination of organic/inorganic anions,
inorganic cations, and ethanol in beer samples.
Food Chemistry, 274, 679-685.
https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2018.09.0
27

Tabla 2. Ejercicio 2B

Condiciones del Para Extracción de lípidos no polares, se tienen

ensayo en cuenta las siguientes condiciones:

 Se utilizó dióxido de carbono

supercrítico (S-CO2) como solvente
 Extracción 41,4. MPa; temperatura,
60°C; caudal, 5 l/min; remojo tiempo,
30 min; y tiempo total de ejecución, 90
min.
En esta etapa, el CO2 supercrítico se utilizó
solo para eliminar la mayoría de los lípidos no
polares de las muestras de WPPC (concentrado
de proteína de suero de leche).

Para Extracción de lípidos polares, se tienen en

cuenta las siguientes condiciones:

 Se utilizó etanol como co-disolvente

junto con S-CO2.
 Presión de extracción: Se utilizó un
 diseño factorial 3 × 3 × 2 con tres
niveles de presión (35.0, 41.4 y 55.0
MPa), dos niveles de temperatura (40 y
60°C) y tres niveles de concentración de
etanol (10, 15 y 20% de fracción molar
de CO2).

Esta etapa tiene como objetivo facilitar la

extracción de los lípidos polares que quedan en
los sólidos gastados después de la extracción
con S-CO2 en la etapa anterior.

Interpretación de Las condiciones de cada etapa están diseñadas

condiciones de para maximizar la extracción selectiva de los
estudio tipos específicos de lípidos presentes en las
muestras. En la primera etapa, las condiciones
están optimizadas para extraer principalmente
los lípidos no polares, mientras que, en la
segunda etapa, se ajustan las condiciones para
mejorar la extracción de los lípidos polares.

El cambio en las condiciones, como la presión,

la temperatura y la presencia de un co-
solvente como el etanol, afecta la solubilidad
de los lípidos en el solvente y, por lo tanto, la
eficiencia y la selectividad de la extracción.

Análisis de La concentración de etanol en el CO2

Resultado supercrítico (S-CO2), utilizado como eluyente
en la extracción de PL, tuvo un impacto
significativo en los resultados finales. Durante
el ensayo, se sometió el método analítico a
tres concentraciones diferentes de etanol. Se
observó que, a concentraciones más altas
(15% y 20%), la cantidad de PL aumentó a
temperaturas entre 60ºC y 40ºC. Además, se
demostró que a una concentración del 20%, el
proceso obtuvo una mayor cantidad de PL. Por
lo tanto, las condiciones óptimas para llevar a
cabo este ensayo fueron una presión de 35
MPa, una concentración de etanol del 15% y
 una temperatura de 40ºC. Estas condiciones
proporcionaron la mejor extracción de PL en el
proceso.

Diagrama de fases

Fig 1. Diagrama de fases del CO 2 (Chemical

Logic Corporation).

Referentes de Sprick, B., Linghu, Z., Amamcharla, J.,

información Metzger, L. E., & Smith, J. S. (2019). Selective
(norma APA 7.0) extraction of phospholipids from whey protein
phospholipid concentrate using supercritical
carbon dioxide and ethanol as a co-solvent.
Journal Of Dairy Science, 102(12), 10855-
10866. https://doi.org/10.3168/jds.2019-
16419

Ejercicio 3: Aplicaciones de la Cromatografía Iónica y de Fluidos

Supercríticos en la Industria de Alimentos.

Tabla 3. Ejercicio 3
Propuesta o ensayo Avances en la Separación de Compuestos
de aplicación Azólicos mediante Cromatografía de Fluidos
Supercríticos (SFC) y Columnas Poliméricas:
Aplicaciones y Perspectivas

La cromatografía de fluidos supercríticos (SFC)

y el uso de columnas poliméricas han emergido
como herramientas poderosas en la separación
de compuestos azólicos, prometiendo avances
significativos en diversas áreas científicas y
tecnológicas. Este ensayo tiene como objetivo
principal explorar los avances en esta técnica,
analizando su aplicabilidad, ventajas y
potencial en diferentes campos.

La importancia de este estudio radica en la

amplia aplicabilidad y eficiencia de la SFC con
columnas poliméricas en la separación de
compuestos azólicos. Esta técnica ha
demostrado ser crucial en la mejora de la
calidad y seguridad de productos en varias
industrias, incluyendo la farmacéutica,
alimentaria y textil. Además, su contribución a
la investigación científica es invaluable,
impulsando el desarrollo de nuevas tecnologías
y aplicaciones.

Los materiales y reactivos utilizados en este

estudio son fundamentales para la realización
de experimentos precisos y confiables, los
cuales son los siguientes Metanol, Etanol, 2-
Propanol, Acetonitrilo, Amoniaco, Trietilamina,
Dibutilamina, Ácido Trifluoroacético. Se
emplearon una variedad de equipos, incluyendo
bombas, interfases y detectores, junto con una
selección específica de columnas la cual fue
laDAICEL DCPak P4VPcon la fase estacionaria
de 4 polivinilpiridina. Las condiciones
experimentales, como el flujo de fase móvil, la
presión y la temperatura, fueron
cuidadosamente controladas para obtener
resultados óptimos.

Es importante destacar que el uso de metanol

como modificador fue fundamental en el
proceso experimental. Se prepararon patrones
de compuestos azólicos en metanol para
garantizar la precisión y reproducibilidad de los
resultados.

En el estudio se observó que, con la columna

DCPak P4VP y aplicando el gradiente GRAD1,
se obtienen buenos resultados de análisis. Sin
embargo, no se consigue separar hasta la línea
de base los analitos B1 (Miconazol)y
 B7(Econazol), obteniéndose para este par unas
resoluciones cercanas a la unidad. Además, en
el caso de la columna DCPak P4VP, el estudio
termodinámico para la pareja B1 (Miconazol)y
B7(Econazol)mostró que la separación era de
control entálpico y que la selectividad disminuía
a medida que aumentaba la temperatura.

En conclusión, la combinación de la
cromatografía de fluidos supercríticos y
columnas poliméricas representa un enfoque
innovador y prometedor en la separación de
compuestos azólicos. Este estudio proporciona
una visión detallada de los avances en esta
área y destaca su impacto potencial en la
ciencia y la tecnología modernas.

Referentes de Domínguez, V. (s/f). Separaciones de

información (norma compuestos azólicos mediante cromatografía
APA 7.0) de fluidos supercríticos (SFC) y columnas
poliméricas.
https://uvadoc.uva.es/bitstream/handle/10324
/38130/TFG-G3564.pdf?sequence=1

Cuadro comparativo

VARIABLE CC CD HPLC CG CI SF

Fase Móvil Solvente Solvente Solvente Gas Solvente Fase móvil

inerte CO2
Fase Sólido Sólido Material Solido Resina de Columnas
estacionari adsorbente. adsorbente. que intercambio abiertas
a permanece iónico como las
estático columnas
dentro de la
rellenas
columna.

Aplicación En la En la En la En la En la Industria
industria industria industria industr industria de Farmacéutic
farmacéutic farmacéutico Farmacéuti ia alimentos, a
a s, alimentos, ca, farmac química y
ensayos bioquímica, éutica farmacéutica
clínicos, la alimentos, y .
toxicología química, alimen
medioambie medicina taria,
ntal, análisis clínica y el
del agua. química análisi
forense. s de
 produc
tos
petrolí
feros.

Ventajas Separación Uso de Amplio Alta Alta Temperatura

de mezclas pequeñas rango de resolu capacidad, s moderadas
complejas, cantidades aplicabilida ción, alta Alta
separar de d, alta Veloci resolución, volatilidad
cualquier reactivos, precisión en dad y se puede solventes no
cantidad de estándares y sus sensibi sembrar un Extracción
mezclas y muestras; resultados, lidad gran sin cambios
amplia gama Identificación fácil volumen de fase,
de fases de diferentes manipulació para luego Posibilidad
móviles. compuestos n de los eluirlo de extraer
en una gradientes en un en forma
misma generados volumen diferencial
corrida. en la fase menor compuestos
móvil, alto volátiles y
poder de no volátiles
separación
con
detección
sensible.

Nota: Emplear normas APA séptima edición para las referencias de

artículos, libros, páginas web, entre otros. Para más información
consultar:
https://repository.unad.edu.co/static/pdf/Norma_APA_7_Edicion.pdf

Referencias

Domínguez, V. (s/f). Separaciones de compuestos azólicos mediante

cromatografía de fluidos supercríticos (SFC) y columnas poliméricas.
https://uvadoc.uva.es/bitstream/handle/10324/38130/TFG-
G3564.pdf?sequence=1

Kozaki, D., Tanihata, S., Yamamoto, A., Nakatani, N., Mori, M., &
Tanaka, K. (2019). Single injection ion-exclusion/cation-exchange
chromatography for simultaneous determination of organic/inorganic
anions, inorganic cations, and ethanol in beer samples. Food
Chemistry, 274, 679-685.
https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2018.09.027
Sprick, B., Linghu, Z., Amamcharla, J., Metzger, L. E., & Smith, J. S.
(2019). Selective extraction of phospholipids from whey protein
phospholipid concentrate using supercritical carbon dioxide and
ethanol as a co-solvent. Journal Of Dairy Science, 102(12), 10855-
10866. https://doi.org/10.3168/jds.2019-16419