INFORME LABORATORIO IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS

MARÍA GÓMEZ DUQUE

JUAN JACOBO RAMÍREZ VALENCIA
MARILUNA CASTAÑO GARCÉS

INGENIERÍA BIOMÉDICA

DOCENTE
KELLY YOJANNA CARDONA LONDOÑO

UNIVERSIDAD AUTONOMA DE MANIZALES

30 DE MARZO 2017
 INFORME PRIMER LABORATORIO

OBJETIVOS
● Identificar la función de cada una de las pruebas bioquímicas empleadas
para la identificación de los carbohidratos.
● Describir las propiedades físicas y químicas de los carbohidratos.
● Analizar los resultados obtenidos en cada prueba partiendo de la
fundamentación teórica.

PREGUNTAS

1. ¿Qué conceptos fueron necesarios para desarrollar la practica?

R/
Para realizar la práctica de laboratorio fueron necesarios los conocer los
siguientes conceptos:
● Prueba de Molish: ​Permite el reconocimiento general de
carbohidratos en el que los polisacáridos y disacáridos se hidrolizan
con ácido sulfúrico concentrado hasta monosacáridos y se
convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales
reaccionan con α-naftol formando un color púrpura violeta.

● Prueba de Benedict: ​Permite el reconocimiento de carbohidratos

reductores, al igual que el reactivo de Felhing, el de Benedict
contiene ion cúprico en medio alcalino que se reduce hasta óxido
cuproso en presencia de azúcares con el hidroxilo hemiacetálico
libre. Al tratar el azúcar con estos reactivos, experimentan una
reacción de oxidación.

● Prueba de Seliwanoff: ​Esta prueba es específica para cetosas y se

basa en la conversión de la cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su
posterior condensación con resorcinol formando así complejos
coloreados.

● Prueba de Barfoed​: ​Esta prueba permite diferenciar entre

monosacáridos y disacáridos reductores, también contiene ion
cúprico que se reduce hasta óxido cuproso más rápidamente con los
monosacáridos que con los disacáridos. El carbohidrato reductor, al
contacto con el reactivo da en característico precipitado de color rojo
ladrillo. Los monosacáridos reductores dan la reacción positiva en
 poco tiempo, de 2 a 5 minutos mientras que los disacáridos
reductores la dan positiva pero más lentamente, de 5 a 10 minutos.

● Prueba de Bial: ​El reactivo de Bial contiene orcinol en ácido

clorhídrico, el cual forma complejos de coloración sólo con las
pentosas. ​Al reaccionar con aldopentosa el ácido clorhídrico, pierde
moléculas de agua, y produce la sustancia conocida con el nombre
de furfural. El furfural puede reaccionar en medio ácido con el
orcinol. Si en esas condiciones se agrega una pequeña cantidad de
cloruro férrico, se formará un complejo de color verde.

● Prueba de Yodo: ​El almidón y las dextrinas producen color con una
disolución de yodo y yoduro de potasio. Este color puede ser azul,
rojo o púrpura, según sea el grado de hidrólisis de la macromolécula.
● Prueba de Osazonas: ​Las osazonas se forman cuando azúcares
reaccionan con un compuesto conocido como fenilhidrazina en el
punto de ebullición. La reacción involucra la formación de
fenilhidrazona.

2. Describa cómo realizo el procedimiento para cada uno de los

experimentos.
● Prueba de Osazonas: ​En un tubo de ensayo limpio colocamos 5 ml de
glucosa, agregamos 10 gotas de ácido acético el cual reaccionó con los
monosacáridos de la glucosa y agregamos 3 gotas de fenilhidrazina; luego
de estos agitamos y calentamos 5 min al baño María. A la salida del baño
María se dejó reposar, se filtró en otro tubo de ensayo y se introdujo en el
refrigerador, para posteriormente observarlo bajo el microscopio.

● Prueba de Molish: En un tubo de ensayo limpio, se agregó una muestra de

glucosa y luego dos gotas del reactivo de Molish con ayuda de la profesora
añadimos 0.5 ml de ácido sulfúrico; realizamos esta misma prueba con
agua de la llave y retirando la glucosa.

● Prueba de Benedict: en otro tubo de ensayo limpio añadimos un ml del

reactivo de benedict, luego cinco gotas de glucosa y agitamos; lo
colocamos en el baño María durante cinco minutos, a continuación,
realizamos el mismo procedimiento, pero en lugar de glucosa añadimos
Coca Cola sin azúcar.
● Prueba de Baerdof: en un tubo de ensayo limpio agregamos un ml del
reactivo de Baerdof y 0.5 ml de glucosa, lo agitamos y lo introducimos al
baño maria.

● Prueba de Bial:
Para Pentosa:
​en un tubo de ensayo limpio colocamos 1.5 ml del reactivo de Bial,
añadimos 1 ml de de la solución de Ribosa, y agitamos; luego lo
calentamos durante cinco minutos.

Para hexosa:
Se realiza el mismo procedimiento que para la Pentosa, pero obtenemos
diferentes resultados.

● Prueba de Seliwanoff: ​en un tubo de ensayo limpio colocamos 2 ml del

reactivo de Seliwanoff, luego 3 gotas de solución de fructosa y agitamos
para colocar en el baño María y realizamos el mismo procedimiento con la
glucosa.

● Prueba de Yodo: para esta prueba realizamos dos diferentes

procedimientos donde añadimos 2 gotas de HCL (Acido Clorhidríco) y 2
gotas de Yodo; una prueba con almidon y otra con Coca Cola sin azúcar.

3. ¿Qué resultados observo en cada uno de los experimentos?

● Prueba de Osazonas: ​Al final de la prueba podemos observar por medio

de los Microscopios algo como con forma de Estrella y unos puntos
compactos de color amarillo.

● Prueba de Molish: ​En esta prueba prueba observamos que el reactivo de

molish queda en la parte superior, en el centro el anillo de Ácido Sulfúrico
de color morado por la oxidación que se provoca y en la parte de abajo
queda el azúcar.

Con agua: en lugar de un anillo morado se creó un anillo de color amarillo

con una reducida cantidad de puntos negros.
● Prueba de Benedict: ​Luego de calentar la solución con Reactivo de
benedict observamos que debido a la oxidación obtenemos una mezcla de
colores: azul claro y rojo ladrillo en pocas proporciones.

● Prueba de Baerdof: ​En esta prueba observamos un color café de la

solución luego de calentarla debido a la presencia de monosacáridos,
mientras que con la Coca Cola sin azúcar observamos un azul verdoso por
el bajo contenido de monosacáridos.

● Prueba de Bial: ​En esta prueba observamos que cuando en la mezcla hay
una pentosa se coloca de color verde, en cambio sí hay una hexosa su
color es café, esto debido a que actúa más rápido en la pentosa que en la
hexosa.

● Prueba de Seliwanoff: ​La mezcla era transparente y con el calor se puso

color rojo vivo porque la fructosa es una cetosa, mientras que con la
glucosa se puso de color salmón.

● Prueba de Yodo: En esta prueba con el almidón, debe resultar azul por la
presencia de polisacáridos, en cambio con la Coca Cola la mezcla no
cambia de color porque, aunque tiene azúcar, no son polisacáridos.

4. Explique con sus propias palabras y brevemente, por qué ocurre el

fenómeno observado en cada uno de los experimentos.
5. ¿Cómo interpreta los resultados obtenidos en cada experimento?

● Ozazonas: ​Las osazonas se forman cuando los azucares

reaccionan con fenilhidrazina. La reacción involucra la formación
defenilhidrazona. La reacción puede ser utilizada para identificar
monosacáridos

● Prueba de Molish: Todos los glúcidos, por acción del ácido

sulfúrico se deshidratan formando compuestos furfúricos, y estos
se condensan con el reactivo de Molish.
 ● Prueba de Benedict: Al mezclar el reactivo Benedict con glucosa
se da una oxidación que torna el reactivo de un color rojo ladrillo.

● Prueba de Seliwanoff: ​Los azucares son distinguidos a traves

de su funcióncomo ​cetona o ​aldehído.​Si el azúcar contiene un
grupo cetona, es una cetosa, y si contienen un grupo aldehído,
es una aldosa. Esta prueba está basada en el hecho de que,
al calentarlas, las cetosas son deshidratadas más rápido que las
aldosas.

● Prueba de Barfoed: Nos dio el resultado de color rojo ladrillo,

este lo realizamos con glucosa, después de sacarlo del baño de
María que cambia de color debido a la oxidación.

● Prueba de Yodo: Con el almidón se produce un color violeta ya

que el yodo se introduce entre las espiras de la molécula de
almidón, no es por tanto una verdadera reacción química sino
que forma un compuesto de inclusión que modifica las
propiedades físicas de la molécula, apareciendo la coloración
violeta

● Prueba de Bial: ​Las pentosas son monosacáridos (glúcidos

simples) formados por una cadena de cinco átomos de carbono.
Como en los demás monosacáridos aparecen en su estructura
los grupos alcohólicos (OH). Además, también pueden llevar
grupos cetónicos o aldehídicos.
Aldopentosa: También llamada ribosa. Como su nombre indica
contiene la función aldehído. Es uno de los compuestos que
forman el ARN.

6. ¿Cuáles fueron los posibles errores que cometió durante la práctica del
laboratorio?
● No pudimos medir bien las 10 gotas de ácido acético.
● Excedimos la agitación de la mezcla de la segunda prueba.
● En la prueba de osazona filtramos la mezcla sin antes agitarla
como se debía.
● En la prueba de Seliwanoff añadimos muy poca glucosa y el color
no fue evidente.

7. Escriba una conclusión general del experimento

En este experimento pudimos observar diferentes formas para identificar
la presencia de carbohidratos en una muestra mediante reacciones
químicas con diferentes reactivos, y evaluando los resultados positivos o
negativos identificamos los diferentes tipos de sacáridos de acuerdo a la
reacción a la que se refería, y diferenciamos las distintas reacciones con
base al fundamento en que se basan las mismas; también observamos
que en cada prueba estas cambiaban significativamente sus colores.
Imágenes de los procesos realizados durante el laboratorio.
Referencias bibliográficas:
www.academia.edu

https://es.scribd.com/doc/160161041/Prueba-de-Seliwanoff

https://es.slideshare.net/sunanowafer/informe-prctica-1-indentificacin-
de-carbohidratos

https://es.scribd.com/doc/166399226/Practica-7-Osazonas-1-docx
https://books.google.com.co/books?id=8VpJ8foyDiIC&pg=PA12&lpg=
PA12&dq=prueba+de+benedict&source=bl&ots=q1zFpVaj-g&sig=E0
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20de%20benedict&f=false
http://danielamartineze.blogspot.com.co/2012/09/identificacion-de-car
bohidratos.html