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PROCESOS BIOLOGICOS

GUA DE PRCTICA DE
LABORATORIO

PROCESOS BIOLGICOS
EQUIPO DOCENTE:
Mori Castro, Jaime Alberto
jaime.mori@upnorte.edu.pe
PROCESOS BIOLOGICOS

UNIDAD I:
BASES QUMICAS DE LA VIDA: COMPUESTOS ORGNICOS E INORGNICOS
PRACTICA N 01
MATERIALES DE LABORATORIO

INTRODUCCIN
El contenido y volumen del manual de prcticas de laboratorio, corresponden al Programa de
enseanza del curso de "Procesos Biolgicos".
Se trata de una ciencia natural que ha ido forjando a travs del tiempo en una lucha constante
por conocer y transformar la naturaleza. En el proceso de su desarrollo, ha surgido una
diversidad de campos especializados dentro de los que destaca la gentica, con sus estudios del
genoma humano, la clonacin de animales, la terapia gnica y la transgnica.
Asimismo cabe destacar los estudios ecolgicos de contaminacin, tales como la lluvia cida, la
destruccin de la capa de ozono y el efecto de invernadero.
Sin embargo a pesar de su progresivo avance, muchas veces el conocimiento biolgico no est
al alcance de las mayoras y lo que es ms grave, no se orienta a solucionar los problemas
sociales ms apremiantes como el hambre, la destruccin y las enfermedades.
Siendo la Biologa una ciencia que se debe estudiar aplicando la teora con la parte prctica, se
ha elaborado esta gua de prcticas de laboratorio con prcticas que puedan ser tiles a los
estudiantes.

INSTRUCCIONES GENERALES
Para el desarrollo de las prcticas es conveniente tener en cuenta algunas normas elementales
que deben ser observadas con toda escrupulosidad.
1. Antes de realizar una prctica, debe leerse detenidamente para adquirir una idea clara
de su objetivo, fundamento y tcnica. Los resultados deben ser siempre anotados
cuidadosamente apenas se conozcan.
2. El orden y la limpieza deben presidir todas las experiencias de laboratorio. En
consecuencia, al terminar cada prctica se proceder a limpiar cuidadosamente el
material que se ha utilizado.
3. Cada grupo de prcticas se responsabilizar de su zona de trabajo y de su material.
4. Antes de utilizar un compuesto hay que fijarse en la etiqueta para asegurarse de que es
el que se necesita y de los posibles riesgos de su manipulacin; No devolver nunca a los
frascos de origen los sobrantes de los productos utilizados sin consultar con el profesor;
No tocar con las manos y menos con la boca los productos qumicos.
5. Todo el material, especialmente los aparatos delicados, como lupas y microscopios,
deben manejarse con cuidado evitando los golpes o el forzar sus mecanismos.
6. Los productos inflamables (gases, alcohol, ter, etc.) deben mantenerse alejados de las
llamas de los mecheros. Si hay que calentar tubos de ensayo con estos productos, se
har al bao Mara, nunca directamente a la llama. Si se manejan mecheros de gas se
debe tener mucho cuidado de cerrar las llaves de paso al apagar la llama.
7. Cuando se manejan productos corrosivos (cidos, lcalis, etc.) deber hacerse con
cuidado para evitar que salpiquen el cuerpo o los vestidos. Nunca se vertern
bruscamente en los tubos de ensayo, sino que se dejarn resbalar suavemente por su
pared.
8. Cuando se vierta un producto lquido, el frasco que lo contiene se inclinar de forma que
la etiqueta quede en la parte superior para evitar que si escurre lquido se deteriore
dicha etiqueta y no se pueda identificar el contenido del frasco.
9. No pipetear nunca con la boca. Se debe utilizar la bomba manual, una jeringuilla o
artilugio que se disponga en el Centro.
10. Las pipetas se cogern de forma que sea el dedo ndice el que tape su extremo superior
para regular la cada de lquido.
11. Al enrasar un lquido con una determinada divisin de escala graduada debe evitarse el
error de paralaje levantando el recipiente graduado a la altura de los ojos para que la
visual al enrase sea horizontal.
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12. Cuando se calientan a la llama tubos de ensayo que contienen lquidos debe evitarse la
ebullicin violenta por el peligro que existe de producir salpicaduras. El tubo de ensayo
se acercar a la llama inclinada y procurando que sta acte sobre la mitad superior del
contenido y, cuando se observe que se inicia la ebullicin rpida, se retirar, acercndolo
nuevamente a los pocos segundos y retirndolo otra vez al producirse una nueva
ebullicin, realizando as un calentamiento intermitente. En cualquier caso, se evitar
dirigir la boca del tubo hacia la cara o hacia otra persona.
13. Cualquier material de vidrio no debe enfriarse bruscamente justo despus de haberlos
calentado con el fin de evitar roturas.
14. Los cubreobjetos y portaobjetos deben cogerse por los bordes para evitar que se
engrasen.

MATERIALES DE LABORATORIO
Los materiales y equipos constituyen la principal herramienta en el laboratorio, su nmero y
variedad es grande, segn el tipo y prueba a realizar. Los materiales para ser considerados de
calidad, deben cumplir ciertos requisitos y condiciones, como son: construidos con insumos de
calidad, neutro, resistente a la accin mecnica y a los cambios de temperatura entre otros
factores. Los equipos son elaborados en acero inoxidable y son de mucha utilidad en los
laboratorios.
OBJETIVO
Conocer el uso y manejo de los materiales y equipos del laboratorio de biologa.
MATERIALES
Mascarilla
Guantes de ltex
Materiales de laboratorio
PROCEDIMIENTO
Observe y reconozca los materiales y equipos de laboratorio
Materiales de vidrio
En el laboratorio de biologa, el material de vidrio constituye una de las principales herramientas
de trabajo. Existe una gran variedad de acuerdo a las necesidades de cada laboratorio. Como
requisito general el material de vidrio debe ser: de buena calidad, ya que estos son sometidos a
repetidas esterilizaciones, ser transparentes, de superficie lisa, sin ralladuras, contener una
mmica cantidad de lcali libre, tener bajo coeficiente de dilatacin.
Tubos de prueba o ensayo
Son de vidrio neutro, de paredes gruesas y con reborde para facilitar el taponamiento. Si son
con tapa rosca, debe ser tambin de vidrio neutro. Los tubos de centrfuga, las medidas son
variadas desde 10 cc. a 250 cc. Graduadas al cm. o mm; Pueden ser cnicos o cilndricos y
siempre de paredes gruesas.
Placas Petri
Compuestas de dos cristalizadores, el mas grande hace de tapa. Los ms usados son de 10 x
100, 20 x 100 y se emplean para el cultivo y aislamiento de grmenes. Existen tambin con
divisiones internas de dos y cuatro compartimientos.
Pipetas
Se utilizan las serolgicas y volumtricas. Las pipetas serolgicas, son terminales y con
capacidad de 0.1 a 25 ml. Se emplean para dispensar lquidos en pequeos volmenes. Las
pipetas volumtricas, se reconocen por presentare una dilatacin bulbosa central con una marca
de aforamiento impreso en el extremo proximal angosto de la pipeta. Son utilizadas para llenar
medios de cultivo en tubos, placas petri y frascos. Se les conoce tambin como pipetas de bola,
la capacidad volumtrica de estas pipetas estn comprendidas entre 10 y 100ml.
Matraces Erlenmeyer
Recipientes volumtricos de gran utilidad para la preparacin y almacenamiento de soluciones,
colorantes y reactivos, medios de cultivo y otros. La calidad debe ser la misma recomendada en
los requisitos generales.
Fiolas
Su forma es semejante a los balones, estn calibrados a medidas exactas mediante un aforo en
la parte media del cuello, en el que se indica la medida. Poseen tapa de vidrio esmerilado y de
plstico. Se emplea para la preparacin de soluciones valoradas.
Kitazato
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Es un matraz que posee una tubuladura costa lateral, y sirve para hacer vaco. Se utiliza como
complemento del equipo de filtracin.
Probetas
Son recipientes cilndricos con base para su estabilidad, sus paredes son de un mayor dimetro
comparado con los materiales indicados anteriormente. Tienen graduaciones y pueden venir con
o sin tapa. Se utilizan para medir soluciones. Su capacidad vara desde 25 ml. hasta 2500 ml.
Beakers o Vasos de Precipitacin
Recipientes cilndricos y cortos con una escotadura (pico) en uno de los mrgenes, su utilidad es
muy amplia. Se fabrica de varias medidas, muy comunes para facilitar la mezcla de una
solucin, el vidrio debe ser resistente al calor.
Materiales de Metal y otros
Trpodes
Son de metal, sobre estos se colocan una malla cuadrada cubierta en el centro con varias capas
de asbesto. Sirven para colocar envases que van a calentarse o slo como soporte.
Esptulas de metal
Son de acero inoxidable y sirven para transferir sustancias en polvo, cuando se pesan para su
preparacin.
Mecheros de Bunsen
Son de metal, con una rueda corrediza en la parte baja del tubo, que sirve para regular la
intensidad de la llama.
Gradillas
Pueden ser de alambre metlico, madrera, acero inoxidable o plastificadas, estas ltimas son las
ms recomendadas. Sirven para colocar los tubos de prueba de diferentes dimensiones.
Equipos
Balanzas de precisin
La sensibilidad de una balanza es la masa ms pequea que puede pesar con precisin. Pueden
ser digitales o mecnicas.
Centrfugas
Son equipos que sirve para separa dos fase de diferentes densidades con la finalidad de
separarlas. Su velocidad se mide en revoluciones por minuto rpm.
Incubadora
Esta provista de un calentador que nos permite obtener temperaturas entre 25 a 100C., es
controlada mediante un termmetro. Sirve para mantener una temperatura constante de un
producto que se quiere preparar.
Autoclave
Este equipo sirve para esterilizar los materiales que son usados en microbiologa o que por su
uso requieren estar libres de grmenes patgenos.
Se basa en el uso del vapor de agua sobrecalentado y a presin lo que permite que la
temperatura suba hasta los 200 a 250 C.
CONCLUSIONES

CUSTIONARIO
1. Qu diferencias existe entre una pipeta serolgica y una pipeta volumtrica?
2. Qu tipo de frascos son recomendados para guardar reactivos?
3. Dibuje los materiales y equipos observados.
PRECAUCIONES EN EL DESARROLLO DE CADA EXPERIMENTO
Las medidas oportunas y la comprensin de las prcticas a seguir harn del laboratorio un lugar
seguro como cualquiera saln de clases. Para ello debern tenerse en cuenta en forma general.
Las siguientes precauciones:

1. Observa dnde dejas el material caliente cerciorndote de que est frio antes de tomarlo
con la mano
2. Cuando caliente un tubo de ensayo, no lo apuntes haca ti o hacia tus compaeros, puede
proyectarse su contenido.
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3. Si cae sobre ti o en tu ropa un material corrosivo, lvate inmediatamente con agua


abundante y llama al docente.
4. Al detectar el olor de un lquido, no pongas la cara sobre la boca del recipiente. Con tu mano
abanica hacia ti el aroma
5. Antes de usar un reactivo, lee dos veces la instruccin de la hoja de trabajo
6. Los aparatos o recipientes en los que haya desprendimientos gaseosos no deben cerrarse
hermticamente, pues las presiones formadas en su interior pueden explotarlo
7. Los tubos de ensayo no deben calentarse por el fondo sino por las paredes, para evitar la
expulsin de su contenido.
8. No arrojes cuerpos slidos en los lavatorios, a menos que estn pulverizados y sean
fcilmente arrastrables o solubles en agua. No viertas directamente los cidos en los
lavatorios, ya que los corroe
9. Cuando interrumpas un experimento, coloca etiquetas con leyendas apropiadas a los frascos
y matraces que contengan sustancias, as te ser fcil identificarlos
10. Cuando trabajes con fuego, mantn tu cabello recogido para evitar se incendie.
11. Cuando necesites encender el mechero, nunca lo hagas con un papel, puede iniciar un
incendio.
12. El docente indicar el uso adecuado y la ubicacin de las instalaciones de agua, luz, drenaje,
gas y otras que existen en el laboratorio.

Actividad: Los estudiantes debern realizar


un croquisREGLAMENTO
de dichas instalaciones.
INTERNO
1. Tendrn derecho el acceso y uso del laboratorio nicamente los
estudiantes que estn matriculados en el curso o las personas
debidamente autorizadas por la Direccin.
2. Los estudiantes respetarn durante todo el periodo de prcticas el horario que tengan
asignado.
3. No se permitir la entrada al laboratorio si el estudiante no se presenta con su bata.
4. En ningn caso el estudiante podr sustraer del laboratorio, aparatos o materiales sin la
autorizacin respectiva por escrito.
5. Es obligacin de los estudiantes conservar en buen estado las instalaciones, materiales y
equipos del laboratorio, as como mantenerlo aseado, depositando la basura en los tachos
seleccionadores, que para tal efecto existen.
6. Cada equipo de trabajo se har responsable del material recibido, deber ser revisado de
inmediato y reportar cualquier anomala o desperfecto al docente.
7. Es obligacin del estudiante entregar al responsable del laboratorio el material y equipo
usado, limpio y en buen estado, 5 minutos antes del trmino de la sesin de prctica.
8. El material o equipo que se deteriore o se pierda ser repuesto por los responsables en un
plazo no mayor de 5 das hbiles, de lo contrario se perder el derecho de uso de
laboratorio.
9. Sin excepcin de persona, est prohibido fumar e ingerir alimentos y bebidas en el interior
del laboratorio.
10.Los estudiantes que muestren indisciplina dentro del laboratorio, sern sancionados de
acuerdo a la gravedad de su falta, ya que este tipo de conducta puede originar un accidente,
las situaciones no previstas en este reglamento, sern resueltas por el respectivo
Departamento Acadmico.
Procesos Biolgicos

NORMAS DE LABORATORIO PARA EL CURSO DE PROCESOS BIOLGICOS


Las normas de laboratorio que se presentan a continuacin han sido desarrolladas para velar
por tu seguridad y para su mejor aprovechamiento del laboratorio. Evala cada premisa y firma
al final una hoja que te proveer el docente como evidencia de que se ha discutido en el
laboratorio las reglas de seguridad.
REGLA COMO NOS BENEFICIA ESTA REGLA
1. Se puntual, ausencias y tardanzas afectan tu
nota
2. No se permite el uso de celulares durante el
periodo de laboratorio. Los telfonos celulares
tienen que ser ajustados de manera tal que no
emitan ruidos durante el periodo de laboratorio.
3. Ya que en este laboratorio se utilizan aguas
estancadas, lquidos preservadores de animales
y otros compuestos, tienes que presentarte con
una bata de laboratorio, adems de vestir
calzado cerrado.
4. No hablars en voz alta; no te sentars en la
mesa del laboratorio; no fumars ni ingerirs
alimentos dentro del laboratorio; no te
maquillars en el laboratorio.
5. Las visitas al laboratorio de otros estudiantes
no matriculados en el curso estn
terminantemente prohibidas.
6. Los juegos de mano estn prohibidos en el
laboratorio.
7. Cuando no ests utilizando las sillas
mantenlas bajo la mesa.
8. En los fregaderos no puedes descartar
desperdicios slidos. Usa el tacho.
9. Reporta cualquier avera (tomas de agua,
electricidad, microscopios.) que se presente en
el laboratorio.
10. Si rompes un envase o instrumento de
cristal, recoge los vidrios con cuidado y notifica
de inmediato a tu profesor. Los vidrios y
cristales se rotos se colocan en un envase de
desperdicios especial que se encuentra al fondo
del saln y no en cualquier tacho de basura.
11. De sufrir alguna cortadura o algn accidente
debes comunicrselo al profesor encargado
inmediatamente.
12. Al finalizar el laboratorio colocars el
microscopio en su lugar de la manera indicada
por el profesor. No lo debes dejar sobre la mesa.
13. Al terminar tu ejercicio de laboratorio
verifica que toda el rea y equipo de laboratorio
est limpio y organizado.
14. Las computadoras son para el beneficio de
los estudiantes y facultad del curso. No mutiles
ni juegues con tu equipo.
15. Identifica el equipo de seguridad (extintores,
mantas y otros) presente en el laboratorio.
16. Toma las medidas necesarias para evitar el
contagio de la gripe AH1N1.
Qu puedes concluir de esta actividad de laboratorio?

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Procesos Biolgicos

REGLAS DE APRENDIZAJE COLABORATIVO PARA BIOLOGA


Objetivos: Se pretende cambiar la tradicional clase pasiva donde el estudiante es meramente
un recipiente de informacin dada por el profesor, a una experiencia educativa cooperativa.
Las reglas para la implementacin de esta estrategia de enseanza son las siguientes:
1. La seleccin de los integrantes de los grupos ser tomando en cuenta la igualdad de sexo,
ndice acadmico, grupos de no ms de cinco (5) personas.
2. Se levantar la mano cada vez que el profesor lo haga ya que esto significar que el profesor
desea la atencin de todos los estudiantes. Los estudiantes debern en ese momento dejar
de hacer todo cuanto estn realizando para atender las instrucciones o informacin que se
est ofreciendo.
3. Al comenzar cada clase se formularn preguntas escritas u orales sobre el tema a desarrollar
con el objeto de evaluar el nivel de conocimientos de cada uno de los estudiantes. La
aprobacin de esta evaluacin es obligatoria para poder realizar la respectiva clase prctica.
4. Cdigo de Cooperacin entre los integrantes del grupo:
a. Cada miembro del grupo es responsable del xito de su grupo.
b. Una vez nombrado el grupo no hay marcha para atrs.
c. Se deber escuchar, respetar y considerar las contribuciones de cada miembro del
grupo.
d. Se deber criticar constructivamente las ideas, NO LAS PERSONAS.
e. Debern ir al grano evitando ancdotas y/o ejemplos extensos.
f. Nadie tiene un rango superior que otro en el grupo. No habr lderes de grupo.
g. Cuando haya una queja de un compaero, el grupo lo debe de discutir.
h. Cuando se trabaje individualmente dentro del grupo, cada miembro tendr que saber
y conocer el procedimiento y resultados de los mismos.
i. Al momento de finalizar la tarea, la misma debe ser firmada por aquellos miembros
del grupo que participaron activamente en el ejercicio. Aqul que no particip o
que no est claro con el tema discutido en el ejercicio o actividad, no deber firmar
el informe. Si lo firma es responsable de lo que suceda con el grupo a la hora de la
evaluacin. Los siguientes son ejemplos de mtodos de evaluacin:
*Como el estudiante al firmar el documento certifica que domina el material en cuestin, se
tomar a uno de los integrantes del grupo y se le har una pregunta con un valor determinado
la cual contestar oralmente al momento. Si el integrante no contesta correctamente la
contestacin TODO EL GRUPO perder la puntuacin.
*En otras ocasiones se ofrecern pruebas cortas individuales para el grupo y slo se corregir
una de las pruebas. Si la prueba corregida es de un estudiante que firm como que sabe el
material, ser responsable de la nota grupal sea sta Excelente, Buena, Regular, Deficiente, o
Reprobado.
j. El estudiante desarrollar estrategias para ayudar a sus compaeros de grupo que no
tengan claro algn concepto. Adems desarrollar comunicacin, aprendizaje
extendido, etc.
k. Se entender que aquellos miembros que firmen la hoja de trabajo son aquellos
miembros del grupo que entienden y dominan el material discutido. Para esto
debern leer el manual o material asignado antes de la clase. Esto ayudar
significativamente a su aprovechamiento.
l. Se har un trabajo grupal sobre un tema asignado el cual ser presentado frente a
la clase, las instrucciones sobre los trabajo se ofrecern en su momento.
m. La nota de laboratorio ser tomando en consideracin lo siguiente:
Desenvolvimiento individual
Desenvolvimiento grupal
Evaluacin entre compaeros
n. La gramtica ser tomada en consideracin al momento de evaluar trabajos escritos.
Escribir en oraciones completas y sintaxis correcta. Seguir instrucciones ser
indispensable.

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Procesos Biolgicos

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Procesos Biolgicos

PRACTICA N 02
MICROSCOPIA
Un microscopio simple (de un lente o varios lentes), es un instrumento que amplifica una
imagen y permite la observacin de mayores detalles de los posibles a simple vista. El
microscopio ms simple es una lente de aumento o un par de anteojos. El poder de resolucin
del ojo humano es de 0,2 mm es decir que para ver dos objetos separados estos deben estar
como mnimo a esa distancia. El microscopio aumenta la imagen hasta el nivel de la retina, para
captar la informacin. La resolucin depende de la longitud de onda de la fuente luminosa, el
espesor del espcimen, la calidad de la fijacin y la intensidad de la coloracin. Tericamente la
mxima resolucin que se puede alcanzar es de 0,2 um dada por una luz con longitud de onda
de 540 nm, la cual pasa por un filtro verde (muy sensible por el ojo humano) y con objetos
condensadores adecuados. El ocular aumenta la imagen producida por el objetivo, pero no
puede aumentar la resolucin. Existen distintos microscopios pticos generales y de
investigacin que se diferencian en factores tales como la longitud de onda de la iluminacin del
espcimen, la alteracin fsica de la luz que incide en la muestra y procesos analticos que se
aplican a la imagen final.
OBJETIVO
Conocer las partes del microscopio y sus funciones
Adquirir habilidad y destreza en el manejo del microscopio
Realizar observaciones con este instrumento
MATERIALES
microscopios compuestos
Estereoscopios
Lminas porta y cubre objetos
Servilletas de papel
Muestras
Goteros
PROCEDIMIENTO
Mediante explicaciones y observaciones de figuras, reconozca las partes del microscopio.
Durante el trabajo debe aplicar correctamente el uso y manejo del microscopio y estereoscopio,
para el cuidado es importante su limpieza despus del uso, son hbitos que contribuyen a la
buena conservacin de estos equipos.
PARTES DEL MICROSCOPIO
1. Parte Mecnica
- SOPORTE: Mantiene la parte ptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo.
- PLATINA: Lugar donde se deposita la preparacin.
- CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular,
- REVLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los
objetivos.
- TORNILLOS DE ENFOQUE: Micromtrico que aproxima el enfoque y micromtrico que
consigue el enfoque correcto.
2. Parte ptica
- OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Ampla la imagen del objetivo.
- OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparacin. Ampla la imagen de sta.
- CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin.
- DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
- FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador
CARACTERSTICAS DE LA VISIN CON EL MICROSCOPIO
1. Grado de Aumento
Es la magnificacin total que sufre la imagen del objeto. Se obtiene multiplicando el nmero de
veces que aumenta el lente ocular por el nmero de veces que aumenta el lente del objetivo. Si
el objetivo aumenta la imagen de un objeto 40 veces, sta al pasar por la lente ocular ser
nuevamente aumentada. Si el ocular aumenta 10 veces la magnificacin total en este caso ser:
40X x 10X = 400x.
Este resultado permite, saber cuntas veces ms grande estamos viendo la imagen de un
objeto.

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Procesos Biolgicos

2. Poder de Resolucin
Es la posibilidad de distinguir separados dos puntos muy cercanos entre s. Cuando mayor sea el
poder de resolucin, menor ser la distancia entre dos puntos a la cual pueden distinguirse
como tales. La distancia lmite en la cual dos puntos pueden ser todava distinguibles se
denominan lmite de resolucin. El poder de resolucin de un microscopio compuesto depende
de la longitud de onda de la fuente luminosa y de la apertura numrica (propiedad ptica de la
lente). Este puede ser calculado mediante la siguiente frmula:
DLR = 0.61 X / A.N.
Donde:
DLR = Distancia lmite de resolucin
X = Longitud de onda de la fuente luminosa
A.N. = Apertura numrica de la lente
Existe una correspondencia entre el aumento de un objeto y su apertura numrica de tal modo
que las lentes con mayores aumentos generalmente tendrn mayores aperturas numricas. El
poder de resolucin es quizs la caracterstica ms importante de un buen microscopio ya que
de nada sirve una imagen muy grande del objeto si est se ve borrosa y no pude distinguirse en
sus detalles.
3. Distancia de Trabajo
Es la distancia que existe entre el objeto en observacin y el lente objetivo. Esa distancia es
caracterstica y constante para cada lente.
MANEJO DEL MICROSCOPIO PTICO
1. Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina
completamente. Si el microscopio se recogi correctamente en el uso anterior, ya debera
estar en esas condiciones.
2. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas.
3. Comenzar la observacin con el objetivo de 4x (ya est en posicin) o colocar el de 10
aumentos (10x) si la preparacin es de bacterias.
4. Para realizar el enfoque:
a. Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo
macromtrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a travs del ocular, ya que
se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparacin pudindose daar alguno de
ellos o ambos.
b. Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la
preparacin con el macromtrico y, cuando se observe algo ntido la muestra, girar el
micromtrico hasta obtener un enfoque fino.
5. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser suficiente
con mover un poco el micromtrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se
perdi por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y
repetir la operacin desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la
preparacin y por ello es fcil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la
preparacin si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite de
inmersin si se observa una preparacin que ya se enfoc con el objetivo de inmersin.
6. Empleo del objetivo de inmersin:
a. Bajar totalmente la platina.
b. Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que nos indica la
zona que se va a visualizar y donde habr que echar el aceite.
c. Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio camino entre ste y el
de x40.
d. Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz.
e. Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo de inmersin.
f. Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la
gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la
lente.
g. Enfocar cuidadosamente con el micromtrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de
inmersin y la preparacin es mnima, aun menor que con el de 40x por lo que el riesgo
de accidente es muy grande.
h. Una vez se haya puesto aceite de inmersin sobre la preparacin, ya no se puede volver
a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se manchara de aceite. Por tanto, si desea
enfocar otro campo, hay que bajar la platina y repetir la operacin desde el paso 3.

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Procesos Biolgicos

i. Una vez finalizada la observacin de la preparacin se baja la platina y se coloca el


objetivo de menor aumento girando el revlver. En este momento ya se puede retirar la
preparacin de la platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersin en posicin
de observacin.
j. Limpiar el objetivo de inmersin con cuidado empleando un papel especial para ptica.
Comprobar tambin que el objetivo 40x est perfectamente limpio.

RESULTADOS
1. Seale las partes de los microscopios en los esquemas

Vista de frente
2. Hallar el poder de resolucin de cada uno de los objetivos de su microscopio, considerando
que la longitud de onda de la luz verde es 5,50 A y llene el siguiente cuadro:

OCULAR OBJETIVO GRADO DE DISTANCIA DE DISTANCIA


AUMENTO RESOLUCIN DE TRABAJO

3. Observacin de muestras:
Muestra 01: Lminas fijas

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Procesos Biolgicos

X
Observacin: describa lo que observa
Muestra 02: Gota de agua estancada

X
Observacin: describa lo que observa
CONCLUSIONES:

CUESTIONARIO
a. Problema N01: La distancia entre dos hongos del levaduras del gnero Saccharomyces es
de 5,161 A, valor que concuerda con la distancia lmite de resolucin del mayor aumento.
Cul es el grado de aumento total que se obtiene con este lente?
b. Cul es la apertura numrica de este lente?

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Procesos Biolgicos

PRACTICA N 03
MTODO CIENTFICO

El mtodo cientfico est sustentado por dos pilares fundamentales. El primero de ellos es la
reproducibilidad, es decir, la capacidad de repetir un determinado experimento en cualquier
lugar y por cualquier persona. Este pilar se basa, esencialmente, en la comunicacin y
publicidad de los resultados obtenidos. El segundo pilar es la falsabilidad. Es decir, que toda
proposicin cientfica tiene que ser susceptible de ser falsada (falsacionismo). Esto implica que
se pueden disear experimentos que en el caso de dar resultados distintos a los predichos
negaran la hiptesis puesta a prueba. La falsabilidad no es otra cosa que el modus tollendo
tollens del mtodo hipottico deductivo experimental. Segn James B. Conant no existe un
mtodo cientfico. El cientfico usa mtodos definitorios, mtodos clasificatorios, mtodos
estadsticos, mtodos hipottico-deductivos, procedimientos de medicin, etctera.
OBJETIVO
- Practicar la tcnica sobre la observacin cientfica
MATERIALES
- Una hoja de una planta vegetal
- Un insecto
- Un piedra
PROCEDIMIENTO
MUESTRA 01 : Hoja vegetal
Preparacin : Realice observaciones de una hoja vegetal
Observaciones : Dibuje la hoja, seale sus partes y anote como mnimo 30
observaciones
MUESTRA 02 : Insecto
Preparacin : Realice las observaciones del insecto
Observaciones : Dibuje el insecto, seale sus partes y anote como mnimo 30
observaciones
MUESTRA 03 : Piedra
Preparacin : Realice las observaciones de la piedra
Observaciones : Dibuje la piedra, seale sus partes y anote como mnimo 30
observaciones
CONCLUSIONES

CUESTIONARIO
1. De todas lo que ha anotado diga cuales cree que no son observaciones.
2. Cmo podra definir que es una observacin?
3. Por qu cree que son importantes las observaciones?
4. Cmo debe ser una buena observacin?
5. Qu diferencia existe entre la observacin y la interpretacin?

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Procesos Biolgicos

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Procesos Biolgicos

PRACTICA N 04
CLULAS VEGETALES

El termino clula fue aplicado por primera vez por Robert Hooke en 1665, actualmente es
aceptado como la unidad bsica, morfolgica y funcional de todo organismo, adems de
presentar la unidad fundamental en cuanto a origen, dado que todo organismo procede de una
clula nica. La clula vegetal tpica presenta como partes principales: el protoplasto y la
pared celular.
OBJETIVOS
Reconocer los organelos caractersticos de la clula vegetal
Reconocer las principales componentes no protoplasmticos o sustancias ergsticas de la
clula vegetal.
MATERIALES
Hoja de yuyo
Harina de yuca y maz
Fruto rojo de rocoto, Capsicum pubescens
Corcho
Frutos de aceituna, Olea europea
PROCEDIMIENTO
ORGANELOS TPICAMENTE VEGETALES: PLASTIDIOS
MUESTRA 01 : Cloroplastos en yuyo
Preparacin : Coloque una hoja con una gota de agua en el porta objetos
Observaciones : Los cloroplastos se observan como corpsculos esfricos de color
verde dentro de la clula.

MUESTRA 02 : Cloroplastos en Capsium pubescens rocoto


Preparacin : Realice un corte superficial del mesocarpio del fruto, coloque en el
porta objetos con una gota de agua
Observaciones : Los cloroplastos se observan como corpsculos esfricos de
tonalidad rojo-amarillo.

MUESTRA 03 : Pared celular del corcho

15
Procesos Biolgicos

Preparacin : Realice un corte superficial de un trozo de corcho, coloque en el


porta objetos con una gota de agua
Observaciones : Pared celular, canalculos, lmina media y lmen.

MUESTRA 04 : Acumulacin de almidn en leucoplastos (Inclusiones inertes en


plastidios) Harina de Manihot esculenta yuca y Zea mays maiz.
Preparacin : Coloque una gota de agua en el portaobjeto, agregue la menor
cantidad de harina posible.
Observaciones : Observe la disposicin de los leucoplastos.
Yuca Maz

X X

MUESTRA 05 : Grasa y aceites en el mesocarpio de la Olea europea aceituna


Preparacin : Coloque una pequea porcin del pericarpio de la aceituna sobre el
portaobjeto, coloque el cubreobjetos y presione suavemente.
Observaciones : Observe las gotas de grasa y aceite.

16
Procesos Biolgicos

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO
1. Dibujo de una clula vegetal y sus partes.
PRACTICA N 05
CLULA ANIMAL
La clula es la unidad biolgica, anatmica, gentica y fisiolgica de los seres vivos. Todos los
seres vivos estn constituidos por una o varias clulas. En los organismos superiores las clulas
que los conforman se organizan en menor o mayor grado, constituyendo: tejidos, rganos y
sistemas altamente especializados. La clula animal no presenta cloroplastos ni pared celular.

OBJETIVOS
Identificar la clula animal
Reconocer las estructuras propias de la clula animal.
MATERIALES
Lmina portaobjetos y cubreobjetos
Baja lengua
Lanceta
Colorante Wright
Aceite de cedro
Algodn
Alcohol medicinal 500 ml.
Un Sapo o Rana
PROCEDIMIENTO
MUESTRA 01 : Mucosa o epitelio bucal
Preparacin : Con el borde de un baja lenguas, realice un raspado de la mucosa bucal y
coloque en el centro de portaobjeto, en la que previamente se ha puesto
gota de suero fisiolgico. Agregar una gota de lugol o azul de metileno.
Observaciones: Reconozca la forma del ncleo y aspecto del Citoplasma.
MUESTRA 02 : Sangre capilar
Preparacin : Obtenga 1 o 2 gotas de sangre, realice un frotis sanguneo. Deje secar a
medio ambiente. Cubrir la extensin con unas gotas de colorante Wrigt.
Dejar en reposo durante 1 a 2 minutos, agregar sobre el colorante la
misma cantidad de agua destilada y mezclar rpidamente. Dejar reposar
la mezcla por 10 minutos, lavar con agua corriente, secar a la
temperatura ambiente. Observar en el microscopio con el objetivo de
menor aumento y luego con el de inmersin. (100X)
Observaciones : Clulas sanguneas: eritrocitos, leucocitos y plaquetas.
Eritrocitos Leucocitos

X X

Leucocitos Plaquetas

17
Procesos Biolgicos

X X

MUESTRA 03 : Grasa animal


Preparacin : Con el bistur, cortar una capa fina de grasa, colocarla en un portaobjeto
y cubrirla con una gota de formol; dejar actuar por 4 minutos, lavar la
muestra con agua y cubrirla con unas gotas de sudn III. Dejar actuar
unos 5 minutos. Volver a lavar la preparacin con agua, cubrirla con un
cubreobjetos y observar al microscopio
Observaciones : Clulas adiposas.

MUESTRA 03 : Ovarios de vertebrados (peces o anfibios)


Preparacin : Sobre una lmina portaobjetos, colocar una gota de suero fisiolgico,
con la ayuda de una pinza extraer una porcin de huevos del ovario de
un pez o anfibio, colocarlo sobre la lmina portaobjetos disgregndolos
unos a otros. Colocar una lmina cubreobjetos, observar al microscopio
Observaciones : vulos de los vertebrados.

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO
1. Qu diferencia morfolgica puede notar entre las clulas observadas?
2. Qu diferencia existe entre: rgano, organelo y organismo?
3. Dibujar una clula animal y considere sus partes

18
Procesos Biolgicos

NOMBRE DE UNIDAD II: CLULA, ENERGA Y METABOLISMO CELULAR


PRACTICA N 06
MITOSIS
En todos los organismos vivos, el ciclo celular est caracterizado por una serie de eventos que
conducen a la duplicacin de los constituyentes celulares para mantenimiento y la evolucin.
Los eventos ms importantes que se presentan en el ciclo celular son: la interfase y la divisin
celular. La interfase es el momento del crecimiento celular, sntesis de ADN y preparacin para
la divisin. La divisin celular es el periodo en el que la clula se divide por mitosis y da lugar a
clulas hijas idnticamente iguales a la clula madre en constitucin cromosmica.
La divisin celular mittica se divide en cuatro fases: profase, metafase, anafase y telofase; sta
ltima relacionada con la citocinesis celular. Estas fases de la mitosis se inician con el final del
periodo interfsico y terminan con el inicio de una nueva interfase.

OBJETIVO
Reconocer las etapas del ciclo celular en las clulas meristemticas de la raz de Allium
cepa cebolla
MATERIALES
Luna de reloj
Solucin de orcena actica clorhdrica al 2% (colorante)
Pinzas metlicas
Microscopio compuesto
Papel filtro
Cebolla enraizada
Hoja de bistur
Fsforos
Mechero de alcohol
Lmina porta y cubreobjeto

PROCEDIMIENTO
MUESTRA 03 : Ovarios de vertebrados (peces o anfibios)
Preparacin : Sobre una lmina portaobjetos, colocar una gota de suero fisiolgico, con
la ayuda de una pinza extraer una porcin de huevos del ovario de un pez
o anfibio, colocarlo sobre la lmina portaobjetos disgregndolos unos a
otros. Colocar una lmina cubreobjetos, observar al microscopio
MUESTRA 01 : Races frescas de cebolla
Preparacin : Escoja un bulbo de cebolla fresca, quiete las races y fibras secas. De la
base del bulbo. Deje la cebolla en un recipiente con agua (solo la base
debe tocar la superficie del agua) por un periodo de 3 a 4 das para que
desarrollen races. Con un bistur, corte la mitad inferior de la punta de la
raz y colquela en una luna de reloj. Agregue suficiente colorante para
cubrir la raz y unas gotas de cido clorhdrico 1N. Caliente suavemente
sobre el mechero la preparacin, hasta que salga el primer vapor. El
colorante no debe hervir, retire la luna de reloj y espere a que se enfre.
Evite inhalar vapores. Repita el paso 5 varias veces por un perodo de 20
a 25 minutos. Coloque la raz coloreada en la lmina portaobjeto y realice
un corte de un milmetro en el extremo apical, deseche el resto y agregue
una gota de colorante fresco. Despedazar la muestra con la ayuda de una

19
Procesos Biolgicos

aguja de diseccin. Colocar una lmina cubreobjeto sobre la muestra y


absorber sin hacer presin el exceso de colorante con un papel filtro.
Haciendo uso de un lpiz que tenga borrador en uno de sus extremos,
golpear suavemente sobre el tejido, cuidando de no mover la lmina
cubreobjetos. Cubrir la preparacin con una hoja de papel filtro y hacer
presin con el dedo pulgar sobre el cubreobjetos, teniendo cuidado de no
producir ningn movimiento lateral del cubreobjeto.
Observacin : La preparacin en el microscopio de menor a mayor aumento (inmersin).
Identifique las clulas meristemticas. Identifique y esquematice las
clulas en las diferentes fases de la mitosis

FASES DE LA MITOSIS

20
Procesos Biolgicos

PROFASE METAFASE

X .X

ANAFASE TELOFASE

.X .X

CUESTIONARIO
1. Enumere las caractersticas de las clulas meristemticas
2. Indicar las diferencias entre la mitosis de las clulas vegetales y las clulas animales.
3. Indicar la importancia gentica de la mitosis
4. Por qu es importante que cada clula resultante de la mitosis reciba exactamente la
misma cantidad de material nuclear?
5. Por qu los cromosomas son visibles durante la interfase?

21
Procesos Biolgicos

PRACTICA N 07
DIFUSIN Y OSMOSIS EN CLULAS VEGETALES

Difusin es un fenmeno mediante el cual las molculas de varios fluidos situados en un mismo
recinto, debido a su movimiento continuo, tiende a formar una mezcla homognea. La osmosis
es la difusin de un lquido a travs de una membrana semipermeable que separa dos
diluciones que poseen concentraciones diferentes. Rn la osmosis el flujo de las molculas del
disolvente es el de la disolucin menor concentracin (hipotnica) a la de mayor concentracin
(hipertnica) y tiende a igualarlas (es decir hacerlas isotnicas). Los procesos de osmosis
intervienen de modo decisivo en la regulacin del equilibrio hdrico del organismo.
OBJETIVOS
Observar las caractersticas del proceso de difusin.
Conocer el proceso de osmosis.
MATERIALES
Lugol, Azul de metileno, Solucin de glucosa al 1%, Cloruro de Sodio
Almidn, Agua destilada, Algas del gnero Spirogyra
Tubo de desprendimiento de 10 cm., Papel celofn, Frascos de boca ancha, Ligas de jebe,
Permanganato de potasio, Azcar, Papa
Palitos mondadientes, Cronmetro
PROCEDIMIENTO

MUESTRA 01 : agua y azul de metileno


Preparacin : Llenar agua en 10 probetas con los siguientes volmenes: 2, 4, 6, 8,
10, 14, 16, 18 y 20 ml. A cada probeta agregar una gota de azul de
metileno, en cada caso cronometrar el tiempo que tarda el
colorante en difundirse hasta teir homogneamente el agua.
Observacin : Velocidad de difusin en los diferentes tiempos. Con los datos de
volumen y tiempo realizar la regresin exponencial correspondiente,
en las abscisas va el volumen y en las ordenadas el tiempo.

Y = AC BX

Tiempo

Volumen

MUESTRA 02 : Solanum tuberosum papa


Preparacin : Cortar un trozo pequeo de la cscara en la parte superior, introducir
cuidadosamente un tubo de desprendimiento (10 cm. de longitud), la

22
Procesos Biolgicos

parte sin cscara cubrir con parafina fundida. Llenar el tubo con una
solucin de glucosa 0.1 molar, colocar una marca en el menisco, la papa
as preparada colocar en un frasco conteniendo agua destilada, luego de
24 horas medir la altura de la columna formada.
Observacin : Osmosis en papa

MUESTRA 03: Algas filamentosas del gnero Spirogyra


Preparacin: Colocar en el portaobjetos una alga filamentosa con agua natural (del
ambiente donde obtuvo la muestra), poner el cubreobjetos y observar a
100X; sin mover la muestra de la platina, sacar el agua con papel
absorbente, aadir solucin hipertnica (cloruro de sodio) hacer que
ingrese a la muestra por capilaridad, no mover el cubreobjetos, observar la
plasmlisis. Sin mover la muestra de la platina extraer el agua salada con
el papel absorbente, aadir solucin hipotnica (agua destilada) gota a
gota, hacer que ingrese por capilaridad, observe la turgencia.
Observacin: Plasmlisis y turgencia.

CONCLUSIONES

CUESTIONARIO
1. Qu es difusin y osmosis?
2. En qu consiste el crecimiento osmtico
3. Qu ventaja y desventaja significa para la clula los fenmenos de difusin y osmosis?

23
Procesos Biolgicos

PRACTICA N 08
OBSERVACIN DE CLULAS SANGUNEAS DE PECES
La ictiohematologa puede ser definida, en trminos generales, como una disciplina que estudia
la sangre de los peces; sin embargo, en trminos prcticos, estudia las clulas sanguneas
morfolgica, bioqumica y funcionalmente, as como tambin los rganos hematopoyticos, las
enfermedades relacionadas con ellos y cualquier fenmeno o patologa que relacione las clulas
y/o sus rganos productores.
Los valores hematolgicos y la bioqumica sangunea son herramientas vlidas muy tiles en la
determinacin del estado de salud y el equilibrio metablico en los peces, tanto de vida silvestre
como en cultivos intensivos. La posibilidad de evaluacin de estos parmetros depende de la
disponibilidad de valores de referencia "normales" de diferentes componentes sanguneos que
son buenos indicadores del estado de salud de los peces en condiciones naturales, as como de
cambios en su hbitat.
Estudios sobre hematologa de peces demuestran que las variaciones en las condiciones
ambientales como temperatura, pH, oxgeno, entre otros, causan modificaciones fisiolgicas en
los niveles de algunos parmetros sanguneos Adems, se ha determinado que estos pueden
estar tambin influenciados por numerosos factores tales como la especie, la edad, el
fotoperiodo, el estado nutricional y la metodologa usada para su determinacin.
OBJETIVO
Identificar los glbulos rojos y blancos en una muestra de sangre de pescado
MATERIALES. Pipeta, Lminas portaobjetos, Alcohol etlico, Aceite de inmersin, Colorante
Wright (2.4 g. en un litro de alcohol metlico), Jeringa descartable de 2 cc, Algodn, Microscopio
compuesto, Agua destilada.
PROCEDIMIENTO
- Extraer con la jeringa descartable, sangre de la zona caudal del pescado.
- Deja caer una gota pequea de sangre en el borde de la lmina portaobjeto. Con el borde
de otra lmina portaobjeto, extiende la gota de sangre. La extensin debe ser lo ms fina
posible. Djala secar.
- Una vez seca, agregar con el gotero una pequea cantidad del colorante, lo suficiente
para cubrir la muestra, y djalo actuar durante 1 minuto. Luego, con una pipeta, agrega
suavemente agua destilada sobre el colorante, evitando que ste se derrame.
- Deja actuar esta solucin por 5 minutos, luego, lava con abundante agua destilada y deja
secar.
- Una vez que se haya secado bien, observa la muestra al microscopio compuesto con un
aumento de 1000x. Debes agregar el aceite de inmersin.

Forma de extender la gota de sangre del pescado

Gota
de
sangr
e
24
Procesos Biolgicos

Glbulos rojos de pescado

OBSERVACIONES
CUESTIONARIO
1. Identifica en los dibujos los distintos tipos de clulas sanguneas.
2. De qu color aparece teido el ncleo de los leucocitos?
3. Qu forma tienen los glbulos rojos? Tienen ncleo?
4. Son iguales los glbulos rojos de los peces que de los humano? Explique

UNIVERSIDAD PRIVADA DEL NORTE

NOMBRE DE UNIDAD III: METABOLISMO CELULAR Y ENZIMAS


PRACTICA N 09
RECONOCIMIENTO DE SALES MINERALES
OBJETIVOS
Demostrar que en la composicin de la materia viva entran a formar parte las sales
minerales.
Conocer el proceso de la coagulacin de la leche, como tcnica para poder obtener el suero
de la leche (fraccin lquida) en el que quedan fundamentalmente las sales que
pretendemos identificar.
MATERIAL:
Vaso de precipitado
Matraz o probeta
Embudos con papel de filtro
Gradilla con tubos de ensayo
Pinzas para calentar tubos
Mechero
Leche
cido actico
cido ntrico
Solucin molibdato amnico al 1%
Solucin de nitrato de plata al 1%.
Solucin de oxalato amnico al 1%.
TCNICA
1. PREPARACIN DE LA MUESTRA.
o Para determinar la presencia de sales es interesante utilizar el suero de leche. Para
conseguirlo, podemos realizar esta sencilla receta:
o Colocar en un vaso de precipitado unos 250 cc. de leche.
o Aadir unas gotas de cido actico y esperar unos minutos.
o Al producirse el "cuajado" filtrar por papel, para obtener el suero.
o Recoger el filtrado en un matraz o probeta.
2. REALIZACIN DE LAS REACCIONES.
o Preparar una gradilla con tres tubos de ensayo.
o En cada tubo de ensayo poner unos 3cc. de suero de leche.
o Numerar los tubos con 1, 2 y 3.
o Al tubo de ensayo nmero 1, aadir 1cc., de solucin de nitrato de plata.
o Al tubo de ensayo nmero 2, aadir 2cc., de solucin de molibdato amnico al 1%,
tratado con cido ntrico concentrado en cantidad suficiente para que el cido molbdico
que se forma se redisuelva. Calentar el tubo al bao Mara.
o Al tubo de ensayo nmero 3 unas 10 gotas de solucin de oxalato amnico al 1%.
3. RESULTADOS OBTENIDOS.

25
Procesos Biolgicos

o La reaccin en el tubo de ensayo nmero 1 nos sirve para identificar los cloruros. La
explicacin es la siguiente: Los cloruros en contacto con una solucin de nitrato de plata
forman cloruro de plata, que da lugar a un precipitado blanco de aspecto lechoso.
o La reaccin en el tubo de ensayo nmero 2 nos va a permitir identificar la presencia de
fosfatos. La explicacin es la siguiente: Los fosfatos en presencia de molibdato
amnico, forman un precipitado amarillo de fosfomolibdato amnico.
o La reaccin en el tubo de ensayo nmero 3 nos sirve para identificar el calcio. Esto es
debido a: El calcio al reaccionar con el oxalato amnico forma un precipitado blanco
cristalino de oxalato amnico.

NOMBRE DE UNIDAD IV: BIOLOGA MOLECULAR


PRACTICA N 11
RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS
Objetivos:
1. Identificacin de glcidos.
2. Hidrlisis del enlace de un disacrido
Materiales:
Muestras de glcidos: glucosa maltosa lactosa sacarosa almidn.
Tubos de ensayo, gradilla, vaso para calentar, mechero.
Reactivo de Fehling A y Fehling B
Lugol
HCl diluido y bicarbonato.
Reacciones que van a realizarse:
1. Reaccin de Fehling:
o Tomar la muestra que se quiera analizar (normalmente una cantidad de 3 cc.)
o Aadir 1 cc. de Fehling A y 1 cc. de Fehling B. El lquido del tubo de ensayo adquirir un
fuerte color azul.
o Calentar el tubo al bao Mara o directamente en un mechero de Laboratorio.
o La reaccin ser positiva si la muestra se vuelve de color rojo-ladrillo.
o La reaccin ser negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul-verdoso.
Fundamento: Se basa en el carcter reductor de los monosacridos y de la mayora de
los disacridos (excepto la sacarosa). Si el glcido que se investiga es reductor, se
oxidar dando lugar a la reduccin del sulfato de cobre (II), de color azul, a xido de
cobre (I), de color rojo-anaranjado.
2. Reaccin del Lugol: Este mtodo se usa para identificar polisacridos. El almidn en
contacto con unas gotas de Reactivo de Lugol (disolucin de yodo y yoduro potsico) toma
un color azul-violeta caracterstico.
o Poner en un tubo de ensayo unos 3 cc. del glcido a investigar.
o Aadir unas gotas de lugol.
o Si la disolucin del tubo de ensayo se torna de color azul-violeta, la reaccin es
positiva.
Fundamento: La coloracin producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre las
espiras de la molcula de almidn. No es por tanto, una verdadera reaccin qumica, sino que
se forma un compuesto de inclusin que modifica las propiedades fsicas de esta molcula,
apareciendo la coloracin azul violeta.
Basndote en esta caracterstica te voy a proponer un pequeo juego de magia que te va a
sorprender:
o Una vez que tengas el tubo de ensayo con el almidn y el lugol, que te habr dado una
coloracin violeta, calienta el tubo a la llama y djalo enfriar. !Sorprendido!.

26
Procesos Biolgicos

o Vuelve a calentar y enfriar cuantas veces quieras.... ?Dnde est el color?


1. INVESTIGACIN DE AZUCARES REDUCTORES
Poner las muestras de glcidos en los tubos de ensayo. Pueden prepararse soluciones al
1% aproximadamente.
Realizar la Prueba de Fehling como se indica al principio de pgina.
Despus de calentar observar los resultados.
Estos resultados nos indican que los azcares: glucosa, maltosa y lactosa tienen carcter
reductor.
2. INVESTIGACIN DE AZUCARES NO REDUCTORES
Como se vea en la experiencia 1 la sacarosa daba la reaccin de Fehling negativa, por no
presentar grupos hemiacetlicos libres.
Ahora bien, en presencia del cido clorhdrico (HCl) y en caliente, la sacarosa se hidroliza
descomponindose en los dos monosacridos que la forman (glucosa y fructosa).
Tcnica: Tomar una muestra de sacarosa y aadir unas 10 gotas de cido clorhdrico al 10%.
Calentar a la llama del mechero durante un par de minutos. Dejar enfriar y realizar la Prueba de
Fehling. Observa el resultado. La reaccin positiva nos dice que hemos conseguido romper el
enlace O-glucosdico de la sacarosa. (Se recomienda antes de aplicar la reaccin de Fehling,
neutralizar con bicarbonato, Fehling sale mejor en un medio que no sea cido.)
3. INVESTIGACIN DE POLISACRIDOS (ALMIDN)
El polisacrido almidn se colorea de azul-violeta en presencia de yodo, debido no a una
reaccin qumica, sino a la fijacin del yodo en la superficie de la molcula del almidn, fijacin
que slo tiene lugar en fro.
TCNICA:
Colocar en una gradilla muestras de distintos glcidos.
Aadir 5 gotas de Lugol en cada uno de los tubos de ensayo.
Observar los resultados.
Con este mtodo puede identificarse el almidn.
PRACTICA N 12
RECONOCIMIENTO DE PROTENAS
Materiales de Laboratorio
3 huevos Acido Ntrico
Acido actico Sulfato cprico
Hidrxido de Sodio Acetato de Plomo
Las protenas, debido al gran tamao de sus molculas, forman con el agua soluciones
coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formacin de cogulos al ser calentadas a
temperaturas superiores a los 70C o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc.
La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por
los agentes indicados, que al actuar sobre la protena la desordenan por la destruccin de su
estructura terciaria y cuaternaria.
TCNICA
Para ver la coagulacin de las protenas se puede utilizar clara de huevo, para conseguir ms
volumen puede prepararse para toda la clase una dilucin de clara de huevo en agua, de forma
que quede una mezcla an espesa.
1. Colocar en un tubo de ensayo una pequea cantidad de clara de huevo.
2. Aadir 5 gotas de cido actico y calentar el tubo a la llama del mechero.
REACCIONES COLOREADAS
1. REACCION XANTOPROTEICA
Es debida a la formacin de un compuesto aromtico nitrado de color amarillo, cuando las
protenas son tratadas con cido ntrico concentrado. La prueba da resultado positivo en
aquellas protenas con aminocidos portadores de grupos bencnicos, especialmente en
presencia de tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un lcali vira a un color
anaranjado oscuro.
TCNICA
1. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de solucin problema (clara de huevo).
2. Aadir 1 cc. de HNO3 concentrado.
3. Calentar al bao mara a 100: C..
4. Enfriar en agua fra
5. Aadir gota a gota una disolucin de sosa al 40%. (Hidroxido de Sodio)

27
Procesos Biolgicos

2. REACCIN DE BIURET
La producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos, ya que se debe a la presencia
del enlace peptdico (- CO- NH -)que se destruye al liberarse los aminocidos.
Cuando una protena se pone en contacto con un lcali concentrado, se forma una sustancia
compleja denominada biuret, de frmula:

Que en contacto con una solucin de sulfato cprico diluida, da una coloracin violeta
caracterstica.
TCNICA
1. Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3 cc. de albmina de huevo.
2. Aadir 2cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%.
3. A continuacin 4 5 gotas de solucin de sulfato cprico diluida al 1%.
Debe aparecer una coloracin violeta-roscea caracterstica.
3. REACCIN DE AMINOCIDOS AZUFRADOS
Se pone de manifiesto por la formacin de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se basa
esta reaccin en la separacin mediante un lcali, del azufre de los aminocidos, el cual al
reaccionar con una solucin de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo.
TCNICA
1. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 cc. de albmina de huevo (clara de huevo).
2. Aadir 2 cc. de solucin de hidrxido sdico al 20%.
3. Aadir 10 gotas de solucin de acetato de plomo al 5%.
4. Calentar el tubo hasta ebullicin.
5. Si se forma un precipitado de color negruzco nos indica que se ha formado sulfuro de
plomo, utilizndose el azufre de los aminocidos, lo que nos sirve para identificar
protenas que tienen en su composicin aminocidos con azufre.

PRACTICA N 13
RECONOCIMIENTO DE LPIDOS
OBJETIVOS
Poner de manifiesto ciertas propiedades de los lpidos, algunas de las cuales pueden servirnos
para su identificacin.
Materiales de Laboratorio
Bao Mara. Mechero. Gradillas con tubos de ensayo. Vaso de precipitado con agua.
Aceite vegetal, Solucin de Sudn III en frasco cuentagotas. Tinta roja en frasco
cuentagotas. Solucin de Hidrxido sdico al 20%. ter o cloroformo
SAPONIFICACIN: Las grasas reaccionan en caliente con el hidrxido sdico o potsico
descomponindose en los dos elementos que la forman: glicerina y los cidos grasos. Estos se
combinan con los iones sodio o potasio del hidrxido para dar jabones, que son en definitiva las
sales sdicas o potsicas de los cidos grasos.
La reaccin es la siguiente:

TCNICA: Proceder de la siguiente forma:


1. Colocar en un tubo de ensayo 2cc de aceite vegetal y 2cc de una solucin de hidrxido
sdico al 20%.
2. Agitar enrgicamente y colocar el tubo al bao Mara de 20 a 30 minutos.
3. Transcurrido este tiempo, se puede observar en el tubo tres capas: la inferior clara, que
contiene la solucin de sosa sobrante junto con la glicerina formada; la superior amarilla
de aceite no utilizado, y la intermedia, de aspecto grumoso, que es el jabn formado
Nota: Cuando ya se ha visto como se forma el jabn, se puede ir echando en un vaso de
precipitado el contenido de los tubos de ensayo, se remueve bien y se deja calentar hasta que
se haga un buen trozo de jabn.

28
Procesos Biolgicos

TINCIN. Las grasas se colorean en rojo anaranjado por el colorante denominado Sudan III.
TCNICA. Proceder as:
1. Disponer en una gradilla dos tubos de ensayo, colocando en ambos 2cc de aceite.
2. Aadir a uno, 4 o 5 gotas de solucin alcohlica de Sudn III. Al otro tubo aadir 4-5
gotas de tinta roja. Agitar ambos tubos y dejar reposar.
3. Se observar en el tubo al que se le aadi Sudn, que todo el aceite aparece teido. En
cambio en el frasco al que se aadi tinta roja, la tinta se habr ido al fondo y el aceita
aparecer sin teir.
SOLUBILIDAD. Las grasas son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se
dividen en pequesimas gotitas formando una "emulsin" de aspecto lechoso, que es
transitoria, pues desaparece en reposo, por reagrupacin de las gotitas de grasa en una capa
que por su menor densidad se sita sobre la de agua.
Por el contrario, las grasas son solubles en los llamados disolventes orgnicos como el ter,
benceno, xilol, cloroformo, etc.
TCNICA. Proceder de la siguiente manera:
1. Tomar dos tubos de ensayo y poner en cada uno de ellos 2-3 cc de agua y en el otro 2-
3cc de ter u otro disolvente orgnico.
2. Aadir a cada tubo 1cc de aceite y agitar fuertemente. Observar la formacin de gotitas
o micelas y dejar en reposo. Se ver como el aceite se ha disuelto en el ter y en cambio
no lo hace en el agua, y el aceite subir debido a su menor densidad.

PRACTICA N 14
ENZIMAS
OBJETIVOS
1. Poner de manifiesto la presencia de la enzima catalasa en tejidos animales y vegetales.
2. Comprobar la accin de la temperatura sobre la actividad de las enzimas.
3. Comprobar la accin hidroltica de la amilasa.
MATERIALES
Gradilla Agua oxigenada Agua oxigenada
Tubos de ensayo Solucin de lugol Trocitos de hgado
Mechero Soluciones de Fehling Trocitos de tomate
Pipetas Bao Mara Almidn
1. RECONOCIMIENTO DE LA CATALASA
La catalasa es una enzima que se encuentra en las clulas de los tejidos animales y vegetales.
La funcin de esta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el metabolismo celular, se
forma una molcula txica que es el perxido de hidrgeno, H2O2 (agua oxigenada). Esta
enzima, la catalasa, lo descompone en agua y
oxgeno, por lo que se soluciona el problema.
La reaccin de la catalasa sobre el H2O2, es la
siguiente:

Reaccin A
La existencia de catalasa en los tejidos animales, se aprovecha
para utilizar el agua oxigenada como desinfectante cuando se
echa sobre una herida. Como muchas de las bacterias
patgenas son anaerobias (no pueden vivir con oxgeno),

29
Procesos Biolgicos

mueren con el desprendimiento de oxgeno que se produce cuando la catalasa de los tejidos
acta sobre el agua oxigenada.
En esta primera experiencia vamos a demostrar su existencia.
1. Colocar en un tubo de ensayo unos trocitos de hgado.
2. Aadir 5 mililitros de agua oxigenada.
3. Se observar un intenso burbujeo debido al desprendimiento de oxgeno. Figura 1 (Observa
la reaccin A)
2. DESNATURALIZACIN DE LA CATALASA
Mediante esta experiencia, vamos a ver una propiedad fundamental de protenas, que es la
desnaturalizacin. Ya que la catalasa qumicamente es una protena, podemos desnaturalizarla
al someterla a altas temperaturas. Puedes
recordarlo en la prctica de protenas. Al perder la
estructura terciaria, perder tambin la funcin y
como consecuencia su funcin cataltica, por lo
que no podr descomponer el agua oxigenada y
no se observar ningn tipo de reaccin cuando
hagamos la experiencia anterior con muestras de
tejidos hervidos.
1. Colocar en un tubo de ensayo varios trocitos
de hgado.
2. Aadir agua para hervir la muestra. Hervir
durante unos minutos.
3. Despus de este tiempo, retirar el agua
sobrante.
4. Aadir el agua oxigenada.
5. Observar el resultado. Figura 2
3. HIDRLISIS DEL ALMIDN
Mediante esta experiencia, vamos a ver la actividad de otra enzima, la amilasa o ptialina,
presente en la saliva.
Esta enzima acta sobre el polisacrido almidn, hidrolizando el enlace O-glicosdico, por lo que
el almidn se terminar por transformar en unidades de glucosa.
Es importante que recuerdes las reacciones caractersticas de glcidos para comprender esta
experiencia.
PROCEDIMIENTO:
1. Poner en una gradilla cuatro tubos de ensayo,
numerados del 1 al 4.
2. Aadir en cada tubo 5 mililitros de una solucin diluida de
almidn.
3. A los tubos 3 y 4 aadir una pequea cantidad de saliva.
Figura 3
Para ayudarte y formar ms saliva, piensa en un limn o en algo
que te apetezca mucho comer... As favoreces que formes ms
saliva.
o En el tubo 1, haz la Reaccin de Fehling.
o En el tubo 2, realiza la Reaccin de Lugol.
o Los resultados son los esperados para un polisacrido como el almidn.
Los tubos 3 y 4 que contienen el almidn, al que le hemos echado la saliva, ponerlos en un vaso
de precipitados al bao Mara, controlando la temperatura del agua para que no hierva, ya que
lo que intentamos, es que la enzima de la saliva trabaje a unos 37: C. Dejarlo unos 15 minutos
A continuacin realizar las siguientes reacciones:
En el tubo nmero 3, realizar la Reaccin de Fehling.
En el tubo nmero 4, realizar la Prueba del Lugol.
El resultado positivo obtenido en el tubo de ensayo 3, nos dice que no hay ya almidn,
porque la amilasa de la saliva ha hidrolizado el almidn transformndolo en glucosa, por
eso la reaccin de Fehling es ahora positiva.
De una manera similar, podemos interpretar el resultado del tubo de ensayo 4, ahora nos
da la reaccin de polisacridos negativa, ya que el almidn (polisacrido) se ha
hidrolizado.

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Procesos Biolgicos

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