UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

CENTRO DE BIOLOGÍA

LABORATORIO DE BIOLOGÍA APLICADA

PRÁCTICA 4

TEMA:
EXTRACCIÓN DE ADN
NOMBRE:
GRUPO # 6
Alexis Oña
Dayana Chancusi
Dennis Hurtado
Fernanda Anchatuña
Valeria Faz

DOCENTE:
Dra. Germania Karolys
TÉCNICO DEL CENTRO DE BIOLOGIA:
Isabel Carrillo, Mag
AYUDANTE:
Andrea Yánez

Quito, 28 de marzo de 2022.

ECUADOR
 RESUMEN

En un inicio se conceptualizo acerca del análisis del ADN, así como los procesos
que conllevan una extracción habitual y metagenómica del ADN. En ese sentido
estos procesos partieron de técnicas físicas y químicas ya que la extracción
consiste en la separación y purificación del ADN con el fin de poder estudiarlo y
analizarlo; seguido de etapas como la disgregación celular que deben ir
acompañadas de agentes con el fin de inactivar nucleasas celulares.
Una vez obtenido el ADN se lo analizo tanto por el método cualitativo conocido
como proceso de electroforesis, así como por el método cuantitativo donde se
utilizó la espectrofotometría con la finalidad de incluir la funcionalidad al igual
que la composición dentro de las células sanguíneas.

DESCRIPTORES:
METAFENÓMICA/SEPARACIÓN/DISGREGACIÓN_CELULAR/
ELECTROFORESIS/ CÉLULAS_SANGUÍNEAS.
 TEMA: Extracción de ADN

1. INTRODUCCIÓN
Moreno (2019) indica que el ADN es una molécula compleja, que se encuentra dentro de
cada célula de nuestro cuerpo y consiste en dos cadenas que se enrollan para formar la
estructura de doble hélice. El ADN está constituido de una azúcar denominada desoxirribosa
y el ácido nucleico formado por el fosfato y la base nitrogenada. Estas bases pueden ser de 4
tipos: Adenina, citosina, timina y guanina, nombradas normalmente como A, C, T, G. Y el
orden en que se combinen una después de la otra, es lo que codifica la información genética
(National Human Genome Research Insitute, s.f.); Por lo que se considera una plataforma
biológica de almacenamiento universal y tomando en cuenta la importancia que tiene esta
molécula en la vida se ha buscado la manera de estudiar, analizar y manipular la misma,
llegando a la extracción a partir de material biológico, para la clarificación del tema dentro de
este informe se encontrará simuladores y un experimento casero que permite a través de
técnicas físicas químicas la extracción de ADN. A demás se incluye dentro del presente texto
prácticas mediante simuladores que permiten el entendimiento acerca de la importancia de la
sangre y el tipo de sangre, para realizar una transfusión sanguínea. Como lo menciona
Maureen (2012) La sangre viene a ser el sistema de transporte del cuerpo, reparte oxígeno y
también recoge productos de desecho, como el dióxido de carbono, y los lleva a los órganos
encargados de expulsarlos del organismo; Y en una transfusión sanguínea para evitar
reacciones que podrían poner en peligro la vida del receptor, su tipo de sangre debe coincidir
con el tipo de sangre del donante existiendo ocho tipos principales de sangre.

2. OBJETIVOS:

 Utilizar técnicas sencillas para obtener extraer el ADN del tomate observando su
estructura y como estas técnicas ocasionan cambios en la célula haciendo que se
pueda llevar a cabo este proceso.
 Se pudo comprobar el contenido de ADN que las células animales como vegetales
contienen dentro de su estructura la cual es una cantidad de información genética.
 Uno de los objetivos principales es extraer el ADN para posteriormente observar su
estructura fibrilar.
3. PARTE EXPERIMENTAL
3.1. Materiales y Equipos

Extracción ADN Vegetal (experimento casero)

3.1.1. Tomate
3.1.2. Licuadora
3.1.3. Cuchillo
3.1.4. Gasa o algodón
3.1.5. Taza para medir
3.1.6. Frascos pequeños
3.1.7. Agua destilada
3.1.8. Detergente lavaplatos
3.1.9. Sal de cocina
3.1.10. Enzimas
3.1.11. Etanol

Extracción ADN Animal (simulador)

3.1.12. Scrapper
3.1.13. Micropipeta
3.1.14. Frasco de cultivo
3.1.15. Microtubos
3.1.16. Pipeta Pasteur
3.1.17. Centrifuga
3.1.18. Vortex
3.1.19. Baño María

Extracción ADN Vegetal (simulador)

 3.1.20. Vaso de precipitación
3.1.21. Macerador
3.1.22. Micropipeta
3.1.23. Punta micropipeta
3.1.24. Papel filtro
3.1.25. Pipeta Pasteur
3.1.26. Pipeteador
3.1.27. Probeta
3.2. Sustancias y Reactivos

Extracción ADN Animal (simulador)

3.2.1. Células de ADN

3.2.2. Etanol C 2 H 5 OH
3.2.3. Lisis
3.2.4. Hielo
3.2.5. Isopropanol C 3 H 8 O
3.2.6. Solución de reconstitución
3.2.7. Solución de lavado

Extracción ADN Vegetal (simulador)

3.2.8. Etanol C 2 H 5 OH
3.2.9. Solución amortiguadora
3.2.10. Fresas
3.3. Procedimiento:
3.3.1. Extracción de ADN
Paso 1
Preparación de solución salina jabonosa compuesta por 100ml de agua, 10 ml
de jabon lavaplatos, 13gr de sal y 20 de jugo de piña.
Paso 2
preparación de las frutas es decir en un mortero picamos en cubos pequeños el
tomate luego lo trituramos.
Paso 3
En un vaso o mortero con la fruta triturada vertemos la solución y
continuamos triturando después dejar reposar durante 5 minutos.
 Paso 4
Pasamos por un colador para retirar el grueso de la sopa de fruta y luego a
través de una toalla de cocina obtenemos 50 ml lo pasamos a un vaso limpio.
Paso 5
sobre el jugo de fruta colado, vertemos lentamente por las paredes del vaso
alcohol frio y dejamos reposar de 10 a 15 minutos.

3.3.1.1. Extracción ADN Animal (simulador)

3.3.1.1.1. Ingresar al siguiente link:
https://unidadvirtual.itm.edu.co/laboratorios/extraccionADN/Animal/index.html
3.3.1.1.2. Homogenización: Con una espátula (scrapper) se frota una muestra dentro del
frasco de cultivo para obtener células con ADN, seguidamente con una
micropipeta se toma una muestra y se coloca en un microtubo.
Fig 1. Homogenización

Fuente: “Simulador Institución Universitaria – Guia Laboratorio de Extracción ADN Animal”

3.3.1.1.3. Lavado: Con la pipeta de Pasteur se toma una pequeña cantidad de etanol y se
coloca en el microtubo con la muestra tapamos y llevamos a la centrífuga por un
minuto retiramos, seguidamente retiramos el líquido y conservamos el
precipitado, se coloca el microtubo con el precipitado en el vórtex durante 20
segundos.
 Fig 2. Lavado

Fuente: “Simulador Institución Universitaria – Guia Laboratorio de Extracción ADN Animal”

3.3.1.1.4. Lisis: Se añaden 500ml de solución lisis tapamos, se agita por inmersión, a
continuación, se añade solución salina y se lleva al vórtex por 20 segundos, se
retira y se sumerge en hielo por 5 minutos, seguidamente se lleva la muestra a la
centrifuga por 10 minutos, retiramos el líquido y colocamos en un nuevo
microtubo.
Fig 3. Lisis

Fuente: “Simulador Institución Universitaria – Guia Laboratorio de Extracción ADN Animal”

3.3.1.1.5. Precipitación: A la muestra conservada se añade 6000 μl de isopropanol se tapa

y se mezcla por inmersión, se lleva a la centrifuga por 5 minutos, una vez
cumplido el tiempo es retirado, seguidamente retiramos el exceso de líquido
 sobrenadante remplazándolo por 250 μl de etanol y se lleva a centrifugar por un
minuto, es retirado y se lleva a secar por un intervalo de 20 minutos.
Fig 4. Precipitación

Fuente: “Simulador Institución Universitaria – Guia Laboratorio de Extracción ADN Animal”

3.3.1.1.6. Reconstitución: Trascurridos los 20 minutos adicionamos 100 μl de solución de

reconstitución se tapa y se lleva a baño María por una hora.
Fig 5. Reconstitución

Fuente: “Simulador Institución Universitaria – Guia Laboratorio de Extracción ADN Animal”

3.3.1.2. Extracción ADN Vegetal (simulador)

3.3.1.2.1. Ingresar al siguiente link:
https://unidadvirtual.itm.edu.co/laboratorios/extraccionADN/Vegetal/index.html
3.3.1.2.2. Escoger los elementos necesarios, para realizar la práctica de laboratorio virtual.
Fig 6. Selección de material

Fuente: “Simulador Institución Universitaria – Laboratorio de Extracción ADN Vegetal”

3.3.1.2.3. Homogenización: Macerar las fresas

Fig 7. Maceración de fresas

Fuente: “Simulador Institución Universitaria – Laboratorio de Extracción ADN Vegetal”

3.3.1.2.4. Lisis: Depositar 50mL del producto macerado en una probeta, el producto
macerado se pasa de la probeta al vaso de precipitación, se depositan 100mL de la
solución amortiguadora en una probeta, se coloca la solución amortiguadora en el
vaso de precipitación con la sustancia macerada, se agita la mezcla
Fig 8. Lisis vegetal 1
Fuente: “Simulador Institución Universitaria – Laboratorio de Extracción ADN Vegetal”

Fig 9. Lisis vegetal 2

Fuente: “Simulador Institución Universitaria – Laboratorio de Extracción ADN Vegetal”

Fig 10. Lisis vegetal 3

Fuente: “Simulador Institución Universitaria – Laboratorio de Extracción ADN Vegetal”

 Fig 11. Lisis vegetal 4

3.3.1.2.5. Separación: Se filtra la mezcla

Fig 12. Separación de la mezcla vegetal

Fuente: “Simulador Institución Universitaria – Laboratorio de Extracción ADN Vegetal”

3.3.1.2.6. Lavado: Se toma una muestra de la sustancia con el pipeteador, se deposita la

muestra en un tubo de ensayo, y con la pipeta Pasteur se toma una pequeña
cantidad de etanol.
Fig 13. Lavado

Fuente: “Simulador Institución Universitaria – Laboratorio de Extracción ADN Vegetal”

 Fig 13. Extracción de etanol

Fuente: “Simulador Institución Universitaria – Laboratorio de Extracción ADN Vegetal”

3.3.1.2.7. Recuperación: Se deposita suavemente el etanol en un tubo de ensayo en un

ángulo de 45° y se espera que se separe el ADN
Fig 14. Recuperación

Fuente: “Simulador Institución Universitaria – Laboratorio de Extracción ADN Vegetal”

3.3.1.2.8. Finalmente: Se obtiene la extracción del ADN vegetal, siendo indicada a través
de la sucesión célula, núcleo, cromosoma, histona y ADN.
Fig 15. Obtención de ADN vegetal

Fuente: “Simulador Institución Universitaria – Laboratorio de Extracción ADN Vegetal”

3.3.2. Células sanguíneas
3.3.2.1. Ingresar al siguiente link:
http://glencoe.mheducation.com/sites/dl/free/0078802849/383963/BL_1
3.html
3.3.2.2. Cuando ingresamos al simulador observamos un microscopio, un
manual de hermatopatología y 3 archivos de casos de pacientes.

Fig 16. Equipo de laboratorio

Fuente: “Simulador Virtual Lab – Virtual Pathology”

3.3.2.3. A continuación, se selecciona el archivo del caso paciente uno y

colocamos la muestra en el microscopio, seguidamente abrimos el manual
para poder diagnosticar una vez que hemos encontrado el caso
correspondiente, seleccionamos y verificamos el diagnostico previamente
identificado.

Fig 17. Selección de archivo – Identificación del diagnóstico –

Selección y verificación del diagnóstico caso 1
 Fuente: “Simulador Virtual Lab – Virtual Pathology”

3.3.2.4. Seguidamente se realiza el mismo procedimiento realizado con el

caso uno, con el caso 2 y 3.
Fig 18. Selección de archivo – Identificación del diagnóstico –
Selección y verificación del diagnóstico caso 2 y 3

Fuente: “Simulador Virtual Lab – Virtual Pathology”

3.3.2.5. Una vez realizado la selección y verificacion del diagnostico de

los respectivos casos se registran los hallazgos en la siguinete tabla.
 Fig 19. Registro de síntomas – Descripción - Diagnóstico

Fuente: “Simulador Virtual Lab – Virtual Pathology”

3.3.2.6. Terminado el registro de datos se resuelve el cuestionario presente en

el simulador.
Fig 20. Resolución del cuestionario preguntas 1 - 7
 Fuente: “Simulador Virtual Lab – Virtual Pathology”

3.3.3. Simulador: Transfusión de Sangre

Figura 3.3.3-1 Sangre tipo O Rh-
 Figura 3.3.3-2 Sangre tipo B Rh-

Figura 3.3.3-3 Sangre tipo O Rh+

Fuente: The Nobel Prize. (2021)

4. PROCESAMIENTO DE DATOS (solo si se puede)

4.1. Datos
 Se registran los datos de las mediciones obtenidas en la práctica.
También se suelen registrar datos adicionales necesarios para los cálculos, como
constantes, valores tabulados, etc.
No olvidar colocar títulos y fuentes en las tablas:
Tabla 1. Datos

Fuente:
4.2. Cálculos
Se realiza los cálculos con los datos obtenidos.
Siempre colocar un cálculo modelo si se utiliza la misma fórmula varias veces.
No olvidar enumerar las ecuaciones.
Colocar esta parte solo si la práctica lo amerita
4.3. OBSERVACIONES Y RESULTADOS: puede realizar tablas o
realizar descripciones de las actividades realizadas para extracción de ADN y
células sanguíneas.

5. DISCUSIÓN

El método empleado para la extracción del ADN y la tipificación sanguínea fue el correcto,

ya que permitió extraer ADN vegetal como animal en los cuales se utilizaron métodos como:

la homogenización, lisis, separación, precipitación y la reconstrucción, para la obtención del

material biológico que contiene la información genética de los organismos. Así mismo

permitió en el caso de la tipificación identificar los componentes de la sangre tales como el

plasma, leucocitos, plaquetas y eritrocitos los cuales son muy importantes ya que ésta

transporta el oxígeno y los nutrientes a todas las células del cuerpo. No obstante, se sugiere

considerar otros métodos para la extracción como: intercambio aniónico para la extracción de

ADN del lisado celular, en la que se utiliza la cromatografía en fase sólida de intercambio

aniónico, esta interacción hace que las moléculas de ADN queden retenidas en la fase

estacionaria de la columna y puedan separarse de las proteínas y demás metabolitos

presentes. Chemicals, (2014). Por otro lado, se establece que la tipificación sanguínea se
utiliza para determinar el grupo sanguíneo de una persona y qué tipos de sangre o derivados

de sangre puede recibir. Finalmente, el ADN de cada individuo es único y diferente, producto

de la combinatoria de los códigos genéticos de cada progenitor.

6. CONCLUSIONES

Concluimos que al realizar el procedimiento adecuadamente resulta que las fibrillas de

ADN comenzaron a salir de un color blanco precipitado por sobre el alcohol.

La extracción de ADN con material cotidiano es una actividad práctica interdisciplinar, ya

que para determinar cómo extraer ADN de una muestra biológica es preciso relacionar

conceptos químicos, físicos y biológicos. En relación a los objetivos planteados, en este

trabajo mostramos que es posible diseñar e implementar una intervención didáctica de

aprendizaje activo bajo el modelo didáctico de enseñanza por investigación dirigida

orientada a la extracción de ADN con material cotidiano.

7. CUESTIONARIO
7.1. ¿Cuál es la función del ADN en la célula?
Su función principal radica en codificar toda la información genética que posee a través de la
combinación de bases nitrogenadas con el fin de codificar un aminoácido.
7.2. ¿Dónde se encuentra el ADN?
El ADN se encuentra en el núcleo de cada célula.
7.3. ¿Por qué el jugo de piña actúa como una enzima?
Porque el jugo piña es un ablandador natural que posee bromelina lo que permite la ruptura
de las proteínas, ayudando así a limpiar el ADN.
7.4. ¿Por qué utilizamos alcohol para separar el ADN de las células?
Porque la solubilidad del ADN se altera al añadir alcohol frío provocando que la disolución
presente una precipitación del ADN como filamentos blancos y un color debido a la red
cristalina que forma con el NaCl.
7.5. ¿Qué función tiene el detergente para la Extracción del ADN?
La función que cumple el detergente es que ayuda tanto a la separación como a la ruptura de
las membranas celulares permitiendo la extracción del ADN.
7.6. ¿Cuáles son las bases nitrogenadas qué forman parte de la
molécula de ADN?
a. Adenina, Guanina, Timina y Uracilo
b. Adenina, Citosina, Timina y Uracilo
c. Adenina, Guanina, Citosina y Timina
d. Citosina, Guanina, Timina y Uracilo
7.7. Quizá te parezca una pregunta muy obvia, pero vamos a empezar
por ella: ¿Qué es el ADN?
a. Una célula
b. Una molécula
c. Un microorganismo
d. Ninguna
7.8. Aunque Watson y Crick recibieron el galardón por el descubrimiento de
la estructura del ADN, en la actualidad se trata de un hecho bastante
cuestionado. ¿Sabes a qué científica que permaneció en la sombra
durante muchos años se le atribuye el mérito real del descubrimiento?
a. Barbara McClintok
b. Rosalind Franklin
c. Aretha Franklin
7.9. ¿Sabes cómo llamamos a la unidad funcional más pequeña de
ADN?
a. Codón
b. Cromosoma
c. Gen
 7.10. Los cromosomas salvo en algunas bacterias, se agrupan en pares y el
número de ellos es característico y diferente en cada especie. ¿Sabes
cuántos cromosomas tenemos los seres humanos?
a. 5 pares
b. 23 pares
c. 108 pares
7.11. Responder a la tabla 1 con SI o NO. SI, cuando tiene lugar la reacción de
aglutinación. Una reacción de aglutinación positiva indica el grupo
sanguíneo

Tabla 1. Reacción de aglutinación

SANGRE SANGRE SANGRE SANGRE
1 2 3 4
ANTIGENOS

Anti-A NO SI NO
SI
Líquido azul

Anti-B NO SI SI NO
Líquido amarillo

Anti-D(Rh) NO SI SI NO
Líquido
transparente
GRUPO
SANGUINE A- B+ AB+ O-
O
Fuente: Centro de Biología

7.12. Para cada grupo sanguíneo dado, señalar el resultado esperado de la

reacción de aglutinación cuando se mezcla la sangre con cada
anticuerpo.

Grupo sanguíneo Anti-A Anti-B Anti-Rh

 A+ SI NO SI
A- SI NO NO
B+ NO SI SI
B- NO SI NO
AB+ SI SI SI
AB- SI SI NO
O+ NO NO SI
O- NO NO NO

7.13. Dado los antígenos encontrados en las células rojas (eritrocitos), señalar el
grupo sanguíneo y el correspondiente anticuerpo en la sangre.

Antígeno en los Grupo sanguíneo Anticuerpo en el plasma

eritrocitos
A A Anti -B
B B Anti-A
AB AB Ninguno
NINGUNO O Anti-A y Anti -B

8. BIBLIOGRAFÍA: Utilizar APA, revisar uso correcto del mismo

Audesirk, T., Audesirk, G., & Byers, B. E. (2013). Biología. La Vida En La Tierra Con
fisiología. In Biología. La vida en la Tierra (Novena, Vol. 9). Pearson Educación de
México, S.A.
Curtis, H., Barnes, N. S., Schnek, A., & Massarini, A. (2014). Curtis Biología (Septima).
Médica Panamericana S.A.C.F.

Chemicals, F. W. (2014, enero 1). 10 métodos de Extracción de ADN.

Wakolatinamerica.com. https://www.wakolatinamerica.com/blog-reactivos/noticias-
wako/post/10-metodos-de-extraccion-de-adn/
Institución Universitaria. (s.f.) Laboratorio de Extracción ADN Vegetal.
https://unidadvirtual.itm.edu.co/laboratorios/extraccionADN/Vegetal/index.html
Moreno, M. (2019) ¿Qué es el ADN? Veritas Intercontinental.
https://www.veritasint.com/blog/es/que-es-el-adn/
National Human Genome Research Insitute. (s.f.). Información sobre la sangre y las células
sanguíneas. https://www.mskcc.org/es/cancer-care/patient-education/facts-about-
blood-and-blood-cells
Maureen, F. (2012). Transfusiones de sangre. TeensHealth.
https://kidshealth.org/es/teens/transfusions.html
The Nobel Prize. (2021). Simulador: Realiza una Transfusion de Sangre a un paciente On-
Line. Nasajpg.com. https://www.nasajpg.com/publicaciones/simulador-de-
transfusion-sanguinea-on-line/
9. ANEXOS
Ver anexo 1
ANEXO 1

Figura 1-1,1-2,1-3 ROMPIMIENTO DE CELULAS

FIGURA 1-4, 1-5 SEPARACION DEL MATERIAL SOLIDO

FIGURA 1-6, 1-7 PRECIPITACION DEL ADN POR ACCION DEL ALCOHOL

Fuente:elaboración propia , Grupo-6

NOMBRE FECHA UNIVERSIDAD CENTRAL DEL

ECUADORFACULTAD DE INGENIERIA
QUÍMICACARRERA DE INGENIERÍA
Grupo N° 6 QUÍMICABIOLOGÍA APLICADA I