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DIAGNOSTICO

PARASITOLOGICO

AUX. DOC: CRISTHIAN SANCHEZ


MATERIA: PARASITOLOGIA
AÑO:2020
DIAGNOSTICO DIAGNOSTICO DIAGNOSTICO
CLINICO EPIDEMIOLOGICO ETIOLOGICO

ES AQUEL QUE EL ES AQUEL QUE EL


MEDICO INFIERE A ES AQUEL DONDE SE
MEDICO SUPONE EN
PARTIR DE LAS IDENTIFICA LA CAUSA
BASE A LOS
MANIFESTACIONES ESPECIFICA (AGENTE
ANTECEDENTE
CLINICAS DEL ETIOLOGICO) DE LA
EPIDEMIOLOGICOS
PACIENTE ENFERMEDAD
DEL PACIENTE

EXAMENES DE GABINETE = SON EXAMENES COMPLEMENTARIOS


AL DIAGNOSTICO CLINICO: RAYOS X, TAC, RM, ECOGRAFIA, ECG,
EEG.
PROCEDIMIENTOS QUE
DIAGNOSTICO PARASITOLOGICO PERMITEN IDENTIFICAR AL
AGENTE ETIOLOGICVO
QUE PROVOCA LA
ENFERMEDAD

METODOS DIRECTOS
OBSERVACION DIRECTA DEL PARASITO

METODOS INDIRECTOS
DETECCION DE ANTIGENOS O ANTICUERPOS
PRODUCTO DE LA PRESENCIA DEL PARASAITO EN EL
ORGANISMO

METODOS MOLECULARES
IDENTIFCACION Y AMPLIFICACION DEL GENOMA DEL
PARASITO
EXAMENES DE LABORATORIO

• CICLO BIOLOGICO
¿Cuándo?
• HABITAT EN EL
HOSPEDADOR

• HAYA UNA SOSPECHA • MANISFESTACIONE


CLINICA SCLINICAS MAS
• FASE CLINICA DE LA
CONOCER PROBABLES
INFECCION
• LOCALIZACION DEL • MECANISMO DE
PARASITO INFECCION
• CONFIRMAR DX
• ANTECEDENTES
EPIDEMIOLOGICOS
METODOS DIRECTOS
MUESTRAS

HECES
BIOPSIA DE LESION
SANGRE
LAVADO BRONQUIAL
ESPUTO
FLUJO VAGINAL O
ASPIRADO URETRAL
DUODENAL
ASPIRADO DE LESION
RASPADO DE LESION
METODOS CUALITATIVOS METODOS CUANTITATIVOS

IDENTIFICAR EL PARASITO PERO CUANTIFICAR LA CARGA


NO SU CANTIDAD PARASITARIA

OBJETIVO: IDENTIFICAR EL AGENTE OBJETIVO: DETERMINAR LA


ETIOLOGICO QUE ESTA PRODUCIENDO CANTIDAD DE HUEVOS DE HELMINTOS
LA ENFERMEDAD EN TUBO DIGESTIVO O VIAS BILIARES
EN UNA CANTIDAD DE HECES Y PODER
PRONOSTICAR LA CANTIDAD DE
ADULTOS
CAPACIDAD DE LA
PRUEBA PARA
DETECTAR ENFERMOS

SENSIBILIDAD

ESPECIFIDAD

CAPACIDAD DE LA
PRUEBA PARA
DETECTAR PERSONAS
SANAS
METODOS CUALITATIVOS
RECOLECCION DE HECES

• HECES FRESCAS
• FRASCOS DE PLASTICO CON BOCA ANCHA Y
TAPA ROSCA CON EL ETIQUETADO Y ROTULADO
CORRESPONDIENTE.
• MUESTRAS SOLIDAS = 3-5 GRAMOS
• MUESTRAS LIQUIDAS= 1 CUCHARA SOPERA
• TIEMPO DE LLEGADA AL LABORATORIO = 2-4
HORAS EN MUESTRAS SOLIDAS Y EN MUESTRAS
DISENTERICAS 30 MINUTOS
• MANTENER FUERA DE LA LUZ SOLAR EN
AMBIENTEBFRESCO
• MUESTRAS DIARREICAS CON PRESENCIA DE
SANGRE O MOCO DEBEN SER PRIORIZADAS
SUSTANCIAS QUE PRESERVAN LA ESTRUCTURA MORFOLOGICA
DE PROTOZOARIOS, HUEVOS Y LARVAS DE HELMINTOS.
FIJADORES
PRESERVA QUISTE Y TROFOZOITOS DE PROTOZOARIOS;
PAF TAMBIEN SE UTILIZA EN HUEVOS Y LARVAS DE HELMINTOS

FENOL-ALCOHOL-FORMALDEHIDO

FIJA Y TIÑE EN FORMA SIMULTANEA. BUEN FIJADOR DE


MIF TROFOZOITOS, QUISTE, HUEVOS Y LARVAS.

MERTHIOLATE-YODO-FORMALDEHIDO

EXCELENTE PARA TROFOZOITOS, UTIL EN HECES ACUOSAS Y


PVA DISENTERICAS

ALCOHOL POLIVINILICO

FORMALINA NO ES ADECUADO ÑPARA LA CONSERVACION DE


TROFOZOITOS
5-10%
TECNICAS CUALITATIVAS BASICAS DE DX
COPROPARASITOLOGICO

EXAMEN MACROSCOPICO

• EVALUA LAS CARACTERISTICAS


FECALES: CONSISTENCIA, COLOR,
PRESENCIA DE MOCO O SANGRE,
RESTOS DE ALIMENTOS, SI FLOTAN O
NO EN EL AGUA.
• SE PUEDEN ENCONTRAR PARASITOS
ADULTOS (NEMATODOS) O
SEGMENTOS DE PARASITOS
(PROGLOTIDES DE TENIAS).
TECNICAS CUALITATIVAS BASICAS DE DX
COPROPARASITOLOGICO

EXAMEN DIRECTO EN FRESCO

FUNDAMENTO: IDENTIFICACION DE
PARASITOS MICROSCOPICOS
MOVILES EN MUESTRAS FRESCAS DE
HECES UTILIZANDO SOLUCION
FISIOLOGICA
• UTILIZADO FRECUENTEMENTE EN
MUESTRAS DISENTERICAS O
LIQUIDAS
TECNICAS CUALITATIVAS BASICAS DE DX
COPROPARASITOLOGICO

EXAMEN
COPROPARASITOLOGICO SIMPLE
EXAMEN SERIADO: SE
APLICA PARA LA
RECOLECCION DE MUESTRAS Y
FUNDAMENTO: IDENTIFICACION AUMENTAR LA SENSIBILIDAD
DE PARASITOS MICROSCOPICOS DE LA PRUEBA.
EN PEQUEÑAS CANTIDADES DE CONSISTE EN TOMAR 3 A 5
HECES FRESCAS O CONSERVADAS, MUESTRAS EN DIAS
UTILIZANDO SOLUCION SALINA ALTERNOS.
FISIOLOGICA O LUGOL.
EXAMENES CUALITATIVOS ESPECIALIZADOS

PARASITOS DEL TUBO DIGESTIVO Y ANEXOS

METODOS DE CONCENTRACION

CONCENTRACION DE PARASITOS (HUEVOS,


OBJETIVO LARVAS, QUISTE U OOQUISTES ) EN UNA
MENOR CANTIDAD DE MUESTRA DE HECES.
METODOS DE CONCENTRACION

METODOS POR FLOTACION

FUNDAMENTO: CONCENTRACION DE PARASITOS POR FLOTACION EN LA


SUPERFICIE DE UNA SUSPENSIÓN DE MAYOR DENSIDAD

TECNICA DE WILLIS TECNICA DE SHEATER

UTILIZA SOLUCION
UTILIZA SOLUCION
SOBRESATURADA DE AZUCAR
SOBRESATURADA DE CLNa
(SACAROSA). PARA COCCIDIOS
METODOS DE CONCENTRACION

METODOS POR
SEDIMENTACION
FUNDAMENTO: SEDIMENTACION DE LOS PARASITOS POR SU PESO, EN UNA
SUSPENSION (FONDO DEL RECIPIENTE:TUBO CONICO, COPA, ETC)

SEDIMENTACION SIMPLE TECNICA DE RITCHIE

HECES DILUIDAS EN AGUA FORMOL + ETER


Y FILTRADAS SIN NINGUN
PROCEDIMIENTO
RITCHIE
FORMOL + GASOLINA
MODIFICADO
RITCHIE MODIFICADO
LEER DOCUMENTO ADJUNTO
OTROS METODOS DE CONCENTRACION

METODO POR COMBINA AMBOS TECNICA DE FAUST, UTILIZA


FLOTACION/SEDIMENTACION METODOS SULFATO DE ZINC

• BUSQUEDA DE
FUNDAMENTO: CONCENTRACION DE
NEMATODOS.
LARVAS BASADA EN LA MIGRACION
METODO POR • TECNICA DE
DE ESTAS DESDE UNA MUESTRA DE
CONCENTRACION DE LARVAS HECES HACIA AGUA ATEMPERADA DE
ELECCION PARA
STRONGYLOIDES
37ºC, APROVECHANDO SU TERMO E
STERCORALIS
HIDROTROPISMO POSITIVO

TECNICA DE • UTILIZA EMBUDO DE VIDRIO CON LLAVE DE PASO


• SEDIMENTACION DE LAS LARVAS EN EL FONDO DEL EMBUDO
BAERMAN • MUESTRA FEESCA, SIN CONSERVANTES NI FIJADORES
TECNICA DE LUMBRERAS

FUNDAMENTO
DETECCION DE LARVAS O HUEVOS DE PARASITOS DE
MAYOR DENSIDAD COMO FASCIOLA HEPATICA
(TECNICA DE ELECCION) MEDIANTE EL PRECIPITADO DE
ESTOS EN EL FONDO DEL RECIPIENTE.

MATERIALES
 COPA DE VIDRIO
 GASA
 COLADERA
 HECES FECALES
OTROS METODOS CUALITATIVOS
CULTIVO DE
DIFERENCIAR DE
HECES ANCYLOSTOMA
DUODENALE DE
NECATOR
AMERICANUS
FUNDAMENTO: IDENTIFICACION ESPECIFICA
DE LARVAS DE NEMATODOS A PARTIR DEL
CULTIVO DE HUEVOS QUE NO SE PUEDEN
DIFERENCIAR POR MICROSCOPIA DIRECTA
TECNICA DE HARADA MORI

• TEMPERATURA DE 25ºC A 30ºC


TECNICA DE HARADA MORI
• HUMEDAD
• SOMBRA EN CAJA PETRI
OTROS METODOS CUALITATIVOS

TECNICA DE GRAHAM (CINTA


ADHESIVA TRANSPARENTE)

FUNDAMENTO: ADHERENCIA DE LOS


HUEVOS DE ENTEROBIUS VERMICULARIS
DEPOSITADOS EN LOS MARGENES DEL
ANO EN UNA CINTA ADHESIVA O CINTA
DE SCOTCH, POSTERIORMENTE SERA
EXTENDIDA EN UNA LAMINA
PORTAOBJETOS
METODOS CUANTITATIVOS
TECNICA DE KATO CUALITATIVA
TECNICA DE KATO-KATZ
KATZ
FUNDAMENTO: IDENTIFICACION DE HUEVOS DE
HELMINTOS EN UN FROTIS GRUESO DE HECES
FORMADAS, MEDIANTE LA ACLARACION DE LA MESTRA INCORPORA UN MOLDE O
CON GLICERINA TEMPLETE PARA CONOCER LA
CANTIDAD DE MUESTRA.
CUALICUANTITATIVA

VENTAJAS:
• HECES NO REQUIEREN CONSERVANTES NI DESVENTAJAS:
PROCESAMIENTO PREVIO • SOLO HECES FRESCAS
• MATERIALES BARATOS Y ACCESIBLES • NO ES ADECUADO PARA HECES
• PUEDEN TRANSPORTARSE AL LABORATORIO DIARREICAS, LIQUIDOS O MUCOIDES
• PUEDEN GUARDARSE VARIOS MEESSES
MATERIALES
 HECES FECALES
 VERDE DE
MALAQUITA
 GLICERINA
 TEMPLETE O TACO
 APLICADOR
 MALLA
 PORTAOBJETOS
EXAMENES CUALITATIVOS ESPECIALIZADOS

PARASITOS HEMOTISULARES

METODOS DE CONCENTRACION

MICROMETODO EN
METODO DE STROUT
TUBO CAPILAR
CONCENTRACION E IDENTIFICACION DE CONCENTRACION E IDENTIFICACION DE
TRIPOMASTIGOTES MOVILES DE TRYPANOZOMA TRIPOMASTIGOTES MOVILES DE TRYPANOZOMA
CRUZI, MEDIANTE CENTRIFUGACION DE SANGRE NO CRUZI, MEDIANTE MICROCENTRIFUGACION EN
ANTICOAGULADA EN TUBOS DE ENSAYO TUBOS CAPILARES CON ANTICOAGULANTE. SE
UTILIZA EN EL DIAGNOSTICO DE CHAGAS
AGUDO Y CONGENITO
EXAMENES DIRECTOS

HEMOPARASITOS

• EXTENDIDO GRUESO
(MUCHAS CAPAS)
GOTA GRUESA • SE DESHEMOGLOBINIZA
• SE COLOREA
• MAYOR SENSIBILIDAD BARATOS

REQUIERE
• EXTENDIDO FINO EXPERIENCIA
FROTIS
• SANGRE COLOREADA
• MAYOR ESPECIFIDAD
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO INDIRECTO

Conjunto de métodos en los cuales la formación de inmuno-complejo permite


IDENTIFICAR ANTÍGENOS O ANTICUERPOS DE PARÁSITOS. Tenemos otros exámenes
que nos van a apoyar: Rayos X, resonancia magnética (RM), tomografía axial
computarizada (TAC), ecografía endoscopia.

NO SE DETECTA DIRECTAMENTE AL PARASITO, SINO EVIDENCIAS DE SU PRESENCIA EN EL


ORGANISMO.

REACCIONES DE SUSTANCIAS
DETECCIÓN DE
HIPERSENSIBILIDAD SECRETAS POR LOS
ANTICUERPOS (AC):
RETARDADA: PARASITOS
INMUNIDAD
INMUNIDAD EJ. ANTIGENOS
HUMORAL
CELULAR FECALES
INMUNODIAGNÓSTICO

INVESTIGA LA RESPUESTA INMUNE ESPECIFICA

DIAGNOSTICO
INMUNOHISTOQUIMICA INTRADERMOREACCION
SEROLÓGICO

EXPLORA LA EXPLORA LA
INMUNIDAD INMUNIDADCEL
HUMORAL EXPLORACION DE
ANTIGENOS EN ULAR
BIOPSIAS A TRAVES DE RETARDADA
ANTICUERPOS
ANTICUERPOS MARCADOS
PRODUCIDOS POR EL RESPUESTA TISULAR POR
ORGANISMO EN RESPUESTA INOCULACION INTRADERMICA
DE LOS ANTIGENOS DE ANTIGENOS PARASITARIOS
PARASITARIOS
INFORME DE RESULTADOS:






EN CASO DE NO HALLARSE PARASITOS NO COLOCAR “NEGATIVO” YA QUE


SE DEBE COLOCAR “NO SE PUEDE QUE SI HAYAN PARASITON PERO
OBSERVARON PARASITOS” EN POCA CANTIDAD O SE REALIZO MAL
LAS TECNICAS EMPLEADAS
DIAGNOSTICO SEROLOGICO
INMUNIDAD HUMORAL

1. REACCIONES DE AGLUTINACION
ADSORCION DE AG. PARASITARIOS EN SUPERFICIE DE MACROMOLECULAS SINTETICAS

EJ. LATEX

EN SANGRE O SUERO SE PRODUCE


AGLUTINACION EN LA CUAL SE LOS ANTICUERPOS UNEN LAS
PUEDE OBSERVAR PARTICULAS PARTICULAS ENTRE SI AL FIJARSE A
GRUESAS LOS ANTIGENOS DE SU SUPERFICIE

PRUEBA DE ANTIGENOS ABSORBIDOS EN LA SUPERFICIE


HEMAGLUTINACION DE LOS ERITROCITOS, EN PRESENCIA DE
INDIRECTA (HAI) ANTICUERPOS SE AGLUTINAN TORNANDO
TURBIA LA MUESTRA
2. REACCIONES DE PRECIPITACION

EJ. PLACA DE AGAR

LA REACCION FORMA PRECIPITADOS EN FORMA DE BANDAS O HALOS

INMUNODIFUSION MIGRACION UNIDIRECCIONAL


SIMPLE DE AC HACIA AG

MIGRACION EN AMBOS SENTIDOS


USANDO DOS POCILLOS CON AG, UNO INMUNODIFUSION
PARA EL AGAR Y EL OTRO PARA LA MUESTRA DOBLE

INMUNOELECTROFORESIS DIFUSION FACILITADA POR UN CAMPO ELECTRICO


2. REACCIONES DE PRECIPITACION

EJ. PLACA DE AGAR

LA REACCION FORMA PRECIPITADOS EN FORMA DE BANDAS O HALOS

INMUNODIFUSION MIGRACION UNIDIRECCIONAL


SIMPLE DE AC HACIA AG

MIGRACION EN AMBOS SENTIDOS


USANDO DOS POCILLOS CON AG, UNO INMUNODIFUSION
PARA EL AGAR Y EL OTRO PARA LA MUESTRA DOBLE

INMUNOELECTROFORESIS DIFUSION FACILITADA POR UN CAMPO ELECTRICO


3. REACCION DE FIJACION DE COMPLEMENTO

EL COMPLEMETO DETECTA LA REACCION AG-AC Y


PROVOCA LISIS DE LAS CELULAS AFECTADAS

SE AÑADEN ERITROCITOS
SENSIBILIZADOS CON ANTICUERPOS
HEMOLITICOS

NO QUEDACOMPLEMENTO
EXISTE COMPLEMENTO LIBRE LIBRE POR LAPRESENCIA DE
LO QUE PRODUCE HEMOLISIS ANTICUERPOS, NO SE
PRODUCE HEMOLISIS

REACCION REACCION
NEGATIVA POSITIVA
4. REACCIONES DE INMUNOFLUORESCENCIA

EN CASO DE QUE ESTE


INMUNOFLUORESCENCIA CONTENGA AC. SE AGREGAR OTRO AC
INDIRECTA (IFI) PRODUCE LA REACCION
AG-AC

SE OBTIENE UN AG
CONOCIDO FIJANDOLO A PONER EN CONTACTO ANTIINMUNOGLOBULINAS
UNA LAMINA CON EL SUERO DEL HUMANAS MARCADAS
PORTAOBJETOS PACIENTE CON FLUORESCENCIA :
CONJUGADO

REACCION POSITIVA SI OBSERVAR CON EL


SE VE FLUORESCENTE: MICROSCOPIO DE
EXISTEN PARASITOS INMUNOFLUORESCENCIA

SE UTILIZA UN AC MARCADO CON FLUOROCROMO INMUNOFLUORESCENCIA


(CONJUGADO) PARA DETECAR AG DIRECTA (IFD)
5. REACCIONES INMUNOENZIMATICOS O ENZIMOINMUNOENSAYOS

ENZIME LINKED PRUEBAS RAPIDAS


SORBENT ASSAY REACCION POSITIVA ANTE DE INMUNO-
(ELISA) CAMBIO DE PH Y COLOR CROMATOGRAFIA

•UTILIZA UN AG SOLUBLE (TRITURADO O •UTILIZAR SUSTRATO


SECRETORIOS) SOLIDO
•SE ADSORBEN EN UN POCILLO DE •COLOCAR AC
PLASTICO ELISA SANDWICH CONOCIDOS CONTRA
•COLOCAR LA MUESTRA EN EL POCILLO MARCADORES
Y LAVAR ESPECIFICOS (AC,
•EN CASO DE AC, SE ADHIEREN AL AG ENZIMAS, AG)
•UTILIZAR UNA ANTIINMUNOGLOBULINA SE UTILIZA UN AC
HUMANA MARCADA CON UNA ENZIMA CONOCIDO
•COLOCAR EN EL POCILLO UN SUSTRATO FIJADO AL COLOCAR LA MUESTRA DE
SENSIBLE A LA ENZIMA POCILLO SANGRESOBRE LA PALETA
FORMA BANDA COLOREADA
6. REACCIONES RADIOISOTOPICAS O RADIOINMUNOENSAYOS

SE UTILIZAN COMO
MARCADORES LOS ALTA SENSIBILIDAD
RADIOISOTOPOS

NO SE LO REALIZA
COMUNMENTE POR
LA NECESIDAD DE UN
PERSONAL
ENTRENADO Y
EQUIPO ESPECIFICO
INMUNIDAD CELULAR

INTRADERMOREACCION

COLOCAR EN EL ANTEBRAZO UN AG LA LECTURA


PARASITARIO CONOCIDO POR VIA DEPENDE DEL
INTRADERMICA FORMANDO UN HABON DIAMETRO DE LA
DEBAJO DE LA PIEL Y INDURACION
MARCAR LA ZONA CON UN
BOLIGRAFO
POSITIVA EN
FUNCION DE LA
REACCION DE48 – 72 HORAS INFECCION QUE SE
INDAGA
DIAGNOSTICO MOLECULAR NECESITA
PEQUEÑAS
CANTIDADES
REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR) DE MUETRA

UTILIZAR EL TERMOCICLADOR,
AMPLIFICA MILLONES DE VECES UN REPETIR 30 CICLOS EN LAPSOS VERIFICAR LA
FRAGMENTO DE ADN PARASITARIO BREVES HASTA ALCANZAR MILES DE AMPLIFICACION
A TRAVES DE LA ENZIMA TAQ- MILLONES DE CICLOS CON
POLIMERASA QUE RESISTE CAMBIOS ELECTROFORESIS
BRUSCOS DE TEMPERATURA YA QUE DE ARAGOSAY
SE EXPONDRA EL ADN A SE FORMA UNA CADENA
COMPLEMENTARIA LECTURA DE
TEMPERATURAS MAYOR A 90 ° PARA RAYOS
PROVOCAR DESNATURALIZACION ULTRAVIOLETA
A LOS 75 ° SE EXTIENDE LA CADENA
DE ADN POR LA INCLUSION DE
NUCLEOTIDOS POR MEDIO DE LA
SE UTILIZA 2 PEQUEÑAS SECUENCIAS ENZIMA TAQ-POLIMERASA
DE PARES DE BASES O NUCLEOTIDOS HACER LA
PARA UNA REGION ESPECIFICA DEL SECUENCIACION
ADN PARASITARIO SI SON COMPLEMETARIOS SE UNEN A DEL ADN
LOS 55 °
GRACIAS!

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