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PRESENTADO A:
LIC. JULIAN DAVID
DOCENTE BIOLOGÍA
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INTRODUCCIÓN
Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es
observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el
laboratorio. El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para
el crecimiento de los microorganismos.
Por otra parte, está formado por componentes alternativos: agente solidificante
(agaragar), tampones, indicadores de pH, etc.
a. Su consistencia:
Medios líquidos
Medios sólidos (en tubo, en placa)
Medios semisólidos
b. Su uso:
Medio General: Es aquel medio donde crecen todo tipo de microorganismos,
excepto aquellos que necesitan de unas condiciones especiales.
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JUSTIFICACIÓN
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La Gelatina es otro agente solidificante, pero se emplea mucho
menos ya que bastantes bacterias provocan su licuación.
También se añaden colorantes que actúan como indicadores para detectar, por
ejemplo, la formación de ácido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y
no de otras (el Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo en pH básico y amarillo
en pH ácido. La Violeta de Genciana se usa como inhibidor ya que impide el
crecimiento de la mayoria de las bacterias Gram-positivas).
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OBJETIVOS:
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CONDICIONES GENERALES PARA EL CULTIVO DE MICROORGANISMOS
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Muy a menudo se añaden al medio de cultivo ciertos colorantes, bien como indicadores
de ciertas actividades metabólicas o bien por sus capacidades de ejercer de inhibidores
selectivos de ciertos microorganismos.
Los medios solidificados con gelatina tienen el gran inconveniente de que muchos
microorganismos no se desarrollan adecuadamente a temperaturas inferiores al punto
de fusión de este solidificante y de que otros tienen la capacidad de licuarla.
Actualmente los medios sólidos son de uso universal, por su versatilidad y comodidad,
pero hay también gran cantidad de medios líquidos cuyo uso está ampliamente
extendido en el laboratorio.
5- Luz Ambiental
6- pH
7- Temperatura
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8- Esterilidad Del Medio
Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estériles para evitar la
aparición de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el
crecimiento microbiano normal del o de los especímenes inoculados en dichos medios.
El sistema clásico para esterilizar los medios de cultivo es la autoclave (que utiliza vapor
de agua a presión como agente esterilizante)
La primera noticia de la utilización de medios de cultivo nos llega del micólogo Brefeld,
que consiguió aislar y cultivar esporas de hongos en medios sólidos realizados a base
de gelatina.
Sin embargo, este sistema no era adecuado para las bacterias (por su menor tamaño) y
no fue hasta el año 1878 cuando Lister popularizó un método enfocado al cultivo puro
basado en diluciones seriadas en un medio líquido.
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En el año 1882 tiene lugar uno de los grandes avances de la microbiología en relación
con los medios de cultivo: el médico alemán Walter Hesse introduce el agar-agar
(polisacárido extraído de algas rojas) como solidificante.
Beijerinck y Winogradsky, que desde de 1888 realizaron sus investigaciones sobre las
bacterias quimioautótrofas (utilización de nitrógeno y azufre sobre todo) tuvieron gran
importancia en el desarrollo de los medios selectivos y de enriquecimiento. Diseñaron
este tipo de medios de tal forma que su especial composición química favorecía el
crecimiento de ciertos tipos de microorganismos que, en función de sus procesos
metabólicos, eran los únicos capaces de utilizar para su desarrollo ciertos nutrientes del
medio.
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Atendiendo A Su Utilidad Práctica:
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MATERIALES:
Placas de Petri
Palillos de algodón o pincel delgado
Rotulador
Gelatina sin sabor (cada 2 o 3 personas)
Bata
Tapabocas
Moña para el cabello (mujeres)
Guantes de nitrilo o látex.
Olla
Preinforme
Marcador sharpie
Cubito de caldo maggi
Vinipel (3 o 4 rollos por todo el salón)
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DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
(alternativa):
Tenemos 2 placas Petri, todas ellas con un medio de cultivo general. El objetivo
principal de la práctica es cultivar bacterias en el medio de cultivo. Esto lo vamos a
hacer de dos formas:
a. Dividiremos la primera placa Petri en dos, trazando una línea en la tapa que
contiene el cultivo. A continuación, tocaremos la superficie del medio de cultivo
con el dedo pulgar en una de las mitades. En la otra mitad haremos lo mismo,
pero con las manos limpias y secas.
Una vez tenemos las dos placas de Petri sembradas de microorganismos vamos a
introducirlas en un lugar oscuro y seco durante dos días. Tras este tiempo,
observaremos las placas.
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CUESTIONES:
a) ¿Qué diferencias observas en la placa 1 entre la zona que tocaste con el dedo
sucio y la que lo hiciste con el dedo limpio?
Rta:/ La que toque con el dedo sucio se ve que hay microorganismos
(bacterias) y la que toque con el lado limpio al observarla las bacterias no
existen.
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b) Viendo la diferencia entre las dos mitades, ¿Podría ser peligroso no lavarse las
manos antes de comer?.
Rta:/ Sí, porque al no lavarnos las manos contagiaremos los alimentos y aparte
de eso ingerimos las bacterias que se encuentres en nuestras manos sucias,
teniendo un alto grado de contagiarnos de alguna enfermedad.
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c) ¿Qué ves en la placa 2?
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d) ¿Por qué se han cultivado a 25ºC y no a 100ºC?
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e) Busca en internet un medio de cultivo que sea selectivo y diferencial a la vez, y
describe.
Agar S.S.:
Fundamento
La selectividad, está dada por las sales biliares y el verde brillante, que inhiben el
desarrollo de bacterias Gram positivas, de la mayoría de los coliformes y el desarrollo
invasor del Proteus spp.
Es diferencial debido a la fermentación de la lactosa, y a la formación de ácido
sulfhídrico a partir del tiosulfato de sodio.
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Siembra
Sembrar por estriado la superficie del medio de cultivo.
Resultados
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Características Del Medio
Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
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