DETERMINACIÓN DE CAFEÍNA EN CAFIASPIRINA MEDIANTE HPLC.

PROBLEMÁTICA.
Se presenta un comprimido de una droga comercialmente conocida como cafiaspirina, con una
masa de 550mg según informa el rótulo de la misma. Se desea conocer la concentración real
de cafeína presente en dicho analgésico, el cual teóricamente es
de 50mg. Para ello se deberá utilizar la cromatografía líquida de
alta resolución (HPLC). El objetivo del presente trabajo es la
preparación de la muestra para su posterior corrida en el
cromatógrafo.
La curva de calibración empleada fue realizada por alumnos de la
especialidad en años anteriores. Previo al análisis, suponemos
que la curva no nos será confiable debido al envejecimiento de la
columna. Sin embargo, debido al poco tiempo para realizar una nueva curva, la utilizaremos.

INTRODUCCIÓN.
Este medicamento contiene ácido acetilsalicílico y cafeína como principios activos. El ácido
acetilsalicílico actúa reduciendo el dolor y la fiebre, y la cafeína, tiene una acción estimulante
del sistema nervioso.
Cafiaspirina está indicado en adultos y niños mayores de 16 años para el alivio sintomático de
los dolores ocasionales leves o moderados, como dolores de cabeza, dentales, menstruales,
musculares (contracturas) o de espalda (lumbalgia). Estados febriles.

TÉCNICA OPERATORIA.
La pastilla fue pesada en la balanza análitica, siendo su masa
0,6479g. Se molió con un mortero, y se diluyó para realizar una
solución madre. Primero se planteó una concentración de 1000μg/ml,
pero al no diluirse la solución y revisar la farmacopea, terminamos
realizando una solución de 250μg/ml. Como no llegamos con el
tiempo para preparar diluciones, hicimos la corrida con este único
valor. La concentración de cafeína presente en la pastilla no debería
diferir considerablemente del valor rotulado, puesto que previo a su comercialización ya debió
pasar por un análisis de este tipo.
La curva de calibración utilizada es la siguiente:

[C] cafeína en μg/ml Área

METODOS Y TÉCNICAS ANALITICAS E

INSTRUMENTALES
 200 5268268

100 2883674

50 1537188

25 764667

12,5 387626

Revisando los valores de la tabla y la curva de calibración (siguiente imágen), podemos

predecir que el área aproximada de nuestro pico debería rondar en los 8.000.000.

CONDICIONES DEL ANÁLISIS CROMATOGRÁFICO.

Concentración de fase móvil: 70% agua, 30% metanol (preparada por los alumnos en un
volumen de 200ml, previo al análisis).
Caudal: 1 ml/min
Presión de trabajo: máx = 300 kgf, mín = 0 kgf.
Tiempo de corrida: 10 min
Longitud de onda: 272 nm (para asegurarnos de un valor correcto de trabajo, se realizó un
barrido).

RESULTADOS.
En la siguiente hoja podemos ver el cromatograma realizado por el equipo, y las áreas
correspondientes. El pico de interés (cafeína) es el segundo, siendo comprobado con un

METODOS Y TÉCNICAS ANALITICAS E

INSTRUMENTALES
cromatograma realizado por alumnos de la especialidad en años anteriores, con el uso de un
patrón de cafeína.
El área del pico en cuestión es de 10.599,125. Gracias a este dato podemos calcular la
concentración de cafeína en nuestra muestra.
área de pico−159511
[C] cafeína (en μg/ml) = = 402,76μg/ml
25920

CONCLUSIONES.
La concentración calculada gracias al área y la curva de calibrado no son similares a la
concentración de cafeína de partida. Podríamos suponer que la concentración está mal
rotulada, sin embargo, hay una serie de errores que pudimos estar arrastrando y por lo cual el
resultado no es coherente. Estos son los siguientes:
● Utilizar una curva de calibración hecha hace años. Debido al envejecimiento de la
columna, cabe la posibilidad que la curva de calibración ya no sea representativa, por lo
cual debería realizarse una nueva con un patrón conocido.
● La curva de calibrado utilizada no posee un valor de r > 0,999. Esto genera que la
linealidad no sea la adecuada y que los resultados se vean afectados. Esto podría
arreglarse planteando patrones de diferentes concentraciones para mejorar la
linealidad.
● Haber superado el intervalo dinámico lineal del compuesto. Carecemos de información
de la razón de las concentraciones de los patrones, pero puede deberse a que, a

METODOS Y TÉCNICAS ANALITICAS E

INSTRUMENTALES
concentraciones mayores de los 200μg/ml la cuantificación de la cafeína ya no sea
lineal. Esto puede solucionarse diluyendo la muestra.

METODOS Y TÉCNICAS ANALITICAS E

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