PROBLEMAS DE BIOQUÍMICA, 1º BIOLOGÍA -2do PARCIALIV. ENZIMOLOGÍA 49.

Un enzima con Km=3x10-4 M se ensayó con una concentración inicial de sustrato de 10 -6 M. En un minuto, el 5% del sustrato había reaccionado. a) ¿Qué porcentaje de sustrato habrá reaccionado en 5min?. b) Si la concentración inicial de sustrato fuese de 8x10 -7 M, ¿qué porcentaje de sustrato habrá reaccionado en 5min?. c) Calcular Vmax. d) A concentración 9x10-7 M, ¿cuánto tardará en reaccionar el 50% del sustrato?. e) A concentración 10-6 M, ¿cuánto tardará en reaccionar el 75% del sustrato?. Sol: a) 23%. b) 23%. c) 1,5x10-5 mol/lxmin. d) 13,58 min. e) 27,15 min. 50. Una enzima se ensayó con una concentración inicial de sustrato de 10 -5M. La Km para el sustrato era de 2x10-3 M. Después de transcurrido 1min, el 2% del sustrato se había convertido en producto. a) ¿Qué porcentaje del sustrato se habrá convertido en producto después de 3min?. ¿Cuáles serán las concentraciones de producto y sustrato en ese momento?. b) Si la concentración inicial de sustrato fuese de 10 -6 M, ¿qué porcentaje de sustrato se habrá convertido en producto tras 3min de reacción?. c) ¿Cuál es la Vmax alcanzable con la concentración de enzima dada?. d) ¿Con qué concentración de sustrato, aproximadamente se observará Vmax?. e) Con esta concentración de sustrato, ¿qué porcentaje de sutrato se convertirá en producto en 3min?. Sol: a) 6%, 0,6x10-6 M, 9,4x10-6 M. b) 6%. c) 40 µmoles/lxmin. d) 0,2 M. e) 0,0603%. 51. Una enzima con una Km para el sustrato de 1,2x10 -4 M se ensayó con una concentración inicial de sustrato de 0,02 M. En 30seg se obtuvo una cantidad de producto de 2,7µmol x l-1. ¿Qué cantidad se obtendrá en: a) 1min, b) 95seg y c) 5,3min?. d) ¿Cuál es el porcentaje del sustrato original que habrá reaccionado a esos tiempos?. Sol: a) 5,4x10-6 M. b) 8,55x10-6 M. c) 28,62x10-6 M. d) 2,7x10-2 %, 4,27x10-2%, 14,31x10-2%. 52. Un volumen de 0,1ml de una preparación homogénea de nitrato reductasa (pm=500.000 mg/mmol), que contiene 0,5mg de proteínas ml -1, cataliza la producción de 20µmoles de NO2- en 5 min, utilizando una mezcla de reacción cuyo volumen final es de 1ml. Calcular: a) la actividad de la preparación enzimática en U/ml, b) la actividad específica c) la actividad total en katales, de 100 ml de preparación enzimática,;d) la actividad molar de la preparación; e) la actividad por centro activo, sabiendo que la nitrato reductasa tiene dos sitios para la reducción del nitrato; y f) el tiempo requerido para que se transforme una molécula de sustrato en producto. Sol: a) 40U/ml. b) 80U/mg. c) 66,6x10-6 katales. d) 40.000 min-1. e) 20.000 min-1. f) 3 mseg. 53. a) ¿Qué concentración de inhibidor competitivo se requiere para dar un 75% de inhibición, cuando la concentración de sustrato es de 1,5 x 10 -3 M, sabiendo que la Km de la enzima por dicho sustrato vale 2,9 x 10-4 M, y que la Ki para el inhibidor es de 2 x 10-5 M?. b) ¿Hasta que concentración debe elevarse el sustrato para restablecer el valor de velocidad obtenido en ausencia del inhibidor?. Sol: a) 3,7x10-4 M. b) 2,93x10-2 M. 54. La actividad de una aminoácido descarboxilasa puede ensayarse manométricamente siguiendo el desprendimiento de CO2. En un experimento realizado con esta enzima en presencia o ausencia de un hidroxiácido (0,05 M) se obtuvieron los siguientes resultados:

y Ki.02x 10-6M.33 0.91 5.00 V (mmol x min-1) [I]= 0 [I]= 2mM 2. 58. 82%.8 100 40 20.4 50 33. 50 µl de la preparación enzimática en presencia de [S]= 0.48 3.00 0. 50. Sol: a) V=V’=10mmoles/min. c) estimar la concentración del inhibidor necesaria para inhibir un 50% la reacción.00 57.06 µM. sabiendo que con [S]= 2 x 10 -5 M y [I]= 10-5 M.81 .00 2. Al ensayar una fumarasa de levadura frente a un sustrato específico en presencia o ausencia de un inhibidor.25 0.4 10.71 11. Sol: a) inhibición competitva.2 6. d) 72 %. 3x10-6 min-1.3 11.48 0. e) la cantidad de sustrato desaparecido en 3 min.5 mM [Ib]= 1.16 3.86 1.6 3.67 A partir de estos datos calcular: a) los valores de Vmax y Km en presencia y ausencia de inhibidor.73 Se pide: a) determinar el tipo de inhibición.000 µmoles.8 1. c) 500.62 3.) -Hidroxiácido +Hidroxiácido 12.[aa] (M) V (u. así como el número de recambio. Km’=5mM.47 2. se obtiene una velocidad inicial de 1. Si 20µl de esta preparación se ensaya a concentración saturante de piridín nucleótido.83 2. b) Km=39µM.5 0. b) calcular los valores de Km para el sustrato y de Ki para el inhibidor. 56.5 mM. 57. c) 0.22 6.90 14. d) el grado de inhibición cuando [S]= 0.66 1.5mM.7 x 10 -4 M. Sol: 2.00 30. Ki 6´6x 10 -2M. en ausencia de inhibidor.92mM. V=60 unidades arbitrarias y Ki=13. Una glutaminasa de hepatocito hidroliza distintas concentraciones de glutamina.23 22. Km’=179 µM.67 0. en presencia o ausencia de dos inhibidores diferentes. b) Km 1mM. una Km para su sustrato de 6. 55. en 1ml de mezcla de reacción. Sol: a) Inhibición no competitiva. Una preparación de glutamato deshidrogenasa (PM= 60.a. b) Inhibición competitiva.2 [I]=0 V (mmol x min-1) [Ia]= 1.5 M.67 17.50 1. cuando la concentración de sustrato es 3 mM. obteniéndose los siguientes resultados: [S] (mM) 0. e) 75. Una isomerasa tiene. c) la actividad enzimática en U/ml y U/mg.000 mg/mmol) contiene 10mg prot por ml.5 13. Km=1mM. se obtienen los siguientes resultados: [S] (mM) 0. b) el tipo de inhibición ejercida y el valor de Ki correspondiente.81 50. y b) calcular los valores de Km.63 0.3 - 16. y en presencia o ausencia de un inhibidor.0 Se pide: a) indicar el tipo de inhibición que ejerce el hidroxiácido en la reacción enzimática. Ki 0.2 0.14 19. cuando se ensayan.1µM 24.00 4.11 2.00 V(mmol x min-1) [I]=0 [I]= 0.6 25 22.00 1.62 5.18 1.5 mM 1.44 2. variando las concentraciones de glutamato. se obtienen los siguientes resultados: [S] (mM) 0.43 4. Calcúlese la Ki y el porcentaje de inhibición para un inhibidor competitivo.03 35. y su Vmax es de 300 µmol/min.000 U/mg.000 U/ml.08 7.33 0.15 3. Vmax.5 µmol/min.4 0.2 4.

03M de substrato en ausencia de inhibidor es de 295 µmoles /min. Calcular la velocidad y el grado de inhibición de una reacción enzimática en presencia de 3. v’(b) 5 mmol/min. Ib inhibidor no competitivo. (KM=2x10-4M) y 4x10-5M de inhibidor no competitivo (KI=2x10-5M).8x10-4 M.11KM. Calcular la relación entre la concentración de substrato necesaria para una velocidad 90% de la Vmáx y la requerida para una velocidad 10% de la V máx para una enzima cuya cinética sigue la ecuación de Michaelis-Menten.370 0.77µmoles /min . b) el valor de los correspondientes parámetros cinéticos (Km.02 0.Calcular: a) en cada caso el tipo de inhibición existente.4 mM). 60. 59. Ki(a) 0.526x10-3 0.8 V (µmol/min)+ Inhibidor 6.6x10-4M cuando la [S]=0.417 0.50 15.67 25 41. Ki(b) 1. Sol: 9KM. 62.Inhibidor 8.64mM.05 0. Sol: a) 9. b)Km/3. Ki.09 µmol/min.62 16 V(µmol/min). Sol: Vmáx 0. KM 5. 0.81. Calcular la concentración de un inhibidor competitivo (K I= 10-7M) necesaria para que la velocidad sea un 20% de la Vmáx de una reacción enzimática (KM=1.44 Calcular la KM y la Vmáx en ambos casos y la KI para el inhibidor. . en ausencia y presencia de un inhibidor ([I]=1mM). Sol: a) Ia inhibidor competitivo.33mM. expresada en función de la K M nos dará una velocidad de reacción igual al 60% de la Vmáx. km’(b) 1mM.33 16. ¿Qué clase de inhibición se produce?. 63.6 µmoles /min.588 0.000x10-3 0. Calcular la velocidad inicial que se obtendrá en una reacción enzimática si la velocidad máxima es de 10 µmol/min y la concentración de sustrato es a) 10Km. Sol: 9x10-7M.250x10-3 A partir de estos datos calcular gráficamente la Vmáx y la KM de esta reacción enzimática.5x10-5M de substrato.obteniéndose los siguientes resultados: [S] mM 0. 65.25 10 12. Sol: 1. sabiendo que la velocidad observada a 0.252 [Cetoácido](M) 2.500 0. Una enzima se ensayó para distintas concentraciones de su substrato específico. b) 2.10 0.5 KM. 61. La descarboxilación enzimática de un cetoácido muestra las siguientes velocidades para las concentraciones que se citan: V0 (µmoles CO2/2min) 0. b) Km 1mM.500x10-3 1. Vmáx).5 0. Km’(a) 3.5 µmol/min. Sol: 14. 81. v=v’(a)=10 mmol/min. Calcular qué concentración de substrato. 66%.714x10-3 0.67 44.5mM. 64.

Suponiendo que todas las mutaciones eran sustituciones de bases. c) 7. en la que no se detectó una nueva proteína A mutante. y que la cepa progenitora y la hija no diferían mas que en una sola base del codón del resto 26 de la proteína A. Un enzima tiene un K M de 4. Vmáx´ 19. b) inhibidor no competitivo (KI= 3x10-4M).6x10-3 mol/lxmin. KM´0. KI 5. Inhibición acompetitiva o incompetitiva.15x10-4M. Indicar la secuencia de aminoácidos es codificada por la siguiente secuencia de bases de una molécula de ARNm: 5’-UUGCCUAGUGAUUGGAUG-3’. b) la secuencia de bases del ARNm transcrito por la segunda hebra de ADN.6% de Asn.4% de His. 71. El genetista molecular expresó su sorpresa y realizó un examen minucioso del problema propuesto. 26. Sol: a) 13. Escribir: a) la secuencia de bases de la otra hebra del ADN. b) 6. 9.Thr-Phe-Ile-Trp. ¿Concuerdan estas frecuencias observadas con las que cabía esperar? 72. Un segmento de ARNm codifica el siguiente polipéptido: Met.1mM. 63%. 68. La mutación de la cepa 2 produjo la cepa 3. contenía Leu en la posición 26. La proflavina induce la supresión de una sola base del gen codificador de este ARNm. . La proteína A de la cepa 2.23 µmol/min.3% de Gln. GENÉTICA MOLECULAR 67.Sol: Vmáx 50 µmol/min. derivada de la 1 por mutación.7x10-5M. La mutación de la cepa 3 formó la cepa 4 que contenía Pro en dicha posición 26. 9.8% de Lys. fruto de la traducción del ARNm alterado. Un químico de proteínas comunicó a un genetista molecular que había encontrado un nuevo mutante de la hemoglobina en el que Asp era reemplazado por Lys. 70. ¿En qué codón tuvo lugar la supresión? ¿En qué posición del codón original estaba sustituida la base suprimida? ¿Qué secuencias de bases tendrán los ARNms salvaje y mutante? ¿Cuál sería la secuencia de aminoácidos resultante si una guanina se insertase después de las tres primeras bases en la secuencia del ARNm mutante?.5x10-3 mol/lxmin.3% de Thr y 32. y muestra una Vmáx de 22x10-3 moles/lxmin. Para una [S] de 2x10-4M y [I] de 5x10-4M. c) la secuencia de aminoácidos codificada por el ARNm. es el Met-Pro-Ser-Tyr-Gly. Una proteína A de una bacteria tipo salvaje (cepa 1) tiene un resto de Trp en la posición 26. leída de 5’ a 3’: TCGTCGACGATGGATCCCATCGGCTACTGCA. 57%. 73. 11. Jones y Nüremberg obtuvieron las siguientes frecuencias de aminoácidos que habían sido incorporados en proteínas: 10.6x10-3 mol/lxmin. KM 0.034 mM. ¿qué velocidad y qué grado de inhibición (i%) se observará en el caso de que el inhibidor sea un: a) inhibidor competitivo (KI= 3x10-4M). d) la secuencia aminoacídica codificada si la segunda T del extremo 3’ del ADN inicial está suprimida. Una hebra de ADN contiene la siguiente secuencia. V. ¿Por qué dudaba el genetista molecular de la referida sustitución del aminoácido? ¿Qué aminoácidos sustituidos habrían sido mucho más aceptados por el genetista molecular?. El nuevo péptido.6% de Pro. 69. se pregunta si estas observaciones están de acuerdo con el código genético e indicar el curso de los cambios del codón durante esta serie de mutaciones. Utilizando un polirribonucleótido con un 47% de adenina y un 53% de citosina distribuidas al azar. c) inhibidor acompetitivo (KI= 3x10-4M). ¿Cuál es la secuencia del polipétido formado por la adición de poli (UUAC) a un sistema de síntesis de proteínas libres de células?. 24%. 66.

Pro ó Ile. se encuentran normalmente ocupadas por leucina.y –Thr-Lys-Val-His-His-Leu-Met-Ala-Ala-Lys. c)Leu y d) Tyr?. Si el codón para Asn es AAC. Ser (24%). que los mutantes obtenidos tuvieran Ser o Leu en el lugar de la Pro en una posición específica y que el tratamiento posterior de estos mutantes con el mismo mutágeno diera lugar a Phe en esa posición. Suponer que el ARN de cadena simple del virus del mosaico del tabaco fuera tratado con un mutágeno químico. utilizándolo como mensajero en un sistema acelular. sin molde. polihistidina y poliisoleucina.2 y 3 derivan de la salvaje y la 1’ de la mutante 1. ¿Cuáles son los posibles codones asignados para estos cuatro aminoácidos? ¿Cuál fue el efecto del mutágeno empleado? 76. Se sintetizó un polinucleótido. 78. y que cada una de ellas se originó por una mutación puntual. tipo salvaje y de un mutante son respectivamente: -Thr-Lys-Ser-Pro-Ser-Leu-Asn-Ala-AlaLys. durante el estudio de diversos mutantes de esta proteína se han encontrado los siguientes aminoácidos en las posiciones indicadas anteriormente: posición 21: Val. determinar qué codones especifican los aminoácidos Phe. ¿A partir de la secuencia de aminoácidos del extremo de una proteína se puede predecir la secuencia de bases del ARNm que la codifica?. 75. Coli. En otro experimento se utilizó un ARNm de secuencia conocida. 80. Ser. ¿qué proporción de tripletes codificarían: a) Phe. Si un ARNm presentase la misma cantidad de bases adenina y uracilo situadas al azar. Leu y Pro. ¿Cómo puede producirse este mutante? ¿Cuál es la secuencia de bases de los ARNm que codifican a los cinco aminoácidos diferenciales de las cepas salvaje y mutante?. 79. posición 97: His. b) Ile. las posiciones 21. Leu (24%) y Pro (36%). 81.74. Las secuencias de aminoácidos del extremo –NH2 de un polipéptido en cepas salvaje y mutantes de una especie bacteriana son: CEPA Salvaje Mutante 1 Mutante 2 Mutante 3 Mutante 1’ SECUENCIA DE AMINOÁCIDOS Met-Ser-Gly-Leu-Val-Ser-His-Thr Met-Tyr-Trp-Ile-Ser-Val-Ser-His Met-Ser-Gly-Ser-Val-Ser-His-Thr Met-Ser-Gly-COOH Met-Tyr-Trp-Leu-Val-Ser-His-Thr Sabiendo que las cepas mutantes 1. deducir la secuencia de nucleótidos del ARNm que corresponde a ese polipéptido en cada una de las cepas. Se obtuvo un polipéptido en el que sólo aparecían 4 aminoácidos en las siguientes proporciones: Phe (16%). poli (UCA) con el que se obtuvo una mezcla de tres polipéptidos: poliserina. Arg ó . teniendo en cuenta que el código genético es degenerado y que normalmente los tripletes de bases que codifican a un mismo aminoácido suelen tener las dos primeras bases iguales. a partir de una mezcla de ribonucleótidos difosfatos de uracilo (40%) y citosina (60%). Utilizando un ARNm sintético en el que se repite la secuencia (CCAA) y un extracto celular de E. Las secuencias de aminoácidos de una parte de la lisozima del bacteriófago T 4. posición 54: Ile ó Ser. ¿Cuáles son los de los otros tres aminoácidos?. 77. 54 y 97. En una cadena proteica de 100 aminoácidos. Utilizando los datos de los dos experimentos. se ha sintetizado un polipéptido en el que se repite la secuencia de aminoácidos (Thr-Asn-Gln-Pro)n.

Sol: A) K’eq 199.456 kcal/mol. La enzima lactato deshidrogenasa cataliza la reacción: NADH + Piruvato  Lactato + NAD+ Calcular la reacción espontánea que se produce y su ΔG cuando a pH 7 se dan las siguientes relaciones entre concentraciones: a) Lactato/piruvato=1. creatina-P y creatina son: 4mM. ΔG’º -1735 cal/mol.0095M.8.3 Kcal/mol. En las condiciones de equilibrio (músculo en reposo). 86. Ka=1.6-difosfato aldolasa (FDP) a 25°C y pH 7 (escrita en la dirección de formación de triosa fosfato) es aproximadamente 10 -4.3 Kcal/mol. Calcular el desplazamiento de la situación de equilibrio debido al acoplamiento de la hidrólisis de una molécula de ATP. Calcular ΔG’º y la K’eq para la reacción entre la glucosa y el ATP.013 mM. La glucosa-6P se hidroliza enzimáticamente a pH 7 y 25° C hasta glucosa y Pi. ADP y Pi se mantienen igual a 10-3. 82. las concentraciones de ATP. respectivamente. Sol: a) 6485. ∆G’º-3136.005x 10-3 ΔG’º 3138cal/mol. b) 0. c) 2 x 10-4 M d) 10-5 M. y c) ΔG’º de la hidrólisis: Creatina-P + H2O↔ Creatina + Pi. 85.3 Kcal/mol.7cal/mol b) 13304 cal/mol. Calcular la K’eq total y el ΔG’º total a pH 7 y a 25°C para la conversión del ácido fumárico en ácido cítrico en presencia de los enzimas. catalizada por la hexoquinasa.72. 83. ΔG’º = 5. b) ΔG’º de la reacción. El ATP producido queda disponible para la contracción muscular. calcular: a) K’eq e ΔG’º para la hidrólisis de la Glucosa6P y b) K’eq e ΔG’º para la síntesis de la Glucosa-6P. ¿Cuál sería el codón utilizado para la leucina en cada una de las tres posiciones. ΔG’º a pH 7y 25°C= -7. Sol: K’eq 18. 89.14 kCal/mol. ADP. c) –10. Calcular las concentraciones de FDP. de dihidroxiacetona fosfato (DHAP) y de gliceraldehido 3 fosfato (GAP) en el equilibrio cuando la concentración inicial de FDP es: a) 1M. cosustratos y cofactores adecuados.09cal/mol. Sol: -3.000951M.05% de la glucosa-6P permaneció como tal. K’eq 2. c) 0.7 kcal/mol. 88.0001M y 0. ΔGº= 4 kcal/mol. Sol: a) 160. NAD+/NADH=1. Sol: ΔG’º -4.0001M d) 0. 84. Calcular ΔG para la hidrólisis del ATP a pH 7 y a 25° C en condiciones de estado estacionario (análogas a las que pueden darse en una célula viva) en las que las concentraciones de ATP. b) 10-2 M. Calcular los valores de ΔGº del estado estándar para la disociación del ácido acético a los siguientes valores de pH: a) pH 0 y b) pH 5. en la reacción: A ↔ B. b) K’eq 5. ΔGº para la hidrólisis del ATP=–7. El ΔGº’ de la hidrólisis del ATP a pH 7 y a 25°C es –7. 87.999M y 9x 10-6M.7 kcal/mol. 25 mM y 13 mM. calcular: a) K’eq de esta reacción en el músculo. Sol: -11792 cal/mol.75x10-5. La K’eq para la reacción de la Fructosa-1. Sol:a) 0. b) –3Kcal/mol. Si la concentración inicial de Glucosa-6P fue de 0. Sabiendo que ΔG’º para la hidrólisis del ATP es de –7. En el músculo la creatina-P es una reserva de energía: Creatina-P + ADP + H+ ↔ ATP + creatina. 90.999M y 0. VI: TERMODINÁMICA. El ΔG’º de la hidrólisis de la glucosa-6P a pH 7 y a 25°C es –3.3Kcal/mol.Val. 0.1 M y en el equilibrio el 0. 10-4 y 10-2 M. . respectivamente.21x 103. suponiendo que ha sido una mutación puntual la que ha dado origen al cambio de aminoácido?.56Kcal/mol.99M y 0.

32 V. Sol: a) reacción espontánea. d) -482950cal/mol PROBLEMAS RESUELTOS http://books. b) 29.6Kcal/mol.com/books?id=pF-A9vUEL8C&pg=PA324&lpg=PA324&dq=ecuacion+de+michaelis+menten+ejercicios+solucionados&sou rce=bl&ots=BZDzV6wOgn&sig=zPDA_EJrMi_Go93wX6UWk9etjO4&hl=es&ei=4hqrTd2OGabV0 QHttdTcAg&sa=X&oi=book_result&ct=result&resnum=3&ved=0CCQQ6AEwAg#v=onepage&q& f=false . Calcular: a) ΔG’º de la reacción total acoplada.google. c) 26 moles. c) con esa eficiencia ¿cuántos moles de ATP por mol de glucosa podrán obtenerse en condiciones de metabolismo aerobio. d) calcular el ΔG’º para la oxidación total acoplada a la síntesis de ATP.19V. Sol: a) –36.0 Kcal/mol. NAD+/NADH= 1000.0 kcal/mol). La conversión de glucosa en ácido láctico a pH 7 y 25ºC tiene una ΔG’º total de –52. E’0 Lactato/piruvato=-0.6%. dónde la glucosa se oxida hasta CO2 y H 2O (ΔG’º = -686. 91. b) eficiencia de la conservación de energía en el proceso. b) reacción espontánea. En una célula anaerobia esta conversión se acopla a la síntesis de dos moléculas de ATP por molécula de glucosa. E’ 0 NADH/NAD+=-0.b)Lactato/piruvato=1000.

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