Está en la página 1de 1

PRÁCTICA 4.

ESTRUCTURA, PROPIEDADES Y FUNCIONES DE cuidado con esta última evitando hacer mucho movimiento, luego del
ÁCIDOS NUCLEICOS. TRANSFERENCIA DE MATERIAL GENÉTICO sembrado se procedió a incubar 24 horas a 37 °C. Luego de la incubación,
I: CONJUGACIÓN. se tomaron las colonias aisladas que crecieron de la cepa receptora y se
inocularon en cajas de petri con medio Luria Agar, una con 2% de Str y
Bioquímica Experimental. Equipo 1. Autores: Acosta García Juan
otra con 2% de Kn, previamente cuadriculadas (una colonia por cuadro).
Pablo, Jiménez Martínez Arturo, Serrano Malagón Pedro. Ciudad
Se hizo lo mismo con las colonias aisladas de la cepa conjugada. Después
de México, Facultad de Química, UNAM. 2 de abril de 2019. de la inoculación, se volvió a incubar una noche a 37 °C y se tomaron
resultados.
RESUMEN RESULTADOS
La transferencia de material genético entre las bacterias puede provocar La cepa donadora no pudo crecer en el medio donde se sembraron las 3
que estas adquieran una nueva característica fenotípica que puede dar cepas juntas que contenía estreptomicina.
como resultado el origen de la adaptación del entorno de la célula, tal es
el caso de la resistencia a los antibióticos. En esta práctica se realizó un Tabla 1. Número de colonias de cepa receptora y conjugada que crecieron en luria-agar con
ensayo de conjugación bacteriana utilizando la cepa de E. coli correspondiente antimicrobiano y de diferentes equipos.
W3110/F ́KmTn3 como cepa donadora, de resistencia a Kanamicina y, Equipo Str Kn Str Conjugante Kn % de conjugación
como receptora, la cepa E. coli JM1452StrR estreptomicina resistente, Receptora Receptora Conjugante
realizando la metodología expuesta en el reporte. Finalmente se obtuvo
un porcentaje de conjugación del 93.75% con un fenotipo Str/kn 1 16 0 16 15 93.75%
resistente, concluyendo así que las bacterias pueden incorporar nuevo
2 26 0 26 25 96.15%
material genético para adquirir nuevas características fenotípicas.
INTRODUCCIÓN 3 15 0 28 22 78.57%
Las bacterias son microorganismos con una capacidad de adaptación a
diferentes condiciones ambientales. Las bacterias tienen mecanismos 4 15 0 12 9 75%
que les permiten cambiar su expresión génica favoreciendo la síntesis de
los productos de ciertos genes y reprimiendo la de otros. Estos
mecanismos pueden llamarse de variación fenotípica, ya que implican Todas las colonias sembradas de la cepa receptora crecieron en
una serie de cambios en el fenotipo celular o de la población bacteriana. estreptomicina mientras que en kanamicina no. Todas las colonias de la
Algunos procesos permiten que la bacteria origine alguna nueva función cepa conjuganda, crecieron en medio con estreptomicina y en
que pueda dar como resultado la adaptación de la célula, estos procesos kanamicina no crecieron todas, siendo que se sembró la misma colonia
son la transferencia de material genético entre bacterias, este proceso en ambas cajas.
se puede dar por diferentes mecanismos: La transformación, la ANÁLISIS DE RESULTADOS
transducción y la conjugación. De acuerdo con los resultados obtenidos, la cepa receptora no puede
La conjugación bacteriana es la transmisión horizontal de material crecer en medio con kanamicina ya que no creció ninguna de las colonias
genético en la que la información genética de un plásmido es transferida que fueron inoculadas en el medio, dado que esta cepa no se puso en
de una célula donadora (Cepa F+) a una célula receptora (Cepa F-). contacto con la cepa donadora que le confiriera el plásmido adecuado.
Requiere el contacto físico entre las dos especies bacterianas, que se Por otro lado, la cepa conjugada, creció en ambos medios, esto debido
al contacto entre cepa donadora y receptora por lo que hubo
establece a través del pili-F de la célula donadora, que es una estructura
conjugación y transmisión del plásmido, que contiene la información
formada por la proteína pilina y es expresada por lo genes tra. Este grupo
genética que le confiere la resistencia a la kanamicina, a cepa receptora.
de genes en particular le confiere al plásmido la propiedad de ser
Sabemos que ocurrió esto debido a que la cepa donadora no creció en
conjugativos. el medio con Str de la primera caja inoculada y, a su vez, la receptora no
OBJETIVOS creció en medio con Kn, la mezcla de las 2 provocó la generación de una
nueva cepa que obtuvo resistencia para ambos antimicrobianos. Pero
• Identificar al DNA como portador de la información genética. pesar de sembrar las mismas colonias, no todas crecieron en el medio
• Reconocer a la conjugación bacteriana como un fenómeno de con kanamicina, arrojando el % de conjugación que se encuentra en la
transferencia horizontal de material genético. tabla 1. El porcentaje se tuvo en un rango del 75.00 al 96.15%, esto
• Entender el mecanismo por el cual se realiza la conjugación puede deberse, a nivel experimental a las formas de trabajo de cada
bacteriana. equipo, que no todos hayan tenido los cuidados adecuados, como
HIPÓTESIS mantener casi estática la cepa conjugada, o a nivel biológico que alguna
Si la cepa donadora de E. coli W3110/F’KmTn3 contiene el plásmido que de las células simplemente no haya sido capaz de captar el plásmido.
la hace resistente a Kanamicina y puede transferirlo por medio de CONCLUSIÓN.
conjugación bacteriana a la cepa Receptora de E. coli JM1452Str La cepa conjugada puede crecer en medios con estreptomicina y
resistente a estreptomicina, entonces se creara una nueva cepa que sea kanamicina ya que contiene el material genético necesario que le va a
resistente a ambos antimicrobianos. permitir desarrollarse en ambos. Esto debido a que se pusieron en
METODOLOGÍA contactos dos tipos de cepas viables de E. coli, una donadora del
Se tomaron dos cepas distintas de E. coli, JM1452Str (cepa receptora) plásmido, que confiere resistencia a kanamicina, a una receptora que es
resistente a estreptomicina (Str) y W3110/F’KmTn3 (cepa donadora) susceptible al antibiótico, por medio de conjugación bacteriana como
resistente a Kanamicina (Kn) pero no a estreptomicina, que previamente canal de transferencia de ADN.
habían sido incubadas en caldo luria, durante una noche a 37 °C. Se REFERENCIAS.
tomaron 300 uL de la cepa receptora y 120 uL de la cepa donadora y se • Griffiths A., Wessler S., Lewontin R., Gelbart W., Suzuki D.,
mezclaron en tubo de microfuga que contenía 600 mL de caldo luria, Miller J. “Introduction to Genetic Analysis”. Octava edición.
además se sembraron cajas petri con el antibiótico con la cepa a la que W.H. Freeman and Company, New York. 2005.
son resistentes como controles. Posteriormente se incubó el tubo a 37 • Brown T.A. “Genetics. A Molecular Approach”. Segunda
°C sin agitación. Pasado el tiempo de incubación, se sembró de manera edición. Chapman & Hall. USA. 1992. pp 467.
que se puedan obtener colonias aisladas, en una caja de petri con medio
Luria-agar 2% sulfato de estreptomicina, previamente dividida y
etiquetada, con la cepa receptora, donadora y la conjugada, teniendo

También podría gustarte