UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIAPAS

ESCUELA DE CIENCIAS QUÍMICAS SEDE OCOZOCOAUTLA

PROGRAMA EDUCATIVO
Químico fármaco biólogo
MATERIA
Genética aplicada
DOCENTE
Mayram Margarita González Reyes
TRABAJO

Reporte de laboratorio
Extracción de adn a partir de tejido vegetal
INTEGRANTES

Gloria Asunción Ovando Pérez

Priscila lizeth sanches Roblero
Paulina Gissel ovando de la cruz
Stephani Dayanne Ruiz Zabala.
María luz de la cruz castellanos
Ingrid Yamileth Velazco Toledo
Martin Alberto Ocaña cruz
Martín Arias Marroquín
GRADO Y GRUPO
5° “B”

Ocozocoautla de espinosa, Chiapas a 11 de mayo 2023

REPORTE DE LABORATORIO DE LA PRATICA NO.3 EXTRACCIÓN DE ADN A
PARTIR DE TEJIDO VEGETAL

Integrantes del equipo: María luz de la Cruz Castellanos, Martín Arias Marroquín,
Martín Alberto Ocaña Cruz, Paulina Gissel Ovando De la Cruz, Gloria Asunción
Ovando Pérez, Stephani Dayanne Ruiz Zavala, Priscila Lizeth Sánchez Roblero,
Ingrid Yamilet Velasco Toledo.

Resumen: Se realizo una extracción "la extracción de ADN es el primer

de ADN a partir de tejido vegetal,
paso en la mayoría de los análisis
donde se tomó como muestra un
kiwi, en la cual se añadieron moleculares y celulares, y es crucial
diferentes sustancias reactivas para para el estudio de la genética y la
obtener los resultados correctos fue
de gran importancia seguir los biología molecular" (Alberts et al., 2014,
protocolos determinados por el p. 69).
manual de prácticas de la institución.
2 OBJETIVOS
Palabras clave: Extracción de ADN,
Tejido vegetal, Ruptura celular, Específicos
Calidad.
• Observar las diferentes etapas del
proceso de extracción de ADN y
1 INTRODUCCIÓN describir las características físicas y
químicas de cada una de ellas.
La extracción de ADN en tejido vegetal
es un procedimiento fundamental en la • Identificar los materiales y reactivos

biología molecular, que permite obtener utilizados en la extracción de ADN, y

el material genético de plantas para su explicar su función y su importancia en

análisis y estudio. Se lleva a cabo el proceso.

mediante una serie de pasos que • Describir las características del ADN

incluyen la trituración del tejido, la extraído y compararlas con otras

separación de las proteínas y la practicas anteriormente utilizadas en

obtención del ADN en una solución otros experimentos similares.

líquida. A pesar de ser un Generales

procedimiento relativamente sencillo,
• Identificar los materiales y reactivos
requiere de una cuidadosa atención a
óptimos necesarios para la extracción
los detalles y la precisión en la
de ADN a partir de tejido vegetal, y
realización de cada paso. Como señala
describir el proceso de extracción.
el libro "Molecular Biology of the Cell",
3 METODOLOGIA

3.1 Material, equipo y reactivos 3.2 Diagrama de flujo

Material, equipos Reactivos

1 morteros y 1 pistilos NaCl 2M
3 vasos de precipitado Agua destilada
de 50 ml
2 Pipetas de 5 ml 5 ml de jabón
para lavar trastes
2 Probeta de 50ml Azul de metileno
2 Matraz de 250 ml Etanol 96° frio
1 Matraz aforado de 1 kiwi
100 ml
2 Agitadores de vidrio Aceite de
inmersión
Gasas y colador SDS 1%
Hielo
Portaobjetos
Microscopio
3.3 Procedimiento A continuación, se procedió a filtrar con
la ayuda de un filtro de café
El desarrollo se llevó de acuerdo a lo
esperado, a pesar de que la practica se Se procedió a medir el volumen
llevo a acabo en menos tiempo de lo obtenido en una probeta, obteniendo 55
esperado. ml de la mezcla.

Como primer paso se lavo el kiwi y se

procedió a partir a la mitad y pelar.
Después se comenzó con el
procedimiento de trituración dentro del
mortero, este proceso llevo por lo
menos alrededor de 8 minutos.

Como siguiente paso se procedió a

añadir los reactivos (2m de NaCl)
necesarios para la separación de las
fibras de cromatina.

A partir de esto se le añadió 30 ml de

agua destilada, hasta parecer una masa
uniforme y se dejó reposar en hielo
durante 5 minutos.
Mientras se integraba el reactivo (2m de Posteriormente agitamos con un
NaCl) al kiwi triturado debía estar en agitador de vidrio con precaución sin
hielo. lograr hacer espuma o burbujas.

Posteriormente uno de los integrantes

del equipo integro 1ml de jabón líquido
(Axion) lo cual no debió ser retirado del
hielo o lugar frio donde se encontrara.

Esperamos a que se formen los

filamentos aproximadamente unos 5
minutos de espera.

4 RESULTADOS
A continuación integramos 2ml de
Obtuvimos extracto de ADN de tejido
alcohol frio de 96% deslizándolo por las
vegetal. A un matraz se le añadió 30ml
paredes del vaso de precipitado sin ser
de agua destilada, obteniendo 55 ml de
retirado del hielo.
la mezcla, utilizando la mitad de un kiwi

.se realizó un frotis y la llevamos a

observar al microscopio el conjunto de
ADN separando las proteínas con
ayuda del detergente rescatando toda la
muestra fibrilar.
5 DISCUSION DE RESULTADOS proporcionó por lo que tuvimos que
vernos en la necesidad de observar
La extracción de ADN en tejido vegetal
nuestros resultados en el microscopio
utilizando el método que la institución
en una hora después de la practica con
nos proporciona y siguiendo el
la finalidad que todos los integrantes del
desarrollo de los pasos del manual se
equipo lograran observar
logró realizar una práctica de manera
detalladamente nuestro tejido de ADN.
exitosa, sin embargo el tiempo que se
nos proporciono fue bastante escaso Para esta práctica el equipo opto en no
por lo que en nuestro primer intento no usar otro método para la realización de
logramos separar con del la práctica ya que observamos que si se
ayuda
detergente las proteínas del tejido realizan los pasos tal cual nos da el
logrando que solo quedara el ADN por manual si logramos los resultados
lo que de manera rápida nos vimos en exitosamente.
la necesidad de volver a realizar la Al contario de la práctica de tejido
práctica y con el desempeño de todos animal no obtuvimos un excedente de
los integrantes logramos realizar de tejido vegetal por lo que fue más
nuevo los pasos de la práctica y de esa complicado observar nuestro resultado
manera lograr nuestro objetivo . por lo que analizamos que el kiwi tiene

Para realizar la práctica necesitamos menos estructura fibrilar aunque

una disolución de NaCl 2M, 4ml jabón rescatamos toda la muestra que
líquido de la marca Axión y alcohol de pudimos.
96° necesariamente frio, para
la Pudimos dialogar con el equipo y
extracción de ADN del kiwi, tan solo descubrimos con ayuda de maestra que
utilizamos la mitad de nuestro kiwi y cometimos el error de no mezclar el
utilizamos la otra mitad para repetir el detergente de manera correcta y esa
procedimiento. A pesar de seguir las fue la razón por la cual la primera
concentraciones y el procedimiento prueba que realizamos no tuvimos
mencionado en el manual, los resultados exitosos a diferencia de los
resultados obtenidos fueron limitados otros equipos ya que como nos
en términos de tiempo que se nos comentaba la maestra que teníamos
que observar de manera instantánea las específicos como NaCl 2M, jabón
fibras de ADN, le dimos unos cuantos líquido Axión y alcohol de 96° frío para
minutos para esperar obtener los lograr separar las proteínas del tejido y
resultados y no lo logramos por el cual observar la estructura fibrilar del ADN. A
tuvimos la necesidad de repetir todos pesar de que en el primer intento no se
los pasos, en efecto la segunda vez fue logró obtener los resultados deseados,
de manera instantánea que el se pudo solucionar el problema y repetir
detergente separo las proteínas del kiwi la práctica con éxito. En general, se
y de manera que visualizamos la concluye que siguiendo
estructura fibrilar y rescatamos la cuidadosamente los pasos del manual y
muestra para la observación en el utilizando los reactivos adecuados, se
microscopio. Comparando nuestros puede obtener exitosamente el ADN de
resultados con los de una bibliografía tejido vegetal.
autorizada y verificada del autor
7 REFERENCIAS
Carmen Belart Rodríguez en su libro
Biología y Geología 4o ESO, explica Biología y Geología 4o ESO. Libro guía del
detenidamente el proceso que llevamos
profesorado. (2008).
a cabo, y de igual forma expone los
mismos resultados que obtuvimos.
Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Morgan,
(Biología y Geología 4o ESO. Libro guía
D., Raff, M., Roberts, K., & Walter, P.
del profesorado, 2008)
(2014). Molecular biology of the cell (6th
6 CONCLUSIÓN ed.). Garland Science.

En conclusión, se llevó a cabo una

práctica exitosa para la extracción de
ADN de tejido vegetal utilizando un
método proporcionado por la institución.
Aunque el tiempo proporcionado fue
limitado, se lograron seguir los pasos
del manual para obtener el extracto de
ADN de un kiwi. Se utilizaron reactivos
1. ¿Cuál es el fundamento de esta técnica?

El fundamento de la técnica de extracción de ADN en tejido vegetal se basa en la

ruptura de las células vegetales para liberar el ADN. Esto se logra mediante la
maceración del tejido vegetal en un tampón de extracción que contiene detergentes,
sales y enzimas proteolíticas. Los detergentes rompen las membranas celulares y
liberan el contenido celular, mientras que las sales y las enzimas proteolíticas
ayudan a separar el ADN de las proteínas y otros componentes celulares. Luego, el
ADN se purifica mediante una serie de pasos de precipitación y lavado para obtener
una muestra pura de ADN que puede ser utilizada para una amplia variedad de
análisis moleculares

2. ¿Por qué es necesario que el etanol esté frio?

Es necesario que el etanol esté frío durante ciertas técnicas de laboratorio, como la
precipitación de ADN, para aumentar su capacidad de precipitar y separar las
moléculas de ADN. Según el libro "Molecular Biology Techniques: An Intensive
Laboratory Course" de Susan J. Karcher y Christopher A. Karcher, "El etanol debe
estar frío (-20°C) para que las moléculas de ADN se unan con el etanol y precipiten
fuera de la solución". (Karcher & Karcher, 2016) Además, según el libro "Essential
Genetics: A Genomic Perspective" de Daniel L. Hartl y Elizabeth W. Jones, "La
precipitación del ADN se lleva a cabo mediante la adición de una solución salina y
luego la adición de etanol frío para provocar la formación de un precipitado de ADN".
(Hartl & Jones, 2018)

3. ¿Cuál es el papel del detergente liquido?

El detergente líquido es un componente clave en la extracción de ADN ya que ayuda
a romper las membranas celulares y solubilizar las proteínas que se unen al ADN,
lo que permite una mejor liberación del ADN de la célula. De acuerdo a los autores
Bojanova y D'haeseleer (2016), el detergente actúa como un agente tensioactivo,
que reduce la tensión superficial del agua y permite que el detergente penetre en la
célula y disuelva la membrana celular y nuclear, permitiendo la liberación de los
componentes celulares, incluyendo el ADN. Además, según Sambrook y Russell
(2001), los detergentes también ayudan a solubilizar las proteínas que se unen al
ADN, como las histonas, lo que permite una mejor liberación del ADN de las células.

4. ¿Por qué el azul de metileno tiñe al ADN?

El azul de metileno es una molécula catiónica que se une a los grupos fosfato del
ADN, lo que resulta en una alteración de la carga eléctrica del ADN y su
estabilización. Además, se piensa que el colorante intercala entre las bases
nitrogenadas del ADN, lo que puede contribuir a su capacidad de tinción.

Bibliografía
Murray, B. G., & Thompson, W. F. (1980). Rapid isolation of high molecular weight
plant DNA. Nucleic acids research, 8(19), 4321-4326.
https://doi.org/10.1093/nar/8.19.4321

Doyle, J. J., & Doyle, J. L. (1987). A rapid DNA isolation procedure for small
quantities of fresh leaf tissue. Phytochemical Bulletin, 19, 11-15.
https://doi.org/10.1007/BF02900361

Dellaporta, S. L., Wood, J., & Hicks, J. B. (1983). A plant DNA minipreparation:
Version II. Plant Molecular Biology Reporter, 1(4), 19-21.
https://doi.org/10.1007/BF02712670

Edwards, K., Johnstone, C., & Thompson, C. (1991). A simple and rapid method
for the preparation of plant genomic DNA for PCR analysis. Nucleic acids research,
19(6), 1349. https://doi.org/10.1093/nar/19.6.1349

Bojanova, D. P., & D'haeseleer, P. (2016). Microbial nucleic acid extraction: from
environmental samples to single cells. Journal of visualized experiments: JoVE,
(119), e54485. https://doi.org/10.3791/54485
Sambrook, J., & Russell, D. W. (2001). Molecular cloning: a laboratory manual.
Cold spring harbor laboratory press.
María Luz De La Cruz Castellanos