PROBLEMAS DE BIOQUÍMICA, 1º BIOLOGÍA -2do PARCIALIV. ENZIMOLOGÍA 49.

Un enzima con Km=3x10-4 M se ensayó con una concentración inicial de sustrato de 10 -6 M. En un minuto, el 5% del sustrato había reaccionado. a) ¿Qué porcentaje de sustrato habrá reaccionado en 5min?. b) Si la concentración inicial de sustrato fuese de 8x10 -7 M, ¿qué porcentaje de sustrato habrá reaccionado en 5min?. c) Calcular Vmax. d) A concentración 9x10-7 M, ¿cuánto tardará en reaccionar el 50% del sustrato?. e) A concentración 10-6 M, ¿cuánto tardará en reaccionar el 75% del sustrato?. Sol: a) 23%. b) 23%. c) 1,5x10-5 mol/lxmin. d) 13,58 min. e) 27,15 min. 50. Una enzima se ensayó con una concentración inicial de sustrato de 10 -5M. La Km para el sustrato era de 2x10-3 M. Después de transcurrido 1min, el 2% del sustrato se había convertido en producto. a) ¿Qué porcentaje del sustrato se habrá convertido en producto después de 3min?. ¿Cuáles serán las concentraciones de producto y sustrato en ese momento?. b) Si la concentración inicial de sustrato fuese de 10 -6 M, ¿qué porcentaje de sustrato se habrá convertido en producto tras 3min de reacción?. c) ¿Cuál es la Vmax alcanzable con la concentración de enzima dada?. d) ¿Con qué concentración de sustrato, aproximadamente se observará Vmax?. e) Con esta concentración de sustrato, ¿qué porcentaje de sutrato se convertirá en producto en 3min?. Sol: a) 6%, 0,6x10-6 M, 9,4x10-6 M. b) 6%. c) 40 µmoles/lxmin. d) 0,2 M. e) 0,0603%. 51. Una enzima con una Km para el sustrato de 1,2x10 -4 M se ensayó con una concentración inicial de sustrato de 0,02 M. En 30seg se obtuvo una cantidad de producto de 2,7µmol x l-1. ¿Qué cantidad se obtendrá en: a) 1min, b) 95seg y c) 5,3min?. d) ¿Cuál es el porcentaje del sustrato original que habrá reaccionado a esos tiempos?. Sol: a) 5,4x10-6 M. b) 8,55x10-6 M. c) 28,62x10-6 M. d) 2,7x10-2 %, 4,27x10-2%, 14,31x10-2%. 52. Un volumen de 0,1ml de una preparación homogénea de nitrato reductasa (pm=500.000 mg/mmol), que contiene 0,5mg de proteínas ml -1, cataliza la producción de 20µmoles de NO2- en 5 min, utilizando una mezcla de reacción cuyo volumen final es de 1ml. Calcular: a) la actividad de la preparación enzimática en U/ml, b) la actividad específica c) la actividad total en katales, de 100 ml de preparación enzimática,;d) la actividad molar de la preparación; e) la actividad por centro activo, sabiendo que la nitrato reductasa tiene dos sitios para la reducción del nitrato; y f) el tiempo requerido para que se transforme una molécula de sustrato en producto. Sol: a) 40U/ml. b) 80U/mg. c) 66,6x10-6 katales. d) 40.000 min-1. e) 20.000 min-1. f) 3 mseg. 53. a) ¿Qué concentración de inhibidor competitivo se requiere para dar un 75% de inhibición, cuando la concentración de sustrato es de 1,5 x 10 -3 M, sabiendo que la Km de la enzima por dicho sustrato vale 2,9 x 10-4 M, y que la Ki para el inhibidor es de 2 x 10-5 M?. b) ¿Hasta que concentración debe elevarse el sustrato para restablecer el valor de velocidad obtenido en ausencia del inhibidor?. Sol: a) 3,7x10-4 M. b) 2,93x10-2 M. 54. La actividad de una aminoácido descarboxilasa puede ensayarse manométricamente siguiendo el desprendimiento de CO2. En un experimento realizado con esta enzima en presencia o ausencia de un hidroxiácido (0,05 M) se obtuvieron los siguientes resultados:

000 mg/mmol) contiene 10mg prot por ml.33 0. Una isomerasa tiene.7 x 10 -4 M. b) Inhibición competitiva.63 0. b) Km 1mM.44 2.66 1.47 2. Sol: a) Inhibición no competitiva.73 Se pide: a) determinar el tipo de inhibición. Km’=5mM.) -Hidroxiácido +Hidroxiácido 12. Km’=179 µM.18 1. d) el grado de inhibición cuando [S]= 0. Al ensayar una fumarasa de levadura frente a un sustrato específico en presencia o ausencia de un inhibidor.43 4.15 3.81 50. cuando la concentración de sustrato es 3 mM.0 Se pide: a) indicar el tipo de inhibición que ejerce el hidroxiácido en la reacción enzimática.71 11.8 1.67 0. sabiendo que con [S]= 2 x 10 -5 M y [I]= 10-5 M.48 0. en 1ml de mezcla de reacción. c) estimar la concentración del inhibidor necesaria para inhibir un 50% la reacción.50 1.3 11. una Km para su sustrato de 6.000 U/ml.02x 10-6M. Calcúlese la Ki y el porcentaje de inhibición para un inhibidor competitivo.00 V (mmol x min-1) [I]= 0 [I]= 2mM 2.4 0. c) 500. y Ki.03 35.000 U/mg.5 0. cuando se ensayan.5 13.86 1.48 3.00 0. en ausencia de inhibidor. 82%.000 µmoles. en presencia o ausencia de dos inhibidores diferentes.00 2.83 2. variando las concentraciones de glutamato.00 57. b) el tipo de inhibición ejercida y el valor de Ki correspondiente. así como el número de recambio.11 2. Una glutaminasa de hepatocito hidroliza distintas concentraciones de glutamina. 50.06 µM.2 [I]=0 V (mmol x min-1) [Ia]= 1. Ki 6´6x 10 -2M. 57. Sol: 2. 56. 55.92mM.00 1.08 7. Una preparación de glutamato deshidrogenasa (PM= 60.23 22. 50 µl de la preparación enzimática en presencia de [S]= 0.6 25 22.5 M. b) calcular los valores de Km para el sustrato y de Ki para el inhibidor.5mM. Km=1mM.91 5.5 mM 1.22 6.14 19.3 - 16. obteniéndose los siguientes resultados: [S] (mM) 0.00 4. d) 72 %. 3x10-6 min-1. b) Km=39µM.a.00 30. Ki 0. se obtienen los siguientes resultados: [S] (mM) 0. y en presencia o ausencia de un inhibidor. Sol: a) V=V’=10mmoles/min. e) 75.4 10. Sol: a) inhibición competitva. 58.62 3.2 4.[aa] (M) V (u. Vmax. c) 0.6 3.00 V(mmol x min-1) [I]=0 [I]= 0.67 17. V=60 unidades arbitrarias y Ki=13.5 mM [Ib]= 1. e) la cantidad de sustrato desaparecido en 3 min.67 A partir de estos datos calcular: a) los valores de Vmax y Km en presencia y ausencia de inhibidor.2 0.8 100 40 20. se obtiene una velocidad inicial de 1.16 3.33 0. se obtienen los siguientes resultados: [S] (mM) 0.4 50 33.81 . y su Vmax es de 300 µmol/min.25 0.5 µmol/min.90 14.1µM 24.2 6.62 5. Si 20µl de esta preparación se ensaya a concentración saturante de piridín nucleótido. y b) calcular los valores de Km.5 mM. c) la actividad enzimática en U/ml y U/mg.

Sol: 14. Ib inhibidor no competitivo. sabiendo que la velocidad observada a 0. 66%.44 Calcular la KM y la Vmáx en ambos casos y la KI para el inhibidor. en ausencia y presencia de un inhibidor ([I]=1mM).81. b) el valor de los correspondientes parámetros cinéticos (Km. La descarboxilación enzimática de un cetoácido muestra las siguientes velocidades para las concentraciones que se citan: V0 (µmoles CO2/2min) 0.09 µmol/min.8 V (µmol/min)+ Inhibidor 6.8x10-4 M.33 16.5 µmol/min. b) Km 1mM.03M de substrato en ausencia de inhibidor es de 295 µmoles /min. 81. b) 2. 65. Ki(b) 1.5 0. Sol: Vmáx 0.33mM.5x10-5M de substrato. Sol: a) 9.252 [Cetoácido](M) 2. Sol: 9x10-7M. Km’(a) 3. Calcular la concentración de un inhibidor competitivo (K I= 10-7M) necesaria para que la velocidad sea un 20% de la Vmáx de una reacción enzimática (KM=1.6x10-4M cuando la [S]=0.02 0.obteniéndose los siguientes resultados: [S] mM 0.714x10-3 0. Calcular la velocidad y el grado de inhibición de una reacción enzimática en presencia de 3. Calcular la velocidad inicial que se obtendrá en una reacción enzimática si la velocidad máxima es de 10 µmol/min y la concentración de sustrato es a) 10Km.370 0. Una enzima se ensayó para distintas concentraciones de su substrato específico. 63. Sol: 1. . Calcular la relación entre la concentración de substrato necesaria para una velocidad 90% de la Vmáx y la requerida para una velocidad 10% de la V máx para una enzima cuya cinética sigue la ecuación de Michaelis-Menten. 0.05 0. Sol: 9KM. v’(b) 5 mmol/min. b)Km/3.62 16 V(µmol/min). ¿Qué clase de inhibición se produce?.417 0. 59.588 0.5 KM.50 15. KM 5.11KM.4 mM).250x10-3 A partir de estos datos calcular gráficamente la Vmáx y la KM de esta reacción enzimática.526x10-3 0.500x10-3 1.000x10-3 0. Ki. Calcular qué concentración de substrato.500 0. expresada en función de la K M nos dará una velocidad de reacción igual al 60% de la Vmáx. v=v’(a)=10 mmol/min. 62. 61.25 10 12. Ki(a) 0. Sol: a) Ia inhibidor competitivo.10 0. Vmáx).5mM.67 25 41.Inhibidor 8.6 µmoles /min.Calcular: a) en cada caso el tipo de inhibición existente. 60.77µmoles /min .64mM. (KM=2x10-4M) y 4x10-5M de inhibidor no competitivo (KI=2x10-5M).67 44. km’(b) 1mM. 64.

Utilizando un polirribonucleótido con un 47% de adenina y un 53% de citosina distribuidas al azar. 26.034 mM. c) la secuencia de aminoácidos codificada por el ARNm.6x10-3 mol/lxmin. 9. fruto de la traducción del ARNm alterado. b) inhibidor no competitivo (KI= 3x10-4M). ¿Concuerdan estas frecuencias observadas con las que cabía esperar? 72. b) 6. Suponiendo que todas las mutaciones eran sustituciones de bases. El genetista molecular expresó su sorpresa y realizó un examen minucioso del problema propuesto. 57%. c) inhibidor acompetitivo (KI= 3x10-4M). El nuevo péptido. GENÉTICA MOLECULAR 67. Para una [S] de 2x10-4M y [I] de 5x10-4M. KM 0. Sol: a) 13. d) la secuencia aminoacídica codificada si la segunda T del extremo 3’ del ADN inicial está suprimida.3% de Thr y 32. ¿En qué codón tuvo lugar la supresión? ¿En qué posición del codón original estaba sustituida la base suprimida? ¿Qué secuencias de bases tendrán los ARNms salvaje y mutante? ¿Cuál sería la secuencia de aminoácidos resultante si una guanina se insertase después de las tres primeras bases en la secuencia del ARNm mutante?. La proteína A de la cepa 2. 9. Una hebra de ADN contiene la siguiente secuencia. ¿qué velocidad y qué grado de inhibición (i%) se observará en el caso de que el inhibidor sea un: a) inhibidor competitivo (KI= 3x10-4M). KI 5. ¿Cuál es la secuencia del polipétido formado por la adición de poli (UUAC) a un sistema de síntesis de proteínas libres de células?. c) 7. 71.6% de Pro. .5x10-3 mol/lxmin. ¿Por qué dudaba el genetista molecular de la referida sustitución del aminoácido? ¿Qué aminoácidos sustituidos habrían sido mucho más aceptados por el genetista molecular?.3% de Gln. b) la secuencia de bases del ARNm transcrito por la segunda hebra de ADN.Thr-Phe-Ile-Trp.4% de His. Vmáx´ 19.1mM. Escribir: a) la secuencia de bases de la otra hebra del ADN. 63%.6x10-3 mol/lxmin. se pregunta si estas observaciones están de acuerdo con el código genético e indicar el curso de los cambios del codón durante esta serie de mutaciones. contenía Leu en la posición 26. Un segmento de ARNm codifica el siguiente polipéptido: Met. La proflavina induce la supresión de una sola base del gen codificador de este ARNm. KM´0. en la que no se detectó una nueva proteína A mutante. es el Met-Pro-Ser-Tyr-Gly.23 µmol/min. V.Sol: Vmáx 50 µmol/min. 69. 66. Jones y Nüremberg obtuvieron las siguientes frecuencias de aminoácidos que habían sido incorporados en proteínas: 10. 24%.15x10-4M. Un químico de proteínas comunicó a un genetista molecular que había encontrado un nuevo mutante de la hemoglobina en el que Asp era reemplazado por Lys. y que la cepa progenitora y la hija no diferían mas que en una sola base del codón del resto 26 de la proteína A. La mutación de la cepa 3 formó la cepa 4 que contenía Pro en dicha posición 26.8% de Lys. Una proteína A de una bacteria tipo salvaje (cepa 1) tiene un resto de Trp en la posición 26. Un enzima tiene un K M de 4. 11. 68.6% de Asn. Indicar la secuencia de aminoácidos es codificada por la siguiente secuencia de bases de una molécula de ARNm: 5’-UUGCCUAGUGAUUGGAUG-3’. derivada de la 1 por mutación. 73. Inhibición acompetitiva o incompetitiva. leída de 5’ a 3’: TCGTCGACGATGGATCCCATCGGCTACTGCA. 70.7x10-5M. y muestra una Vmáx de 22x10-3 moles/lxmin. La mutación de la cepa 2 produjo la cepa 3.

las posiciones 21.y –Thr-Lys-Val-His-His-Leu-Met-Ala-Ala-Lys. Utilizando los datos de los dos experimentos. Arg ó . se encuentran normalmente ocupadas por leucina. 78. Las secuencias de aminoácidos del extremo –NH2 de un polipéptido en cepas salvaje y mutantes de una especie bacteriana son: CEPA Salvaje Mutante 1 Mutante 2 Mutante 3 Mutante 1’ SECUENCIA DE AMINOÁCIDOS Met-Ser-Gly-Leu-Val-Ser-His-Thr Met-Tyr-Trp-Ile-Ser-Val-Ser-His Met-Ser-Gly-Ser-Val-Ser-His-Thr Met-Ser-Gly-COOH Met-Tyr-Trp-Leu-Val-Ser-His-Thr Sabiendo que las cepas mutantes 1.2 y 3 derivan de la salvaje y la 1’ de la mutante 1. Ser. En otro experimento se utilizó un ARNm de secuencia conocida. deducir la secuencia de nucleótidos del ARNm que corresponde a ese polipéptido en cada una de las cepas. Se sintetizó un polinucleótido. utilizándolo como mensajero en un sistema acelular. Ser (24%). 81. Coli. posición 54: Ile ó Ser. Utilizando un ARNm sintético en el que se repite la secuencia (CCAA) y un extracto celular de E. c)Leu y d) Tyr?. durante el estudio de diversos mutantes de esta proteína se han encontrado los siguientes aminoácidos en las posiciones indicadas anteriormente: posición 21: Val. Leu y Pro.74. poli (UCA) con el que se obtuvo una mezcla de tres polipéptidos: poliserina. sin molde. tipo salvaje y de un mutante son respectivamente: -Thr-Lys-Ser-Pro-Ser-Leu-Asn-Ala-AlaLys. ¿A partir de la secuencia de aminoácidos del extremo de una proteína se puede predecir la secuencia de bases del ARNm que la codifica?. ¿qué proporción de tripletes codificarían: a) Phe. Si el codón para Asn es AAC. que los mutantes obtenidos tuvieran Ser o Leu en el lugar de la Pro en una posición específica y que el tratamiento posterior de estos mutantes con el mismo mutágeno diera lugar a Phe en esa posición. y que cada una de ellas se originó por una mutación puntual. ¿Cómo puede producirse este mutante? ¿Cuál es la secuencia de bases de los ARNm que codifican a los cinco aminoácidos diferenciales de las cepas salvaje y mutante?. 80. Se obtuvo un polipéptido en el que sólo aparecían 4 aminoácidos en las siguientes proporciones: Phe (16%). ¿Cuáles son los posibles codones asignados para estos cuatro aminoácidos? ¿Cuál fue el efecto del mutágeno empleado? 76. se ha sintetizado un polipéptido en el que se repite la secuencia de aminoácidos (Thr-Asn-Gln-Pro)n. 77. determinar qué codones especifican los aminoácidos Phe. Pro ó Ile. posición 97: His. teniendo en cuenta que el código genético es degenerado y que normalmente los tripletes de bases que codifican a un mismo aminoácido suelen tener las dos primeras bases iguales. 79. Si un ARNm presentase la misma cantidad de bases adenina y uracilo situadas al azar. 75. polihistidina y poliisoleucina. Leu (24%) y Pro (36%). Las secuencias de aminoácidos de una parte de la lisozima del bacteriófago T 4. a partir de una mezcla de ribonucleótidos difosfatos de uracilo (40%) y citosina (60%). b) Ile. En una cadena proteica de 100 aminoácidos. 54 y 97. ¿Cuáles son los de los otros tres aminoácidos?. Suponer que el ARN de cadena simple del virus del mosaico del tabaco fuera tratado con un mutágeno químico.

¿Cuál sería el codón utilizado para la leucina en cada una de las tres posiciones. Sol: a) 160. c) –10.75x10-5. cosustratos y cofactores adecuados.09cal/mol. ADP y Pi se mantienen igual a 10-3. calcular: a) K’eq de esta reacción en el músculo.14 kCal/mol. Calcular las concentraciones de FDP. Sabiendo que ΔG’º para la hidrólisis del ATP es de –7. 82.6-difosfato aldolasa (FDP) a 25°C y pH 7 (escrita en la dirección de formación de triosa fosfato) es aproximadamente 10 -4. ADP. las concentraciones de ATP. Sol: a) 6485. ΔG’º = 5. calcular: a) K’eq e ΔG’º para la hidrólisis de la Glucosa6P y b) K’eq e ΔG’º para la síntesis de la Glucosa-6P. ΔG’º a pH 7y 25°C= -7. b) K’eq 5. La glucosa-6P se hidroliza enzimáticamente a pH 7 y 25° C hasta glucosa y Pi. suponiendo que ha sido una mutación puntual la que ha dado origen al cambio de aminoácido?. 84. Ka=1.0001M d) 0. 0. El ATP producido queda disponible para la contracción muscular.999M y 9x 10-6M.21x 103. Calcular la K’eq total y el ΔG’º total a pH 7 y a 25°C para la conversión del ácido fumárico en ácido cítrico en presencia de los enzimas. 25 mM y 13 mM. 90. Calcular los valores de ΔGº del estado estándar para la disociación del ácido acético a los siguientes valores de pH: a) pH 0 y b) pH 5.3 Kcal/mol. La K’eq para la reacción de la Fructosa-1. ∆G’º-3136. ΔGº= 4 kcal/mol. b) ΔG’º de la reacción.7 kcal/mol. c) 2 x 10-4 M d) 10-5 M. Sol: K’eq 18.3 Kcal/mol.05% de la glucosa-6P permaneció como tal.005x 10-3 ΔG’º 3138cal/mol.456 kcal/mol. 88.99M y 0. ΔG’º -1735 cal/mol. respectivamente. 86. Calcular el desplazamiento de la situación de equilibrio debido al acoplamiento de la hidrólisis de una molécula de ATP.999M y 0. El ΔG’º de la hidrólisis de la glucosa-6P a pH 7 y a 25°C es –3. 89.8. Sol:a) 0. b) 10-2 M. ΔGº para la hidrólisis del ATP=–7.1 M y en el equilibrio el 0. VI: TERMODINÁMICA. La enzima lactato deshidrogenasa cataliza la reacción: NADH + Piruvato  Lactato + NAD+ Calcular la reacción espontánea que se produce y su ΔG cuando a pH 7 se dan las siguientes relaciones entre concentraciones: a) Lactato/piruvato=1. Si la concentración inicial de Glucosa-6P fue de 0.0095M. 10-4 y 10-2 M. 85. El ΔGº’ de la hidrólisis del ATP a pH 7 y a 25°C es –7.7 kcal/mol.72. en la reacción: A ↔ B.7cal/mol b) 13304 cal/mol. y c) ΔG’º de la hidrólisis: Creatina-P + H2O↔ Creatina + Pi. b) –3Kcal/mol. NAD+/NADH=1. Calcular ΔG’º y la K’eq para la reacción entre la glucosa y el ATP. .56Kcal/mol.000951M. 87. En el músculo la creatina-P es una reserva de energía: Creatina-P + ADP + H+ ↔ ATP + creatina.013 mM. respectivamente. En las condiciones de equilibrio (músculo en reposo).Val. creatina-P y creatina son: 4mM. Sol: -3. catalizada por la hexoquinasa. Calcular ΔG para la hidrólisis del ATP a pH 7 y a 25° C en condiciones de estado estacionario (análogas a las que pueden darse en una célula viva) en las que las concentraciones de ATP. Sol: ΔG’º -4. b) 0. de dihidroxiacetona fosfato (DHAP) y de gliceraldehido 3 fosfato (GAP) en el equilibrio cuando la concentración inicial de FDP es: a) 1M. 83. Sol: A) K’eq 199.0001M y 0. Sol: -11792 cal/mol.3 Kcal/mol.3Kcal/mol. c) 0. K’eq 2.

6%.6Kcal/mol.19V. Calcular: a) ΔG’º de la reacción total acoplada. c) 26 moles.0 kcal/mol). b) 29. 91. d) calcular el ΔG’º para la oxidación total acoplada a la síntesis de ATP. E’0 Lactato/piruvato=-0. dónde la glucosa se oxida hasta CO2 y H 2O (ΔG’º = -686.0 Kcal/mol.b)Lactato/piruvato=1000. Sol: a) –36. Sol: a) reacción espontánea.32 V. b) eficiencia de la conservación de energía en el proceso. b) reacción espontánea. NAD+/NADH= 1000. La conversión de glucosa en ácido láctico a pH 7 y 25ºC tiene una ΔG’º total de –52.google. d) -482950cal/mol PROBLEMAS RESUELTOS http://books. c) con esa eficiencia ¿cuántos moles de ATP por mol de glucosa podrán obtenerse en condiciones de metabolismo aerobio. E’ 0 NADH/NAD+=-0. En una célula anaerobia esta conversión se acopla a la síntesis de dos moléculas de ATP por molécula de glucosa.com/books?id=pF-A9vUEL8C&pg=PA324&lpg=PA324&dq=ecuacion+de+michaelis+menten+ejercicios+solucionados&sou rce=bl&ots=BZDzV6wOgn&sig=zPDA_EJrMi_Go93wX6UWk9etjO4&hl=es&ei=4hqrTd2OGabV0 QHttdTcAg&sa=X&oi=book_result&ct=result&resnum=3&ved=0CCQQ6AEwAg#v=onepage&q& f=false .