UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE QUÍMICA

CURSO: QUÍMICA ANALÍTICA - LABORATORIO

INFORME DE PRÁCTICA N°3

TÍTULO: Volumetria Ácido-Base Determinación de Nitrógeno Orgánico (Método
kjeldahl)

GRUPO N°: 6.

Alumno Código

Aylas Medina, Katerine 20211033

Chipao Lucero, Cristian 20211039

Huamán Farfán Alejandro Anthony 20191464

Pósito Baca, Alejandra 20211061

Facultad y especialidad: Facultad de ciencias departamento de química.

Horario de la práctica: Miércoles de 15:00pm a 17:00pm.
Docente de laboratorio: Tatiana Angelica Rojas Ayerve.
Fecha de la práctica: 11/04/22.
Fecha de entrega del informe: 17/05/22.

LA MOLINA - LIMA - PERÚ

2022
 ÍNDICE

MATERIALES Y REQUERIMIENTOS 3

METODOLOGÍA Y PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL 4

RESULTADOS 5

DISCUSIÓN DE RESULTADOS 6

CONCLUSIONES 7

CUESTIONARIO 8
 1. MATERIALES Y REQUERIMIENTOS
MATERIALES Y MÉTODOS

1 Propipeta

1 Bureta calibrada de 25 o 50 mL

2 Vasos de precipitado de 50 o 100 mL

Instrumentos
de vidrio 2 Matraz Erlenmeyer de 125 o 250 mL

1 Matraz volumétrico (fiola) de 100 mL

2 Pipetas volumétricas de 5, 10 o 20 mL

2 Matraz volumétrico (fiola) de 50 o 100 mL

2 Probetas graduada de 15 o 20 mL

Muestra problema: tejido biológico u orgánico

Catalizador (mezcla de 100 g K2SO4 más 0,25 g CuSO4)

Ácido sulfúrico concentrado

Reactivos
Hidróxido de sodio 12 M

Ácido sulfúrico 0.10 M estandarizado

Ácido clorhídrico 0,05 M estandarizado.

Bromofenol

Balanza analitica
Equipos Equipo de digestión en campana extractora para capturar gases emitidos

Equipo de destilación Kjeldahl

Otros Agua destilada,balón de digestión Kjeldahl de 100 mL

https://www.google.com/imgres?imgurl=https%3A%2F%2Fupload.wikimedia.org%2Fwikipedia%2Fcommons%2Fthumb%2Fe%2Fee%2FKjeldahl%2527s_distillation.svg%2F220px-Kjeldahl%2527s_distillation.svg.png&imgrefurl=https%3A%2F%2Fes.wikipedia.org%2Fwiki%2FM%25C3%25A9todo_Kjeldahl&tbnid=89bSx1G7eO4JRM&vet=12ahUKEwjtsvP-huj3Ah
Vos5UCHUi1D2UQMygPegQIARBf..i&docid=JYydXWvEf32taM&w=220&h=176&q=equipo%20kendall%20clasico&hl=es&ved=2ahUKEwjtsvP-huj3AhVos5UCHUi1D2UQMygPegQIARBf
2. METODOLOGÍA Y PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Digestión: N-orgánico a N-NH4+

1) Utilizar papel para pesar la muestra libre de fuente de nitrógeno ya que será
incorporado a la digestión junto con la muestra

2) Pesar exactamente alrededor

de 0,20 g de muestra en el pape en la balanza analitica pero con previa
medición del peso del papel en dicha balanza, envolver y cerrar cuantitativamente e
introducir al fondo del balón de digestión.

3) Añadir aproximadamente 1 g de catalizador

4) Agregar 2,5 mL de H2SO4 concentrado

5) Llevar 2 horas (aproximadamente) al digestor, hasta llegar a una solución incolora

6) Sacar del digestor, dejar enfriar y pasar a la siguiente operación

Destilación:

1) Alistar matraz Erlenmeyer de 125 mL

2) Con una pipeta cilíndrica tomar 25 mL de solución de H2SO4 0.05 M

estandarizado y verter al matraz Erlenmeyer de 125 mL

3) Agregar entre 5 a 6 gotas de fenolftaleína y debe quedar incolora.

4) Reservar

Titulación:

1) Tener una bureta limpia, seca y su respectivo soporte

2) Separar en un vaso de precipitado pequeño con NaOH 0.1000 M estandarizado y

enrasar la bureta

3) Titular gota por gota la solución hasta que se torne de color rojo
3. RESULTADOS

Tabla 1: Determinación de Nitrógeno orgánico

Quinua (muestra T. 20) Quinua (muestra T. 24)

Peso de muestra en g 1.0080 1.0225

Vol. H2SO4 mL tomado 25 mL 25 mL

para captura del NH3

M de H2SO4 estandarizada 0.0556 0.0556

Vol. de NaOH gastado en 18.3 mL 22.4 mL

titulación

M de NaOH estandarizado 0.0958 0.0958

Factor estequiométrico de
NaOH a H2SO4 0.5 0.5
2NaOH+H2SO4 → Na2SO4+2H2O

Factor estequiométrico de
H2SO4 a NH3 2 2
2NH3+H2SO4 → (NH4)2SO4

Milimoles de H2SO4 que 1.39 1.39

reaccionó con el NH3

Milimoles de NH3 2.78 2.78

equivalente

Milimoles de N equivalente 2.78 2.78

W en g de nitrógeno = 0.0389 0.0389

(Jx 0.014 g/mol)

%N(p/p) 1.426 0.868

%Proteínas (p/p) =%N x 8.91 5.43

factor gravimetro
Fuente: Elaboración propia (2022)
3.1. Cálculos
Este procedimiento se repite en la muestra 20 y 24:
2𝑁𝐻3 + 𝐻2𝑆𝑂4 → (𝑁𝐻4)2𝑆𝑂4
 𝑚𝑚𝑜𝑙 𝐻2𝑆𝑂4
0.0556 x 𝑚𝑙
x 25 ml = 1.30 mmol 𝐻2𝑆𝑂4
- Factor estequiométrico de H2SO4 a NH3
1 mmol 𝐻2𝑆𝑂4 — 2 mmol NH3
1.39 mmol 𝐻2𝑆𝑂4 — x mmol NH3 = 2.78 mmol NH3

𝑔 𝑁𝐻3
2.78 mmol NH3 x 17 = 0.0473 g NH3
1000 𝑚𝑚𝑜𝑙 𝑁𝐻3

17g NH3 → 14g N

0.0473g NH3 → X
X = 0.0389 g N

- %Nitrógeno

[ 𝑉𝑥𝑀𝐻2𝑆𝑂4 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 – 𝑉𝑥𝑀𝑁𝑎𝑂𝐻 𝑥 𝐹𝐸=0.5 𝑒𝑛 𝑒𝑥𝑐𝑒𝑠𝑜] 𝑥 𝐹𝐸 = 2 𝑥 0.014

%N = 𝑊 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
x 100

[ 25𝑚𝐿 𝑥 0.0556𝑀 – 18.3𝑚𝐿 𝑥 0.0958𝑀 𝑥 0.5 ] 𝑥 2 𝑥 0.014

%N = 1.0080𝑔
x 100
%N = 1.426%

- %Proteína

%N x 6.25 = 8.91%

4. DISCUSIÓN DE RESULTADOS :
En 1966, la quinua fue catalogada como uno de los cultivos promisorios de la
humanidad por la FAO (Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y
la Agricultura) debido a su alto contenido nutricional, entre los cuales destacan las
proteínas. Según la FAO en el 2011, el % de proteínas de la quinua varía entre el
13,81 y 21,9%, cantidad que depende directamente de la variedad y que es superior en
comparación a cereales como el trigo, arroz y maíz. Por otro lado, según León
Mendoza et. al (2021), el % de proteínas proteína total en el grano de quinua entre 10
de sus variedades varió entre el 10.86% y 13.56%.
En esta práctica usamos quinua blanca, donde obtuvimos la cantidad porcentual de
proteína siendo 8.91% y 5.43% de la muestra 20 y 24, respectivamente. Estos valores
son inferiores en comparación al rango establecido por la FAO y León Mendoza et. al.
Esta diferencia se debe a la calidad que presentan los granos de quinua analizados y
la variedad usada en esta práctica.
5. CONCLUSIONES
● Se logró determinar mediante el método de Kjeldahl el porcentaje de
nitrógeno orgánico en una muestra de quinua blanca.

6. BIBLIOGRAFÍA

FAO. (2011, junio). La Quinua: Cultivo milenario para contribuir a la seguridad

alimentaria mundial. https://www.fao.org/family-farming/detail/es/c/326239/

León Mendoza L., Herrera Mestanza V., & González Cabeza J. (2021). Evaluación y

selección de variedades de “quinua” nativa Chenopodium quinoa

(Amaranthaceae) con potencial para el malteado. Arnaldoa, 28(2), 383-396.

https://dx.doi.org/10.22497/arnaldoa.282.28208
 7. CUESTIONARIO

1.-¿Cuál es el título, propósito e hipótesis de la Práctica 1?

- Título: Volumetría ácido-base, Determinación de nitrógeno orgánico, Método de
Kjeldahl.
- Propósito:Poder determinar la concentración de nitrógeno amoniacal en compuestos
inorgánicos y orgánicos a través de la técnica de la volumetría ácido-base y el método
de Kjeldahl(Digestión, Alcalinización y titulación).
- Hipótesis:La concentración de amoniaco NH3 en una base de bronsted y Lowry
acepta los iones H+ para formar NH4+ ,esto se determina desprendiendo y
arrastrandolo con vapor de agua para formar NH3, y en una reacción ácido-base se
realiza la técnica de retrovaloración y las leyes de estequiometria.

2.-¿Cómo demuestra que el resultado reportado por usted es confiable?

Logrando en la medida de lo posible que la teoría y la práctica tengan un margen de
error bajo.

3.-¿ Cómo demuestra usted que trabajó de manera segura ?

Siguiendo las indicaciones establecidas de las Buenas Prácticas de Laboratorio, los
lineamientos establecidos del Manual de Gestión de Residuos de Laboratorio y la norma ISO
140001 para cumplir con la correcta segregación, reciclaje, y disposición correspondiente.
Así como también al momento del manejo y manipulación de reactivos, se debe realizar
según el Manual de Gestión de Seguridad y Salud Ocupacional.

4.-¿Cómo demuestra usted que el impacto ambiental de su actividad en el

laboratorio es mínimo?
Mediante el cumplimiento del sistema de gestión de residuos generados en un laboratorio
químico teniendo en cuenta las tres R: Reducir, Reusar y Reciclar.

5.-Investigue el fundamento analítico para la determinación de proteínas por cada uno

de los siguientes métodos:
- Método de Biuret
 Este método se basa en la formación del complejo entre el Cu2 + y los grupos NH de
los enlaces peptídicos en un medio básico.La realacion entre la intensidad de su
coloración púrpura(cuantifica espectrofotométricamente a 540 nm) y la cantidad de
proteínas(enlaces peptídicos) son directamente proporcionales tiene una sensibilidad
muy baja y solo es recomendado aplicar en mezclas muy concentradas(sueros) para
cuantificar las proteínas.
- Método de Lowry
El método depende de la concentración de tirosina y el triptófano de la muestra la cual
consta de dos reacciones:la de biuret y la de folin esta última es característica de los
grupos -OH reductores de los aminoácidos(tirosina y triptófano) junto con el
complejo Cu+2 que reducen a la reacción de folin dando como resultado una
coloración azul.
- Método del ácido Bicinconínico (BCA):
El ácido bicinconínico es un compuesto capaz de formar un complejo púrpura intenso
con iones Cu1+ en un medio alcalino.Este reactivo es capaz de monitorizar el ion
cuproso el cual es producido por en una reacción entre las proteínas con Cu2+ en
medio alcalino, la estabilidad del reactivo genera que la cuantificación de las
proteínas sea rápido y sencillo, se cuantifica espectrofotométricamente a unos 562
nm.
- Método de absorción UV a 280 nm:
Se da mediante la absorción de los anillos aromáticos que presentan el triptófano y la
tirosina con una absorción a 280 nm, este método requiere cantidades pequeñas esto
debido a que el espectrofotómetro tiene un sistema de retención de muestra durante la
medición para indicar la cantidad de proteína que se encuentra en la muestra pura.
- Método de adhesión de colorante:
En este método se va controlando el pH y la fuerza iónica por medio de los grupos
funcionales ácidos y básicos de las proteínas que pueden interactuar con grupos
orgánicos de carga opuesta.Las proteínas se unen al colorante para formar un
complejo insoluble.
- Método de Bradfort
Esta técnica se basa en la unión del colorante Comassie Blue G-250 a las proteínas
con la presencia del color azul la cual absorbe a 595 nm para así formar un complejo
proteína-colorante con un coeficiente de extinción mayor al del colorante libre.Para la
 determinación de las proteínas es rápido debido a que pocas son las sustancias que
intervienen en el proceso.
- Método de la Ninhidrina:
En este método la ninhidrina es una reacción colorimétrica de alta sensibilidad para
aminoácidos que tengan un grupo amino libre para dar lugar a la formación del
amoniaco y anhídrido carbónico.Esta prueba se reconoce por la formación de una
coloración negra o gris.
- Método turbidimétrico:
Es una técnica que sustenta los fenómenos ópticos es decir consta en medir la
disminución de la luz transmitida a través de una suspensión de partículas para esto se
utiliza un espectrofotómetro.Este método se utiliza para las soluciones concentradas
(suero,orina,etc).

6.-Una muestra de leche desecada pesa exactamente 1 g y se analiza por el método de

Kjeldahl. El amoniaco se recoge en 50 mL de HCl 0,122 M y el exceso de ácido gasta
20,7 mL de NaOH 0,145 M. Calcular el % de proteínas.
Datos:
W muestra de leche = 1g
V HCl = 50 mL
M HCl = 0.122M
Vol gastado de NaOH = 0.145
M NaOH = 0.145
𝑀 𝑥 𝑉(𝐻𝐶𝑙)𝑋 𝐹.𝐸 𝑋 0,014 x100 = 0.122 𝑥 50 𝑥 0,014 x100 = 53.375
%N = =
𝑤(𝑔)𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 1

7.- Un determinado cereal contiene 16% de proteínas. Calcular el peso del cereal que se
tomara como muestra para que al analizar con el método Kjeldahl del ácido bórico se
utilize 50mL de HCl 0,025M, (Factor de conversión 5,7)
Datos:
%Proteínas = 16
Factor de conversión = 5,7
 𝑀 𝑋 𝑉(𝐻𝐶𝑙)𝑋 𝐹.𝐸 𝑋 0,014 x100
%N = (%Proteína / Factor de conversión) %N =
𝑤(𝑔)𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
%N = (16/5,7)
0,025 𝑋 50 𝑋 1 𝑋 0,014 x100
%N = 2.81 2.81=
𝑤(𝑔)𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎

Wmuestra = 0.6227g

8.-Una muestra de 0,5g de un embutido es analizada por la técnica de Kjeldahl

(modificación con ácido bórico). El gasto de HCl 0, 116 M fue de 7,2 ml. Calcular el
%de proteínas totales de la muestra.
𝑀𝑥𝑉𝐻𝐶𝑙 𝑥 𝐹,𝐸 𝑥 0.014
%𝑁 = 𝑊(𝑔) 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
𝑥 100

%N = (0.116x7.2 x 1x0.014)/0.5 x 100

%N = 2.34

%CHON = %N x 6.25
= 2.34 x 6.25
= 14.62

9.-Un gramo de fertilizante comercial es analizado por el procedimiento de

Kjeldahl. El amoniaco destilado es recibido en 30 ml de solución ácido bórico al
2%.Finalmente se necesitaron 45.32ml de HCl 0,182M. Calcular el %N en el
fertilizante.
Datos:
- 30 ml de 𝐻3𝐵𝑂3 al 2% 𝑃/𝑃

- 45 ml de HCl al 0.182 M
- %N en el fertilizante = ?
𝑀𝑥𝑉𝐻𝐶𝑙 𝑥 𝐹,𝐸 𝑥 0.014
%𝑁 = 𝑊(𝑔) 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
𝑥 100

0.182 𝑥 45.32 𝑥 1 𝑥 0.014

%𝑁 = 0.6
𝑋 100

%N = 19.25 %
10.-¿ Cuál será el peso en gramos de una muestra que se analizará por la técnica de
Kjeldahl, variante ácido bórico, el gasto de HCl 0,1M consumido en la titulación final
sea igual al porcentaje en proteínas de la muestra?

Datos:
%Proteína = V(HCl) = B

𝑀 𝑋 𝑉(𝐻𝐶𝑙)𝑋 𝐹.𝐸 𝑋 0,014 x100

%N = (%Proteína / Factor de conversión) %N =
𝑤(𝑔)𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
0,1 𝑥 𝐵 𝑥 1 𝑥0,014 x100
%N = (B/ 6,25) 0,16B=
𝑤(𝑔)𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
%N = 0,16B Wmuestra = 0.875g

11.- Una muestra impura de 0,25 g de urea es analizada por la técnica de Kjeldahl. El
gasto en la valoración final fue de 44,2 mL de HCl 0,35 M. Calcular el % de pureza de
la muestra.
4,2 ml x 0,35 M= 15, 47 mmoles

(15,47/1000) =0,015 g

% Pureza = (0,015g/0,25 g) x100= 6,18

12.- Se sabe que un embutido contiene 20,09 de proteínas totales. ¿Cuál será el volumen
de HCl 0,125 M que se gastará en la valoración final si se analiza una muestra de 0,875
g por la técnica de Kjeldahl?
% CHON=20,09

%N= (20,09/6,25) =3,21

3,21= ((VHCl x0,125 x 1 x 0,014)/0,875 g) x 100

VHCl = 16,05