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SEDE MEDELLÍN

Carbohidratos
Práctica N°7

Kevin Gallego Rodríguez, Michelle Tatiana Zapata Arango

Ingeniería Biológica, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia Sede Medellín
kgallegor@unalmed.edu – mizapataar@unalmed.edu

Práctica elaborada el 17 de mayo, 2022. Elaborado el 23 de mayo de 2022. Recibido el 23 de mayo de 2022.

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Abstract

Carbohydrates are biological molecules composed of carbon, hydrogen, and oxygen. Carbohydrates are divided into three
branches according to their structural conformation, these are: monosaccharides, disaccharides or polysaccharides.
Carbohydrates are of great importance at a biological level, they are the most abundant and essential organic molecule for
the metabolism of most micro and macro organisms. That is why outlining the recognition of these molecules is essential,
the tests of Molish, Bial and Seliwanoff, identify carbohydrates, pentoses and ketoses and aldoses respectively.

Keys words: Carbohydrates, Molish, Bial, Seliwanoff, disaccharides.

Resumen

Los carbohidratos son moléculas biológicas compuestas de carbono, hidrógeno y oxígeno. Los carbohidratos de dividen
en tres ramas según su conformación estructural, estos son: monósacaridos, disacáridos o polisacáridos. Los carbohidratos
son de gran importancia a nivel biológico, son la molécula orgánica más abundante y esencial para el metabolismo de la
mayoría de micro y macro organismos Es por ello que esbozar en el reconocimiento de estas moléculas es fundamental,
las pruebas de Molish, Bial y Seliwanoff, identifican carbohidratos, pentosas y cetosas y aldosas respectivamente.

Palabras Clave: Carbohidratos, Molish, Bial, Seliwanoff, disacáridos.

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1. Introducción 1.1 Marco teórico

Los carbohidratos son moléculas biológicas compuestas
de carbono, hidrógeno y oxígeno en una proporción
aproximada de un átomo de carbono por cada molécula
de agua, las cadenas de carbohidratos tienen diferentes
longitudes. Los carbohidratos son de gran importancia a
nivel biológico, son la molécula orgánica más abundante
y esencial para el metabolismo de la mayoría de micro y
macro organismos Es por ello que esbozar en el
reconocimiento de estas moléculas es fundamental. A
continuación, se explorará de manera superficial la
clasificación de estos y la práctica utilizada para
identificar la clase de carbohidrato de la sustancia en
cuestión. [1]
Los carbohidratos de dividen en tres ramas según su
conformación estructural, estos son: monósacaridos,
disacáridos o polisacáridos.
Los monosacáridos o azúcares sencillos son aldehídos o
cetonas si poseen un grupo funcional aldehído se
denominan aldosas, mientras que los que si tienen un
grupo ceto se denominan cetosas. Las aldosas y las
cetosas más sencillas son, respectivamente, el
gliceraldehído y la dihidroxiacetona. Los azucares se
clasifican también según el número de átomos de
carbono que contienen. Los monosacáridos más
abundantes en las células son las pentosas y las hexosas.

Los disacáridos son moléculas formadas por dos
monosacáridos unidos mediante un enlace glucosídico.
Entre los monosacáridos se pueden formar varios tipos
de enlaces glucosídicos.
Los polisacáridos, también llamados glucanos, están
formados por grandes cantidades de monosacáridos
conectados por enlaces glucosídicos. Los glucanos más
pequeños, llamados oligosacáridos, son polímeros que
contienen hasta unos 10 o 15 monómeros y que con
mayor frecuencia se encuentran unidos a polipéptidos en
ciertas glucoproteínas y a algunos glucolípidos.[2]
Existen diversas pruebas que permiten la identificación
de los tipos de carbohidratos, estas son la prueba de
Seliwanoff, Bial, Molisch y porder reductor.
La reacción de Molish es una reacción que presenta la
propiedad de teñir cualquier carbohidrato presente en
una disolución, Es una reacción cualitativa, por lo que
no permite saber la cantidad de carbohidratos en la
solución original. La reacción entre el ácido sulfúrico y
el α-Naftol forma un anillo de color verde claramente
visible, cuando no hay carbohidratos, cuando la
concentración es alta, se forma un precipitado rojo que
al disolverse, colorea la solución.
El ensayo de Bial se usa para detectar la presencia de
pentosas. El reactivo de Bial está compuesto por orcinol,
acido clorhídrico y cloruro férrico. Si una pentosa está
presente, se deshidratará para formar furfural que
reaccionará con el orcinol para general un compuesto
coloreado.
La prueba de Seliwanoff es una reacción para diferenciar
cetosas de aldosas; aunque ambas dan la reacción. Los
azúcares son distinguidos a través de su función como
cetona o aldehído. En esta prueba de Seliwanoff, se
utiliza el ácido clorhídrico en la reacción de
deshidratación (del monosacárido) y el resorcinol (1,3-
dihidroxibenceno) en la reacción de condensación del
derivado del furfural (el hidroximetilfurfural). Esta es
una prueba cualitativa; es decir el medio pasa de incoloro
2
a rojo, para las cetohexosas y aldohexosas. El
hidroximetilfurfural (producto de la deshidratación) se
forma más rápidamente a partir de cetohexosas y más
lentamente a partir de aldohexosas. [3]
Hipótesis:
La información brindada con anterioridad se
complementa con la identificación de objetivos de esta
práctica los cuales son realizar reacciones químicas que
permitan identificar carbohidratos. Al igual que
desarrollar pruebas específicas para diferenciar
monosacáridos de disacáridos, aldosas de cetosas,
pentosas de hexosas, así como azúcares reductores de no
reductores.
2. Métodos
Poder reductor de azúcares
En cuatro tubos se colocó individualmente 2.0 mL de las
siguientes soluciones: Sacarosa, lactosa, D(+)Glucosa y
D(-)Fructosa. A cada tubo se adicionó 10 gotas de
reactivo de Fehling (0.5 mL de Fehling A y B) y se
calientó la mezcla.
Prueba de Molisch
En cuatro tubos se adicionó individualmente 1.0 mL de
agua destilada y 1mL de glucosa, fructosa, sacarosa y
galactosa respectivamente, seguido se agregó a cada
tubo 4 gotas del reactivo de Molisch (α-naftol) y 2mL de
ácido sulfúrico concentrado.
Hidrólisis de sácarosa
En un tubo de ensayo se colocó 1.0 mL de solución de
sacarosa al 5% y adicione 1.0 mL de ácido clorhídrico al
10%. Se mezcló y dispuso en un baño de agua hirviendo
durante 15 minutos. Seguido de esto se enfrío y
neutralizó con solución de NaOH al 10%. Se realizó una
prueba de Fehling.
Prueba de Bial
A 2.0 mL del reactivo de Bial contenidos en un tubo de
ensayo se adicionó 0.5 mL de solución de D(+)xilosa. Se
calentó en un baño maría hasta que apareció una
coloración. Se repitió este proceso con soluciones de
lactosa y D(+)ribosa.
Ensayo de Seliwanoff
A tres tubos de ensayo se colocó individualmente 1.0 mL
de: D(+)glucosa, D(-)fructosa y sacarosa, se les adicionó
1.0 mL del reactivo de Seliwanoff (resorcinol mas ácido
clorhídrico concentrado). Se pusieron en un baño de
agua y se tomaron los tiempos.
3. Resultados
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glucosa SI se forma un
Tabla 1. Poder reductor de azúcares anillo violeta
muy tenue
COMPUESTO OBSERVACIONES REACCIÓN
sacarosa no se presenta reaccioon ya que
no se evidencia un cambio de
color en el tubo de ensayo no reacciona
lactosa se forma un precipitado rojo
mientras la solución cambia de
rojo a transparente fructosa SI el anillo es de
color violeta
oscuro

D(+)glucosa la solución presenta un color rojo sacarosa SI el anillo es más

oscuro oscuro que los
demás

D(-)fructosa la solución color rojo claro

galactosa SI el anillo es un
tiene un violeta
claro

Tabla 2. Prueba de Molisch.

PRUEBA DE MOLISCH

COMPUESTO POSITIVA NEGATIVA OBSERVACIO REACCIÓN

NES

Tabla 3. Hidrólisis de sacarosa

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COMPUESTO OBSERVACIONES COMPUESTO

Y REACCIONES Tiempo OBSERVACIONES
sacarosa el tubo presenta un color naranja/rojo evidenciandohasta
la hidrólisis
aparición
de color
glucosa no se presenta
reaccion ya que no se
evidencia un cambio
de color en el tubo de
ensayo
fructosa 8 min presenta una
coloración rojiza
brillante

Tabla 4. Prueba de Bial

PRUEBA DE BIAL

COMPUESTO POSITIVA NEGATIVA OBSERVACIO sacarosa REACCIÓN

10 min presenta una
NES coloración
D(+)xilosa SI presenta una rojiza/naranja
coloración verde
turqueza muy
intensa

D(+)ribosa SI presenta una

coloración verde
clara

4. Análisis de resultados

En la Tabla 1, el poder reductor de los azúcares, se

Lactosa obtiene un resultado positivo, por coloración, siendo
SI estos la lactosa por su caracterización disacárido, la
glucosa siendo una aldosa y la fructosa una
hidroxicetosa. En cambio la sacarosa tuvo un resultado
negativo.
Tabla 5. Ensayo de Seliwanoff
En Tabla 2 , la prueba de Molish la glucosa, fructosa,
sacarosa y galactosa son carbohidratos.
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En Tabla 3, la hidrólisis de la sacarosa se observa una

coloración rojiza, esta debido a la reacción con el ácido
y el reactivo de fehlinh con la aldosa.

En Tabla 4, la prueba de Bial: por la coloración azul

formada se obtiene que la D(+) xilosa y D(+) ribosa son
pentosas.

En Tabla 5 el ensayo de Seliwanoff, teniendo presente

los tiempos y las respectivas coloraciones se deduce que
la D(+) fructosa obtuvo un menor tiempo de reacción y
por ende es una cetosa; la sacarosa al ser la segunda en
tiempo e indensidad se confirma que es un disacárido, y
por ultimo la D(+) glucosa no reaccionó debido a que es
una aldosa.

Conclusiones

• Las diferentes pruebas realizadas en el

laboratorio permiten la identificación y
clasificación de los carbohidratos, además con
su tiempo de reacción, la coloración y la
formación de sedimentos podemos ver su
pureza.
• Se corrobora que las pruebas de Molish, Bial y
Seliwanoff, identifican carbohidratos, pentosas
y cetosas y aldosas respectivamente.
• La prueba de poder reductor de azucares
evidencia el poder reductor de algunos
carbohidratos frente a otros.

Referencias Preuba de Molisch

[1] Khan Academy. Carbohidratos,, s.f. Disponible en:

https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/chemistry-of-
life/properties-structure-and-function-of-biological-
macromolecules/a/carbohydrates (mayo de 2022)

[2] Carbohidratos. McKee T, & McKee J.R.(Eds.), (2016).

Bioquímica. Las bases moleculares de la vida, 5e.
McGraw Hill.
https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?boo
kid=1960&sectionid=148095255 (mayo de 2022)
[3] Escuela superior politécnica de chimborazo. (2014). Bioquímca
I. Disponible en:
https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica
-i/carbohidratos/reaccion-de-seliwanof (mayo de 2022) .

Anexos Hidrolisis de sacarosa

Poder reductor de los azúcares

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Prueba de Bial Prueba Seliwanoff

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