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futuras entregas. Si bien organizan la información en las secciones que se solicita, todavía
hay algunas confusiones acerca de dónde corresponde poner cada cosa. Observen las
indicaciones.
Comisión 2- Grupo 2
Objetivos generales: √
● Definir medio de cultivo.
● Enunciar las principales características de los medios de cultivo, sus
componentes básicos y clasificación.
● Preparar medios de cultivo a partir del medio deshidratado.
Objetivos específicos: √
● Aprender a usar los nuevos elementos del laboratorio.
● Identificar qué tipo de cultivo utilizamos según la composición del mismo.
● Análisis de la composición del medio.
APROBADO: Grupo, Les dejo comentarios para que vayan teniendo en cuenta en las
futuras entregas. Si bien organizan la información en las secciones que se solicita, todavía
hay algunas confusiones acerca de dónde corresponde poner cada cosa. Observen las
indicaciones.
Resultados
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Análisis
Resulta de importancia destacar que durante el desarrollo del trabajo se nos brindó
una explicación detallada por parte del docente sobre la preparación adecuada de
un medio de cultivo. Además, ampliamos nuestros conocimientos acerca de otros
elementos de laboratorio que son utilizados en conjunto con los ya empleados en
prácticas anteriores. Estos elementos incluyen: √
● Vaso de precipitado:
● Erlenmeyer:
- Es una lámina de vidrio resistente, la cual tiene que ser estable para
contener líquidos, sólidos, para evaporar líquidos y poder pesarlos.
Posee forma circular cóncava-convexa.√
● Cuchara metálica:
● Tela de amianto:
Rotulados:
El TSI (Triple Sugar Iron) es un medio de cultivo utilizado en microbiología para la
identificación y diferenciación de bacterias. Consiste en un medio sólido que
contiene tres azúcares (glucosa, lactosa y sacarosa) y hierro ferroso. En el medio de
cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan los nutrientes adecuados para
el desarrollo bacteriano. La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbono
fermentables. El agar es el agente solidificante.
El TSI se utiliza para determinar la capacidad de una bacteria para fermentar estos
azúcares y producir ácido y gas como subproductos, que se detectan por medio del
indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo en medio ácido.
Para la interpretación de los resultados el prospecto menciona
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
Observar el color del medio de cultivo y la producción de gas.
1- Superficie alcalina/profundidad ácida (pico rojo/fondo amarillo): el
microorganismo solamente fermenta la glucosa.
2- Superficie ácida/Profundidad ácida (pico amarillo/fondo amarillo): el
microorganismo fermenta glucosa, lactosa y/o sacarosa.
3- Superficie alcalina/Profundidad alcalina (pico rojo/fondo rojo): el
microorganismo es no fermentador de azúcares.
4- La presencia de burbujas o la ruptura del medio de cultivo indican que el
microorganismo produce gas.
5- El ennegrecimiento del medio indica que el microorganismo produce ácido
sulfhídrico.” (Laboratorios Britania s.a)
La interpretación de los resultados del TSI puede proporcionar información sobre las
características metabólicas y la identificación preliminar de las bacterias. Es
entonces un medio de cultivo diferencial ya que nos permite diferenciar entre
fermentadores y no fermentadores, y selectivo ya que el sulfato de hierro y tiosulfato
de sodio actúan como inhibidores del crecimiento de bacterias gram positivas.
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Es crucial cumplir estrictamente con las normas de seguridad y esterilidad durante
todo el proceso de preparación del medio de cultivo. Esto implica utilizar técnicas
adecuadas de manejo de muestras y desinfección de superficies y utensilios. Una
herramienta presente en el laboratorio utilizada para la esterilización de los
materiales de laboratorio y medios de cultivo es el Autoclave. El mismo consiste en
una cámara de acero inoxidable resistente a altas temperaturas y presiones, con
una puerta hermética que permite el sellado hermético durante el proceso de
esterilización. El funcionamiento del autoclave se basa en la generación de vapor a
alta presión y temperatura.
Usualmente el autoclave se utiliza con un ciclo de 121ºC durante 30 minutos sin
vacío para la esterilización de material de riesgo biológico, realizando pruebas de
control de esterilidad en cada tratamiento para asegurar que la carga microbiológica
haya sido eliminada.
9. Finalización del Proceso: Se liberan las puertas para que puedan ser
abiertas.
Es muy importante para la esterilización que el vapor sea limpio, es decir un vapor
formado a partir de agua filtrada y libre de sustancias contaminantes como el
cadmio, magnesio, plomo o cloro entre otras. También se necesita que sea puro,
esto quiere decir que la presencia de agua en forma líquida sea muy baja, se
considera cuando es menor al 3%. Para su efectividad el vapor tiene que estar en
contacto directo con el material a esterilizar (por lo que la carga de los elementos es
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muy importante), y crear el vacío efectivo con el fin de desplazar todo el aire
presente inicialmente en el autoclave y su sustitución por vapor.
Nutritivo Agar
SIM Medio
En el laboratorio encontramos los que se conocen como Sim medio, Tsi AGAR,
Nutritivo Agar y el Agar Citrato de Simmons.
Según las etiquetas, como resultado del empleo de los polvos se obtienen cultivos
con un pH final de 7,3 , el único caso diferente es el del Agar Citrato de Simmons
que va a poseer un pH final de 6,9. A pesar de esta diferencia, aún contamos con
medios de cultivo con pH cercanos a la neutralidad, obteniéndose por medio de los
componentes que los conforman.
En el caso del nutritivo Agar está constituido por pluripeptona, extracto de carne,
cloruro de sodio y agar, obteniéndose así un pH final de 7,3. En cambio, el Sim
medio, está formado por Tripteina,peptona, sulfato de hierro y amonio, tiosulfato de
sodio y agar. Otro de los medios estudiados fue el T.S.I Agar, el cual contiene
extracto de carne, pluripeptona, cloruro de sodio,lactosa, sacarosa, glucosa, sulfato
de hierro y tiosulfato de sodio.√
Conclusión √
Mediante este trabajo fue posible describir la forma correcta de llevar a cabo el uso
de agar para la realización de medios de cultivo, que precauciones se deben tener
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para tratar con los mismos y las características de los elementos de laboratorio que
se utilizan en estos procesos.
Por otro lado se pudieron diferenciar los distintos elementos que los
microorganismos precisan para su correcto desarrollo (macroelementos si son
requeridos en grandes cantidades y microelementos si lo son en pequeñas
cantidades) además de las condiciones específicas que presentan ciertos medios
de cultivos para que la proliferación de los microorganismos sea óptima. Entre
estas condiciones se podrían nombrar un pH acorde, un contenido de agua en el
sustrato correcto o, en el caso de algunas bacterias, la disponibilidad de CO2 para
generar tensión y que el desarrollo en la placa sea el esperado.
Además, se diferenciaron los tipos de medio de cultivo disponibles para la
realización de estudios sobre estos, pudiendo dividirse así según su composición,
según su uso, y según su estado. Muy bien esta conclusión. Expone los objetivos
alcanzados y da el cierre al informe.√
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Bibliografía La Bibliografía no está citada según las normas ISO 690 como se solicita.
Revisen en internet las normas. En el caso de los sitios web, el formato y la información
necesaria contiene: AUTOR, Año de publicación. Título del artículo/post. En: Título de la
web/blog en cursiva [en línea]. Disponible en: URL del recurso [consulta: fecha de consulta].
BritaniaLab (www.britanialab.com):
T.S.I Agar. [en línea]. [Accedido el 14 de junio de 2023].