PROBLEMAS DE BIOQUÍMICA, 1º BIOLOGÍA -2do PARCIALIV. ENZIMOLOGÍA 49.

Un enzima con Km=3x10-4 M se ensayó con una concentración inicial de sustrato de 10 -6 M. En un minuto, el 5% del sustrato había reaccionado. a) ¿Qué porcentaje de sustrato habrá reaccionado en 5min?. b) Si la concentración inicial de sustrato fuese de 8x10 -7 M, ¿qué porcentaje de sustrato habrá reaccionado en 5min?. c) Calcular Vmax. d) A concentración 9x10-7 M, ¿cuánto tardará en reaccionar el 50% del sustrato?. e) A concentración 10-6 M, ¿cuánto tardará en reaccionar el 75% del sustrato?. Sol: a) 23%. b) 23%. c) 1,5x10-5 mol/lxmin. d) 13,58 min. e) 27,15 min. 50. Una enzima se ensayó con una concentración inicial de sustrato de 10 -5M. La Km para el sustrato era de 2x10-3 M. Después de transcurrido 1min, el 2% del sustrato se había convertido en producto. a) ¿Qué porcentaje del sustrato se habrá convertido en producto después de 3min?. ¿Cuáles serán las concentraciones de producto y sustrato en ese momento?. b) Si la concentración inicial de sustrato fuese de 10 -6 M, ¿qué porcentaje de sustrato se habrá convertido en producto tras 3min de reacción?. c) ¿Cuál es la Vmax alcanzable con la concentración de enzima dada?. d) ¿Con qué concentración de sustrato, aproximadamente se observará Vmax?. e) Con esta concentración de sustrato, ¿qué porcentaje de sutrato se convertirá en producto en 3min?. Sol: a) 6%, 0,6x10-6 M, 9,4x10-6 M. b) 6%. c) 40 µmoles/lxmin. d) 0,2 M. e) 0,0603%. 51. Una enzima con una Km para el sustrato de 1,2x10 -4 M se ensayó con una concentración inicial de sustrato de 0,02 M. En 30seg se obtuvo una cantidad de producto de 2,7µmol x l-1. ¿Qué cantidad se obtendrá en: a) 1min, b) 95seg y c) 5,3min?. d) ¿Cuál es el porcentaje del sustrato original que habrá reaccionado a esos tiempos?. Sol: a) 5,4x10-6 M. b) 8,55x10-6 M. c) 28,62x10-6 M. d) 2,7x10-2 %, 4,27x10-2%, 14,31x10-2%. 52. Un volumen de 0,1ml de una preparación homogénea de nitrato reductasa (pm=500.000 mg/mmol), que contiene 0,5mg de proteínas ml -1, cataliza la producción de 20µmoles de NO2- en 5 min, utilizando una mezcla de reacción cuyo volumen final es de 1ml. Calcular: a) la actividad de la preparación enzimática en U/ml, b) la actividad específica c) la actividad total en katales, de 100 ml de preparación enzimática,;d) la actividad molar de la preparación; e) la actividad por centro activo, sabiendo que la nitrato reductasa tiene dos sitios para la reducción del nitrato; y f) el tiempo requerido para que se transforme una molécula de sustrato en producto. Sol: a) 40U/ml. b) 80U/mg. c) 66,6x10-6 katales. d) 40.000 min-1. e) 20.000 min-1. f) 3 mseg. 53. a) ¿Qué concentración de inhibidor competitivo se requiere para dar un 75% de inhibición, cuando la concentración de sustrato es de 1,5 x 10 -3 M, sabiendo que la Km de la enzima por dicho sustrato vale 2,9 x 10-4 M, y que la Ki para el inhibidor es de 2 x 10-5 M?. b) ¿Hasta que concentración debe elevarse el sustrato para restablecer el valor de velocidad obtenido en ausencia del inhibidor?. Sol: a) 3,7x10-4 M. b) 2,93x10-2 M. 54. La actividad de una aminoácido descarboxilasa puede ensayarse manométricamente siguiendo el desprendimiento de CO2. En un experimento realizado con esta enzima en presencia o ausencia de un hidroxiácido (0,05 M) se obtuvieron los siguientes resultados:

[aa] (M) V (u. Ki 0.15 3.2 [I]=0 V (mmol x min-1) [Ia]= 1. y b) calcular los valores de Km. b) calcular los valores de Km para el sustrato y de Ki para el inhibidor.00 30.3 - 16. Una glutaminasa de hepatocito hidroliza distintas concentraciones de glutamina. Al ensayar una fumarasa de levadura frente a un sustrato específico en presencia o ausencia de un inhibidor. b) Km 1mM. c) estimar la concentración del inhibidor necesaria para inhibir un 50% la reacción. d) 72 %.02x 10-6M.43 4.) -Hidroxiácido +Hidroxiácido 12. Una preparación de glutamato deshidrogenasa (PM= 60. 50 µl de la preparación enzimática en presencia de [S]= 0.2 6.000 µmoles. c) 0.25 0.47 2.8 100 40 20. en 1ml de mezcla de reacción.08 7.5 M. 55. en presencia o ausencia de dos inhibidores diferentes. b) Inhibición competitiva.000 U/ml. b) el tipo de inhibición ejercida y el valor de Ki correspondiente.81 .00 1. Sol: 2.18 1. 56.23 22. V=60 unidades arbitrarias y Ki=13.44 2. Km’=179 µM.00 2.91 5.5 µmol/min. cuando la concentración de sustrato es 3 mM.00 V(mmol x min-1) [I]=0 [I]= 0.33 0.06 µM.a.50 1.62 3.2 0. se obtienen los siguientes resultados: [S] (mM) 0. en ausencia de inhibidor.33 0. Vmax. Km’=5mM. así como el número de recambio. e) la cantidad de sustrato desaparecido en 3 min. Sol: a) V=V’=10mmoles/min.6 25 22.4 10.73 Se pide: a) determinar el tipo de inhibición. Ki 6´6x 10 -2M.71 11.03 35. c) la actividad enzimática en U/ml y U/mg. Una isomerasa tiene.5 mM 1.81 50. obteniéndose los siguientes resultados: [S] (mM) 0. cuando se ensayan.00 4. y Ki.000 U/mg.00 V (mmol x min-1) [I]= 0 [I]= 2mM 2.4 0.11 2.67 17.5mM.48 0. 58. se obtiene una velocidad inicial de 1.8 1.000 mg/mmol) contiene 10mg prot por ml.7 x 10 -4 M. Calcúlese la Ki y el porcentaje de inhibición para un inhibidor competitivo. Sol: a) Inhibición no competitiva.4 50 33.86 1.22 6.67 A partir de estos datos calcular: a) los valores de Vmax y Km en presencia y ausencia de inhibidor.1µM 24.48 3. sabiendo que con [S]= 2 x 10 -5 M y [I]= 10-5 M.5 13.83 2.14 19.00 0.0 Se pide: a) indicar el tipo de inhibición que ejerce el hidroxiácido en la reacción enzimática.62 5. 3x10-6 min-1.92mM. Sol: a) inhibición competitva.16 3.67 0. se obtienen los siguientes resultados: [S] (mM) 0. y en presencia o ausencia de un inhibidor. Km=1mM. 82%.5 mM.6 3. e) 75.2 4. una Km para su sustrato de 6.3 11. 57. c) 500.00 57. y su Vmax es de 300 µmol/min.90 14. variando las concentraciones de glutamato.66 1. b) Km=39µM.5 mM [Ib]= 1. 50. d) el grado de inhibición cuando [S]= 0.63 0.5 0. Si 20µl de esta preparación se ensaya a concentración saturante de piridín nucleótido.

Una enzima se ensayó para distintas concentraciones de su substrato específico.77µmoles /min . Ki.714x10-3 0.67 44.252 [Cetoácido](M) 2.6 µmoles /min. (KM=2x10-4M) y 4x10-5M de inhibidor no competitivo (KI=2x10-5M). .50 15.Calcular: a) en cada caso el tipo de inhibición existente. Calcular qué concentración de substrato. 0.588 0. 63. Sol: 9x10-7M. v’(b) 5 mmol/min.250x10-3 A partir de estos datos calcular gráficamente la Vmáx y la KM de esta reacción enzimática.8x10-4 M. expresada en función de la K M nos dará una velocidad de reacción igual al 60% de la Vmáx. 61. Sol: 9KM. Sol: 1. Ki(b) 1.05 0. sabiendo que la velocidad observada a 0.5 0. b) el valor de los correspondientes parámetros cinéticos (Km.5mM.44 Calcular la KM y la Vmáx en ambos casos y la KI para el inhibidor. 62. 64.Inhibidor 8. Sol: 14. KM 5. 65.5 KM.64mM. b)Km/3.02 0.09 µmol/min. en ausencia y presencia de un inhibidor ([I]=1mM).33 16. 60.5 µmol/min. km’(b) 1mM. La descarboxilación enzimática de un cetoácido muestra las siguientes velocidades para las concentraciones que se citan: V0 (µmoles CO2/2min) 0.11KM.81.33mM. Calcular la velocidad y el grado de inhibición de una reacción enzimática en presencia de 3. ¿Qué clase de inhibición se produce?. Calcular la relación entre la concentración de substrato necesaria para una velocidad 90% de la Vmáx y la requerida para una velocidad 10% de la V máx para una enzima cuya cinética sigue la ecuación de Michaelis-Menten. b) Km 1mM. Sol: a) Ia inhibidor competitivo. Km’(a) 3. Ib inhibidor no competitivo.67 25 41.62 16 V(µmol/min). Sol: a) 9.5x10-5M de substrato.526x10-3 0. Sol: Vmáx 0. 81.obteniéndose los siguientes resultados: [S] mM 0.000x10-3 0.03M de substrato en ausencia de inhibidor es de 295 µmoles /min. 66%.417 0. Ki(a) 0. v=v’(a)=10 mmol/min. Calcular la concentración de un inhibidor competitivo (K I= 10-7M) necesaria para que la velocidad sea un 20% de la Vmáx de una reacción enzimática (KM=1. 59.500x10-3 1.4 mM). Vmáx).6x10-4M cuando la [S]=0.8 V (µmol/min)+ Inhibidor 6. b) 2.370 0.500 0.10 0.25 10 12. Calcular la velocidad inicial que se obtendrá en una reacción enzimática si la velocidad máxima es de 10 µmol/min y la concentración de sustrato es a) 10Km.

y muestra una Vmáx de 22x10-3 moles/lxmin. c) 7. 73. es el Met-Pro-Ser-Tyr-Gly. V. b) 6. d) la secuencia aminoacídica codificada si la segunda T del extremo 3’ del ADN inicial está suprimida. 66.6x10-3 mol/lxmin. 26. 68. ¿qué velocidad y qué grado de inhibición (i%) se observará en el caso de que el inhibidor sea un: a) inhibidor competitivo (KI= 3x10-4M). 70. Para una [S] de 2x10-4M y [I] de 5x10-4M.3% de Thr y 32.034 mM. ¿Concuerdan estas frecuencias observadas con las que cabía esperar? 72.15x10-4M. 57%. Un segmento de ARNm codifica el siguiente polipéptido: Met. 69. Suponiendo que todas las mutaciones eran sustituciones de bases. c) inhibidor acompetitivo (KI= 3x10-4M).5x10-3 mol/lxmin.1mM. leída de 5’ a 3’: TCGTCGACGATGGATCCCATCGGCTACTGCA.6x10-3 mol/lxmin. Jones y Nüremberg obtuvieron las siguientes frecuencias de aminoácidos que habían sido incorporados en proteínas: 10. La mutación de la cepa 2 produjo la cepa 3. GENÉTICA MOLECULAR 67. y que la cepa progenitora y la hija no diferían mas que en una sola base del codón del resto 26 de la proteína A.6% de Pro. contenía Leu en la posición 26.Sol: Vmáx 50 µmol/min. fruto de la traducción del ARNm alterado. KM 0. se pregunta si estas observaciones están de acuerdo con el código genético e indicar el curso de los cambios del codón durante esta serie de mutaciones. Una hebra de ADN contiene la siguiente secuencia. La mutación de la cepa 3 formó la cepa 4 que contenía Pro en dicha posición 26.23 µmol/min. 9. 9. 63%. Inhibición acompetitiva o incompetitiva.4% de His. 71. La proteína A de la cepa 2. KM´0. b) la secuencia de bases del ARNm transcrito por la segunda hebra de ADN. Un enzima tiene un K M de 4. Escribir: a) la secuencia de bases de la otra hebra del ADN. ¿Por qué dudaba el genetista molecular de la referida sustitución del aminoácido? ¿Qué aminoácidos sustituidos habrían sido mucho más aceptados por el genetista molecular?. ¿En qué codón tuvo lugar la supresión? ¿En qué posición del codón original estaba sustituida la base suprimida? ¿Qué secuencias de bases tendrán los ARNms salvaje y mutante? ¿Cuál sería la secuencia de aminoácidos resultante si una guanina se insertase después de las tres primeras bases en la secuencia del ARNm mutante?.6% de Asn. derivada de la 1 por mutación. ¿Cuál es la secuencia del polipétido formado por la adición de poli (UUAC) a un sistema de síntesis de proteínas libres de células?. El genetista molecular expresó su sorpresa y realizó un examen minucioso del problema propuesto. c) la secuencia de aminoácidos codificada por el ARNm. .8% de Lys. Una proteína A de una bacteria tipo salvaje (cepa 1) tiene un resto de Trp en la posición 26. Sol: a) 13. La proflavina induce la supresión de una sola base del gen codificador de este ARNm.3% de Gln. 24%. 11. Un químico de proteínas comunicó a un genetista molecular que había encontrado un nuevo mutante de la hemoglobina en el que Asp era reemplazado por Lys.Thr-Phe-Ile-Trp. Indicar la secuencia de aminoácidos es codificada por la siguiente secuencia de bases de una molécula de ARNm: 5’-UUGCCUAGUGAUUGGAUG-3’. en la que no se detectó una nueva proteína A mutante.7x10-5M. b) inhibidor no competitivo (KI= 3x10-4M). El nuevo péptido. Utilizando un polirribonucleótido con un 47% de adenina y un 53% de citosina distribuidas al azar. Vmáx´ 19. KI 5.

poli (UCA) con el que se obtuvo una mezcla de tres polipéptidos: poliserina.y –Thr-Lys-Val-His-His-Leu-Met-Ala-Ala-Lys. ¿Cuáles son los de los otros tres aminoácidos?. tipo salvaje y de un mutante son respectivamente: -Thr-Lys-Ser-Pro-Ser-Leu-Asn-Ala-AlaLys. sin molde. Pro ó Ile. deducir la secuencia de nucleótidos del ARNm que corresponde a ese polipéptido en cada una de las cepas. Coli. Las secuencias de aminoácidos de una parte de la lisozima del bacteriófago T 4. 78. Leu y Pro. Si el codón para Asn es AAC. teniendo en cuenta que el código genético es degenerado y que normalmente los tripletes de bases que codifican a un mismo aminoácido suelen tener las dos primeras bases iguales. Ser. ¿qué proporción de tripletes codificarían: a) Phe. se encuentran normalmente ocupadas por leucina. y que cada una de ellas se originó por una mutación puntual. Utilizando un ARNm sintético en el que se repite la secuencia (CCAA) y un extracto celular de E. utilizándolo como mensajero en un sistema acelular. 77. Arg ó . En una cadena proteica de 100 aminoácidos. posición 54: Ile ó Ser. Las secuencias de aminoácidos del extremo –NH2 de un polipéptido en cepas salvaje y mutantes de una especie bacteriana son: CEPA Salvaje Mutante 1 Mutante 2 Mutante 3 Mutante 1’ SECUENCIA DE AMINOÁCIDOS Met-Ser-Gly-Leu-Val-Ser-His-Thr Met-Tyr-Trp-Ile-Ser-Val-Ser-His Met-Ser-Gly-Ser-Val-Ser-His-Thr Met-Ser-Gly-COOH Met-Tyr-Trp-Leu-Val-Ser-His-Thr Sabiendo que las cepas mutantes 1. determinar qué codones especifican los aminoácidos Phe. 75. posición 97: His. durante el estudio de diversos mutantes de esta proteína se han encontrado los siguientes aminoácidos en las posiciones indicadas anteriormente: posición 21: Val. Leu (24%) y Pro (36%). las posiciones 21. Si un ARNm presentase la misma cantidad de bases adenina y uracilo situadas al azar. 79. ¿Cómo puede producirse este mutante? ¿Cuál es la secuencia de bases de los ARNm que codifican a los cinco aminoácidos diferenciales de las cepas salvaje y mutante?. Ser (24%). ¿A partir de la secuencia de aminoácidos del extremo de una proteína se puede predecir la secuencia de bases del ARNm que la codifica?. 54 y 97. a partir de una mezcla de ribonucleótidos difosfatos de uracilo (40%) y citosina (60%). polihistidina y poliisoleucina. ¿Cuáles son los posibles codones asignados para estos cuatro aminoácidos? ¿Cuál fue el efecto del mutágeno empleado? 76. En otro experimento se utilizó un ARNm de secuencia conocida.2 y 3 derivan de la salvaje y la 1’ de la mutante 1. Utilizando los datos de los dos experimentos. 80. se ha sintetizado un polipéptido en el que se repite la secuencia de aminoácidos (Thr-Asn-Gln-Pro)n. Se obtuvo un polipéptido en el que sólo aparecían 4 aminoácidos en las siguientes proporciones: Phe (16%). Suponer que el ARN de cadena simple del virus del mosaico del tabaco fuera tratado con un mutágeno químico. 81. c)Leu y d) Tyr?. b) Ile. que los mutantes obtenidos tuvieran Ser o Leu en el lugar de la Pro en una posición específica y que el tratamiento posterior de estos mutantes con el mismo mutágeno diera lugar a Phe en esa posición.74. Se sintetizó un polinucleótido.

Sol: -3. c) –10. ΔGº= 4 kcal/mol. Calcular la K’eq total y el ΔG’º total a pH 7 y a 25°C para la conversión del ácido fumárico en ácido cítrico en presencia de los enzimas. Sol: a) 160. Ka=1. ΔGº para la hidrólisis del ATP=–7. ΔG’º = 5.456 kcal/mol.6-difosfato aldolasa (FDP) a 25°C y pH 7 (escrita en la dirección de formación de triosa fosfato) es aproximadamente 10 -4. En el músculo la creatina-P es una reserva de energía: Creatina-P + ADP + H+ ↔ ATP + creatina. ∆G’º-3136. ADP y Pi se mantienen igual a 10-3. calcular: a) K’eq de esta reacción en el músculo. En las condiciones de equilibrio (músculo en reposo). Si la concentración inicial de Glucosa-6P fue de 0.72. 90. 86. y c) ΔG’º de la hidrólisis: Creatina-P + H2O↔ Creatina + Pi. b) –3Kcal/mol. 82.3 Kcal/mol.56Kcal/mol.Val.7cal/mol b) 13304 cal/mol. La enzima lactato deshidrogenasa cataliza la reacción: NADH + Piruvato  Lactato + NAD+ Calcular la reacción espontánea que se produce y su ΔG cuando a pH 7 se dan las siguientes relaciones entre concentraciones: a) Lactato/piruvato=1. de dihidroxiacetona fosfato (DHAP) y de gliceraldehido 3 fosfato (GAP) en el equilibrio cuando la concentración inicial de FDP es: a) 1M.3 Kcal/mol.999M y 0. ΔG’º -1735 cal/mol. las concentraciones de ATP. La K’eq para la reacción de la Fructosa-1. Calcular los valores de ΔGº del estado estándar para la disociación del ácido acético a los siguientes valores de pH: a) pH 0 y b) pH 5. calcular: a) K’eq e ΔG’º para la hidrólisis de la Glucosa6P y b) K’eq e ΔG’º para la síntesis de la Glucosa-6P.005x 10-3 ΔG’º 3138cal/mol. Sol: K’eq 18. ¿Cuál sería el codón utilizado para la leucina en cada una de las tres posiciones.3Kcal/mol. . 25 mM y 13 mM. cosustratos y cofactores adecuados. VI: TERMODINÁMICA.0095M. Sol: a) 6485.75x10-5.7 kcal/mol.09cal/mol. 85. El ΔGº’ de la hidrólisis del ATP a pH 7 y a 25°C es –7. c) 0. Sol: ΔG’º -4.3 Kcal/mol. b) 10-2 M. Calcular ΔG’º y la K’eq para la reacción entre la glucosa y el ATP. Sol:a) 0.0001M y 0.8. b) 0.05% de la glucosa-6P permaneció como tal. b) K’eq 5. ΔG’º a pH 7y 25°C= -7. 83. respectivamente.999M y 9x 10-6M. K’eq 2. Calcular las concentraciones de FDP. Calcular el desplazamiento de la situación de equilibrio debido al acoplamiento de la hidrólisis de una molécula de ATP. 88. catalizada por la hexoquinasa. 0. 84. 89.7 kcal/mol. respectivamente. NAD+/NADH=1. c) 2 x 10-4 M d) 10-5 M. suponiendo que ha sido una mutación puntual la que ha dado origen al cambio de aminoácido?. en la reacción: A ↔ B. ADP. 87.0001M d) 0. 10-4 y 10-2 M.21x 103.99M y 0. Sol: -11792 cal/mol.14 kCal/mol.000951M. El ΔG’º de la hidrólisis de la glucosa-6P a pH 7 y a 25°C es –3. La glucosa-6P se hidroliza enzimáticamente a pH 7 y 25° C hasta glucosa y Pi. Sabiendo que ΔG’º para la hidrólisis del ATP es de –7. creatina-P y creatina son: 4mM. b) ΔG’º de la reacción.013 mM. Calcular ΔG para la hidrólisis del ATP a pH 7 y a 25° C en condiciones de estado estacionario (análogas a las que pueden darse en una célula viva) en las que las concentraciones de ATP. Sol: A) K’eq 199.1 M y en el equilibrio el 0. El ATP producido queda disponible para la contracción muscular.

dónde la glucosa se oxida hasta CO2 y H 2O (ΔG’º = -686.0 kcal/mol). La conversión de glucosa en ácido láctico a pH 7 y 25ºC tiene una ΔG’º total de –52. En una célula anaerobia esta conversión se acopla a la síntesis de dos moléculas de ATP por molécula de glucosa.32 V. b) 29.google. NAD+/NADH= 1000. Sol: a) –36. E’ 0 NADH/NAD+=-0. Calcular: a) ΔG’º de la reacción total acoplada.0 Kcal/mol.19V. d) -482950cal/mol PROBLEMAS RESUELTOS http://books. c) con esa eficiencia ¿cuántos moles de ATP por mol de glucosa podrán obtenerse en condiciones de metabolismo aerobio. c) 26 moles. E’0 Lactato/piruvato=-0. Sol: a) reacción espontánea.6Kcal/mol.6%. 91.com/books?id=pF-A9vUEL8C&pg=PA324&lpg=PA324&dq=ecuacion+de+michaelis+menten+ejercicios+solucionados&sou rce=bl&ots=BZDzV6wOgn&sig=zPDA_EJrMi_Go93wX6UWk9etjO4&hl=es&ei=4hqrTd2OGabV0 QHttdTcAg&sa=X&oi=book_result&ct=result&resnum=3&ved=0CCQQ6AEwAg#v=onepage&q& f=false . d) calcular el ΔG’º para la oxidación total acoplada a la síntesis de ATP. b) reacción espontánea. b) eficiencia de la conservación de energía en el proceso.b)Lactato/piruvato=1000.

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