Actividad Experimental : Obtención de ADN en tejido vegetal y animal Clave: BIOL18_S06_PR02

Plantel: Grupo:
Nombre del alumno:
Competencias genéricas:
8.3 Asume una actitud constructiva, congruente con los conocimientos y habilidades con los que cuenta dentro de distintos equipos de trabajo.
11. Contribuye al desarrollo sustentable de manera crítica, con acciones responsables
Competencias disciplinares:
CE2. Fundamenta opiniones sobre los impactos de la ciencia y la tecnología en su vida cotidiana, asumiendo consideraciones éticas.
CE12. Decide sobre el cuidado de su salud a partir del conocimiento de su cuerpo, sus procesos vitales y el entorno al que pertenece

Objetivo. El objetivo fundamental de esta práctica es utilizar una sencilla técnica para poder extraer el ADN de un tejido animal y
vegetal por el aspecto que presenta, confirmar su estructura fibrilar.

ACTIVIDAD PRÁCTICA BIOL17_S06_PR01

“EXTRACCIÓN DE ADN”

OBJETIVO:
Visualizar macroscópic fibras de DNA, a través de la aplicación de técnicas que involucran la ruptura de las
membranas celulares y lisis de proteínas.

INTRODUCCIÓN
El ADN es la abreviatura del Ácido desoxirribonucleico. Es la molécula de la vida pues constituye el
material genético de todos los organismos vivos y se encuentra en el interior
del núcleo de las células. El ADN es el componente químico primario de los
cromosomas y el material que constituye los genes.
Su función esencial es la de conservar la información durante la división
celular, transmitirla de generación en generación y hacer efectiva la información
genética que contiene.

Obtención de ADN en tejido animal

Materiales

Hígado de pollo Varilla de vidrio

Mortero Vasos de precipitado
Pipeta Probeta
Alcohol de 96º Cloruro sódico 2M
Shampoo ó detergente de vajillas Arena
Tela para filtrar Filtro de tela

Método:

1. Triturar medio higadito de pollo en un mortero. Añadir arena para que al triturar se puedan
romper las membranas del mismo y queden los núcleos sueltos.
2. Añadir al triturado, 50 centímetros cúbicos de agua. Remover hasta hacer una especie de
papilla o puré.  
3. Filtrar varias veces sobre una tela para separar los restos de tejidos que hayan quedado
por romper.  
 4. Medir el volumen del filtrado con una probeta. 
5. Añadir al filtrado un volumen igual de cloruro sódico 2M. Con esto conseguimos producir el
estallido de los núcleos para que queden libres las fibras de cromatina.   
6. A continuación se añade 1 centímetro cúbico de SDS. (Nota: Si no se dispone de este
producto puede sustituirse por un detergente de vajillas, tipo Mistol o similar. La acción de
este detergente es formar un complejo con las proteínas y separarlas del ADN. Así nos
quedará el ADN libre de las proteínas que tiene asociadas.   
7. Añadir mediante una pipeta 50 centímetros cúbicos de alcohol de 96º. Hay que hacerlo de
forma que el alcohol resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la
interface, precipita el ADN.  
8. Introducir una varilla de vidrio e ir removiendo en la misma dirección. Con mayor precisión
las capas. Sobre la varilla se van adhiriendo unas fibras blancas, visibles a simple vista,
que son el resultado de la agrupación de muchas fibras de ADN.
9. Esta práctica puede completarse con una tinción específica de ADN. Tenemos que tomar
una muestra de las fibras que se van depositando sobre la varilla de vidrio y depositarlas
sobre un porta objetos. Teñir durante unos minutos con un colorante básico. Observar al
microscopio.

Obtención de ADN en tejido vegetal

Material

Plátano y/o tomate

Vasos de precipitados
Cuchara sopera y cafetera
Papel filtro
Tubo de ensayo
Pipeta
Varilla de vidrio con un gancho en la punta
(ese gancho se hace al calentar la varilla y cuando esté
al rojo vivo, se le da la forma de gancho).
Microscopio
Porta objetos
Mechero
Alcohol de 90o previamente guardado en el refrigerador por 24 hrs.
Shampoo ó jabón para trastes
Sal de mesa
Agua destilada

Método:

1. Macerar el plátano de 10 a 15 segundos sin cáscara en un mortero con agua destilada

hasta tener una mezcla homogénea (si se macera por más tiempo se puede romper la
molécula de ADN).
2. En un vaso de precipitados, vacía una cucharadita de Shampoo y dos pizcas de sal.
3. Agrega 20 ml. De agua destilada y disuelve la mezcla sin producir espuma.
4. Añade tres cucharas soperas llenas de la mezcla de plátano y mezcla de 5 a 10 minutos
sin producir espuma.
5. Coloca una gasa o papel fino sobre un vaso de precipitados cuidando que no toque el fondo
del vaso. Pasa la solución por el filtro hasta completar unos 5 ml.
 6. Llena el tubo de ensayo con alcohol, este deberá de estar lo más frío posible.
7. Toma con una pipeta la solución de plátano filtrada y agrega al tubo de ensayo con el
alcohol; deja reposar por tres minutos, sin mover.

Observa que se forma un precipitado blanco en el tubo de ensayo; ese precipitado es el ADN

8. Con la varilla enrolla el precipitado blanco y después estira para que puedas observar el
tamaño de la molécula de ADN.
9. Coloca la molécula en un portaobjetos y obsérvala en el microscopio a 10x, 40x y 100x.
10. Puedes hacer el experimento con otras frutas y comparar los tamaños de su ADN.

BIBLIOGRAFIA

Frías Díaz María Inés. Biología 1. Editorial Nueva imagen. Primera edición 2018
México D.F.

OBSERVACIONES

ADN de tejido vegetal Tipo de lente

ADN de tejido animal Tipo de lente

CUESTIONARIO
¿Se podrá extraer ADN de otros materiales? Si es si, ¿De cuáles?
¿Cómo separamos de nuestra muestra el ADN del ARN?
¿Cómo podrías cuantificar la cantidad de ADN de tu muestra?
¿Cuál es la función y la importancia del ADN en los organismos?
Para qué, se anexa el detergente, la sal, el jugo de piña y/o papaya y el alcohol?

RESULTADOS
 ETAPAS Y FUNDAMENTO DE LA EXTRACCIÓN DE ADN DE VEGETALES

ETAPAS ¿QUÉ HACEMOS? ¿CÓMO LO HACEMOS ESQUEMA

1ª Etapa

2ª Etapa

3ª Etapa

CONCLUSIONES

BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA

Tomado y modificado de :

https://docs.google.com/document/d/1L_FOt4Ov3sGK-qF7cm1l3NLCY2S5G2cfPpmkdpOu-Is/edit

file:///C:/Users/User/Desktop/MEJORA%202016-1/68_Extraccion_de_ADN_(experimento_ambiguo).pdf