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Escuela: Biología
Asignatura: Bioquímica
I. RESUMEN
Los carbohidratos son un grupo compuesto por Carbono (C), Hidrógeno (H) y Oxígeno
(O), a este también se le puede adicionar Nitrógeno (N), Fósforo (P) y Azufre (S). Los
carbohidratos cumplen distintas funciones como estructural, almacenamiento,
reserva energética, entre otras. Los carbohidratos se dividen en 3 clases, los
monosacáridos, oligosacáridos y polisacáridos. Los carbohidratos están relacionados
con distintos grupos como las cetonas, aldosas, vitaminas, enzimas, etc.
II. INTRODUCCIÓN
IV. METODOLOGÍA
Figura 1. Resultados del sometimiento de glucosa (tubo 1), sacarosa (tubo 2),
almidón (tubo 3), maltosa (tubo 4) y fructosa (tubo 5) a ácido sulfúrico
concentrado y calor.
Al agregar el timol a cada uno de los tubos, en estos apareció un anillo rojo, el
cual indicaría la presencia de carbohidratos en la solución; sin embargo, al
someterla a calor, en las soluciones de glucosa, almidón, maltosa y fructosa se
dio la formación de una coloración rojiza en la base de los tubos, mientras que
la coloración se mantuvo uniforme en el tubo con solución de sacarosa, lo cual
indicaría la presencia de furfurales y 5 hidroximetil furfurales teóricamente,
aunque sería más acertado decir que se debió a la formación de 5 hidroximetil
furfural, ya que en la composición de las soluciones sólo había presencia de
carbohidratos compuestos por hexosas.
4. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
5. CONCLUSIÓN
- Se puede detectar la presencia de carbohidratos en una
solución a través de su manejo con ácidos concentrados e
indicadores resultando una respuesta positiva a la formación
de furfural y/o 5 hidroximetil furfurales.
GLUCOSA
SACAROSA
ALMIDÓN
MALTOSA
FRUCTOSA
4. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
segun viamontes et all.(2000) en el estudio preliminar de merremia
umbellata, los carbohidratos son azúcares que presentan en su estructura
grupos aldehídos(polihidroxialdehido) y cetonas (polihidroxicetona), estos se
hidrolizan en monosacáridos y a determinadas condiciones como soluciones
básicas(Cu (OH)2) se reducendando lugar a la aparicion de un precipitado
rojo , siempre y cuando presenten un carbono libre en su estructura; Tales
afirmaciones fueron corroboradas en prácticas de laboratorio en el cual se
produjo la reducción de cobre +2 (óxido cúprico) a cobre +1(óxido cuproso )
en carbohidratos como la glucosa, maltosa y fructuosa; observandose un
cambio de color de azul celeste a rojo ladrillo
5. CONCLUSIÓN
❖ Los carbohidratos con un grupo carbonilo libre en medio alcalino se
reducen llegando a la conclusión de que glucosa, maltosa y fructosa
son azúcares reductores y los carbohidratos sacarosa y almidón son
azúcares no reductores
3. RESULTADOS
Todo el proceso de hidrólisis ácida del almidón en total demoró tres
horas.
TIEMPO (minutos) COLOR
0 Azul oscuro
30 Violeta
60 Pardo rojizo
90 Casi incoloro
4. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
La hidrólisis ácida por acción del HCL a una temperatura elevada va a
producir un hidrólisis total del almidón formando glucosa, maltosa, etc. El
almidón al calentarse con el ácido, se descompone formando fragmentos de
diferente tamaño denominados dextrinas, que se van a diferenciar por su
masa molecular y la coloración que tomará con solución de lugol.
Es así como el avance del hidrólisis del almidón se mostrará con la formación
del complejo con yodo, con una coloración azul ya que el yodo se introduce
en las espiras de las moléculas del almidón. A medida que la hidrólisis
continúa el color azul va desapareciendo y aparece un color rojizo por las
eritrodextrinas y posteriormente se observa una coloración amarilla como
resultado final.
En presencia de (HCl) y en caliente, la sacarosa se hidroliza, es decir,
incorpora una molécula de agua y se descompone en los monosacáridos que
la forman, glucosa y fructosa, que así son reductores
La hidrólisis ácida del almidón sucede en varias etapas: primero se obtienen
las dextrinas, luego la maltosa y por último la glucosa, en pocas palabras.
Para que todo esto se efectúa es importante la temperatura, debido a que el
calor facilita el rompimiento de los enlaces glucosídicos.
Por último, se añadió NaOH a la solución sobrante para neutralizar está ya
que hasta ese momento la solución seguía siendo ácida y tomó una
coloración rosado pálido. Es importante resaltar que si se compara la
hidrólisis ácida y la enzimática del almidón, la ácida va a demorar alrededor
de hora a más tiempo que la enzimática que es en minutos. El almidón al ser
un componente muy difícil de separar va a necesitar uno o más factores para
poder hidrolizar como lo indica la práctica, la temperatura y la utilización de
los reactivos que ocasionan una ruptura del almidón.
5. CONCLUSIÓN
El almidón por hidrólisis ácida con el ácido clorhídrico (HCl), se descompone
en carbohidratos reductores como la glucosa que se va efectuando por la
desaparición del color azul al añadir la solución de lugol.
0 Azul violeta
30 Amarillo palido
TABLA 4: Colores observados en un tiempo determinado
4. DISCUSIÓN DE RESULTADOS:
La α-amilasa salival humana (AASH) es la proteína de la saliva que se
encuentra en mayor concentración y posee actividad enzimática, ya
que cataliza los enlaces α-1,4-glucosídicos de los almidones y los
carbohidratos (Tovar et al., 2013). Con nuestro experimento logramos
comprobar lo que nos dice Tovar en su artículo, ya que en nuestros
resultados logramos hidrolizar el almidón por medio de la enzima
amilasa de la saliva humana lo cual se reflejó en los colores obtenidos
en los tubos de ensayo al agregarles lugol y al poner uno a una
temperatura de 37 °C que simulaba la temperatura humana.
5. CONCLUSIÓN: solo dale respuesta al objetivo
Se comprobó que la presencia de la amilasa hidrolisa el almidón,
porque inicialmente el lugol en presencia de almidón nos daba un
color azul y después de pasado 30 segundos a una temperatura de 37
°C nos dio el color amarillo que nos indica que el almidon ha sido
degradado hasta unidades de glucosa , maltosa ,tetrasacaridos ,etc .
E. EXPERIMENTO N° 5. DETERMINACION DE ACIDO ASCORBICO EN
ORINA
1. MATERIALES
❖ Matraz Pipetas
❖ Bureta Solución de 2,6-diclorofenolindofenol 1mM (pesar 32.6
mg de 2,6-diclorofenolindofenol y disolverlo en agua destilada
hasta 100 ml)
❖ Solución patrón de ácido ascórbico (20 mg/ 1000 ml).
(Prepárese en el momento de usarse)
❖ Ácido acético glacial
❖ Muestra de orina
2. MÉTODO DE TRABAJO
➔ Para colectar la muestra de orina, se indica al paciente que
debe realizarse una higiene de los genitales, previa a la
recolección de la muestra, para la cual se debe utilizar un
frasco de boca ancha (esterilizado).
➔ En un matraz pipetear 0.5 ml de orina y agregar 4.5 ml de agua
destilada (dilución 1:10), luego agregar 0.5 ml de ácido acético
glacial y titular con 2,6-diclorofenolindofenol hasta obtener un
color rosa estable. Anotar el volumen usado en la titulación
(T).
➔ Repetir por lo menos dos veces.
➔ Asimismo, titule dos tubos, usando para el blanco 5.0 ml de
agua destilada (Bl) y 5.0 ml de solución patrón de ácido
ascórbico (Pt).
➔ Además, agregue a ambos 0.5 ml de ácido acético glacial y
titule como en el caso anterior.
➔ El contenido de vitamina en la muestra se determina utilizando
la siguiente fórmula:
3. RESULTADOS
Figura 6 : Tubos titulados titule, usando para el blanco 5.0 ml de agua destilada (Bl) y
5.0 ml de solución patrón de ácido ascórbico (Pt), respectivamente.
TUBO 2,6-DICLOROFENOLINDOFENOL
(mL añadidos)
T 0,215 mL
BI 0,1 mL
Pt 0,1 mL
TABLA 5: volúmenes usados en la titulación
Fórmula:
𝐵𝐼
𝑉𝑖𝑡𝑎𝑚𝑖𝑛𝑎 𝐶 = (𝑚𝑔/𝑑𝑙) = 𝑇 − 𝑃𝑡
− 𝐵𝐼 𝑥 2 𝑥 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛
Reemplazando datos:
0,1
𝑉𝑖𝑡𝑎𝑚𝑖𝑛𝑎 𝐶 = (𝑚𝑔/𝑑𝑙) = 0, 215 − 0,1
− 0. 1 𝑥 2 𝑥 10
𝑉𝑖𝑡𝑎𝑚𝑖𝑛𝑎 𝐶 = (𝑚𝑔/𝑑𝑙) = 0, 215 − 1 − 2
𝑉𝑖𝑡𝑎𝑚𝑖𝑛𝑎 𝐶 = (𝑚𝑔/𝑑𝑙) = 0, 215 − 3
𝑉𝑖𝑡𝑎𝑚𝑖𝑛𝑎 𝐶 = (𝑚𝑔/𝑑𝑙) = − 2. 785 𝑚𝐿/𝑑𝑙
4. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
El método volumétrico (Campos Mangas, C. , 2021) utilizando el colorante
(2,6‐diclorofenolindofenol) en la muestra de orina, este es reducido mientras
que la Vit C es oxidada. Durante este proceso el colorante se vuelve incoloro
y de esta forma mientras haya Vit C en la muestra, no se verá el color del
indicador, es decir el colorante es reducido por el ácido ascórbico a una
forma incolora en medio ácido (para el cual puede emplearse ácido acético
o metafosfórico). En el experimento realizado durante este proceso el
colorante se volvió rosa pálido por lo que esto nos indica que no existe
presencia de ácido ascórbico (Vit. C ).
5. CONCLUSIÓN
● En la muestra titulada se estableció que no hay la presencia de
vitamina C en la orina; el valor calculado de esta es negativa, por lo
que podemos deducir que el paciente tuvo una dieta baja de
vitamina C.
3. MÉTODO DE TRABAJO
Para la reacción de Trinder:
- A 1.0 ml de reactivo de color se adicionaron 10 µL de suero, estándar o agua
para preparar los problemas, estándares o blanco respectivamente. Las
mezclas de reacción se incubaron durante 10 min a 37°C y se realizaron las
lecturas espectrofotométricas de los problemas y estándares a 510 nm,
calibrando el espectrofotómetro contra el blanco de reactivos.
- El contenido de glucosa en las muestras se determina utilizando la siguiente
fórmula:
𝐴𝑏𝑠 (𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎)
𝐺𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 (𝑚𝑔/𝑑𝑙) = 𝐴𝑏𝑠(𝑒𝑠𝑡á𝑛𝑑𝑎𝑟)
× 100
4. DATOS EXPERIMENTALES
TUBO ABSORBANCIA
Muestra 1 1.789
Muestra 2 0.820
Estándar 0.868
7. CONCLUSIÓN
- El método de Trinder nos resulta como una opción eficaz para medir
los niveles de glucosa en la sangre, como en el caso de las muestras
estudiadas, los valores pueden ser comparados con los estándares,
teniendo una importancia médica, pues nos puede indicar si la
persona se encuentra dentro del rango normal o si presenta algún
problema de salud relacionado a un exceso (hiperglucemia) o
deficiencia (hipoglucemia) de azúcar.
CUESTIONARIO
1. Describa la interacción de hormonas y enzimas en el control de las
concentraciones de glucógeno.
Puede presenta diversas interacciones, tales como:
❖ De efecto permisivo, el efecto de una hormona sobre una célula diana
requiere una exposición previa o simultánea a otra u otras hormonas. Por
ejemplo, un aumento de estrógenos puede dar lugar a un aumento en el
número de receptores de progesterona. Ambas hormonas preparan el útero
para la posible implantación de un zigoto o huevo fertilizado.
❖ De efecto sinérgico, dos o más hormonas complementan sus respectivas
acciones y ambas son necesarias para conseguir la respuesta hormonal total.
Por ejemplo, la producción, secreción y salida de leche por las glándulas
mamarias requieren el efecto sinérgico de estrógenos, progesterona,
prolactina y oxitocina.
❖ De efecto antagonista, el efecto de una hormona sobre una célula diana es
contrarrestado por otra hormona. Un ejemplo es la insulina que disminuye
los niveles de glucosa en sangre y el glucagón, que hace lo contrario.