SEMANA III:

Complejo de la piruvato deshidrogenasa

𝛃-oxidación de ácidos grasos
Ciclo de Krebs

U.C. Biología Celular y Molecular

Departamento de Bioquímica 2021
A- Principales vías catabólicas
de glúcidos y lípidos
En el siguiente esquema se representan las principales vías del catabolismo de glúcidos y lípidos que
hemos visto en el curso.
a) ¿Cuál es el destino de los carbonos del piruvato en la mitocondria? ¿Y el de los ácidos grasos degradados?
Identifique el punto de convergencia de estas vías.
Glucosa

GLUCÓLISIS

2 Piruvato CITOSOL

Piruvato
Complejo
PDH
Acetil-CoA

OXIDACIÓN
DE AG
CICLO Cadena de transporte
DE KREBS de electrones
Acilgraso-CoA
MITOCONDRIA

CO2 CO
En el siguiente esquema se representan las principales vías del catabolismo de glúcidos y lípidos que
hemos visto en el curso.
a) ¿Cuál es el destino de los carbonos del piruvato en la mitocondria? ¿Y el de los ácidos grasos degradados?
Identifique el punto de convergencia de estas vías.
Glucosa
El acetil coenzima A (acetil-CoA) es el
GLUCÓLISIS
punto de convergencia del catabolismo
de los glúcidos y de los ácidos grasos.
2 Piruvato CITOSOL

Piruvato
Complejo
PDH
Acetil-CoA

OXIDACIÓN
DE AG
CICLO Cadena de transporte
DE KREBS de electrones
Acilgraso-CoA
MITOCONDRIA
CO2 CO
En el siguiente esquema se representan las principales vías del catabolismo de glúcidos y lípidos que
hemos visto en el curso.
b) ¿De qué forma se conserva la energía resultante de la oxidación de estos combustibles?
Glucosa
NADH
GLUCÓLISIS
2 ATP

2 Piruvato CITOSOL

Piruvato
Complejo
NADHPDH Cadena de
transporte de
Acetil-CoA electrones

OXIDACIÓN
DE AG
NADH ATP
NADH
NADH
FADHCICLO e-
FADH2
2
DE KREBS FADH2 e-
Acilgraso-CoA
GTP
(ATP) MITOCONDRIA
B- Complejo de la Piruvato
deshidrogenasa
1. Como vimos, uno de los destinos del piruvato es la formación de acetil-CoA en
la mitocondria.

a) Escriba la reacción general donde participa el complejo de la piruvato deshidrogenasa

b) ¿Cuál es el sustrato oxidado y cuál el reducido?

c) Indique si en condiciones estándar la reacción catalizada por la PDH es una reacción

reversible o irreversible ¿Cómo espera que sea en la célula?
1. Como vimos, uno de los destinos del piruvato es la formación de acetil-CoA en
la mitocondria.

a) Escriba la reacción general donde participa el complejo de la piruvato deshidrogenasa

Reacción catalizada por el complejo PDH

El complejo se encuentra
constituído por múltiples copias de
tres enzimas y utiliza 5 cofactores

E1: Piruvato deshidrogenasa

(TPP unido)
E2: Dihidrolipoil transacetilasa
(lipoato unido)
E3: dihidrolipoil deshidrogenasa
(FAD unido)
Reacción catalizada por el complejo PDH
PASO 1: se elimina el C1 del piruvato en forma de CO2 (descarboxilación) y el C2 se une al TPP en la forma
de hidroxietilo
Reacción catalizada por el complejo PDH
PASO 2: el hidroxietilo se oxida a acetato y el puente disulfuro (-S-S-) del lipoato se reduce a dos grupos
tiol (-SH). El acetato se une a uno de los grupos SH del lipoato por medio de un enlace tioéster.
Reacción catalizada por el complejo PDH
PASO 3: el acetato se transfiere del lipoato a la CoA-SH en una reacción de transesterificación y se libera del
complejo multienzimático como acetil-CoA.
Reacción catalizada por el complejo PDH
PASOS 4 y 5: se regenera el complejo en la forma oxidada. De esta forma se prepara el complejo enzimático para
un nuevo ciclo oxidativo
Reacción catalizada por el complejo PDH

El complejo enzimático permite

la canalización de los sustratos
● Mayor velocidad de
catálisis
● Disminución en las
reacciones secundarias.
1. Como vimos, uno de los destinos del piruvato es la formación de acetil-CoA en
la mitocondria.

b) ¿Cuál es el sustrato oxidado y cuál el reducido?

El aceptor final de electrones es el NAD+ que se reduce a NADH

El piruvato se oxida a acetil-CoA y CO2

1. Como vimos, uno de los destinos del piruvato es la formación de acetil-CoA en
la mitocondria.

c) Indique si en condiciones estándar la reacción catalizada por la PDH es una reacción

reversible o irreversible ¿Cómo espera que sea en la célula?

Para analizar qué ocurrirá con la

reacción en la célula debemos
considerar el ΔG real
Concentraciones de P y R en
estado estacionario!

En condiciones estándar la reacción es

exergónica e irreversible
2. Analice el siguiente problema con su grupo de trabajo

MC es un niño de 7 años que es estudiado en el hospital pediátrico por debilidad muscular.

Entre sus antecedentes personales se destaca que nació a las 40 semanas de gestación
luego de un embarazo bien controlado y sin complicaciones. A partir de los 18 meses de
edad se observan problemas en la marcha y caídas frecuentes por lo que se lo comienza a
estudiar.

Los resultados obtenidos en algunos de estos estudios son presentados aquí.

a) ¿Cuál es la hipótesis detrás de cada estudio solicitado?

b) ¿Cuáles son las posibles hipótesis que se descartan y cuáles se confirman con los
resultados observados? ¿Qué puede concluir de cada uno de los resultados?

c) ¿Cuál es su conclusión final sobre el problema que tiene el paciente?

2. Analice el siguiente problema con su grupo de trabajo
Resultado N°1: Concentración de lactato y piruvato en sangre
Tabla 1- Determinación de concentración en sangre de lactato y piruvato en paciente MC
al momento de la consulta.

Paciente MC Rango normal

[Lactato] 3.65 mM 1.1 ± 0.3 mM

[Piruvato] 0.398 mM 0.090 ± 0.022 mM

Relación [Lactato]/[Piruvato] 9.2 12.2 ± 3,3

Los niveles de lactato y piruvato en sangre se encuentran elevados en el paciente

La relación [lactato]/[piruvato] se encuentra dentro del rango normal.
2. Analice el siguiente problema con su grupo de trabajo
Resultado N°1: Concentración de lactato y piruvato en sangre

Se sospecha que hay una alteración en el

destino oxidativo del piruvato en la
mitocondria, que hace que el piruvato se
acumule y se convierta en lactato para permitir
2 Lactato
LDH que continúe ocurriendo la glucólisis.

En principio, la alteración
podría estar afectando a
enzimas a cualquier nivel
entre el piruvato y la
cadena respiratoria.
2. Analice el siguiente problema con su grupo de trabajo
Resultado N°2: Efecto de la suplementación con tiamina en la concentración de
lactato y piruvato en sangre
La tiamina corrige al menos
parcialmente la alteración que
presenta el paciente.

Figura 1. Efecto del suplemento con tiamina. Niveles de lactato y piruvato en sangre antes y después del tratamiento con
500 mg/día de tiamina.
2. Analice el siguiente problema con su grupo de trabajo
Resultado N°2: Efecto de la suplementación con tiamina en la concentración de
lactato y piruvato en sangre

¿Esto podría ser porque:

● presenta un déficit de tiamina?
● presenta un déficit en alguna de las
2 Lactato enzimas que utilizan TPP como
LDH
cofactor y que con la suplementación
compensan la actividad disminuída?

TPP Se requieren mayores estudios para

confirmar o descartar estas hipótesis.

complejo
𝛼-KGDH TPP
2. Analice el siguiente problema con su grupo de trabajo
Resultado N°3: Medidas de actividad enzimática en biopsia muscular

Figura 2. Medidas de actividad enzimática por producción de 14CO2 en

mitocondrias aisladas de músculo esquelético de paciente MC y paciente control
incubadas con [1-C14] piruvato o con [1-C14] 𝛂-cetoglutarato (*)
2. Analice el siguiente problema con su grupo de trabajo
Resultado N°3: Medidas de actividad enzimática en biopsia muscular
El 14C es un isótopo radioactivo del carbono. Se detecta la formación de CO2 marcado a partir de
piruvato o de 𝛂-cetoglutarato que poseen 14C en el carbono 1.
complejo
Actividad PDH Actividad 𝛼-KGDH
PDH
* *

piruvato acetil-CoA

complejo
Se descarta la hipótesis del déficit de tiamina,
𝛼-KGDH
dado que si este fuese el caso, se observaría
* una actividad disminuida en ambos complejos
* (PDH y 𝛼-KGDH)
𝛼-cetoglutarato succinil-CoA Se descarta la hipótesis del déficit enzimático
de 𝛼-KGDH
2. Analice el siguiente problema con su grupo de trabajo
Resultado N°3: Medidas de actividad enzimática en biopsia muscular

Este resultado sugiere que la acumulación de piruvato y lactato en el paciente se debe a una
deficiencia en la actividad PDH en el músculo esquelético.

2 Lactato
LDH

TPP

complejo
𝛼-KGDH TPP
2. Analice el siguiente problema con su grupo de trabajo
Resultado N°4: Expresión de proteínas por técnica de western blot (*) en músculo
esquelético

Esta técnica permite comparar la cantidad de proteína en dos preparados de células (la banda
será mayor en aquella célula que presente mayor cantidad de esa proteína).
2. Analice el siguiente problema con su grupo de trabajo
Resultado N°4: Expresión de proteínas por técnica de western blot (*) en músculo
esquelético

MW = PM (Peso molecular)
Unidades: Kilo Dalton (KDa)

Figura 3. WB con anticuerpos anti- Piruvato deshidrogenasa. Se sembró 10 µg de extracto de músculo

del paciente (P) y de dos individuos control (C1 y C2). En carril 1 y 2 se cargaron muestras de PDH
purificada.
2. Analice el siguiente problema con su grupo de trabajo
Resultado N°4: Expresión de proteínas por técnica de western blot (*) en músculo
esquelético

Menor intensidad en las bandas

correspondientes a las subunidades proteicas
del complejo PDH en el paciente.
Niveles proteicos muy disminuidos de las
subunidades E1𝛼 y E1𝛽 en el paciente en
comparación con individuos control.

Paciente (P)
Control (C1 y C2).
PDH purificada.
 2. Analice el siguiente problema con su grupo de trabajo
c) ¿Cuál es su conclusión final sobre el problema que tiene el paciente?

Considerando todos los resultados analizados, podemos concluir que el paciente presenta una
deficiencia en el complejo PDH en las mitocondrias de músculo esquelético.
Esta deficiencia en la actividad PDH compromete en gran medida la obtención de ATP a partir de
glucosa en este tejido.
C- 𝛃-oxidación de ácidos grasos
1. En el siguiente esquema se representan los 4 pasos de un ciclo de β-oxidación
de ácidos grasos.
Explique en qué consiste esta vía
metabólica, dónde se localiza y
agregue los nombres de las
enzimas que participan y de los
intermediarios de la vía.

Clasifique cada paso de acuerdo al

tipo de reacción
(oxidación/reducción,
hidratación/deshidratación,
hidrólisis/condensación).
1. Explique en qué consiste esta vía metabólica, dónde se localiza.
1. Explique en qué consiste esta vía metabólica
A diferencia de la glucólisis que por fosforilación a nivel de sustrato rinde ATP, la
cosecha de la β-oxidación se da en forma de Acetil-CoA y transportadores de
electrones reducidos (NADH y FADH2). Este poder reductor será el que se utilizará para
la obtención de energía en la forma de ATP.
1. Palmitoil-CoA 4 isoenzimas de la Acil-CoA
deshidrogenasa:
Acil-CoA deshidrogenasa ● VLCAD (14-20C)
OXIDACIÓN
● LCAD (12-18C)
● MCAD (4-12C)
trans-Δ2-Enoil-CoA ● SCAD (4-6C)

HIDRATACIÓN enoil-CoA hidratasa

L-β-Hidroxiacil-CoA

OXIDACIÓN β-Hidroxiacil-CoA
deshidrogenasa La secuencia de reacciones de
β-cetoacil-CoA la β-oxidación es una estrategia
celular para desestabilizar y
romper el enlace entre grupos
ESCISIÓN O acil-CoA acetiltransferasa —CH2—, el cual es muy
TIÓLISIS (tiolasa) estable.

(C14) Acil-CoA (miristil-CoA) acetil-CoA

2. Franz Knoop en 1904 propuso el nombre de β-oxidación para el
proceso biológico de oxidación de ácidos grasos
Knoop alimentó perros con ácidos grasos modificados con un anillo de benceno en el último
carbono, llamado carbono ω. Utilizó dos tipos de ácidos grasos: con número par de carbonos
(a) y con número impar (b). Aisló de la orina de los perros los productos que poseían un
grupo fenilo. De los perros alimentados con ácidos grasos de número impar se recuperó
ácido benzoico en la orina y de los perros alimentados con ácidos grasos de número par
ácido fenilacético.
2. Franz Knoop en 1904 propuso el nombre de β-oxidación para el
proceso biológico de oxidación de ácidos grasos
a. ¿Por qué ambos grupos de perros no originaron el mismo producto final, ácido benzoico
o fenilacético?
2. Franz Knoop en 1904 propuso el nombre de
β-oxidación para el proceso biológico de oxidación
de ácidos grasos
b. ¿Por qué Knoop utilizó el nombre de β-oxidación?
2. Franz Knoop en 1904 propuso el nombre de β-oxidación para el proceso
biológico de oxidación de ácidos grasos
c. ¿Cómo son la mayoría de los ácidos grasos de la dieta, de número par o impar de átomos de
carbono?

d. ¿Cuáles son los productos finales de oxidación para ambos casos y cómo se metabolizan?

Fragmentación tiolítica final:

AG con nº
par de C

AG con nº
impar de C
2. Franz Knoop en 1904 propuso el nombre de
β-oxidación para el proceso biológico de oxidación Reacción
de ácidos grasos dependiente
de biotina

d. ¿Cuáles son los productos finales de oxidación para

ambos casos y cómo se metabolizan?

Reacción
dependiente de
coenzima B12

CICLO DE
KREBS
3. Activación y transporte de AG

Discuta en grupo qué mecanismos participan en la activación y el transporte de los ácidos

grasos desde el citosol a la mitocondria para su degradación por β-oxidación.

● Realice un esquema donde se represente los compartimentos subcelulares, enzimas y

metabolitos implicados.
● Lea con su grupo la viñeta correspondiente, marque en el esquema el sitio afectado o
involucrado
● Responda a las preguntas planteadas.
 3. Activación y transporte de AG

Activación por acción de

la acil-CoA sintetasa

La hidrólisis del PPi es lo

que hace la reacción más
favorable
 Clasificación de los AG
por longitud de cadena
3. Activación y transporte de AG ❏ muy larga (>20C)
❏ larga (12C a 20C)
Transporte de AG de más de 12 C ❏ media (6C a 12C)
❏ corta (4C a 6C)

Nótese:
- La lanzadera de la carnitina transporta a la matriz mitocondrial sólo
ácidos grasos de cadena larga previamente activados en el lado
citosólico
- Existen dos pools de CoA, uno citosólico y otro mitocondrial, que no
se mezclan
Visión general de la ruta de
oxidación de ácidos grasos
3. Activación y transporte de AG

Grupo 1
La carnitina se obtiene de la dieta, principalmente de productos de origen animal, y en menor
medida de la síntesis endógena a partir de lisina y metionina mediante una vía enzimática
presente en el hígado y en el riñón. La deficiencia de carnitina puede producirse por alteraciones
en un transportador de membrana que impide su adecuada absorción, por alteraciones en la
síntesis en pacientes con enfermedad hepática, o por aumento de su eliminación renal en
respuesta a ciertos fármacos.
¿Qué consecuencias podría tener el déficit de carnitina? ¿Se afectaría por igual el metabolismo
de todos los ácidos grasos?
¿Se le ocurre alguna estrategia que pueda mejorar esa condición?

Compartir esquema
3. Activación y transporte de AG

Grupo 1- ¿Se afectaría por igual el metabolismo de todos los ácidos grasos?

● Reducción de la capacidad de los tejidos para utilizar ácidos grasos de cadena larga como
fuente de energía
● No se afecta la oxidación de ácidos grasos de cadena media (＜12C)

Grupo 1- ¿Se le ocurre alguna estrategia que pueda mejorar esa condición?

★ ¿administración de suplementos de L-carnitina?

★ mantener glucosa en sangre estable para obtención de ATP por glucólisis:
○ ¿dieta rica en carbohidratos? ¿evitar ayunos?
★ limitar la cantidad de AG de cadena larga como fuente de energía:
○ ¿dieta de bajo contenido de grasas? ¿dieta complementada con TAG de cadena
media, los cuales no requieren de la lanzadera de la carnitina para ingresar a la
mitocondria y ser oxidados?
3. Activación y transporte de AG

Grupo 2
La deficiencia de carnitina palmitoil transferasa 2 (CPT-2) en el músculo esquelético es uno de los
desórdenes más comunes del metabolismo de ácidos grasos en este tejido. Por otro lado, la
deficiencia de carnitina palmitoil transferasa 1A (CPT-1A) afecta principalmente al hígado.
¿Qué consecuencias tendrán estas deficiencias?
¿Se le ocurre alguna estrategia que pueda mejorar esa condición?

Compartir esquema
3. Activación y transporte de AG

Grupo 2- ¿Qué consecuencias tendrán estas deficiencias?

Déficit de las enzimas CPT-2 o CPT-1A Disminuye de la capacidad de Mayor dependencia de los

↓
obtener de ATP por oxidación tejidos afectados hacia la Glc
de AGCL

Grupo 2- ¿Se le ocurre alguna estrategia que pueda mejorar esa condición?

★ mantener glucosa en sangre estable para obtención de ATP por glucólisis:

○ ¿dieta rica en carbohidratos?
○ ¿evitar ayunos?

★ limitar la cantidad de AG de cadena larga como fuente de energía:

○ ¿dieta de bajo contenido de grasas?
○ ¿dieta complementada con TAG de cadena media, los cuales no requieren de la
lanzadera de la carnitina para ingresar a la mitocondria y ser oxidados?
3. Activación y transporte de AG

Grupo 3
La carencia de la enzima acil-CoA deshidrogenasa de ácidos grasos de cadena media (ADCM), un
trastorno autosómico recesivo, es uno de los defectos metabólicos innatos más comunes y el más
común dentro de los que afectan la oxidación de ácidos grasos, con una incidencia de uno cada
14.000 nacimientos.
¿Qué consecuencias cree que tendrá sobre la oxidación de ácidos grasos?
¿Cree que se podría resolver aumentando la cantidad de carnitina?

La deficiencia en ADCM causa una No se afecta el metabolismo de AGCL, por lo

disminución en la capacidad de oxidar ácidos cual no serviría aumentar la cantidad de
grasos de 6 a 10 carbonos. carnitina
3. Activación y transporte de AG

Grupo 4
Los ácidos grasos de cadena media abundan en la leche materna humana. A su vez, altas
concentraciones de triglicéridos de cadena media han sido usadas en las fórmulas lácteas para
recién nacidos pretérmino con el fin de aumentar el grado de absorción de lípidos.
Utilizando sus conocimientos sobre la regulación de la degradación de los ácidos grasos, piense qué
consecuencias/ventajas puede tener el consumo de ácidos grasos de esta longitud en recién
nacidos.

★ Transporte: oxidación más rápida al no depender de la lanzadera de carnitina para la

entrada a la mitocondria (recordemos que la lanzadera de carnitina es la etapa
limitante)
★ Regulación: su oxidación no se encuentra regulada por malonil-CoA, un intermediario
de la síntesis de ácidos grasos que inhibe la CPT1 y por lo tanto la β-oxidación (en el
hígado)
3. Activación y transporte de AG

Grupo 5
La L-carnitina es utilizada por algunos atletas como suplemento dietético. De hecho, en el
mercado se encuentran distintas presentaciones que contienen L-carnitina. En algunos
ejemplos, se promociona su uso para "la tonificación muscular”, “para un aumento de la
energía y de la resistencia durante el entrenamiento, especialmente para aquellos que entrenan
duro y con frecuencia".
a) ¿Cuál podría ser el fundamento bioquímico de esa publicidad?
b) ¿Cómo estudiaría el efecto de la suplementación con carnitina?
 3. Activación y transporte de AG

¿ ?

¿ ?

Grupo 5 ¿ [AG]?
a) ¿Cuál podría ser el fundamento
bioquímico de esa publicidad?

Artículo científica de revisión de acceso libre donde pueden consultar: Molecules 2020, 25, 182; ¿ ?
doi:10.3390/molecules25010182. Disponible en: https://www.mdpi.com/1420-3049/25/1/182
3. Activación y transporte de AG

Grupo 5- b) ¿Cómo estudiaría el efecto de la suplementación con carnitina?

¿Ingresa ¿Qué cantidad de

¿Aumenta la
al interior carnitina hay que
oxidación de
celular? consumir para ver
ácidos grasos?
¿La carnitina el efecto?
administrada ¿Aumenta el
vía oral se rendimiento
absorbe bien? deportivo?

¿Cómo afecta el
metabolismo de ¿En qué población tiene
glúcidos? efecto? ¿Cual es su dieta
y su nivel de actividad
¿Qué [ ] física?
alcanza en ¿Cómo afecta el
plasma? metabolismo
global de AG?
D- Ciclo de Krebs
1. En los experimentos que permitieron dilucidar el ciclo del ácido cítrico, Krebs observó
que la adición de malonato a extractos de músculo esquelético de paloma inhibía la
utilización de piruvato y que se acumulaba un metabolito
a) ¿Qué enzima inhibe el malonato?¿Qué tipo de inhibición es?

b) Al agregar citrato (o isocitrato o α-cetoglutarato) a las preparaciones tratadas con malonato qué
metabolito observó que se acumulaba? ¿Por qué?
c) Al agregar fumarato (o malato u oxalacetato) a las preparaciones tratadas con malonato que
metabolito observó que se acumulaba? ¿Qué pudo concluir?
d) Explique por qué cuando las preparaciones son tratadas con un exceso de oxalacetato se puede
superar la inhibición causada por malonato
e) ¿Por qué disminuye el consumo de piruvato al agregar malonato?
1. a) ¿Qué enzima inhibe el malonato?¿Qué tipo de inhibición es?

Similitud
estructural Inhibición
competitiva
1. b) Al agregar citrato (o isocitrato o α-cetoglutarato) a las preparaciones tratadas con malonato qué
metabolito observó que se acumulaba? ¿Por qué?

Estos intermediarios se
forman en pasos previos
a la reacción de
formación de succinato.
1. c) Al agregar fumarato (o malato u oxalacetato) a las preparaciones tratadas con malonato que
metabolito observó que se acumulaba? ¿Qué pudo concluir?

Al agregar intermediarios que

se forman luego del succinato,
se acumulaba nuevamente
succinato.
La vía metabólica es cíclica.
1. d) Explique por qué cuando las preparaciones son tratadas con un exceso de oxalacetato se puede
superar la inhibición causada por malonato

Inhibición competitiva

A concentraciones elevadas
de succinato (sustrato),
desplaza al malonato
(inhibidor) del sitio activo
1. e) ¿Por qué disminuye el consumo de piruvato al agregar malonato?

La inhibición de la SDH por malonato produce la inhibición del CK, generando la acumulación de
acetil-CoA, modulador alostérico negativo de la PDH. Disminuye el consumo de piruvato.
2. El ciclo de Krebs es una encrucijada metabólica con vías degradativas que llegan y vías
anabólicas que parten y está regulado en coordinación con el resto del metabolismo.
a) Escriba el balance global del Ciclo de Krebs

Acetil-CoA + 2 H2O + 3 NAD+ + FAD + GDP (ADP) + Pi

2 CO2 + 3 NADH + FADH2 + CoA-SH + GTP (ATP)

2. b) ¿ Cuáles son los pasos regulados del ciclo?

Está regulado en sus tres pasos exergónicos

2. b) ¿ Cuáles son los pasos regulados del ciclo?

● La acumulación de productos inhibe los

3 pasos limitantes del ciclo.
● Las concentraciones de sustratos e
intermediarios hacen que el ciclo se
mantenga a una velocidad que permita
mantener las concentraciones óptimas
de ATP y NADH.
2. b) ¿ Cuáles son los pasos regulados del ciclo?

El ciclo de Krebs es una encrucijada metabólica con vías degradativas que llegan y vías anabólicas que
parten y está regulado en coordinación con el resto del metabolismo.

En este sentido, el uso de la isocitrato deshidrogenasa y la α-cetoglutarato deshidrogenasa como

puntos de control integra el ciclo de Krebs con otras vías metabólicas.

La inhibición de la Isocitrato deshidrogenasa conduce a la acumulación de citrato (pues la

interconversión isocitrato-citrato es fácilmente reversible).

El citrato puede transportarse al citosol donde actúa por un lado sobre la Fosfofructoquinasa I,
inhibiendo la glucólisis, y por otro como precursor para la síntesis de ácidos grasos.

El α-cetoglutarato que se acumula cuando se inhibe la α-cetoglutarato deshidrogenasa puede utilizarse

como precursor de varios aminoácidos (ácido glutámico, glutamina) o de bases púricas.
2. c) Aunque el oxígeno no participa directamente del ciclo de Krebs, explique porqué el ciclo sólo
opera en condiciones aeróbicas. ¿Cuál es la molécula reguladora?

La relación [NADH]/[NAD+] determina la velocidad del Ciclo

Cuando esta relación aumenta el flujo de metabolitos por
la vía disminuye.

La oxidación de NADH a NAD+ ocurre a nivel de la cadena

de transporte de electrones en donde el aceptor final de
electrones es el O2, el cual se reduce a H2O.

Por lo tanto, el ciclo opera únicamente en condiciones

aeróbicas ya que en ausencia de oxígeno la relación
[NADH]/[NAD+] aumenta.
3. El fluorocitrato (FC) es un inhibidor de la enzima aconitasa. Se realiza un ensayo en el
laboratorio incubando células con este compuesto:

FC

FC
3. El fluorocitrato (FC) es un inhibidor de la enzima aconitasa. Se realiza un ensayo en el
laboratorio incubando células con este compuesto:

a) Se midió la concentración mitocondrial de dos metabolitos de interés en mitocondrias control y

tratadas con fluorocitrato y se construyeron gráficos de concentración en función del tiempo. Las
gráficas superiores corresponden al metabolito 1 y las gráficas inferiores al metabolito 2
3. a) Se midió la concentración mitocondrial de dos metabolitos de interés en mitocondrias control y
tratadas con fluorocitrato y se construyeron gráficos de concentración en función del tiempo.
Metabolito 1

¿Cuál podría ser la identidad Al inhibir a la enzima aconitasa esperamos la acumulación de su

del metabolito? sustrato que es el citrato.
También es esperable que la inhibición del flujo a través del ciclo
cause la acumulación de acetil-CoA.
3. a) Se midió la concentración mitocondrial de dos metabolitos de interés en mitocondrias control
y tratadas con fluorocitrato y se construyeron gráficos de concentración en función del tiempo.

Metabolito 2

¿Cuál podría ser la identidad El metabolito 2 podría corresponder al cis-aconitato o al isocitrato.

del metabolito? También podría corresponder al ATP. La inhibición del flujo
metabólico del ciclo de Krebs por el FC compromete en gran medida
la síntesis de ATP.
4. En células provenientes del paciente MC discutido anteriormente, ¿qué ocurre con el
flujo del ciclo de Krebs cuando se les suministra glucosa como fuente de energía? ¿Y si
se les suministra ácidos grasos?
Glucosa

GLUCÓLISIS

2 Piruvato

Si la fuente de energía es
glucosa, esperamos que el
Piruvato flujo del CK se encuentre
Si se suministra AG, aumenta Complejo disminuido
PDH
el flujo por el CK
Acetil-CoA

OXIDACIÓN
DE AG
Cadena de transporte
CICLO
de electrones
DE KREBS
Acilgraso-CoA
5. Los intermediarios del ciclo de Krebs de cuatro, cinco y seis átomos de carbono actúan
de precursores para vías biosintéticas. Los siguientes son ejemplos de vías anabólicas a
partir de intermediarios del ciclo:

Grupo 1: Síntesis del neurotransmisor ácido γ-aminobutírico (GABA) a partir de glutamato

Grupo 2: Síntesis de porfirinas
Grupo 3: Síntesis de ácido palmítico
Grupo 4: Síntesis de glucosa

Indique en cada caso:

a) ¿A partir de qué intermediario del ciclo se sintetiza la molécula?
b) ¿Cómo se repone el intermediario para que el ciclo siga funcionando?
5. Grupo 1: síntesis del neurotransmisor γ-aminobutírico (GABA) a partir de glutamato

GDH: glutamato
deshidrogenasa GABA
GAD: glutamato
glutamato
descarboxilasa CITOSOL descarboxilasa
PLP: piridoxal fosfato (GAD)
Glutamato

Acetil-CoA

Glutamato

Oxalacetato
MITOCONDRIA
CICLO
Glutamato
DE KREBS
transaminasa
𝛼-cetoglutarato ó GDH
5. Grupo 2: síntesis de porfirinas

SÍNTESIS DE
PORFIRINAS

CITOSOL
ALA

Acetil-CoA

Oxalacetato ALA
MITOCONDRIA
CICLO
DE KREBS

succinil-CoA glicina
5. Grupo 3: síntesis de ácido palmítico

SÍNTESIS DE AG

CITOSOL Acetil-CoA
citrato
liasa
Oxalacetato
Citrato

Acetil-CoA

Cit
rato
Oxalacetato
Citrato
CICLO
DE KREBS
MITOCONDRIA
5. Grupo 4: síntesis de glucosa
GLUCOSA

GLUCONEOGÉNESIS

PEP

Oxalacetato
CITOSOL

Malato

PEP
o Acetil-CoA
lat
Ma

Oxalacetato

CICLO
MITOCONDRIA Malato DE KREBS
5. Grupo 1: Síntesis del neurotransmisor ácido γ-aminobutírico (GABA) a partir de
glutamato
Grupo 2: Síntesis de porfirinas
Grupo 3: Síntesis de ácido palmítico
Grupo 4: Síntesis de glucosa

b) ¿Cómo se repone el
intermediario para que el ciclo
siga funcionando?

REACCIONES ANAPLERÓTICAS
REACCIONES ANAPLERÓTICAS