BACILOS GRAM NEGATIVOS FERMENTADORES, NO EXIGENTES

Familia Enterobacteriaceae:

 Salmonella  Eduardsiella
 Escherichia  Pantoea
 Providencia  Raoultella
 Shigella  Yersinia
 Proteus  Hafnia
 Morganella  Serratia
 Enterobacter  Citrobacter
 Klebsiella

Algunas Generalidades:

 Ubicuos
- Algunos bien adaptados al huésped, de reservorio humano.
- Otros de reservorio animal.
- Muchos parte de la flora normal.
 En general oportunistas.
 LPS → endotoxina gram negativa, confiere características antigénicas.
 BGN rectos de 0.3 a 1.5 micras.
 Aerobios o anaerobios facultativos.
 No esporulados.
 En su mayoría móviles por flagelos perítricos (hay excepciones).
 Quimiorganótrofos.
 Metabolismo fermentativo y respiratorio.

Ubicación Taxonómica:

 Tribu 1: Escherichiae
 Tribu2: Edwarsiellae
 Tribu 3: Salmonellae
 Tribu 4: Citrobacterae
 Tribu 5: Klebsiellae
 Tribu 6: Proteae
 Tribu 7: Yersiniae
 Tribu 8: Erwiniae
Dominio: Bacteria
Reino: Eubacteria
Filo: Proteobacteria
Clase: Gamma proteobacteria
Orden: Enterobacteriales
Familia: Enterobacteriaseae
Género:

-Escherichia -Morganella -Salmonella -Edwarsiella

-Klebisella -Enterobacter -Shigella -Hfnia
-Proteus -Citrobacter -Yersinia -Pantoea
-Providencia -Serratia -Raoultella

Especie:

-E. coli -E. tarda

-K. pneumoniae -M. morgani
-Y. pestis -P. vulgaris
-S. disenteriae -S. Marcescens

CARACTERÍSTICAS CULTURALES:
Colonias:

 Convexas
 Circulares
 De bordes regulares
 Mucoides
 En tonos de gris
CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS:

 Fermentación de glucosa.
 Reducción de nitratos a nitritos.
 Ausencia de citocromo oxidasa (-).

Particulares (identificación):

 Fermentación de otros azúcares (lactosa, galactosa, manosa, sorbitol, manitol) a través de

medios diferenciales, o del sistema API por ej.
 Vías metabólicas fermentativas (a través de VP y RP).
 Vías metabólicas oxidativas alternativas (a través de citrato de Simmons).
 Producción de gas.
 Producción de H2S.
 Dotación enzimática: FADA, LDA, LDC, ODC, DNAasa
 Movilidad.
 CARACTERÍSTICAS ANTIGÉNICAS:
-Antígenos O:

 Somáticos
 Parte más externa del LPS
 Unidades polisacáridas repetidas
 Termo y alcohol estables.
 Detectables por LxA simple.
 Un mo puede tener uno o varios.
 Algunos pueden asociarse con fenotipos virulentos (ej: E. coli O: 157, O: 111, O: 119).

-Antígenos K:

 De envoltura
 Externos a los antígenos O
 Puede construir una verdadera cápsula (klebsiella) haciendo inaglutinable el O.
 Son de naturaleza polisacárida (hay algunos proteicos).
 Un mo puede tener uno o varios.
 Algunos pueden asociarse con fenotipos virulentos (ej: E.coli K: 1).

-Antígenos H:

 Son los más externos (primeros contactos).

 De naturaleza proteica (flagelina).
 Termolábiles y alcohol inestables.
 En general un mo tiene uno sólo, pero por ej. la salmonella regula su expresión génica.
 Algunos pueden asociarse con fenotipos virulentos (ej: E. coli O: 157 H:7).

CARACTERÍSTICAS PATOGÉNICAS:
Procesos infecciosos asociados:

 Infección respiratoria aguda baja.

 Infección urinaria baja.
 Infección de piel y partes blandas.
 Abscesos
 Sepsis

Perfiles de resistencia antibiótica:

ESCHERICHIA COLI:

ALGORITMOS DE IDENTIFICACIÓN EN EL LABORATORIO:

  Características culturales (textura, pigmentación, HAUCH, etc.)
 Microscopía (gram).
 Aporte de medios diferenciales.
 Pruebas bioquímicas rápidas.
 Pruebas bioquímicas de incubación.
 Antibiograma.

IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA DE BGN:

CITRATO:

-Indicador de pH: Azul de bromotimol.

-Composición cítrica: Citrato de Na

Medio de Simmons (medio pobre, carente de proteínas
e HdC).

-Revela: Metabolismo alternativo a la fermentación glucídica.

-Principio: Producción de intermediarios metabólicos alcalinos.

-Procedimiento: Estría única zigzag en pico. Producto final:

24-48h – 35-37ºC

-Interpretación: Viraje/desarrollo.

-CC: (+): E. aerógenes.

(-): E. coli

FENILALANINA DESAMINASA:
 -Indicador de pH: No tiene
Revelador: FeCl3 Al 10%: Agente quelante del
cetoácido AFP.
-Composición cítrica: aa fenilalanina.
Genera un precipitado de color
-Revela: Presencia de la enzima FAD.
verde.
-Principio: Formación de fenilpiruvato por desaminación de la FA.

-Interpretación: Viaje tras revelado.

-CC: (+): Proteus sp

(-): E. coli

TSI: Triple azúcar hierro agar

-Indicadores: Bases orgánicas como producto final

 De pH: Rojo fenol

 De producción de H2S:
FeSO4
Desaminación
-Composición crítica: oxidativa

 Glucosa (1 parte)
 Lactato (10 partes) Fermentación
 Sacarosa (10 partes) oxidativa
 Peptona (1 parte)

-Revela: Metabolismo OF (fermentación | O2 | H2S) Ácidos orgánicos como prod. final.

-Principio: Producción de intermediarios metabólicos

 Oxidación glucídica fermentativa.

 Oxidación proteica.

-Procedimiento: Estría única zigzag en pico/cámara

24-48h – 35-37ºC

LIA: Lisina Hierro Agar

-Indicadores:

 De pH: Púrpura de bromocresol

 De producción de H2S: CAP
(citrato de amonio férrico).

-Composición crítica: Gel/Dxt

L-Lys

-Revela: Presencia de las enzimas LDA y LDC.

Producción de H2S.

-Principio: Producción de intermediarios metabólicos

 Descarboxilación de la Lys (anaerobiosis)

 Desaminación de la Lys (aerobiosis)
 Producción de H2S

-Procedimiento: Estría única zigzag en pico/cámara

24-48h – 35-37ºC

-Interpretación: Viraje/pigmentación

-CC: LDC (+): E. aerógenes

(-): E. cloacae
LDA (+): Proteus sp
(-): E. coli

MIO: Movilidad Indol Ornitina

-Indicador de pH: Púrpura de bromocresol

-Revelador de indol: Reactivo e kovacs / james. (amarillo).

-Indicador de movilidad: Turbidez

-Composición crítica: aa L-Om

aa Trp (agar)

-Revela:

 Presencia de la enzima triptolanasa

 Presencia de la enzima ODC
 Movilidad bacteriana

-Principio: Producción de intermediarios metabólicos

 Descarboxilación de la L-Orn
 Degradación del Trp (indol)

-Procedimiento: Punción recta única y estable.

24-48h – 35-37ºC
Revelado por goteo 30seg.

-Interpretación: Viraje / turbidez / viraje tras revelado

-CC:

VOGES PROSKAUER:
 -Indicador de pH: Alfa naftol 5% + KOH 40%
Voges A Voges B = Reactivo de Barrit

-Composición crítica:

 Glucosa
 Peptona

-Revela: fermentación butanodiólica.

-Principio: Formación de diacetilo a partir de acetona en medio alcalino estimulado por alfa-naftol.

-Procedimiento: Punción
24-48h – 35-37ºC
Revelado por goteo 10-15min

-Interpretación: Viraje tras revelado

-CC: (+): e. aerógenes

(-): e. coli

ROJO DE METILO:

-Indicador de pH: Rojo de metilo.

-Composición crítica:

 Glucosa
 Peptona

-Revela: Vía fermentativa ácidomixta

-Principio: Acidificación del medio por producción de ácidos orgánicos

fermentativos.

-Procedimiento: Punción única

-Interpretación: Viraje 24-48h – 35-37ºC
Revelado por goteo 60seg.
-CC: (+): E. coli
(-): E. aerógenes
 UREASA:
-Indicador de pH: Rojo fenol

-Composición crítica: glucosa / NaCl

Urea
Fosfato monopotásico

-Revela: Presencia de la enzima ureasa.

-Principio: Alcalinización del medio por la producción de amoniaco a partir de urea.

Amoniaco producto final alcalinizante (+ CO2).

-Procedimiento: Punción única

24-48h – 35-37ºC

-Interpretación: Viraje

-CC: (+): P.mirabilis

(-): E. coli

DNAasa:
DNAasa verde de metilo:
ADN se combina con el verde de metilo (actúan como cationes)
para producir el color verde menta.

Cuando se hidroliza el ADN, el complejo se libera y el verde de

metilo libre es incoloro a pH 7.5

= halo de decoloración tras incubación.