INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

OPTATIVA: BIOTECNOLOGÍA

PRÁCTICA 2:
MICROPROPAGACIÓN

ALUMNO: REYES HERNÁNDEZ MARÍA DE LOS ÁNGELES

PROFESOR: MONTES VILLAFAN SILVANO

 Introducción
La micropropagación o propagación clonal, es una de las aplicaciones más generalizadas del
cultivo in vitro, a través de la micropropagación, a partir de un fragmento (explante) de una
planta madre, se obtiene una descendencia uniforme, con plantas genéticamente idénticas,
denominadas clones. El explante más usado para los procesos de propagación in vitro son
las yemas vegetativas de las plantas. Los frascos que contienen las plantas se ubican en
estanterías con luz artificial dentro de la cámara de crecimiento, donde se fija la temperatura
en valores que oscilan entre los 21 y 23°C, además de controlar la cantidad de horas de luz.
Por su parte, el medio de cultivo se compone de una mezcla de sales minerales, vitaminas,
reguladores de crecimiento, azúcar, agua y agar. La composición del medio depende de la
especie vegetal y de la etapa del proceso de micropropagación. Con finalidad puramente
descriptiva se puede clasificar los principales factores no biológicos que afectaran al
desarrollo del cultivo in vitro, incluyendo:
 Ambiente químico
o Composición del medio de cultivo
o pH
 Ambiente físico
o Temperatura
o Luz y fotoperíodo
o Humedad
Dentro del proceso de micropropagación diferenciamos varias fases o etapas:
1) Selección y Preparación de la planta madre
2) Desinfección de las yemas de la planta y/o desinfección de semillas
3) Introducción del material seleccionado in vitro
4) Multiplicación de brotes
5) Enraizamiento
6) Aclimatación
Esta secuencia de etapas abarca el ciclo completo de la multiplicación de plantas in vitro;
puede ser aplicada a diferentes especies vegetales, en cada caso se podrán incluir
simplificaciones o cambios de acuerdo a las características de las plantas, pero en términos
generales son comunes al proceso de propagación in vitro.
La siguiente lista presenta una comparación de las características de una planta en
condiciones de laboratorio (in vitro) respecto a una planta en condiciones naturales (in vivo):
In vitro
o No realiza fotosíntesis
o Crecimiento en condiciones controladas
o Crecimiento en condiciones de asepsia
o Alta humedad relativa
o Estomas no funcionales
o Ausencia de pelos radiculares
o Ausencia de cera en la cutícula
In vivo
o Realiza fotosíntesis
o Crecimiento en condiciones no controladas
o Exposición a los patógenos y gérmenes del ambiente
o Humedad relativa variable
o Estomas funcionales
o Presencia de pelos radiculares
o Presencia de cera en la cutícula

OBJETIVO: Micropropagar explantes caulinares y comparar su desarrollo utilizando dos

especies vegetales.

MATERIAL Y MÉTODOS.
RESULTADOS
Tabla 1. Resultados de los frascos en medio MS utilizados para la micropropagación de
Zebrina y Coleus blumei

Frasco Contaminació Oxidación Con respuestas

n de crecimiento
1 Zebrina No No 4 brotes
2 Zebrina No No 4 brotes
3 Zebrina No No 3 brotes
4 Zebrina No No 2 brotes
1 Coleus blumei No No 2 brotes
2 Coleus blumei No No 3 brotes
3 Coleus blumei No No 2 brotes
4 Coleus blumei No No 2 brotes
Figura 1. Frascos con respuesta de crecimiento de los explantes de Zebrina

Figura 2. Frascos con respuesta de crecimiento de los explantes de Coleus blumei

Figura 3. Plántulas en frascos más grandes con medio de cultivo sin carbohidratos
después de tres meses

DISCUSIÓN
Durante el desarrollo experimental pudimos observar que en todos los frascos hubo respuestas
de crecimiento (fig 1 y 2) , estos presentaron una organogénesis directa en la cual se produjo
tallo y pequeñas hojas sobre el explante y hasta raíces , aunque cabe mencionar que los
explantes de Zebrina tuvieron brotes en menos tiempo en comparación con los de Coleus, y en
estas últimas además de tardar más días en aparecer los brotes estos fueron menos, lo que nos
podría indicar que esta especie es más exigente y de más difícil crecimiento que Zebrina. Al no
haber contaminación en ningún frasco podemos decir que se cumplió con las condiciones de
asepsia, y por otro lado al no presentarse oxidación en ningún frasco nos indica que los lavados
fueron suficientes, ya que el hipoclorito de sodio es altamente oxidante y al mantener residuos
de este, al momento de incubar se propagaría por el explante causando su oxidación, sin
embargo también la presencia de hongos y sus metabolitos secundarios pueden causar la
oxidación.
Se pudo observar que al momento de cambiar los explantes con las plántulas a nuevos frascos
con medio enriquecido de carbohidratos y frascos únicamente con minerales, todas las plántulas
en el medio con carbohidratos se contaminaron en su mayoría por hongos y murieron sin
embargo los que se colocaron en los frascos con minerales continuaron con su crecimiento de
sus plántulas y no se presentó contaminación (fig. 3). Por lo que los carbohidratos en los demás
frascos propiciaron el crecimiento de hongos y bacterias, desfavoreciendo el crecimiento de las
plántulas.
CONCLUSIONES
o Es posible obtener mediante micropropagación plantas clones de su progenitor.
o Es indispensable trabajar en condiciones asépticas durante la siembra de los explantes.
o Hongos y bacterias pueden causar la oxidación de los explantes inhibiendo el
crecimiento de la planta.
o Es necesario utilizar explantes provenientes de plantas sanas para evitar la
contaminación proveniente del interior de estos.
o El desarrollo experimental fue un éxito, ya que en todos los frascos al menos dos
explantes presentaron brotes y hubo organogénesis.

BIBLIOGRAFÍA
Azcon-Bieto, J.,y Talón, M. (2013). Fundamentos de Fisiología Vegetal. McGraw-Hill Interamericana
de España, S.L.
Castillo A., y Dalla Rizza M. (1999). La Biotecnología Aplicada a la Producción de Ajo Semilla, Revista
Oficial de INASE, Nº 3.
Castillo A., Davies P., Ceppa M., Del Pino G., y Bonilla B. (1999). Ajuste de un sistema de
multiplicación in vitro para la especie nativa Aloysia chamaedrifolia (Verbenacea).