Carrera de Ingeniería Química

MICROBIOLOGÍA GENERAL
UNIDAD II: Nutrición Bacteriana

Juliana L. Criollo Feijoo

jlcriollo@utmachala.edu.ec
MORFOLOGÍA BACTERIANA, HONGOS Y
PROTISTAS

CONTENIDOS

01 Clases de nutrientes, universales,

particulares, factores de crecimiento
bacteriano

02 Práctica: preparación de medios de cultivo.

 OBJETIVO
Describir las clases de nutrientes de los
microorganismos, y los factores que
intervienen en su crecimiento a través
de revisión bibliográfica para
comprender su comportamiento y forma
de vida.
 01
Clases de nutrientes,
universales, particulares,
factores de crecimiento
bacteriano
Nutrición
Bacteriana Proceso por el que los seres vivos toman del
medio de donde habitan las sustancias
químicas que necesitan para crecer.

- Fuentes de carbono
- Fuente de nitrógeno
- Fósforo
- Azufre
- Oligoelementos minerales
 Desarrollo de ▪ Nutrientes, H20
microorganismos ▪ Medio ambiente favorable: T°, pH

En el
laboratorio
Se siembran en medios de cultivo apropiados, y
se incuban a temperaturas y tiempos adecuados

La siembra debe realizarse en condiciones estériles (en

un lugar cerrado, sin corrientes de aire, sobre una mesa
previamente desinfectada y cerca de un mechero
encendido)
 CLASIFICACIÓN POR SU TIPO DE
NUTRICIÓN

Por su fuente de energía Por su fuente de carbono A su forma de vida

Fotótrofos: reciben la Autótrofos o Litotrofos: Saprófitas, simbiontes,

energía de la luz solar, utilizan CO2 como única o comensales,
como las cianobacterias. principal fuente de carbono. mutualistas, parásitas.
Quimiótrofos: reciben la Heterótrofos u
energía de la oxidación de Organotrofos: utilizan
compuestos orgánicos e moléculas orgánicas
inorgánicos. preformadas, reducidas, de
los organismos.
 Medios de cultivo
Son soluciones de los componentes
(nutrientes) disueltos en agua en los
que crece y se multiplican los
microorganismos en el laboratorio
Industria → materia prima de bajo costo (suero de
leche, melaza de cana o remolacha, almidón de maíz).
Los requerimientos nutricionales están
determinados por el tipo de metabolismo
celular:
Se debe poner mucha atención en los
nutrientes que contienen ya que de
esto va depender su desarrollo.
Nutrientes → depende del
microrganismo
- Agua.
- Fuente de energía y de carbono
- Fuentes de N (orgánico, inorgánico, complejo)
- Sales minerales
- Macronutrientes (P,S,K,Mg)
- Micronutrientes
frecuentemente escenciales (Fe, Zn, Mn, Cu, Co,Mo).
raramente esenciales (Na, Al, Si,B, Cl,Cr)
- Autotróficos, heterotróficos
- Aerobios, anaerobios.
Medios de cultivo

Son soluciones de los componentes (nutrientes)

disueltos en agua en los que crece y se
multiplican los microorganismos en el laboratorio.

Pueden ser:
- líquidos (“caldos”)
- sólidos

El agar - agar es un polisacárido

Los medios sólidos contienen además
de los nutrientes, agar – agar (1-2%),
o gelatina para darle la consistencia
adecuada (“sólida”).
producido por algas Rodofíceas, que
“solidifica” el medio que sirve de sostén
para los microorganismos, y que no puede
ser metabolizado por éstos. El agar - agar
funde a 100ºC y solidifica a 45ºC.
 Medios de cultivo

Medios de Medios de cultivo Medios de cultivo Medios de cultivo

cultivo simples enriquecidos selectivos diferenciales
Medios de cultivo simples

Poseen los requisitos nutricionales para permitir el

desarrollo bacteriano general, ejemplos: agar nutritivo,
caldo nutritivo, entre otros.

Medios de cultivo enriquecidos

Un medio de enriquecimiento contiene sustancias de

alto poder nutritivo (sangre, suero, huevo, vitaminas,
etc.) que favorecen el crecimiento del microorganismo
nutricionalmente exigentes.

Ejemplo: agar sangre al ser suplementado con sangre ovina, permite el crecimiento de
microorganismos nutricionalmente exigentes y la clara visualización de reacciones de hemólisis
Medios de cultivo selectivo

Un medio selectivo contiene compuestos que inhiben

el crecimiento de algunos microorganismos pero no de
otros. Se consiguen añadiendo al agar nutritivo
compuestos químicos nocivos para algunos m.o cuyo
crecimiento no es de interés

•El agar Mac Conkey que contiene cristal violeta e

inhibe el crecimiento de m.o gram positivos.
•Caldo lactosado bilis verde brillante en donde la bilis
inhibe el crecimiento de bacterias gram positivas.
Medios de cultivo diferenciales

A estos medios se le adiciona sustancias o indicadores (colorantes) específicos

que permitan observar macroscópicamente que durante el crecimiento de un
determinado microorganismo se ha producido un a reacción metabólica
especifica, por tanto ciertas propiedades de crecimiento ayudan a diferenciar sus
colonias de otras especies diferentes.
Medios de cultivo diferenciales
A estos medios se le adiciona sustancias o indicadores (colorantes)
específicas que permitan observar macroscópicamente que durante el
crecimiento de un determinado microorganismo se ha producido un a
reacción metabólica especifica, por tanto ciertas propiedades de
crecimiento ayudan a diferenciar sus colonias de otras especies
diferentes.

Ejemplo: Agar Salmonella-Shigella tiene lactosa y un indicador de pH que permite

diferenciar las colonias de bacterias fermentadoras de este disacárido.
MEDIOS DE AISLAMIENTO
S. aureus

AGAR BAIRD PARKER

Agentes selectivos: Cloruro de litio y telurito

Agentes diferenciales: yema de huevo y telurito

Colonia típica:

▪ Centro negro Reducción telurito

▪ Halo precipitación Actividad lipasica

▪ Halo transparente Actividad Lecitinasa

▪ Halo opaco Acción proteolítica

MEDIOS DE AISLAMIENTO

MEDIO 110

Agente selectivo: NaCl 7,5 %

Agentes diferenciales: manitol y gelatina
Colonia típica:
▪ Pequeña, pigmento amarillo
▪ Fermentación manitol: viraje al color ácido al
agregar el indicador azul de bromotimol
▪ Hidrólisis de gelatina: zonas claras luego de
inundar con (NH4)2 SO4 (ss) (reacc. de Stone)
MEDIOS DE AISLAMIENTO

AGAR MANITOL SALADO

Agente selectivo: NaCl

Agentes diferenciales: manitol, no contiene gelatina,
rojo fenol (indicador de pH)
Colonia típica:
▪ colonias amarillas rodeadas de una zona del mismo
color.
 AGAR MANITOL SALADO

Los medios sólidos inmovilizan las células y les permiten

crecer y formar masas visibles y aisladas llamadas colonias.

Las colonias permiten al

microbiólogo visualizar la
composición y la
supuesta pureza del
cultivo. Las placas que
contienen más de una
clase de colonia indican
un cultivo contaminado.
AGAR MANITOL SALADO

Los medios de cultivo líquidos se utilizan para la producción de grandes

cantidades de microorganismos o para la observación de características
microscópicas de los microorganismos.
Se utilizan también para favorecer el desarrollo bacteriano de células estresadas.
 Siembra en Tubo

Siembra medio líquido: Una vez

que se tiene el ansa cargada con
material, ésta se sacude dentro del
líquido, para que se desprendan los
microorganismos adheridos
 Siembra en Placa

- Siembra de microorganismos stock

en el laboratorio para observar a partir
de un inóculo previo.
- Siembra muestra de alimento.

Siembra por estría en placa

(superficial)
 Resultados
Ejemplos de observaciones:
bacterias en caldo

- Siembra de microorganismos stock

en el laboratorio para observar a partir
de un inóculo previo.
- Siembra muestra de alimento.
 Resultados

Ejemplos de observaciones:
Bacterias en agar
 Ejemplos de
observaciones: hongos
en agar

Ejemplos de observaciones:
Bacterias en agar
Trabajo autónomo

Investigar acerca de 7 microorganismos

con su respectivo medio de cultivo
GRACIAS