Alumno:

Pérez Pérez José Manuel

Asesor:
QFB Ma. De las Mercedes Zamudio Durán
 Definiciones

Bacteremia

• Presencia de bacterias en sangre

Transitoria

• Manipulación de tejidos
• Abscesos, forúnculos, celulitis, cepillado,
estreñimiento.
• Instrumentación sobre superficies mucosas
• Extracción dentaria, caterización uretral

Intermitente

• Abscesos intraabdominales o viscerales no

drenados
• Osteomielitis, artritis, meningitis, neumonía

Continua

• Endocarditis bacteriana
Sindrome de Respuesta inflamatoria sistemica
(SIRS)

• Por lo menos dos manifestaciones

• 1) Fibre mayor a 38°C o hipotermia menor a 36°C.
2) Frecuencia cardiaca mayr a 90 cpm; 3)
Frecuencia respiratoria mayor a 20 rpm, o pCO2
menor a 32 mm de Hg. Leucocitosis mayor a
12000 o menor a 4000/mm3; o mas de 10% de
formas inmaduras.

Shock septico

• Situación de sepsis asociada a hipotención, pese

a reposición de fluidos

Septicemia

• Sindrome severo asociada a infección aguda y

falla orgánica relacionada con mediadores del tipo
citoquinas en circulación

Piemia

• Infección por pyogenos. S pyogenes.

Toxiemia

• Presencia de bacterias en sangre

PRINCIPALES AGENTES DE BACTEREMIA
Endocarditis
• Afecta
• Endocardio y valvulas

Causantes

• Biota normal de la boca y tracto

gastronistestinal
• Streptococcus del grupo viridans
• Staphylococcus aureus (drogadictos)

Tipos

• Endocarditos aguda
• Valvulas normales o lesionadas con
progreso rápido y mortal (S. aureus)
• Endocarditis subaguda (cronica)
• Válvulas anormales, con deformacions
congénitas y lesiones reumaticas o
escleroticas (S. viridans)

Secuelas

• Insuficiencia renal
• Embolias en cerebro y riñon
• Insuficiencia valvular aguda
 Endocarditis infecciosa

Endocarditis
Video que muestra cómo se observa una válvula normal y una con
endocarditis y cuerpos vegetativos.
¿Qué es un hemocultivo?
 Entorno de Infección

IMPORTANCIA y ETIOPATOGENIA • Nosocomial>Comunitaria

• Sepsis: 20 y 80% de mortalidad en UCI Naturaleza de la bacteriemia

Tratamiento antimicrobiano • Polimicrobiana>Monomicrobiana

• Tratamiento excesivo o inadecuado
• Fármacos inmunosupresores Enfermedades subyacentes

• Neoplasias Hematológicas y no
Microorganismo responsable hematológicas, diabetes, insuficiencia
renal en etapap de diálisis, cirrosis
• Enterococcus, gramnegativos y hongos
hepática, SIDA-
Edad
Complicaciones de la Sepsis
• Mayores de 40 años, recién nacidos
• Shock
Foco infecciosos
Procedimientos invasivos
• Genitourinario>respiratorio>absesos
• Catéteres, cirugías del tracto digestivo y
genitourinario, endoscopia.
 Clasificación de Hemocultivos
Rapides en detección, sensibilidad, mejora en las
bacterteremias y terapia antimicrobiana.
Botellas con diverversos medios: (aeróbicos,
Automatizados anaeróbicos, hongos, micobacterias con resinas).
Detección de productos del metabolismo (CO2)
mediante técnicas radiometricas, espectrofotometricas,
fluorométricas, y/o colorimetricas.
El computador relaciona los indices del crecimiento
bacteriano.
Micoorganismo intracelulares y cuantificación.
Hongos, Micobacterias.
Semi-automatizados SPS: Anticoagulante
Saponina: Agente lítico de eritrocitos y leucocitos
Lisis-Centrifugación Polipropilenglicol: Antiespumante
Hemocultivos cuantitativos.
Diagnóstico de bacteremia relacionada a Catéter
Venoso Central (CVC)
Polianetol Sulfonato de Sodio (SPS) a 0.025-0.05%
Para: Peptostreptococcus, Gardnerella, y algunas
Manuales cepas de Neisseria spp agregar 1.2% de Gelatina
Monofásico Mayor riesgo de contaminación.
Incubación desición del microbiologó basado en el
Bifasico diagnóstico clínico.
Clasificación de los hemocultivos.
Según tipo de paciente, toma de muestra, tipo de microorganismo y metodología.

Según el tipo de Según toma de la Según el Tipo de Según la

Paciente Muestra Microorganismo Metodología

Pediátrico Central Cerrado o Abierto

Bacterias aeróbicas

Adulto Periféricos Manuales

Bacterias anaeróbicas

Inmunocompetente
Semi-automatizados
Bacterias Fastidiosas

Inmosuprimido
Automatizados
Micobacterias

Hongos
CLASIFICACIÓN DE SISTEMAS DE HEMOCULTIVO MANUEL
 ClasificaciónDE
FUNDAMENTO deALGUNOS
Hemocultivos
AUTOMATIZADOS

BACTEC SERIES 9000

Fluorescencia.
Reacción del CO2 con material
BACTEC 9000 Series fluorescente al fondo es
Fluorescence proporcional a la luz absorbida.
Becton Dickinson BD Monitoriea cada 10 minutos.

Reacción del CO2 con material

BacT/Alert colorimetrico en el fondo (gas
Colorimetria permeable) con vire de verde
Biomerieux a amarillo.

BACTEC 13A - RADIOMETRICO

Sustratos marcados con C14, la
Bactec 13A cantidad de CO2 (C14) es medida por
Radiometrico su ionización y transformada a un
Becton Dickinson BD numero, proporcial al crecimiento
bacterinano
Arrow Process
IMPACTO DE HEMOCULTIVOS AUTOMATIZADOS
Why use graphics from PowerPointing.com?

Estadistica de Dismunución de
Sensibilidad y velocidad de Disminución de positividad y horas/hombre
detección carga de trabajo y contaminación, Material de
Mejora en diagnóstico y contaminación control de resiembre
mejora en el trabamiento bacteremias Disminuye riesgo de
intrahospitalarias cortopunzantes

CLINICO MICROBIOLOGICO EPIDEMIOLOGICO ECONOMICO

Costo de 2-4 veces

el convencional
Costo equipo

Your Logo
 MEDIO “RUIZ CASTAÑEDA” SISTEMA BIFASICO

Se ideo para el diagnóstico de Brucelosis.

Medio para el cultivo de bacterias como
estafilococos, pseudomonas, E. coli, Salmonella,
Neumococo, a partir de muestras sanguíneas y
líquido céfalo raquídeo.
Observar crecimiento en medio solido sin abrir el
frasco
Evita contaminación y riesgo de infección.
•Fase solida: Agar Soya Tripticasa (AST)
•Fase líquida: Caldo Soya Tripticasa
•SPS: 0.025%
•Cisteína: 0.025%
•Sacarosa: 10%
 MEDIO LISIS-CENTRIFUGACIÓN (ISOLATOR)

Concentración por sedimento.

Diagnóstico de bacteremia relacionada a Catéter
Venoso Central (CVC)
Micoorganismos intracelulares y cuantificación.
Hemocultivos cuantitativos.
•SPS: Anticoagulante
•Saponina: Agente lítico de eritrocitos y leucocitos
•Polipropilenglicol: Antiespumante
Micobacterias y Hongos (25 – 50%)
PROCEDIMIENTO EN LA TOMA DEL HEMOCULTIVO Your Logo

• Recolección y Transporte
•Número de Hemocultivo
•Tiempo e intervalo de toma de muestras

•Volumen de sangre por frasco

•Relación Sangre-Caldo

•Medios de cultivo y Anticoagulante

•Duración de la Incubación
 TOMA DE MUESTRA
Intervalo de la toma de muestra Volumen de la muestra

• 2 horas a 30 minutos antes del pico febril. (puede

• Bacterias en sangre 1 a 10 UFC/mL
ser precedida por escalofríos) • Adolescentes y adultos: 10 mL
• Si no de puede predecir. • Recien nacidos: 1 -2 mL
• Tomar de forma arbitraria 2 hemocultivos a • Lactantes (1 mes – 2 años): 2-3 mL
intervalos de 30 a 90 minutos (Endocarditis) • Mayores de 2 años: 5 mL
• Tomar 2 Hemocultivos al mismo tiempo de
diferente sitio de punción

Relación Sangre-Caldo de Cultivo

Método de Obtención de Muestra

• 1:5
• Periférica (venosa o arterial) y ser la primera del a 1:10
examen, el catéter se coloniza a las 48 h de • Mayor: Dilución del microorganismos
instalado. • Menor: inhibición bactericida del suero

Preparación de la Piel (CRITICO)

Inoculación de las Botellas
• Lavado de piel (Pavidona Yodada)
• Desinfección con Tintura de Yodo o Clorhexidina
alcohólica y remoción con alcohol al 70% • Desinfectar el tapón de las botellas (alcohol 70%)
• Guantes estériles • Sistemas manuales hay mayor contaminación
Numero de Hemocultivos

• 2 a 3 H apropiados (95% de bacteremias)

• 2 H para endocarditis en 24h (98%) sin Tx
antibiótica, si los primeros son negativos
tomar otro set a las 24-48 h.
• Antes de la siguiente administración
antibiótica
• 3-5% contaminación
• Más de 4 hemocultivos provoca anemia al
paciente Hospitalizado.

Medios de cultivo

• Medios de Cultivo
• Aeróbicos y anaeróbicos facultativos
• Caldos: Soya-Tripticasa, Columbia,
Brucela, BHI, peptona complementada
• Sistemas bifasicos: Setpi-Chek (Becton
Dickinson)
• Lisis centrifugación
• Sistemas automatizados: Bactec 6A,
16A, 26 Plus, PEDS Plus (Becton
Dickinson). BacT/Alert (Biomeriuoux)
Medios de Cultivo

• Anaerobios facultativos
• Líquidos: BHI anaerobios, Caldo Tioglicolato
• Automatizados: Bactec 7A, 17A, litico
• Hongos
• Isolator y Bactec para hongos
• Micobacterias.
• Isolator, Bactec 13A

Anticoagulante y Aditivos

• Anticoagulante: Polyanetol Sulfonato de Sodio

• 0.025 – 0.05%
• Inhibe:
• Complemento, fagocitosis, antibióticos (amino
glucósidos), lisozimas
• Gelatina: 1.2% por efecto inhibitorio PSS
• Neisseria spp. Peptostreptococcus spp,
Gardnerella sp.
• Estabilizadores osmóticos (pared deficiente)
• Sacarosa, manitol (10%)
• Resinas
• Inhibe antibióticos
• Aditivos y otros
• Piridoxal (B6) Streptococcus viridans
• L-cistenia
 Hemocultivo: procedimiento de toma

Hemocultivo Parte I
Video que muestra cómo se toma la muestra para un hemocultivo,
cuidados y precauciones. Las botellas pertenecen al sistema
BacT/ALERT (aerobio y anaerobio).
Incubación y seguimiento manual

Aspecto Microoganismo asociado

Incubación Observación
macroscopico macroscopica
Hemólisis Streptococus, Staphylococcus, Listeria
spp. Clostridoum, Bacillus spp.

Turbidez Bacilo gramnegativo aerobio,

Stpaphylococcus, Bacteroides spp.

Formación de gas Bacilo gramnegativo aerobio, anaerobios

TA 25°C maximo 2 Formación pelicula Pseudomonas spp., Bacillus spp.,

horas. levaduras
Incubar a 35°C.
Nunca refrigerar Coágulo Staphylococcus aureus

Manual: Observación Colonias visibles Staphylococcus, Streptococcus.

díaria

Automatizado: Por
ordenador
Hemocultivo, sistema automatizado BACTEC™

Hemocultivo parte II
Video que muestra cómo se procesa la muestra en un hemocultivos
automatizado BACTEC PEDS PLUS/F después que el equipo detecta
que es positivo.
 Hemocultivo CVC
INTERPRETACION
• Cultivo positivo en Hemocultivo y
Catéter para el mismo mo. <15 UFC
Hemocultivo positivo
Falsos posivos
• Interpretación a la luz del cuadro
clínico. • Hemocultivos positivos para el mismo
• Hemocultivo positivo en diferente microogranismo en una toma
sitio de punción. • Indadecuada desinfección de piel
• Bacterima verdadera (90%) • Indadecuada desifección del frasco
• S. aureus, > Bateremia intrahosp. (tapón)
• Enterobacterias
• S. pneumoniae Hemocultivos negativos
• Micobacterias, • Virus
• Hongos levaduriformes • Endocarditis no infecciosa
• Microoganismos de dificil desarrollo
Contaminantes
• Cultivos al final de un proceso
• Corynebacterium spp. crónico
• Bacillus spp. • Endocardoitis causada por Chlamidia
• Propionebacterum acnes. spp., Rickettsia spp. Coxiella
buernetti, Legionella pneumophila.
• Staphylococcus coagulasa
negativa.
SELECCION DE MEDIOS DE CULTIVO Your Logo

• Recolección y Transporte

GRAM ASC5% AC MAC CNA ANA BRUC

Cocacea grampositivo X X X X
Bacilo grampositivo X X X X
Cocacea gramnegativo X X X X X

Bacilo gramnegativo X X X X X

ASC: Agar Sangre de Carnero; AS: Agar Chocolate; CNA: Agar Columbia Cistin-ácido nalidixico
BRUC: Agar Vrucela
PROCEDIMIENTO DE PRACTICA

• Desinfectar con yodo 3% una zona de aproximadamente 2 cm de

diámetro sobre la piel de la vena escogida.
• Eliminar con alcohol al 70% el exceso de yodo.
• Realizar punción extrayendo 3mL de sangre y depositarlos
inmediatamente el frasco del medio de cultivo.

• Agitar lentamente el frasco por unos segundos e incubar a 37°C

por 30 min en posición horizontal , para hacer contacto con la
fase solida

• Enderezar el frasco e incubar a 37°C y observar cada 24 hrs, si

hay crecimiento en fase solida turbidez en la liquida por una
semana. Continuar la observación semanalmente
• 7. Si hay cambios en el medio, realizar frotis y teñir con la
técnica de Gram y hacer resiembras para aislamientos de m.o en
A.S, EMB Y Staph 110 e incubar a 37°C por 24 hrs.
• Hacer pruebas especiales según la morfología colonial y
microscópica.
• Antibiograma una vez identificado el m.o
 Referencias:
Koneman E. Diagnóstico microbiológico. 5ª edición. Editorial médica panamericana. México. 2003.
García C, Pérez C. Hemocultivos. Instituto de Salud de Chile. Pontificia Universidad Católica de
Chile: 2003 [LINK]
Macedo M, Algorta G, Vola M, Pardo L. Bactermias y sepsis. Endocarditis. Instituto de Salud.
Facultad de Medicina; Uruguay: 2006. pp 197-211 [LINK]

Sitios visitados.
BIOMERIEUX. BacT/Alert [LINK]
Becton Dickenson (BD) Bactec™ [LINK]

Material audio-visual
Introduction to Bloodcultures. Dalhousie University Faculty of Medicine. [LINK]
Lancashire Teaching Hospital. NHS. The University of Manchester [LINK01], [LINK02], [LINK03]
Blood culture. BlackBearl [LINK]
Use of the BacT/ALERT® 3D microbial detection system in the biopharmaceutical industry [LINK]
Fail mitral valve due to inefective endocarditis [LINK]
How the hearth animation video [LINK]
Mitral Valve Prolapse and Mitral Regurgitation [LINK]
Diseño Designado EK790M: http://ark461.wordpress.com
ANCIENT REPOSITORY KNOWLEDGE 461
Pérez Pérez José Manuel

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