Propagación in vitro de orquídeas a partir
de semilla sexual1
INTRODUCCIÓN
Bajo condiciones naturales, las semillas de
Orquídeas son liberadas de sus cápsulas cuando
estas maduran y son llevadas por el viento,
pudiendo germinar y crecer si eventualmente
caen en un medio adecuado para la germinación.
Sin embargo, dichas semillas tienen pocas
posibilidades de sobrevivir, debido a que muchas
de las especies de orquídeas sólo son capaces
de crecer en presencia de un hongo simbiótico:
Rhizoctonia spp.
Las semillas de orquídeas pueden ser
germinadas en troncos y raíces de árboles
establecidos; sin embargo, el porcentaje de
germinación es muy bajo. A pesar de que cada
cápsula puede contener aproximadamente tres
millones y medio de semillas, sólo unas cuantas
germinan, dificultando así la selección y
producción masiva para fines comerciales
(Cañas, 1991). Por esta razón, varios
investigadores han trabajado en la obtención de
medios de cultivo que permitan un alto porcentaje
de germinación. Knudson (1.946) logró la
germinación asimbiótica de orquídeas en medio
de cultivo que contenía pulpa de banano, para
contrarrestar las bajas concentraciones de
nutrientes. El medio de cultivo desarrollado por
Murashige y Skoog (1962), ha sido probado
exitosamente para la germinación y crecimiento
de muchas especies, debido principalmente a los
altos contenidos de nitrógeno y potasio.
1
Leticia Serna Angel. M.Sc.
N° 034 GENÉTICA. Diciembre, 1999. Universidad de Caldas, A.A. 275. Manizales, Colombia.
fitotec@emtelsa.multi.net.co
Las orquídeas crecen prácticamente en todas las
latitudes; sin embargo, una gran mayoría es
originaria de los trópicos. Colombia es uno de los
centros de origen donde se siguen reportando
especies nuevas, manteniendo el interés de los
diferentes cultivadores por hacer más eficiente y
rápido el proceso de germinación. A este respecto,
Alarcón y Angarita (1.984) compararon la
germinación simbiótica y asimbiótica de especies
de orquídeas nativas en la Sabana de Bogotá,
logrando establecer un procedimiento adecuado
para la germinación.
Para los cultivadores de orquídeas es
fundamental lograr un alto porcentaje de
germinación que asegure la reproducción
eficiente de sus híbridos, razón por la cual se
llevó a cabo el presente experimento, con el fin
de establecer un procedimiento simple que
asegure un alto porcentaje de germinación en el
menor tiempo posible.
MATERIALES Y MÉTODOS
Cápsulas de los géneros Catleya y Cymbidium,
fueron colectadas cuando estaban maduras, pero
antes de que se presentara el fenómeno de la
dehiscencia, y fueron llevadas al laboratorio don
fueron lavadas mediante inmersión en una
solución de hipoclorito de sodio (blanqueador
comercial) al 10%, durante 10 minutos, luego
fueron lavadas dos veces con agua destilada
estéril y sembradas en condiciones asépticas.
Para ello, se cortó la cápsula en la parte superior
y se permitió que las semillas cayeran libremente
sobre el medio de cultivo.
Los medios evaluados se incluyen en la Tabla 1.
La siembra se realizó aleatoriamente de tal
manera que en cada medio se tuviera una medio B sólo se presentó un 12% de germinación
muestra representativa de los diferentes estados a las 24 semanas y las semillas en los otros
de madurez de las semillas dentro de la cápsula. frascos se han tornado de color pardo, lo mismo
que en el medio D. El porcentaje de germinación
Tabla 1. Medios de cultivo para la germinación en estos tres medios ha sido bajo y lento. En el
de semillas de orquídeas. medio C el proceso de germinación se inició a las
3 semanas, observándose gran cantidad de
Compuesto A B C D protocormos de color verde, los cuales
MS* X** X** X** X** desarrollaron hoja y raíz inicial a las 6 semanas,
Glicina 0.5 0.5 0.5 0.5 presentándose gran proliferación de las mismas
Piridoxina 0.5 0.5 0.5 0.5
en cada frasco. Para evitar la competencia entre
Tiamina 0.5 0.5 0.5 0.5
A. nicotínico 0.5 0.5 0.5 0.5
las plántulas y permitir el correcto desarrollo, a
m-inositol 100 100 100 100 las 8 semanas se hizo una transferencia a nuevo
BAP*** 0 4 2 2 medio de cultivo, permitiendo el contacto directo
ANA**** 0 2 2 4 con el medio y por lo tanto el libre crecimiento.
* Murashige-Skoog; **: Concentraciones en mg.lt-1;
*** Benzilaminopurina; ****: Acido naftalenacétíco. Se evaluaron los cuatro medios de cultivo para
determinar cuál de ellos permitía el mejor
desarrollo; los resultados fueron muy semejantes
Los medios fueron suplementados con 3% de a los encontrados en la germinación: El medio C
sacarosa, solidificados con 0,7% de Bacto Agar permitió rápido crecimiento de hoja y desarrolló
(Difco), incubados a temperatura ambiente (20 - raíces nuevas, doblando el tamaño de las
25 °C) e iluminados directamente con tubos plántulas en 4 semanas. En los medios A y B las
fluorescentes durante 8 horas diarias. Para la plántulas han crecido lentamente pero se han
evaluación correspondiente se consideró como mantenido vivas, mientras que en el medio D las
semilla germinada aquella que xxxxxx plántulas se tornaron cafés y sólo el 20% de ellas
permanecen vivas.
RESULTADOS
Se puede concluir que un medio de cultivo con
Se sembraron 25 réplicas de cada medio de las sales MS, suplementado con vitaminas,
cultivo y se evaluó el porcentaje de germinación azúcar, ANA y BAP permite una rápida
con respecto al tiempo expresado en semanas. germinación de las semillas y un crecimiento
Los resultados se presentan en la Tabla 2. saludable de las plantúlas, las cuales pueden ser
adaptadas a condiciones de campo dado que en
Tabla 2. Porcentaje de germinación con respecto este medio desarrollan bien la raíz y las hojas,
al tiempo en semanas.
haciendo más fácil su adaptación.
Tiempo A B C D
3 0 0 29.2 0 BIBLIOGRAFÍA
ALARCON , C. Y ANGARITA, A. Estudio de los medios
6 0 0 54.2 0 simbióticos y asimbióticos para la propagación sexual de
12 0 0 62.5 0 orquídeas nativas de la Sabana de Bogotá. Primer congreso
24 0 12 80.0 8 Nacional de Cultivo de Tejidos Vegetales. 1984.

Las semillas se evaluaron semanalmente para
descartar contaminación y evaluar el proceso de
desarrollo. Durante los 6 meses de observación
se presentó un 9% de contaminación. Se pudo
observar que el suplemento de ANA y BAP en el
medio C, permitió el mayor porcentaje de
germinación en el menor tiempo. En el medio A
no se presentó germinación en las 24 semanas y
las semillas continúan de color blanco. En el
CAÑAS, B. M., Cultivo asimbiótico. In Vitro en Orchidaceae
Rev UlS. 20(1): 35-44. 1991.
KNUDSON, L. A new nutrient solution for germination of
orchid seed. Amer, orchid, Soc. 15 : 214 - 217. 1946.
MURASHIGE, T, Y SKOOG, F. A revised medium for rapid
growtb bioassays with tobacco tissue cultures. Physiol.
Plant, 15:473-497. 1962.