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PERTINENCIA CLINICA
Grado en que una prueba Microbiolgica contribuye a prevenir o curar enfermedades infecciosas. Una prueba de buena calidad es aquella que informa con precisin y aporta resultados tiles para prevenir o curar la infeccin
PERTINENCIA CLINICA
RECOMENDACIONES
FIABILIDAD
Se mide determinando si el resultado es correcto. Ejemplo:
1. - Identificacin de agentes patgenos 2. - Pruebas de sensibilidad de grmenes aislados a los antibiticos mediante el mtodo de los discos RECOMENDACIONES Usar terminologa uniforme para designar los microorganismos . Debe utilizarse siempre la nomenclatura reconocida internacionalmente. Es imprescindible el empleo de mtodos aprobados y uniformes .
REPRODUCIBILIDAD
La reproducibilidad o precisin de una prueba microbiologica se ve menoscabada por dos factores :
1. Falta de homogeneidad
2. Falta de estabilidad
Falta de homogeneidad
En una muestra nica puede haber ms de un microorganismo. En consecuencia , al repetir los cultivos pueden aislarse microorganismos diferentes
Falta de estabilidad:
A medida que el tiempo transcurre, los microorganismos presentes en un especimen se multiplican o mueren en lapsos de tiempo variables.
EFICIENCIA
La eficiencia de una prueba microbiolgica es la capacidad de sta para dar el diagnstico correcto de un agente patgeno o de un estado morboso. Se mide por dos criterios:
1. Sensibilidad 2.Especificidad
El agar Mac conkey tiene poca sensibilidad para aislar Salmonella typhi en las heces. Este importante agente patgeno intestinal pasa a menudo inadvertido a consecuencia de la proliferacin de bacterias intestinales no patgenas.
FASE PRE-ANALITICA
Solicitud del anlisis legible y con datos completos Toma de muestra adecuada, transporte y conservacion de la muestra adecuado
Control de calidad de discos, medios de medios de cultivo, reactivos y antisueros , sistemas de identificacin
Control de calidad de equipos Control de calidad del personal
TOMA DE MUESTRA
La muestra clnica debe ser material del sitio infeccin real y debe recogerse con un mnimo de contaminacin a partir de tejidos, rganos o secreciones adyacentes. Debe establecerse el momento ptimo para la recoleccin de muestras Debe obtenerse una cantidad suficiente de la muestra para efectuar las tcnicas de cultivo solicitadas. Deben usarse dispositivos de recoleccin y envases adecuados Toda vez que sea posible, deben obtenerse muestras antes de la administracin de antibiticos. El envase con la muestra debe rotularse de forma correcta
1. Control de Esterilidad 2. Control de las propiedades de los medios de cultivo 3. Control del ph 4. Control de la fecha de expiracin
Procedimiento de control de esterilidad Una parte proporcional de cada lote de fabricacin (5%), se aparta para efectuar un control de esterilidad, que consiste en comprobar la ausencia de crecimiento despus de dos das de incubacin a 35C y 5 dias a temperatura ambiente para descartar hongos
Interpretacin: Si no hay crecimiento en el grupo control, se mantiene el resto del lote en el refrigerador hasta su utilizacin (suponiendo que pase el segundo control).
Procedimiento del control de pH: El pH de cada medio debe comprobarse con un pH metro despus que se ha dejado que el medio se enfri a temperatura ambiente. El pH no puede determinarse con fiabilidad mientras el medio est caliente. Procedimiento de caducidad: En el momento de emplacar los agares es preciso rotular de forma visible sobre cada placa, el nombre del medio de cultivo y la fecha de su preparacin. De esta manera ser fcil en todo momento identificarlo y reconocer el tiempo de caducidad. Existen tablas donde se seala la caducidad de los medios preparados.
mezclados en diferentes proporciones. Una vez seco, estos portas de microscopio pueden almacenarse para su empleo posterior como controles de la tincin Gram.
FASE ANALITICA
Es necesario que en todo laboratorio de microbiologia exista un manual de Es importante el examen microscopico del material clnico, ya que permite conocer no slo la calidad de la muestra, sino tambin la presencia de microorganismos, lo que proporciona suficiente informacin para un diagnstico presuntivo inmediato.
Procedimientos
FASE ANALITICA-HEMOCULTIVOS
Procedimiento de control: Realizar subcultivos y Tincin de Gram Frecuencia: Cada vez que se realiza el subcultivo Interpretacin: Si en la tincin Gram se observan bacterias y no se desarrollan en el cultivo se debe pensar en anaerobios o en bacterias fastidiosas. Procedimiento de control: Revisin de resultados obtenidos simultaneamente.
Frecuencia:Mensualmente
Interpretacin : Si aparecen con frecuencia Staphylococcus coagulasa negativa se debe pensar en contaminacin en la toma de muestra.
FASE ANALITICA-UROCULTIVOS
Procedimiento de control: Gram de orina no centrifugada Frecuencia: Cada vez que se realice Interpretacin : La presencia de uno o varios elementos bacterianos por campo examinado por inmersin suele indicar que la muestra contiene 105 o mas bacterias por mililitro.
La presencia de uno o varios leucocitos por campo es un indicio ms de infeccin urinaria. En las mujeres la presencia de muchas celulas epiteliales escamosas , mezcladas o no con bacterias , es un fuerte indicio presuntivo de que la muestra est contaminada por flora vaginal y obligar a examinar otra muestra. Debe existir concordancia entre el gram y el cultivo. Un gram que muestra indicios de infeccin urinaria con cultivo negativo puede deberse a procesamiento de diferentes muestras o tambin puede ocurrir si el paciente est en tratamiento antimicrobiano antes de la toma de muestra
final de 0 o menos indica ausencia de respuesta inflamatoria o presencia de una contaminacin salival significativa, lo cual invalida la muestra
Segn el sistema de Murray el gran nmero de clulas epiteliales en los grupos 1 a 4 indica contaminacin con secreciones orofaringeas e invalida la muestra. Solo las muestras del grupo 5 se considera de importancia clnica.
FASE ANALITICA-ANTIBIOGRAMAS
VARIABLES A CONTROLAR Inoculo Caractersticas del medio de cultivo
Agente antimicrobiano
Incubacin Interpretacin del tamao de la zona de inhibicin
FASE POST-ANALITICA
Al emitir un informe es importante que se tenga en cuenta la poblacin de Debe utilizarse siempre la nomenclatura reconocida internacionalmente. Todos resultados deben ser revisados por el encargado del rea antes de ser entregados. Debe evaluarse el porcentaje de exmenes discordantes con la clnica Debe evaluarse el porcentaje de error de transcripcin al informe Debe evaluarse la oportunidad
Solicitud de laboratorio
Diagnstico clnico
Resultados de otros exmenes de laboratorio PREPARACION DEL PACIENTE Usar impresos que detallen todas las instrucciones necesarias para la recoleccin de la muestra Restringir por tres das que anteceden al examen coprolgico los alimentos que dejan Demasiado residuo .
Cantidad de muestra
Nmero de muestras que se estudian Intervalo de das entre las muestras
Procedimiento:
Evaluar en cruces (+/++/+++) la consistencia de la muestra
Procedimiento: 1. Obtener sangre fresca con anticoagulante, centrifugar y separar la capa de leucocitos, la que debe tener un recuento alto.
2. Mezclar 2 gramos de muestra de deposicin fresca, que no contenga elementos parasitarios, con varias gotas de los leucocitos obtenidos anteriormente.
3. Agregar 10 ml del fijador a controlar a la mezcla preparada y dejar actuar durante 30 minutos. Preparar varios frotis. 4. Realizar las tinciones habituales. 5. Si despus de la tincin de leucocitos aparecen con su morfologa tpica se podra asumir una buena fijacin de los elementos parasitarios. 6. Para una fijacin adecuada es importante respetar el tiempo limite recomendado entre la eliminacin de la muestra y la fijacin.
Examen coproparasitologico macroscopico En muestras no preservadas se recomienda examinarse la consistencia , presencia de moco , sangre y parsitos macroscopicos. Examen coproparasitologico microscopico
MTODO DIRECTO
Permite encontrar la mayora de los parsitos(quistes , huevos y larvas ) y estudiar los caracteres de movilidad de las formas vegetativas de los protozoarios Desventaja : la muestra es tan pequea que es poco representativa Si se tiene heces de consistencia acuosa y muco sanguinolentas se debe examinar las heces sin diluir
2. Recoleccin de la muestra:
Resuspender la emulsin fecal con una paleta de madera agregando fijador si la emulsin es muy espesa.
Tamizarla emulsin a travs de una malla metalica que cubra la boca del recipiente de vidrio utilizado 4. Distribucin de la muestra Introducir una barra de Iman dentro del recipiente de vidrio que contiene la muestra y colocar este sobre el agitador Con una pipeta automtica colocar un ml de la suspensin en viales
5.Control de calidad interno (homogeneidad) Cada 10 viales se hace un control de la suspensin del material de control. 6. Se enva este material del control preparado al comit de expertos en el diagnsticos de enteroparsitos. Cada profesional anota los elementos encontrados
Si se envan dos muestras se deben sumar los puntajes obtenidos por cada una de
las muestras y se divide entre dos.
10. Procesamiento de los datos Los resultados informados por cada laboratorio participante se comparan con los elementos identificados en el material de control por el Comit de expertos. Son elementos parasitarios exigidos aquellos que por encontrarse en cantidad adecuada han sido identificados por todos los expertos. Los elementos parasitarios que se encuentran en escasa cantidad y que son diagnosticados por algunos de los expertos son informados pero no influye en el puntaje final. 11. Criterios de aceptabilidad : El puntaje mnimo de aceptabilidad con este mtodo corresponde a un 75% y el mximo a un 100%
CODIGOS DE LOS ELEMENTOS PARASITARIOS Cdigo Elemento parasitario 12 Quites de Girdias lamblia 15 Trofozotos de Entamoeba histolytica 16 Quistes de Entamoeba histolytica 17 Trofozotos de Entamoeba coli 18 Quistes de Entamoeba coli 23 Formas vacuoladas de Blastocystis hominis 27 Cristales de Charcot-Leyden