Ejercicios,

 Unidad  3:  Enzimas,  E.  E.:  Bioquímica/Biología  

1. Una enzima mutante se une a un sustrato con una fuerza 100 veces mayor que la enzima nativa ¿cuál es el efecto sobre la
velocidad catalítica si la unión el estado activado no resulta afectada?

2. Se presentan la representación doble recíproca para una reacción de un solo sustrato catalizada por una enzima a tres
concentraciones diferentes ¿Cuál de las siguientes gráficas sería la que se obtiene? y ¿por qué ?

3. Las velocidades iniciales a varias concentraciones de sustrato para una reacción catalizada por un enzima hipotético son:
[S] (moles/L): 5x10-2 5x10-3 5x10-4 5x10-5 5x10-6 5x10-7
V (μmoles/min):0.25 0.25 0.25 0.20 0.071 0.0096
a) ¿Cuál es la velocidad máxima para esta reacción?
b) ¿Por qué la velocidad inicial permanece constante a una [S] mayor de 5x10-4 M
c) ¿Cuál es la concentración de enzima libre para una [S] de 5x10-4 M?
d) ¿Cuál es la Km de la enzima? Hacer gráfica (tarea)
e) Calcular la velocidad inicial para [S]=1x10-6 y [S]=1x10-1 M
f) Calcular la concentración de producto formado en los cinco primeros minutos de reacción utilizando 10 mL de una disolución
de sustrato 2x10-3 M

4. En un cultivo de bacterias, la velocidad de reacción de un enzima E fue de 20 μg/min para una concentración de sustrato de 3
mM. Si la concentración de sustrato es igual o superior a 7 mM, la velocidad no supera los 40 μg/min. Al añadir un inhibidor
competitivo, la velocidad de la reacción fue de 20 μg/min para una concentración de sustrato de 8 mM. Calculese la Km, la Vmax
y la Ki para este enzima, sabiendo que la concentración de inhibidor añadido es de 6 mM.

5. A partir de los siguientes datos de una reacción enzimática, determinar de que manera está actuando el inhibidor. Determinar
la Km para el enzima y la Ki para el complejo enzima-inhibidor. ¿Cuál es la velocidad máxima?
[S] mM: 2 3 4 10 15
V μg producto/h (sin inhibidor): 139 179 213 313 370
V μg producto/h (6 mM inhibidor): 88 121 149 257 313

6. Se aisló una enzima E que cataliza la reacción A↔P, se decidió hacer un estudio estructural y cinético de dicha enzima:
[A] mM: 1.00 0.55 0.25 0.20
V(mmol P/ min): 1.00 0.71 0.50 0.41
V (nmol P/min) con J: 0.66 0.41 0.25 0.20
Donde J es un inhibidor de E cuya influencia como tal se quiere estudiar. [J] = 0,25 mM
a) Km de la enzima estudiada para A, y Vmax para la transformación A→P en presencia de E
b) ¿Qué tipo de inhibidor es J? Calcula la Ki.
c) ¿Cuál sería el efecto sobre la Vmax de la enzima, si se da un aumento en la concentración de J?

7.- La cinética de una enzima viene determinada como función de la concentración de sustrato en presencia y ausencia del
inhibidor I. a) Calcular la Km y la Vmax en presencia y ausencia de inhibidor
b) Que tipo de inhibidor es? Calcular la Ki
[S] (M x10-5): 0.3 0.5 1.0 3.0 9.0
V (µmol/min) sin inhibidor: 10.4 14.5 22.5 33.8 40.5
V (µmol/min) con inhibidor (1x10-4 M): 2.1 2.9 4.5 6.8 8.1