Practica 2: Extracción de ADN

Nombre del alumno: Bueno Sarabia Iris Arlette 21440355, González Ibarra Rosalinda 21440331, López
Yáñez Jesús Andrés 21440113, Peral González Anahis Alexandra. Docente: Dra. Castro Ochoa Lelie Denise
Instituto Tecnológico de los Mochis, Materia: Bioquímica Grupo: T1O

Resumen. Se distinguió el ADN del tomate y la saliva utilizando un método de extracción casero, en donde se preparó
una solución buffer de lisis casero que contenía jabón de platos y sal, misma que se agregó a la muestra líquida, donde
se llevó a cabo una separación de moléculas. Además se usó el alcohol a 95% debido a la importancia que tiene para
hacer precipitar el ADN que fue lo que buscamos. Seguido de una serie de pasos de preparación efectuadas en cada
muestra, dada las reacciones se registraron las observaciones en la bitácora.

Otros conceptos biológicos a desarrollar durante la

Introducción
La biología molecular es una de las herramientas más
utiles de las que se vale hoy en día la ciencia y la
medicina moderna. La obtención de ácido
desoxirribonucleico (ADN), es el punto de partida para
la mayoría de análisis genéticos; incluso contando con
pequeñas cantidades de ADN, es posible amplificar
genes específicos in vitro a través de la reacción en
cadena de la polimerasa (PCR por sus siglas en Inglés :
Polymerase Chain Reaction). Esta revolucionaria
técnica le valio a su inventor, Kary B. Mullis, el premio
Nobel de química en 1993 (1).
Las células representan el componente básico del
cuerpo. Hay muchos tipos distintos de células con
diferentes funciones. Estas células forman todos los
órganos y tejidos del cuerpo. Prácticamente todas las
células del organismo de una persona tienen el mismo
ácido desoxirribonucleico (ADN). El ADN es el
material hereditario de los seres humanos y de casi todo
el resto de los organismos. La mayoría del ADN se
encuentra en el núcleo celular (denominado ADN
nuclear), pero existe una pequeña cantidad de ADN que
se encuentra en las mitocondrias (denominado ADN
mitocondrial). El ADN contiene el código para crear y
mantener todo organismo. El código se lee según el
orden o la secuencia de bases químicas: la adenina (A),
la citosina (C), la guanina (G) y la timina (T). (2)
La extracción de ADN de una muestra celular se basa
en el hecho de que los iones salinos son atraídos hacia
las cargas negativas del ADN, permitiendo su
dispersión coloidal y posterior extracción de la célula.
Se empieza por lisar (romper) las células, vaciándose su
contenido molecular, procediéndose a continuación a su
protección frente a enzimas que puedan degradarlo, para
conseguir finalmente su aislamiento, haciéndolo
precipitar en alcohol. (3)
práctica son dos aspectos muy relevantes de la molécula
de ADN: su localización intracelular y su estructura. El
ADN se encuentra localizado principalmente en el
núcleo celular, pero, en los organismos eucariotas,
también está en las mitocondrias de animales, plantas y
hongos, y en los cloroplastos de las plantas. Estos tres
compartimentos celulares también están delimitados
por membranas grasas, por lo que se pueden disolver
utilizando detergente (4).
Objetivo
El objetivo de esta práctica fue identificar por medio de
reacciones algunos aminoácidos.
Materiales y métodos
Se preparó 100 mL solución de buffer de lisis casero
mezclando 10 mL de jabón para loza, 1/4 de cucharada
de sal y 90 mL de agua.
Posteriormente, se colocó el tomate en una bolsa tipo
ziploc, cerrándola muy bien se trituró el tejido hasta
homogenizar la muestra. Se agregaron 10 mL de
solución de buffer de lisis a la bolsa y se continuó
triturando por 2 minutos más.
Después de eso se pasó el contenido de la bolsa al
filtro de café para separar el tejido triturado y obtener
la fase líquida en un recipiente de 200 mL, luego se
filtró la muestra por lo menos 10 minutos y se
colocaron 25 mL de la fase líquida filtrada en un tubo
tipo Falcón de 50 mL, y se añadieron 25 mL de etanol
al 95% frio.
Por otro lado, para la muestra de saliva, se realizó una
muestra de está usando agua y manteniéndola en la
boca por aproximadamente 1 minuto, posteriormente
se agregó a la solución buffer de lisis y se dejó reposar
alrededor de 2 minutos, para después tomar una
muestra de 3 mL de la nueva solución y añadirla a un
tubo de ensayo en el cual se agregaron 3 mL de
alcohol.
Se esperó unos minutos a que precipite el DNA y se
recuperó el precipitado de este con ayuda de una
varilla de vidrio y se colocó la madeja de DNA en un
tubo de ensayo que contenga agua destilada en ambas
muestras.
Resultados y discusión
Fig.3. Muestra de
Para esta práctica, para la obtención de ADN del tomate
saliva con lisis
se utilizó un método en que se trató de observar
cualitativamente la presencia de ADN, aquí se observó
separación de toda grasa o proteína de la muestra, no se
la presencia de fibras en la muestra, lo cual se tomó
dio una clara separación de los elementos en la muestra
como el indicador positivo de la extracción.
en 2 fases claras. No hubo precipitación de ADN.
Respecto al reactivo que se utilizó para la extracción del
Aunque se apreciaban algunas fibras dentro del tubo de
ADN observado en “Fig.1”, funcionó debido a que, el
ensayo, no eran suficientes para señalar que se tratase
limpiador de trastes contiene un reactivo que se encarga
del ADN precipitado. Una contaminación de la muestra
de la eliminación de grasas y proteínas, por lo que
sería la causa aparente de este suceso.
cuando se agregó a nuestra muestra separó a los lípidos
y las proteínas presentes en las membranas celulares y Se estima que la muestra de ADN fue defectuosa,
en el núcleo de la célula de la muestra, por lo que se principalmente debido a que no se obtuvo una cantidad
expuso el ADN celular. Como se observa en “Fig. 2” sustancial para poder observarse durante la etapa de
después de que se agregó alcohol al tubo de ensayo precipitación.
donde se contuvo a la muestra junto con el buffer, el
alcohol actuó y precipitó el ADN, en la interfase de la
muestra en “Fig.2” se observó un componente externo Bibliografía
entre las dos fases de la muestra, este componente
externo se identificó como el ADN de la muestra de 1. Marcos-Merino,, José María, Gallego, Rocío Esteban, & Ochoa
de Alda, Jesús Gómez. (2019). Extracción de ADN con material
tomate.
cotidiano: desarrollo de una estrategia interdisciplinar a partir de sus
fundamentos científicos. Educación química, 30(1), 58-69. Epub 14
de octubre de
2019.https://doi.org/10.22201/fq.18708404e.2019.1.65732

2. Genetic Alliance; The New York-Mid-Atlantic Consortium for

Genetic and Newborn Screening Services. Cómo entender la
genética: Una guía para pacientes y profesionales médicos en la
región de Nueva York y el Atlántico Medio. Washington (DC):
Genetic Alliance; 2009 Jul 8. Anexo A, INFORMACIÓN
GENÉTICA BÁSICA. Available from:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK132204/
Fig.2. Muestra de 3. Fonseca, D. Mateus, H. y Contreras, N. (2010). Prácticas de
Fig.1. Buffer de Lisis tomate con lisis. laboratorio de biología molecular: su aplicación en genética básica
Editorial Universidad del Rosario.
https://editorial.urosario.edu.co/gpd-practicas-de-laboratorio-de-
biologia-molecular-su-aplicacion-en-genetica-basica.html
Para la segunda muestra, donde se utilizó una muestra
de saliva diluida en agua purificada, se obtuvieron 4. Llach, M. y Vila, M. (2017). ¡Ha desaparecido un ratón! ¿Nos
ayudáis a buscar al culpable? Análisis del impacto didáctico y
resultados no satisfactorios. Esto se observa en la “Fig.
emocional de un encargo ficticio. Enseñanza de las ciencias, 35(3),
3”. 151-173.

El método para la extracción del ADN fue el mismo que

se utilizó para el tomate. Hasta el momento de la
incubación no se presentó algún problema o diferencia.
Durante la precipitación del ADN, y por ende la