Guía de Ejercicios

Química Biológica
Temas: Proteínas/Enzimas
Docente: Lucas Meneses
Año 2021
PROTEINAS

1) Para determinar la concentración de proteínas de un plasma, se realiza una

curva de calibrado con un estándar de 1,2 g/dl, realizándose diluciones
seriadas ½ y ¼ . Las absorbancias medidas a 540 nm son 0.66, 033 y 0.17,
respectivamente.
a) Construya la Curva de Calibrado.
b) Si la Absorbancia de la muestra incógnita es 0.69. ¿Qué valor de proteínas
tiene la muestra?
2) Con la Curva de Calibrado anterior, se investiga la concentración proteica de
un lisado plaquetario. La Absorbancia de la muestra diluida 1/10 es 1.85 y de la
dilución 1/20 es 0.95. Calcular la concentración de proteínas de la muestra.
3) En un laboratorio se prueban dos testigos proteicos, A y B para la reacción de
Biuret. En ambos casos se realizan diluciones ½, ¼, 1/8 y se obtienen las
siguientes absorbancias:
Testigo A: 0.70; 0.35; 0.175; 0.092.-
Testigo B: 0.95; 0.86; 0.65; 0.66.-
¿Qué testigo elegiría? ¿Por qué?
4) Un paciente posee un mieloma a IgG cuya concentración es de 5 g/%. ¿Qué
dilución haría de la muestra para dosar sus proteínas plasmáticas? (Siempre
utilizando la Curva de Calibrado del punto 1)
5) Un equipo de proteínas marca Weiner tiene un testigo cuya concentración es
0.98 g/dl. Por accidente el testigo es derramado y en el laboratorio no existe
otro testigo de la misma marca. ¿Podría utilizarse un testigo de proteínas
marca Roche cuya concentración es 1,1 g/dl? ¿Cómo procedería?
6) Para determinar la concentración de proteínas de un plasma se realiza una
curva de calibrado con un estándar de 0.98 g/dl realizando diluciones seriadas
1/3 y 1/5. Las Absorbancias a 540 nm son 0.78, 0.29 y 0.145 respectivamente.
a) Construya la curva de calibrado.
b) Escriba la ecuación de la recta.
c) Si la absorbancia de una muestra incógnita es 0.57, ¿Qué valor de
proteínas tiene la muestra?
7) ¿Qué Absorbancia para una solución testigo de 1 g/dl espera obtener de una
muestra cuya concentración es 0.55 g/dl y da una Absorbancia de 0.185?
ENZIMAS

8) Una enzima cataliza una reacción con una velocidad máxima de 5 µmoles por
minuto, siendo su Km para el sustrato de 0.5 mM. Si la ponemos en presencia
de una concentración de 500 mM de sustrato, ¿qué cantidad de sustrato se
logrará transformar en 10 minutos?
9) La Km de una Hexoquinasa para la glucosa es 10^-4 M. Si la concentración de
Glucosa en el medio de reacción es de 1.8 µg/ml, ¿Cuál será la relación [ES]/
[E]? Formula Molecular de la Glucosa: C6 H12 O6. (M= 180 g/mol)
10) La Km para el etanol de la Alcoholdeshidrogenasa de Levadura es 1.3 x 10^-2
M. Si la Concentración de Alcohol en el medio de reacción es de 59.8 µg/ml,
¿Qué proporción de Enzima estará libre y qué proporción estará combinada
con el Sustrato? Formula Molecular del Etanol: C2 H5 OH.
11) Calcular que velocidad se obtendrá en una reacción enzimática si la velocidad
máxima es igual a 100 y la concentración de sustrato es igual a
a) 10 Km
b) Km/3
12) Calcular qué concentración de sustrato, expresada en función de la Km, nos
dará una velocidad de reacción enzimática igual al 60% de la velocidad
máxima.
13) A partir de los siguientes datos obtenidos para una reacción catalizada
enzimáticamente, calcular gráficamente la Km y la Vmax de dicha enzima.

Sustrato (mM) Velocidad (µmoles/min)

0.5 1.00
1.0 1.67
1.5 2.40
2.0 2.50
2.5 2.78
3.0 3.00

14) 25 µl de una preparación enzimática se llevan a ensayo a un volumen de

reacción estándar de 1 ml y a temperatura y PH óptimos, pero con distintas
concentraciones iniciales de sustrato, obteniéndose las velocidades iniciales
que se indican:

Sustrato (mM) Velocidad (mM/min)

303 x 10^-3 120
149 x 10^-3 98
128 x 10^-3 92.6
100 x 10^-3 83.3
80 x 10^-3 74.6

Determinar la Km de la enzima y la velocidad máxima que se puede conseguir con

la concentración de enzima utilizada.
 15) A partir de los siguientes valores, determinar analitcamente la Km y Vmax para
una reacción enzimática.

Sustrato (mM) Velocidad (µmoles/2 min)

5 0.392
2 0.330
1.42 0.278
1.052 0.246
0.50 0.170