Proteínas

DR AMÈRICO CASTRO LUNA

Hidrólisis de proteínas

Para verificar la hidrólisis ácida o alcalina de una

proteína hasta aminoácidos se debe realizar la
prueba de Biuret, si la hidrólisis no es completa, las
proteínas dan color violeta púrpura o azul que se
atribuye a la presencia de enlaces peptídicos
múltiples en la molécula; si no da coloración, indica
que la hidrólisis es total.
Productos intermedios liberados durante la hidrólisis
de una proteína

Proteína desnaturalizada
Metaproteína
Proteosas
Peptonas
Polipéptidos
Dipéptidos
Aminoácidos
El proceso de hidrólisis de una proteína, se puede representar como la ruptura
de una cadena polipeptídica

H R O H R` O H R`` O
HIDRÓLISIS
N C C N C C N C C
+
H
H n H n` H n``

cadena polipeptídica

R R` R``

H2N C COOH + H2N C COOH + H 2N C COOH

H n H n` H n``

aminoácido aminoácido aminoácido

Tipos de hidrólisis de las proteínas

Hidrólisis ácida.- Utiliza ácido clorhídrico o ácido

sulfúrico de concentración o normalidad conocida.
Hidrólisis alcalina.- Utiliza hidróxido de sodio o
hidróxido de bario de concentración o normalidad
conocida.
Hidrólisis enzimática.- Utiliza compuestos
biológicos de naturaleza protéica: enzimas.
Reacciones de la proteínas

1. Reacciones de coloración:
Reacción de Biuret (violeta púrpura)
Reacción xantoprotéica (amarillo a anaranjado)
Reacción de Millón (rojo)
Reacción de ninhidrina (violeta o púrpura)
2. Reacciones de precipitación (con sales metálicas dan
precipitados):
Nitrato de plata, sulfato de cobre, cloruro de bario, bicloruro de
mercurio, acetato de plomo.
3. Reacciones de coagulación
Con el calor: solución protéica más ácido acético más calor
Con el alcohol etílico.
Reacción del anillo de Heller: 5mL HNO3 más 5mL de proteína
agregado en zona, da un anillo blanco en la zona de contacto.
ENZIMAS
 CONCEPTO DE ENZIMA
- Las enzimas son catalizadores muy potentes y
eficaces.
- Químicamente son proteínas.
- Como catalizadores, las enzimas actúan en
pequeña cantidad y se recuperan
indefinidamente.
- No llevan a cabo reacciones que sean
energéticamente desfavorables.
- No modifican el sentido de los equilibrios
químicos, sino que aceleran su consecución.
REACCIÓN CATALIZADA POR UNA
ENZIMA.
 CATALIZADOR
- Un catalizador es una sustancia que acelera una
reacción química, hasta hacerla instantánea o casi
instantánea.
- Un catalizador acelera la reacción al disminuir la
energía de activación.
-En una transformación dada de "A" a "P" , "A"
representa las moléculas reaccionantes, que
constituyen el estado inicial.

-"P" representa los productos o estado final.

-La reacción química de A a P es un proceso

posible si la energía de P es menor que la de A.
-Pero hay una barrera de energía que los
separa; si no es por ella, A no existiría, puesto
que no sería estable y se habría transformado
en P.

- Este escollo es una barrera energética, la

energía de activación (EA), corresponde al
estado de transición.
CARACTERÍSTICAS DE LA ACCIÓN
ENZIMÁTICA
La característica más sobresaliente de las
enzimas es su elevada especificidad. Esta es
doble, y explica que no se formen
subproductos:

1. Especificidad de sustrato. El sustrato (S) es la

molécula sobre la que el enzima ejerce su
acción catalítica.
2. Especificidad de acción. Cada reacción
está catalizada por una enzima especifica.
 La acción enzimática se caracteriza por la formación
de un complejo que representa el estado de
transición.

E+S ES E+P

- El sustrato se une a la enzima a través de numerosas

interacciones débiles como son: puentes de hidrógeno,
electrostáticas, hidrófobas, etc, en un lugar específico, el
centro activo.
- Este centro es una pequeña porción de la enzima,
constituído por una serie de aminoácidos que
interaccionan con el sustrato.
 Algunas enzimas actúan con la ayuda de
estructuras no protéicas. En función de su
naturaleza se denominan:

1. Cofactor. Cuando se trata de iones o moléculas

inorgánicas.
2. Coenzima. Cuando es una molécula orgánica.
Aquí se puede señalar, que muchas vitaminas
funcionan como coenzimas; y realmente las
deficiencias producidas por la falta de vitaminas
responde más bien a que no se puede sintetizar
una determinada enzima en el que la vitamina es
la coenzima.
VITAMINAS

Algunas vitaminas son necesarias para la

actuación de determinados enzimas, ya que
funcionan como coenzimas que intervienen en
distintas rutas metabólicas y, por ello, una
deficiencia en una vitamina puede originar
importantes defectos metabólicos, como puede
verse en la tabla adjunta:
VITAMINAS FUNCIONES Enfermedades
carenciales
C (ácido Coenzima de algunas peptidasas. Interviene en la síntesis de
Escorbuto
ascórbico) colágeno

B1 (tiamina) Coenzima de las descarboxilasas y de las enzima que transfieren Beriberi

grupos aldehídos

B2 (riboflavina) Constituyente de los coenzimas FAD y FMN Dermatitis y lesiones en las

mucosas
B3 (ácido
Constituyente de la CoA Fatiga y trastornos del
pantotinico)
sueño

B5 (niacina) Constituyente de las coenzimas NAD y NADP

Pelagra

B6 ( piridoxina) Interviene en las reacciones de transferencia de grupos aminos.

Depresión, anemia

B12
Coenzima en la transferencia de grupos metilo.
(cobalamina) Anemia perniciosa

Biotina Coenzima de las enzimas que transfieren grupos carboxilo, en Fatiga, dermatitis...
metabolismo de aminoácidos.
 EFECTO DEL pH Y TEMPERATURA
1. Efecto del pH. Al comprobar experimentalmente la influencia del pH en la
velocidad de las reacciones enzimáticas se obtienen curvas que indican que las
enzimas presentan un pH óptimo de actividad. El pH puede afectarse de varias
maneras:
o El centro activo puede contener aminoácidos con grupos ionizados que pueden
variar con el pH.
o La ionización de aminoácidos que no están en el centro activo puede provocar
modificaciones en la conformación de la enzima.
o El sustrato puede verse afectado por las variaciones del pH.
Algunas enzimas presentan variaciones peculiares. La pepsina del
estómago, presenta un óptimo a pH=2, y la fosfatasa alcalina del intestino a un
pH= 12
2. La temperatura. Influye en la actividad. El punto óptimo representa
el máximo de actividad. A temperaturas bajas, las enzimas se hallan
"muy rígidas" y cuando se supera un valor considerable (mayor de 50
oC) la actividad cae bruscamente porque, como proteína, la enzima se

desnaturaliza.
CLASIFICACIÓN DE ENZIMAS
1. Óxido-reductasas
Si una molécula se reduce, tiene que
(Reacciones de oxido-
haber otra que se oxide
reducción).

2. Transferasas · grupos aldehídos

(Transferencia de grupos · grupos acilos
funcionales) · grupos glucósidos
· grupos fosfatos (kinasas)
 Transforman polímeros en
monómeros.
3. Hidrolasas Actúan sobre:
(Reacciones de hidrólisis) · enlace Ester
· enlace glucosídico
· enlace peptídico
· enlace C-N

4. Liasas · Entre C y C
(Adición a los dobles · Entre C y O
enlaces) · Entre C y N
 5. Isomerasas
(Reacciones de isomerización)

· Entre C y O
6. Ligasas · Entre C y S
(Formación de enlaces, con aporte de ATP) · Entre C y N
· Entre C y C
GLICOPROTEÍNAS
Glicoproteínas
- Son moléculas compuestas por una
proteína unida a uno o más
carbohidratos simples o compuestos.
- En las glicoproteinas los oligosacaridos
están unidos de modo covalente a
cadenas laterales específicas y se
hallan en la matriz extracelular y sirven
de anclaje de las células a estructuras
de soporte.
- Los proteoglicanos y péptidoglicanos
son moléculas formadas por
carbohidratos y proteínas
Ejemplos de glicoproteínas:
- Hormonas
- Anticuerpos
- Enzimas
- Proteínas receptoras
- Proteínas de adhesión celular
- Factores de crecimiento
- Proteínas de identificación celular
- Proteínas sanguíneas
- Proteínas estructurales
- etc.
 Monosacaridos

Poliéptidos

Asparagina
(aminoácido)

Figura 1. Polipéptido (N-glucosilado)

- La fijación de un carbohidrato a una
proteína, permite que se identifique a las
proteínas que están fuera de la célula o en
la membrana, permitiendo que se
conserven para su posterior uso en el
citoplasma de la célula, donde las proteínas
no están glicosiladas.
- La unión del carbohidrato con el péptido se
realiza mediante un enlace glicosidico en la
cadena lateral de residuos de serina,
treonina o asparagina.
- Los azúcares más comunes de olisacaridos
son: D-glucosa, D-galactosa, D-manosa, N-
acetil-D-glucosamina, L-fucosa, etc.
Figura 2. Fórmulas estructurales de azúcares en las glucoproteinas
- Los grupos sanguíneos dependen del tipo de glicoproteína
que contienen la membrana de los eritrocitos.
- El grupo A tiene como oligosacárido una cadena de N-
acetilgalactosamina.
- El grupo B tiene una cadena de galactosa.
- El grupo AB presenta los dos tipos de glicoproteínas.
- El grupo 0 carece de ambos.
- Para determinar el grupo sanguíneo se usan antisueros,
que contienen anticuerpos que reconocen determinado
tipo de glicoproteína (el antisuero A reconoce la
glicoproteína A).
- El conocimiento del grupo sanguíneo es
importante para hacer transfusiones y evitar la
formación de coágulos que provocan infartos y
trombosis cerebrales mortales.

Glicoproteínas de la matriz extracelular

- Los componentes más importantes de la matriz

extracelular, lo constituyen el colágeno y los
proteoglicanos.
- Existe un grupo de proteínas no colágenas de la
matriz, que además de unirse al colágeno y a los
proteoglicanos lo hace a receptores específicos
de la membrana celular.
- Son las glicoproteinas. Esta interacción permite
mantener la organización de la matriz, regulando
por ejemplo la adhesión, migración y forma celular.
Estas glicoproteinas son reguladores cruciales del
microambiente celular.
- Las glicoproteínas se distinguen de los
proteoglicanos por su mayor contenido de proteínas
(85%-90% del peso molecular), y porque sus
cadenas laterales de polisacáridos son de diferente
naturaleza.
- Frecuentemente contienen hexosamina, galactosa y
otros azucares con ácido siálico. Además, su
formación comienza cuando las proteínas de
membrana que se sintetizan en el retículo
endoplasmático rugoso, se envían al complejo de
Golgi en vesículas que se fusionan con él.
- Así, dentro de los sacos del complejo de Golgi,
se produce el enlace final de los glúcidos con las
proteínas; formando las Glucoproteínas, que
luego se dirigen en vesículas al lugar correcto.
- Las glicoproteínas reconocidas de la matriz
extracelular son:
- Fibronectina
- Laminina
- Enactina
- Trombospondina
- Fibrilina
- Tenascina
- Undulina.
Fibronectina: es la glicoproteina más importante
de la matriz extracelular y de elevado peso
molecular, con un contenido de 5 % de hidrato de
carbono y compuesta por dos cadenas de 220000
a 250000 unidas por puentes disulfuro.

La molécula de fibronectina tiene a lo largo de su

cadena un conjunto de puntos de enlace o
receptores altamente específicos para las
macromoléculas de superficie celular y de la matriz
extracelular.
Entactina:
Es una Glucoproteína sulfatada

Laminina: Es una molécula glicoproteica

sulfatada con un 15 % de hidrato de carbono, en
forma de cruz.

Trombospondina: Es una glucoproteina de

adhesión, de elevado peso molecular con puentes
de disulfuro.
Fibrilina: Es una glicoproteina de peso elevado
peso molecular distribuida ampliamente en la
matriz extracelular de la dermis, pulmón, riñón,
arteria aorta y pulmonar, tendón, músculo,
cartílago elástico, cráneo y zonula ciliar.

Tenascina: Fue identificada por primera vez en

tumores humanos y en la unión miotendinosa del
pollo. Es una proteína hexamérica que se expresa
durante la morfogénesis embrionaria, y
escasamente presente en el adulto.
Undulina: Tiene aspecto de fibras onduladas al
microscopio óptico. Sintetizada por las células
almacenadoras de grasa en el hígado, en la
placenta, intestino, piel y mucosa oral y por una
línea de células provenientes de rabdomiosarcoma
humano.

rabdomiosarcoma
 Glicoproteína con unión N-glicosídica

Figura 3. Residuos de manosa unidos a otros azucares forman glicoproteínas

Esquema de la distribución y composición de
los tres tipos de glicoproteínas N-unidas.
 Glicoproteínas con unión O-glicosídica

- Este tipo de glicoproteínas se encontró por primera vez

en un sustancia llamada mucina, por lo que también se
les conoce con el nombre de glicanos tipo mucina.

- Ha sido mucho menos investigados que las estructuras

N-unidas y un ejemplo de este tipo de estructuras son los
grupos antígenos de la sangre (clasificación ABO.
Existen otro tipo de estructuras moleculares biológicas como los
peptidoglicanos, que forman la pared celular de las bacterias, los
proteoglicanos, similares a las glicoproteínas pero mucho más ricos en
carbohidratos y glicolípidos en donde los azúcares están unidos a estructuras
lipídicas.
 CONCLUSIONES

- Las glicoproteínas son estructuras moleculares formadas principalmente

por cadenas aminoacídicas unidas a una pequeña porción de glúcidos.
- Se encuentran fundamentalmente en la matriz extracelular asociadas a
componentes tanto de la misma matriz como a estructuras celulares
(receptores), y su función primordial es la de servir de anclaje de a las
células a estructuras de soporte como la lamina basal y componentes
colágenos de la matriz.
- Contribuyen además, al anclaje de los epitelios a la matriz extracelular.
- Dentro de todas estas, destaca la Fibronectina que adopta formas
diferentes, todas codificadas por el mismo gen, y se encuentra en la
Matriz extracelular como fibrillas insolubles, pero de manera soluble en
la sangre y otros líquidos tisulares.
 ¡MUCHAS
GRACIAS!
“Sin el amor por la investigación, el mero
conocimiento y la inteligencia no pueden
hacer un científico”

- Iréne Joliot-Curie