GUA DE PRCTICA DE

LABORATORIO

BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAS

EQUIPO DOCENTE:
Mori Castro, Jaime Alberto
morijaime@hotmail.com

2017

PRACTICA N 01
MATERIALES DE LABORATORIO
 INTRODUCCIN
El contenido y volumen del manual de prcticas de laboratorio, corresponden al Programa de enseanza del
curso de "Procesos Biolgicos".
Se trata de una ciencia natural que ha ido forjando a travs del tiempo en una lucha constante por conocer y
transformar la naturaleza. En el proceso de su desarrollo, ha surgido una diversidad de campos especializados
dentro de los que destaca la gentica, con sus estudios del genoma humano, la clonacin de animales, la
terapia gnica y la transgnica.
Asimismo cabe destacar los estudios ecolgicos de contaminacin, tales como la lluvia cida, la destruccin de
la capa de ozono y el efecto de invernadero.
Sin embargo a pesar de su progresivo avance, muchas veces el conocimiento biolgico no est al alcance de
las mayoras y lo que es ms grave, no se orienta a solucionar los problemas sociales ms apremiantes como
el hambre, la destruccin y las enfermedades.
Siendo la Biologa una ciencia que se debe estudiar aplicando la teora con la parte prctica, se ha elaborado
esta gua de prcticas de laboratorio con prcticas que puedan ser tiles a los estudiantes.

INSTRUCCIONES GENERALES
Para el desarrollo de las prcticas es conveniente tener en cuenta algunas normas elementales que deben ser
observadas con toda escrupulosidad.
1. Antes de realizar una prctica, debe leerse detenidamente para adquirir una idea clara de su objetivo,
fundamento y tcnica. Los resultados deben ser siempre anotados cuidadosamente apenas se
conozcan.
2. El orden y la limpieza deben presidir todas las experiencias de laboratorio. En consecuencia, al
terminar cada prctica se proceder a limpiar cuidadosamente el material que se ha utilizado.
3. Cada grupo de prcticas se responsabilizar de su zona de trabajo y de su material.
4. Antes de utilizar un compuesto hay que fijarse en la etiqueta para asegurarse de que es el que se
necesita y de los posibles riesgos de su manipulacin; No devolver nunca a los frascos de origen los
sobrantes de los productos utilizados sin consultar con el profesor; No tocar con las manos y menos
con la boca los productos qumicos.
5. Todo el material, especialmente los aparatos delicados, como lupas y microscopios, deben manejarse
con cuidado evitando los golpes o el forzar sus mecanismos.
6. Los productos inflamables (gases, alcohol, ter, etc.) deben mantenerse alejados de las llamas de los
mecheros. Si hay que calentar tubos de ensayo con estos productos, se har al bao Mara, nunca
directamente a la llama. Si se manejan mecheros de gas se debe tener mucho cuidado de cerrar las
llaves de paso al apagar la llama.
7. Cuando se manejan productos corrosivos (cidos, lcalis, etc.) deber hacerse con cuidado para evitar
que salpiquen el cuerpo o los vestidos. Nunca se vertern bruscamente en los tubos de ensayo, sino
que se dejarn resbalar suavemente por su pared.
8. Cuando se vierta un producto lquido, el frasco que lo contiene se inclinar de forma que la etiqueta
quede en la parte superior para evitar que si escurre lquido se deteriore dicha etiqueta y no se pueda
identificar el contenido del frasco.
9. No pipetear nunca con la boca. Se debe utilizar la bomba manual, una jeringuilla o artilugio que se
disponga en el Centro.
10. Las pipetas se cogern de forma que sea el dedo ndice el que tape su extremo superior para regular
la cada de lquido.
11. Al enrasar un lquido con una determinada divisin de escala graduada debe evitarse el error de
paralaje levantando el recipiente graduado a la altura de los ojos para que la visual al enrase sea
horizontal.
 12. Cuando se calientan a la llama tubos de ensayo que contienen lquidos debe evitarse la ebullicin
violenta por el peligro que existe de producir salpicaduras. El tubo de ensayo se acercar a la llama
inclinada y procurando que sta acte sobre la mitad superior del contenido y, cuando se observe que
se inicia la ebullicin rpida, se retirar, acercndolo nuevamente a los pocos segundos y retirndolo
otra vez al producirse una nueva ebullicin, realizando as un calentamiento intermitente. En cualquier
caso, se evitar dirigir la boca del tubo hacia la cara o hacia otra persona.
13. Cualquier material de vidrio no debe enfriarse bruscamente justo despus de haberlos calentado con el
fin de evitar roturas.
14. Los cubreobjetos y portaobjetos deben cogerse por los bordes para evitar que se engrasen.

MATERIALES DE LABORATORIO
Los materiales y equipos constituyen la principal herramienta en el laboratorio, su nmero y variedad es
grande, segn el tipo y prueba a realizar. Los materiales para ser considerados de calidad, deben cumplir
ciertos requisitos y condiciones, como son: construidos con insumos de calidad, neutro, resistente a la accin
mecnica y a los cambios de temperatura entre otros factores. Los equipos son elaborados en acero inoxidable
y son de mucha utilidad en los laboratorios.
OBJETIVO
Conocer el uso y manejo de los materiales y equipos del laboratorio de biologa.
MATERIALES
Mascarilla
Guantes de ltex
Materiales de laboratorio
PROCEDIMIENTO
Observe y reconozca los materiales y equipos de laboratorio
Materiales de vidrio
En el laboratorio de biologa, el material de vidrio constituye una de las principales herramientas de trabajo.
Existe una gran variedad de acuerdo a las necesidades de cada laboratorio. Como requisito general el material
de vidrio debe ser: de buena calidad, ya que estos son sometidos a repetidas esterilizaciones, ser
transparentes, de superficie lisa, sin ralladuras, contener una mmica cantidad de lcali libre, tener bajo
coeficiente de dilatacin.
Tubos de prueba o ensayo
Son de vidrio neutro, de paredes gruesas y con reborde para facilitar el taponamiento. Si son con tapa rosca,
debe ser tambin de vidrio neutro. Los tubos de centrfuga, las medidas son variadas desde 10 cc. a 250 cc.
Graduadas al cm. o mm; Pueden ser cnicos o cilndricos y siempre de paredes gruesas.
Placas Petri
Compuestas de dos cristalizadores, el ms grande hace de tapa. Los ms usados son de 10 x 100, 20 x 100 y
se emplean para el cultivo y aislamiento de grmenes. Existen tambin con divisiones internas de dos y cuatro
compartimientos.
Pipetas
Se utilizan las serolgicas y volumtricas. Las pipetas serolgicas, son terminales y con capacidad de 0.1 a 25
ml. Se emplean para dispensar lquidos en pequeos volmenes. Las pipetas volumtricas, se reconocen por
presentare una dilatacin bulbosa central con una marca de aforamiento impreso en el extremo proximal
angosto de la pipeta. Son utilizadas para llenar medios de cultivo en tubos, placas petri y frascos. Se les
conoce tambin como pipetas de bola, la capacidad volumtrica de estas pipetas estn comprendidas entre 10
y 100ml.
Matraces Erlenmeyer
Recipientes volumtricos de gran utilidad para la preparacin y almacenamiento de soluciones, colorantes y
reactivos, medios de cultivo y otros. La calidad debe ser la misma recomendada en los requisitos generales.
Fiolas
Su forma es semejante a los balones, estn calibrados a medidas exactas mediante un aforo en la parte media
del cuello, en el que se indica la medida. Poseen tapa de vidrio esmerilado y de plstico. Se emplea para la
preparacin de soluciones valoradas.
Kitazato
Es un matraz que posee una tubuladura costa lateral, y sirve para hacer vaco. Se utiliza como complemento
del equipo de filtracin.
Probetas
Son recipientes cilndricos con base para su estabilidad, sus paredes son de un mayor dimetro comparado
con los materiales indicados anteriormente. Tienen graduaciones y pueden venir con o sin tapa. Se utilizan
para medir soluciones. Su capacidad vara desde 25 ml. hasta 2500 ml.
Beakers o Vasos de Precipitacin
Recipientes cilndricos y cortos con una escotadura (pico) en uno de los mrgenes, su utilidad es muy amplia.
Se fabrica de varias medidas, muy comunes para facilitar la mezcla de una solucin, el vidrio debe ser
resistente al calor.
Materiales de Metal y otros
Trpodes
Son de metal, sobre estos se colocan una malla cuadrada cubierta en el centro con varias capas de asbesto.
Sirven para colocar envases que van a calentarse o slo como soporte.
Esptulas de metal
Son de acero inoxidable y sirven para transferir sustancias en polvo, cuando se pesan para su preparacin.
Mecheros de Bunsen
Son de metal, con una rueda corrediza en la parte baja del tubo, que sirve para regular la intensidad de la
llama.
Gradillas
Pueden ser de alambre metlico, madrera, acero inoxidable o plastificadas, estas ltimas son las ms
recomendadas. Sirven para colocar los tubos de prueba de diferentes dimensiones.
Equipos
Balanzas de precisin
La sensibilidad de una balanza es la masa ms pequea que puede pesar con precisin. Pueden ser digitales
o mecnicas.
Centrfugas
Son equipos que sirve para separa dos fase de diferentes densidades con la finalidad de separarlas. Su
velocidad se mide en revoluciones por minuto rpm.
Incubadora
Esta provista de un calentador que nos permite obtener temperaturas entre 25 a 100C., es controlada
mediante un termmetro. Sirve para mantener una temperatura constante de un producto que se quiere
preparar.
Autoclave
Este equipo sirve para esterilizar los materiales que son usados en microbiologa o que por su uso requieren
estar libres de grmenes patgenos.
Se basa en el uso del vapor de agua sobrecalentado y a presin lo que permite que la temperatura suba hasta
los 200 a 250 C.

CONCLUSIONES
CUSTIONARIO
1. Qu diferencias existe entre una pipeta serolgica y una pipeta volumtrica?
2. Qu tipo de frascos son recomendados para guardar reactivos?
3. Dibuje los materiales y equipos observados.

PRECAUCIONES EN EL DESARROLLO DE CADA EXPERIMENTO

Las medidas oportunas y la comprensin de las prcticas a seguir harn del laboratorio un lugar seguro como
cualquiera saln de clases. Para ello debern tenerse en cuenta en forma general. Las siguientes
precauciones:

1. Observa dnde dejas el material caliente cerciorndote de que est frio antes de tomarlo con la mano
2. Cuando caliente un tubo de ensayo, no lo apuntes haca ti o hacia tus compaeros, puede proyectarse su
contenido.
3. Si cae sobre ti o en tu ropa un material corrosivo, lvate inmediatamente con agua abundante y llama al
docente.
4. Al detectar el olor de un lquido, no pongas la cara sobre la boca del recipiente. Con tu mano abanica hacia
ti el aroma
5. Antes de usar un reactivo, lee dos veces la instruccin de la hoja de trabajo
6. Los aparatos o recipientes en los que haya desprendimientos gaseosos no deben cerrarse
hermticamente, pues las presiones formadas en su interior pueden explotarlo
7. Los tubos de ensayo no deben calentarse por el fondo sino por las paredes, para evitar la expulsin de su
contenido.
8. No arrojes cuerpos slidos en los lavatorios, a menos que estn pulverizados y sean fcilmente
arrastrables o solubles en agua. No viertas directamente los cidos en los lavatorios, ya que los corroe
9. Cuando interrumpas un experimento, coloca etiquetas con leyendas apropiadas a los frascos y matraces
que contengan sustancias, as te ser fcil identificarlos
10. Cuando trabajes con fuego, mantn tu cabello recogido para evitar se incendie.
11. Cuando necesites encender el mechero, nunca lo hagas con un papel, puede iniciar un incendio.
12. El docente indicar el uso adecuado y la ubicacin de las instalaciones de agua, luz, drenaje, gas y otras
que existen en el laboratorio.

Actividad: Los estudiantes debern realizar

un croquis de dichas instalaciones.

REGLAMENTO INTERNO
1. Tendrn derecho el acceso y uso del laboratorio nicamente los estudiantes que estn matriculados en el
curso o las personas debidamente autorizadas por la Direccin.
2. Los estudiantes respetarn durante todo el periodo de prcticas el horario que tengan asignado.
3. No se permitir la entrada al laboratorio si el estudiante no se presenta con su bata.
4. En ningn caso el estudiante podr sustraer del laboratorio, aparatos o materiales sin la autorizacin
respectiva por escrito.
5. Es obligacin de los estudiantes conservar en buen estado las instalaciones, materiales y equipos del
laboratorio, as como mantenerlo aseado, depositando la basura en los tachos seleccionadores, que para
tal efecto existen.
6. Cada equipo de trabajo se har responsable del material recibido, deber ser revisado de inmediato y
reportar cualquier anomala o desperfecto al docente.
7. Es obligacin del estudiante entregar al responsable del laboratorio el material y equipo usado, limpio y en
buen estado, 5 minutos antes del trmino de la sesin de prctica.
8. El material o equipo que se deteriore o se pierda ser repuesto por los responsables en un plazo no mayor
de 5 das hbiles, de lo contrario se perder el derecho de uso de laboratorio.
9. Sin excepcin de persona, est prohibido fumar e ingerir alimentos y bebidas en el interior del laboratorio.
10. Los estudiantes que muestren indisciplina dentro del laboratorio, sern sancionados de acuerdo a la
gravedad de su falta, ya que este tipo de conducta puede originar un accidente, las situaciones no
previstas en este reglamento, sern resueltas por el respectivo Departamento Acadmico.

NORMAS DE LABORATORIO PARA EL CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECUALAR

Las normas de laboratorio que se presentan a continuacin han sido desarrolladas para velar por tu seguridad
y para su mejor aprovechamiento del laboratorio. Evala cada premisa y firma al final una hoja que te proveer
el docente como evidencia de que se ha discutido en el laboratorio las reglas de seguridad.

REGLA COMO NOS BENEFICIA ESTA REGLA

1. Se puntual, ausencias y tardanzas afectan tu nota
2. No se permite el uso de celulares durante el periodo
de laboratorio. Los telfonos celulares tienen que ser
ajustados de manera tal que no emitan ruidos durante
el periodo de laboratorio.
3. Ya que en este laboratorio se utilizan aguas
estancadas, lquidos preservadores de animales y otros
compuestos, tienes que presentarte con una bata de
laboratorio, adems de vestir calzado cerrado.
4. No hablars en voz alta; no te sentars en la mesa
del laboratorio; no fumars ni ingerirs alimentos dentro
del laboratorio; no te maquillars en el laboratorio.
5. Las visitas al laboratorio de otros estudiantes no
matriculados en el curso estn terminantemente
prohibidas.
6. Los juegos de mano estn prohibidos en el
laboratorio.
7. Cuando no ests utilizando las sillas mantenlas bajo
la mesa.
8. En los fregaderos no puedes descartar desperdicios
slidos. Usa el tacho.
9. Reporta cualquier avera (tomas de agua,
electricidad, microscopios.) que se presente en el
laboratorio.
10. Si rompes un envase o instrumento de cristal,
recoge los vidrios con cuidado y notifica de inmediato a
tu profesor. Los vidrios y cristales se rotos se colocan
en un envase de desperdicios especial que se
encuentra al fondo del saln y no en cualquier tacho de
basura.
11. De sufrir alguna cortadura o algn accidente debes
comunicrselo al profesor encargado inmediatamente.
12. Al finalizar el laboratorio colocars el microscopio en
su lugar de la manera indicada por el profesor. No lo
debes dejar sobre la mesa.
13. Al terminar tu ejercicio de laboratorio verifica que
toda el rea y equipo de laboratorio est limpio y
organizado.
14. Las computadoras son para el beneficio de los
estudiantes y facultad del curso. No mutiles ni juegues
con tu equipo.
15. Identifica el equipo de seguridad (extintores, mantas
y otros) presente en el laboratorio.
16. Toma las medidas necesarias para evitar el
contagio de la gripe AH1N1.
Qu puedes concluir de esta actividad de laboratorio?

REGLAS DE APRENDIZAJE COLABORATIVO PARA BIOLOGA

Objetivos: Se pretende cambiar la tradicional clase pasiva donde el estudiante es meramente un recipiente de
informacin dada por el profesor, a una experiencia educativa cooperativa.
Las reglas para la implementacin de esta estrategia de enseanza son las siguientes:
1. La seleccin de los integrantes de los grupos ser tomando en cuenta la igualdad de sexo, ndice
acadmico, grupos de no ms de cinco (5) personas.
2. Se levantar la mano cada vez que el profesor lo haga ya que esto significar que el profesor desea la
atencin de todos los estudiantes. Los estudiantes debern en ese momento dejar de hacer todo cuanto
estn realizando para atender las instrucciones o informacin que se est ofreciendo.
3. Al comenzar cada clase se formularn preguntas escritas u orales sobre el tema a desarrollar con el objeto
de evaluar el nivel de conocimientos de cada uno de los estudiantes. La aprobacin de esta evaluacin es
obligatoria para poder realizar la respectiva clase prctica.
4. Cdigo de Cooperacin entre los integrantes del grupo:
a. Cada miembro del grupo es responsable del xito de su grupo.
b. Una vez nombrado el grupo no hay marcha para atrs.
c. Se deber escuchar, respetar y considerar las contribuciones de cada miembro del grupo.
d. Se deber criticar constructivamente las ideas, NO LAS PERSONAS.
e. Debern ir al grano evitando ancdotas y/o ejemplos extensos.
f. Nadie tiene un rango superior que otro en el grupo. No habr lderes de grupo.
g. Cuando haya una queja de un compaero, el grupo lo debe de discutir.
h. Cuando se trabaje individualmente dentro del grupo, cada miembro tendr que saber y conocer el
procedimiento y resultados de los mismos.
i. Al momento de finalizar la tarea, la misma debe ser firmada por aquellos miembros del grupo que
participaron activamente en el ejercicio. Aqul que no particip o que no est claro con el tema
discutido en el ejercicio o actividad, no deber firmar el informe. Si lo firma es responsable de lo
que suceda con el grupo a la hora de la evaluacin. Los siguientes son ejemplos de mtodos de
evaluacin:
*Como el estudiante al firmar el documento certifica que domina el material en cuestin, se tomar a uno de los
integrantes del grupo y se le har una pregunta con un valor determinado la cual contestar oralmente al
momento. Si el integrante no contesta correctamente la contestacin TODO EL GRUPO perder la
puntuacin.
*En otras ocasiones se ofrecern pruebas cortas individuales para el grupo y slo se corregir una de las
pruebas. Si la prueba corregida es de un estudiante que firm como que sabe el material, ser responsable de
la nota grupal sea sta Excelente, Buena, Regular, Deficiente, o Reprobado.
j. El estudiante desarrollar estrategias para ayudar a sus compaeros de grupo que no tengan claro
algn concepto. Adems desarrollar comunicacin, aprendizaje extendido, etc.
k. Se entender que aquellos miembros que firmen la hoja de trabajo son aquellos miembros del
grupo que entienden y dominan el material discutido. Para esto debern leer el manual o material
asignado antes de la clase. Esto ayudar significativamente a su aprovechamiento.
l. Se har un trabajo grupal sobre un tema asignado el cual ser presentado frente a la clase, las
instrucciones sobre los trabajo se ofrecern en su momento.
m. La nota de laboratorio ser tomando en consideracin lo siguiente:
Desenvolvimiento individual
Desenvolvimiento grupal
Evaluacin entre compaeros
n. La gramtica ser tomada en consideracin al momento de evaluar trabajos escritos. Escribir en
oraciones completas y sintaxis correcta. Seguir instrucciones ser indispensable.
 PRACTICA N 02
CLULAS VEGETALES

El termino clula fue aplicado por primera vez por Robert Hooke en 1665, actualmente es aceptado como la
unidad bsica, morfolgica y funcional de todo organismo, adems de presentar la unidad fundamental en
cuanto a origen, dado que todo organismo procede de una clula nica. La clula vegetal tpica presenta como
partes principales: el protoplasto y la pared celular.
OBJETIVOS
Reconocer los organelos caractersticos de la clula vegetal
Reconocer las principales componentes no protoplasmticos o sustancias ergsticas de la clula
vegetal.
MATERIALES
Hoja de yuyo, Harina de yuca y maz
Fruto rojo de rocoto, Capsicum pubescens
Corcho Y Frutos de aceituna, Olea europea
PROCEDIMIENTO
ORGANELOS TPICAMENTE VEGETALES: PLASTIDIOS
MUESTRA 01 : Cloroplastos en yuyo
Preparacin : Coloque una hoja con una gota de agua en el porta objetos
Observaciones : Los cloroplastos se observan como corpsculos esfricos de color verde
dentro de la clula.

MUESTRA 02 : Cloroplastos en Capsium pubescens rocoto

Preparacin : Realice un corte superficial del mesocarpio del fruto, coloque en el porta
objetos con una gota de agua
Observaciones : Los cloroplastos se observan como corpsculos esfricos de tonalidad rojo-
amarillo.
 X

MUESTRA 03 : Pared celular del corcho

Preparacin : Realice un corte superficial de un trozo de corcho, coloque en el porta objetos
con una gota de agua
Observaciones : Pared celular, canalculos, lmina media y lmen.

MUESTRA 04 : Acumulacin de almidn en leucoplastos (Inclusiones inertes en plastidios)

Harina de Manihot esculenta yuca y Zea mays maiz.
Preparacin : Coloque una gota de agua en el portaobjeto, agregue la menor cantidad de
harina posible.
Observaciones : Observe la disposicin de los leucoplastos.
Yuca Maz

X X

MUESTRA 05 : Grasa y aceites en el mesocarpio de la Olea europea aceituna

Preparacin : Coloque una pequea porcin del pericarpio de la aceituna sobre el
portaobjeto, coloque el cubreobjetos y presione suavemente.
Observaciones : Observe las gotas de grasa y aceite.

X
CONCLUSIONES


CUESTIONARIO
1. Dibujo de una clula vegetal y sus partes.
PRACTICA N 03
CLULA ANIMAL
La clula es la unidad biolgica, anatmica, gentica y fisiolgica de los seres vivos. Todos los seres vivos
estn constituidos por una o varias clulas. En los organismos superiores las clulas que los conforman se
organizan en menor o mayor grado, constituyendo: tejidos, rganos y sistemas altamente especializados. La
clula animal no presenta cloroplastos ni pared celular.
OBJETIVOS
Identificar la clula animal
Reconocer las estructuras propias de la clula animal.
MATERIALES
Lmina portaobjetos y cubreobjetos
Baja lengua
Lanceta
Colorante Wright
Aceite de cedro
Algodn
Alcohol medicinal 500 ml.
Un Sapo o Rana
PROCEDIMIENTO
MUESTRA 01 : Mucosa o epitelio bucal
Preparacin : Con el borde de un baja lenguas, realice un raspado de la mucosa bucal y coloque en
el centro de portaobjeto, en la que previamente se ha puesto gota de suero
fisiolgico. Agregar una gota de lugol o azul de metileno.
Observaciones: Reconozca la forma del ncleo y aspecto del Citoplasma.

MUESTRA 02 : Grasa animal

Preparacin : Con el bistur, cortar una capa fina de grasa, colocarla en un portaobjeto y cubrirla
con una gota de formol; dejar actuar por 4 minutos, lavar la muestra con agua y
cubrirla con unas gotas de sudn III. Dejar actuar unos 5 minutos. Volver a lavar la
preparacin con agua, cubrirla con un cubreobjetos y observar al microscopio
Observaciones : Clulas adiposas.

X
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
1. Qu diferencia morfolgica puede notar entre las clulas observadas?
2. Qu diferencia existe entre: rgano, organelo y organismo?
3. Dibujar una clula animal y considere sus partes
PRACTICA N 4
RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS
Objetivos:
1. Identificacin de glcidos.
2. Hidrlisis del enlace de un disacrido
Materiales:
Muestras de glcidos: glucosa maltosa lactosa sacarosa almidn.
Tubos de ensayo, gradilla, vaso para calentar, mechero.
Reactivo de Fehling A y Fehling B
Lugol
HCl diluido y bicarbonato.
Reacciones que van a realizarse:
1. Reaccin de Fehling:
o Tomar la muestra que se quiera analizar (normalmente una cantidad de 3 cc.)
o Aadir 1 cc. de Fehling A y 1 cc. de Fehling B. El lquido del tubo de ensayo adquirir un fuerte color
azul.
o Calentar el tubo al bao Mara o directamente en un mechero de Laboratorio.
o La reaccin ser positiva si la muestra se vuelve de color rojo-ladrillo.
o La reaccin ser negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul-verdoso.
Fundamento: Se basa en el carcter reductor de los monosacridos y de la mayora de los
disacridos (excepto la sacarosa). Si el glcido que se investiga es reductor, se oxidar dando lugar a
la reduccin del sulfato de cobre (II), de color azul, a xido de cobre (I), de color rojo-anaranjado.
2. Reaccin del Lugol: Este mtodo se usa para identificar polisacridos. El almidn en contacto con unas
gotas de Reactivo de Lugol (disolucin de yodo y yoduro potsico) toma un color azul-violeta caracterstico.
o Poner en un tubo de ensayo unos 3 cc. del glcido a investigar.
o Aadir unas gotas de lugol.
o Si la disolucin del tubo de ensayo se torna de color azul-violeta, la reaccin es positiva.
Fundamento: La coloracin producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la
molcula de almidn. No es por tanto, una verdadera reaccin qumica, sino que se forma un compuesto de
inclusin que modifica las propiedades fsicas de esta molcula, apareciendo la coloracin azul violeta.
Basndote en esta caracterstica te voy a proponer un pequeo juego de magia que te va a sorprender:
o Una vez que tengas el tubo de ensayo con el almidn y el lugol, que te habr dado una coloracin
violeta, calienta el tubo a la llama y djalo enfriar. !Sorprendido!.
o Vuelve a calentar y enfriar cuantas veces quieras.... ?Dnde est el color?
1. INVESTIGACIN DE AZUCARES REDUCTORES
Poner las muestras de glcidos en los tubos de ensayo. Pueden prepararse soluciones al 1%
aproximadamente.
Realizar la Prueba de Fehling como se indica al principio de pgina.
Despus de calentar observar los resultados.
Estos resultados nos indican que los azcares: glucosa, maltosa y lactosa tienen carcter reductor.
2. INVESTIGACIN DE AZUCARES NO REDUCTORES
Como se vea en la experiencia 1 la sacarosa daba la reaccin de Fehling negativa, por no presentar grupos
hemiacetlicos libres.
Ahora bien, en presencia del cido clorhdrico (HCl) y en caliente, la sacarosa se hidroliza descomponindose
en los dos monosacridos que la forman (glucosa y fructosa).
Tcnica: Tomar una muestra de sacarosa y aadir unas 10 gotas de cido clorhdrico al 10%. Calentar a la
llama del mechero durante un par de minutos. Dejar enfriar y realizar la Prueba de Fehling. Observa el
resultado. La reaccin positiva nos dice que hemos conseguido romper el enlace O-glucosdico de la sacarosa.
(Se recomienda antes de aplicar la reaccin de Fehling, neutralizar con bicarbonato, Fehling sale mejor en un
medio que no sea cido.)
3. INVESTIGACIN DE POLISACRIDOS (ALMIDN)
El polisacrido almidn se colorea de azul-violeta en presencia de yodo, debido no a una reaccin qumica,
sino a la fijacin del yodo en la superficie de la molcula del almidn, fijacin que slo tiene lugar en fro.
TCNICA:
Colocar en una gradilla muestras de distintos glcidos.
Aadir 5 gotas de Lugol en cada uno de los tubos de ensayo.
Observar los resultados.
Con este mtodo puede identificarse el almidn.
 PRACTICA N 5
RECONOCIMIENTO DE PROTENAS
Materiales de Laboratorio
3 huevos Acido Ntrico
Acido actico Sulfato cprico
Hidrxido de Sodio Acetato de Plomo
Las protenas, debido al gran tamao de sus molculas, forman con el agua soluciones coloidales. Estas
soluciones pueden precipitar con formacin de cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los
70C o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc.
La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por los agentes
indicados, que al actuar sobre la protena la desordenan por la destruccin de su estructura terciaria y
cuaternaria.
TCNICA
Para ver la coagulacin de las protenas se puede utilizar clara de huevo, para conseguir ms volumen puede
prepararse para toda la clase una dilucin de clara de huevo en agua, de forma que quede una mezcla an
espesa.
1. Colocar en un tubo de ensayo una pequea cantidad de clara de huevo.
2. Aadir 5 gotas de cido actico y calentar el tubo a la llama del mechero.
REACCIONES COLOREADAS
1. REACCION XANTOPROTEICA
Es debida a la formacin de un compuesto aromtico nitrado de color amarillo, cuando las protenas son
tratadas con cido ntrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas protenas con aminocidos
portadores de grupos bencnicos, especialmente en presencia de tirosina. Si una vez realizada la prueba se
neutraliza con un lcali vira a un color anaranjado oscuro.
TCNICA
1. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de solucin problema (clara de huevo).
2. Aadir 1 cc. de HNO3 concentrado.
3. Calentar al bao mara a 100: C..
4. Enfriar en agua fra
5. Aadir gota a gota una disolucin de sosa al 40%. (Hidroxido de Sodio)
2. REACCIN DE BIURET
La producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos, ya que se debe a la presencia del enlace
peptdico (- CO- NH -)que se destruye al liberarse los aminocidos.
Cuando una protena se pone en contacto con un lcali concentrado, se forma una sustancia compleja
denominada biuret, de frmula:

Que en contacto con una solucin de sulfato cprico diluida, da una coloracin violeta caracterstica.
TCNICA
1. Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3 cc. de albmina de huevo.
 2. Aadir 2cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%.
3. A continuacin 4 5 gotas de solucin de sulfato cprico diluida al 1%.
Debe aparecer una coloracin violeta-roscea caracterstica.
3. REACCIN DE AMINOCIDOS AZUFRADOS
Se pone de manifiesto por la formacin de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se basa esta reaccin
en la separacin mediante un lcali, del azufre de los aminocidos, el cual al reaccionar con una solucin de
acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo.
TCNICA
1. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de albmina de huevo (clara de huevo).
2. Aadir 2 cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%.
3. Aadir 10 gotas de solucin de acetato de plomo al 5%.
4. Calentar el tubo hasta ebullicin.
5. Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha formado sulfuro de plomo,
utilizndose el azufre de los aminocidos, lo que nos sirve para identificar protenas que tienen en su
composicin aminocidos con azufre.
 PRACTICA N 6
RECONOCIMIENTO DE LPIDOS
OBJETIVOS
Poner de manifiesto ciertas propiedades de los lpidos, algunas de las cuales pueden servirnos para su
identificacin.
Materiales de Laboratorio
Bao Mara. Mechero. Gradillas con tubos de ensayo. Vaso de precipitado con agua. Aceite vegetal,
Solucin de Sudn III en frasco cuentagotas. Tinta roja en frasco cuentagotas. Solucin de Hidrxido
sdico al 20%. ter o cloroformo
SAPONIFICACIN: Las grasas reaccionan en caliente con el hidrxido sdico o potsico descomponindose
en los dos elementos que la forman: glicerina y los cidos grasos. Estos se combinan con los iones sodio o
potasio del hidrxido para dar jabones, que son en definitiva las sales sdicas o potsicas de los cidos
grasos.
La reaccin es la siguiente:

TCNICA: Proceder de la siguiente forma:

1. Colocar en un tubo de ensayo 2cc de aceite vegetal y 2cc de una solucin de hidrxido sdico al 20%.
2. Agitar enrgicamente y colocar el tubo al bao Mara de 20 a 30 minutos.
3. Transcurrido este tiempo, se puede observar en el tubo tres capas: la inferior clara, que contiene la
solucin de sosa sobrante junto con la glicerina formada; la superior amarilla de aceite no utilizado, y la
intermedia, de aspecto grumoso, que es el jabn formado
Nota: Cuando ya se ha visto como se forma el jabn, se puede ir echando en un vaso de precipitado el
contenido de los tubos de ensayo, se remueve bien y se deja calentar hasta que se haga un buen trozo de
jabn.
TINCIN. Las grasas se colorean en rojo anaranjado por el colorante denominado Sudan III.
TCNICA. Proceder as:
1. Disponer en una gradilla dos tubos de ensayo, colocando en ambos 2cc de aceite.
2. Aadir a uno, 4 o 5 gotas de solucin alcohlica de Sudn III. Al otro tubo aadir 4-5 gotas de tinta roja.
Agitar ambos tubos y dejar reposar.
3. Se observar en el tubo al que se le aadi Sudn, que todo el aceite aparece teido. En cambio en el
frasco al que se aadi tinta roja, la tinta se habr ido al fondo y el aceita aparecer sin teir.
SOLUBILIDAD. Las grasas son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en
pequesimas gotitas formando una "emulsin" de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en
reposo, por reagrupacin de las gotitas de grasa en una capa que por su menor densidad se sita sobre la de
agua.
Por el contrario, las grasas son solubles en los llamados disolventes orgnicos como el ter, benceno, xilol,
cloroformo, etc.
TCNICA. Proceder de la siguiente manera:
1. Tomar dos tubos de ensayo y poner en cada uno de ellos 2-3 cc de agua y en el otro 2-3cc de ter u
otro disolvente orgnico.
2. Aadir a cada tubo 1cc de aceite y agitar fuertemente. Observar la formacin de gotitas o micelas y
dejar en reposo. Se ver como el aceite se ha disuelto en el ter y en cambio no lo hace en el agua, y
el aceite subir debido a su menor densidad.

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