UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRO DEL PERÚ

INGENIERÍA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA EN INDUSTRIAS

ALIMENTARIAS

“Extracción de ADN en los vegetales”

INFORME DE PRACTICA DE LABORATORIO

PRESENTADO POR:

-Capcha Vargas Diego

-Espinoza Huamán Briths

-Huaman Inga Edú

-Vilcas Carrión Jairo Rodrigo

- Villegas Martínez Brigitte (no asistió ese día)

Docente: Ing. DE LA CRUZ CARHUAMACA MABEL CINDY

HUANCAYO–PERU

2023
1. Introducción

La extracción del ADN en vegetales es un proceso fascinante que nos sumerge en el

corazón mismo de la genética y la biotecnología vegetal. Esta técnica esencial
permite aislar el ácido desoxirribonucleico , la molécula maestra de la información
genética, de las células vegetales, revelando así los secretos genéticos que definen
la herencia y las características de las plantas. En este informe, explicaremos las
metodologías empleadas en la extracción de ADN vegetal, desde la ruptura de la
pared celular hasta la purificación de la molécula.

Este proceso no solo es esencial para la investigación biológica, sino que también
juega un papel crucial en la ingeniería genética, la mejora de cultivos y al ayudarnos
a entender mejor a los alimentos

La técnica usada va más allá de la mera extracción de información genética; es una

puerta de entrada a la comprensión de la variabilidad genética en las plantas y a la
identificación de genes específicos que influyen en sus características. Además, la
aplicación práctica de la extracción de ADN en vegetales se extiende a la ingeniería
genética, donde la manipulación de genes puede tener impactos significativos en la
resistencia a enfermedades, la adaptación al medio ambiente y la productividad
agrícola. En este informe, explicaremos cada fase de este proceso y al finalizar la
práctica el alumno habrá desarrollado la habilidad para extraer el ADN de vegetales.

2. Marco teórico

Para comenzar debemos conseguir la ruptura de la pared celular y asi liberar el

material genético. La elección de agentes de lisis y la optimización de condiciones
son pasos críticos para garantizar la integridad del ADN. Posteriormente, se procede
a la purificación, eliminando contaminantes y asegurando la obtención de una
muestra de ADN de alta calidad.

La extracción de ADN en vegetales es un proceso crucial en biología molecular que

permite aislar y analizar la información genética contenida en las células vegetales.
A diferencia de las células animales, las vegetales presentan una pared celular
rígida compuesta principalmente de celulosa, lo que añade complejidad al proceso
de extracción,se separa en diferentes conceptos

2.2. Ruptura de la pared celular: Los métodos físicos más utilizados son el choque
osmótico, los ultrasonidos y la trituración mecánica.

● Se puede utilizar una licuadora o un detergente con enzimas potentes para

romper la pared celular de un objeto orgánico como una fruta, verdura, etc.
● La optimización de los métodos de ruptura celular es esencial para evitar la
degradación del ADN y obtener rendimientos óptimos.

2.3. Precipitación de Proteínas y Componentes Celulares:

 ● Se añaden disolventes como el ayudin y sales para separar el ADN de
proteínas, lípidos y otros componentes celulares,
● La centrifugación posterior de agregarl permite recoger el ADN en una fase
separada.

2.4. Purificación del ADN:

● La purificación implica el uso de técnicas como la precipitación con alcohol y

la utilización de columnas de sílice para eliminar impurezas y obtener ADN
puro.

La aplicación de esta técnica no se limita a la investigación básica, ya que también

desempeña un papel fundamental en la ingeniería genética de plantas. La
identificación y manipulación de genes específicos a través de la extracción de ADN
en vegetales han revolucionado la mejora de cultivos, permitiendo la creación de
variedades más resistentes, nutritivas y adaptadas a condiciones ambientales
desafiantes.

3. Materiales y Métodos

3.1. Materiales
3.1.1. Materiales de Bioseguridad

➢ Guardapolvo
➢ Guantes
➢ Cofia
➢ Mascarilla

3.1.2. Materiales de Limpieza

➢ Detergente
➢ Esponja
➢ Jabón Líquido
➢ Alcohol
➢ Paño antibacterial

3.1.3. Materiales de laboratorio

➢ 4 tubos de ensayo
➢ 5 vasos de precipitación de 250 ml
➢ 1 embudo
➢ 1 matraz 250 ml
➢ 1 agitador o bagueta
➢ 1 piseta
➢ 2 probeta de 50 ml
 ➢ licuadora con vaso pequeño
➢ Gasa
➢ 1 placa petri
➢ Pinzas
➢ 1 Cucharilla

3.1.4. Reactivos

➢ Bicarbonato
➢ Alcohol de 96°
➢ Cloruro de sodio (sal)
➢ Ayudin liquido
Muestras cada grupo uno diferente aproximadamente 100 g:
➢ 1 plátano bien maduro
➢ 2 fresas maduras
➢ 100 g de espinaca
➢ 1 tomate maduro

3.2. Métodos

Para esta práctica se utilizó la muestra de espinaca.

Paso 1: Lavar la espinaca, trozar y pesar 50 g.

Paso 2: Licuar la muestra con 50 ml de agua y enjuagar el vaso de la licuadora con
los otros 50 ml (Licuar por cinco minutos)
Paso 3: Pasa la muestra a un paso petri
Paso 4: Colocar el embudo en el matraz, luego en el embudo colocar la gasa y colar
el líquido
Paso 5:
Preparación de soluciones 1 (Ayudín)

➢ Pesar 15 g de ayudín líquido

➢ Pesar 25 g de bicarbonato de sodio
➢ Pesar 20 g de sal
➢ 100 ml de agua destilada

Preparación de soluciones 1 (Jabón líquido)

➢ Pesar 15 g de jabón líquido

➢ Pesar 25 g de bicarbonato de sodio
➢ Pesar 20 g de sal
➢ 100 ml de agua destilada

Los siguientes procedimientos con los mismos para ambas sustancias (Jabón líquido
y ayudín)

Paso 6: Juntar los reactivos sólidos y después el agua, consecutivamente echar el

ayudin y disolver
 Paso 7: Separar 80 ml de la solución de ayudin, luego echar a la muestra de
espinaca (50 ml)
Paso 8: Verter y mover con la bureta en ambos casos
Paso 9: Dejar reposar por diez minutos
Paso 10: Pasado los 10 minutos, verter 50 ml de etanol (el líquido debe caer por lo
bordes lentamente para no arruinar la muestra)
Paso 11: Dejar reposar veinte minutos sin mover ni agitar
Paso 12: Pasado los veinte minutos observar los resultados.

4. Resultados y Discusión

4.1. Resultados
Para este experimento se utilizaron las hojas de espinaca licuadas por cinco
minutos, las cuales fueron vertidas en dos sustancias; Muestra 1 (Solución de ayudin
líquido y espinaca), Muestra 2 (Solución de jabón líquido y espinaca).
El objetivo de este experimento fue extraer el ADN vegetal y poder observar.

Muestra 1: Solución de ayudin líquido y espinaca.

En la muestra 1 se observa mejor la

extracción del ADN vegetal, ya que las
enzimas del ayudín son mucho más fuertes

Muestra 2: Solución de jabón líquido y espinaca.

En la muestra 2 carece un poco del ADN

vegetal ya que el jabón líquido no tiene
muchas enzimas como el ayudín líquido.

4.2. Discusión

A partir de los resultados obtenidos en la práctica, se puede ver que las muestras
realizadas fueron satisfactoriamente realizadas ya que se aplicaron se aplicaron
adecuadamente los procedimientos planteados.
Según Ainhoa Domene, V. T. las E. (2019) el ADN se encuentra en el interior del
núcleo celular, para poder extraerlo se rompen las células y separar el núcleo para
después volver a romperlo y liberar el ADN, y una vez liberado el ADN es necesario
 separarlo de las proteínas e incitar la precipitación de estas para poder extraer el
ADN.
Después de ver los procedimientos realizados vemos que la práctica se hizo de la
mejor manera posible y que hicimos una buena muestra.(corrigelo el final pipipi
parece redundante)

5. Conclusión y Recomendaciones

5.1. Conclusión

En este experimento, se llevó a cabo la extracción del ADN vegetal utilizando hojas
de espinaca y dos sustancias diferentes: una solución de ayudín líquido y otra de
jabón líquido. Los resultados obtenidos indican que la muestra tratada con la
solución de ayudín líquido mostró una extracción de ADN más efectiva en
comparación con la muestra tratada con la solución de jabón líquido.

La solución de ayudín líquido, que contiene enzimas más potentes, demostró ser
más eficaz en la ruptura de las células y la liberación del ADN vegetal. Esto sugiere
que la presencia de enzimas más fuertes facilita el proceso de extracción del ADN.

Estos hallazgos están en línea con la teoría científica que respalda la extracción de
ADN, donde la ruptura de las células y la separación del núcleo son pasos críticos.
La observación de la mejor extracción del ADN en la muestra tratada con ayudín
líquido respalda la idea de que las enzimas presentes en esta sustancia desempeña
un papel crucial en el proceso.

En resumen, este experimento proporciona una comprensión práctica de la

extracción de ADN vegetal y destaca la importancia de seleccionar sustancias con
enzimas eficaces para lograr resultados óptimos. La realización exitosa de los
procedimientos propuestos respalda la validez y la efectividad del experimento.

5.2. Recomendación:

➢ Para una mayor comprensión del tema, sería factible probar con diferentes
muestras orgánicas como vendría a ser la saliva, tejido, diversas plantas, etc.
➢ Ser precavido al seguir las instrucciones y al contar con las medidas de
bioseguridad correspondiente
➢ Después de completar la práctica, lleva a cabo una discusión en grupo para
analizar los resultados, identificar posibles fuentes de error y discutir las
implicaciones de los hallazgos.
➢ No te limites a observar los resultados, intenta entender el significado detrás
de ellos. ¿Cómo se relacionan con los conceptos teóricos? ¿Qué
conclusiones pueden extraerse?

6. Bibliografía
Amón Togra, L. S., & Ortega Lucero, J. I. (2022). Evaluación de protocolos
convencionales y kit comercial para la extracción de ADN de bacterias Gram
negativas (Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae) (Bachelor's thesis).

Marcos-Merino,, José María, Gallego, Rocío Esteban, & Ochoa de Alda, Jesús
Gómez. (2019). Extracción de ADN con material cotidiano: desarrollo de una
estrategia interdisciplinar a partir de sus fundamentos científicos. Educación química,
30(1), 58-69. Epub 14 de octubre de 2019.
https://doi.org/10.22201/fq.18708404e.2019.1.65732

De Ainhoa Domene, V. T. las E. (2019, marzo 4). PRÁCTICA 15: EXTRACCIÓN

CASERA DE ADN VEGETAL. Biología molecular y citogenética.
https://bionhoadomene.home.blog/2019/03/04/practica-15-extraccion-casera-de-adn-
vegetal/

Velázquez, L. P. A., Martínez, M. D. C. A., & Romero, A. C. (2014). Extracción y

purificación de ADN. Herramientas moleculares aplicadas en ecología: aspectos
teóricos y prácticos, 1.

Huambo Ore, F. A. (2020). Evaluación de tres protocolos de extracción de ADN total

en especies vegetales de la comunidad vegetal tipo Tolar del fundo Qena, distrito
Callalli-Arequipa.

Mosquera, R. V. (2005). Marcadores moleculares y la extracción de ADN.

Biotecnología en el Sector Agropecuario y Agroindustrial: BSAA, 3(1), 14-18.

Arce, G. J., Quesada, M. J. V., Montero, E. J., & Platero, W. P. (2007). Determinación
de la efectividad de cinco protocolos de extracción de ADN a partir de material
parafinado para estudios moleculares. Revista medica de la Universidad de Costa
Rica, 1(1), 10-19.
7. Anexos:
Preparación de la solución lisis: pesamos detergente
líquido para trastes (15gr), cloruro de sodio(25 gr) y
bicarbonato de sodio(50 gr) y 100 ml de agua
destilada

después llevarlo a
la licuadora

Con ayuda de una

gaza filtramos la
mue

tomamos 50ml de la muestra liquida de espinaca y 80 ml de la

solución lisis y lo juntamos para después dejar reposar 10
minutos

Después vertemos
alcohol por las
paredes

Lugar de donde compramos la espinaca

Muestra de tomate, de
identifica el adn
 Muestra de hoja de espinaca

7.1. Cuestionario

1. Explicar cuál es la función de los siguientes reactivos en la práctica: Etanol

96°, bicarbonato, detergente líquido.

ETANOL:Sirve para la purificacion del acido nucleico, usamos el alcohol para

precipitar los ácidos nucleicos

BICARBONATO: Actúa manteniendo el ph constante , evitando la

degradación de biomoléculas como el adn

DETERGENTE LÍQUIDO: Se utiliza para romper las paredes celulares, las

membranas plasmáticas y las membranas nucleares y así dejar libres las
moléculas de ADN.

2. ¿De qué otras fuentes sería posible obtener ADN y cuáles serían las
modificaciones en la práctica?

También se puede obtener adn de diferentes muestras biológicas, como la

saliva, la sangre, tejido, etc. Tan solo se cambiarán las muestras pero a
diferencia a las verduras y frutas ya nos se aplastaria o se levara a licuar,
para romper sus células, ya no sería necesario.

7.2. Artículo:
 Extracción de ADN con material cotidiano:
desarrollo de una estrategia interdisciplinar a partir
de sus fundamentos científicos
José María Marcos-Merino,

Rocío Esteban Gallego

Jesús Gómez Ochoa de Alda

La extracción de ADN con material cotidiano es una propuesta práctica que permite
desarrollar una estrategia didáctica interdisciplinar ya que comprender por qué y cómo se
puede extraer ADN de un organismo implica relacionar conceptos explicados por varias
disciplinas científicas Esta actividad permite poner en práctica conceptos básicos de
Química, Física y Biología mostrando la naturaleza interdisciplinar de la ciencia, al mismo
tiempo que constituye una oportunidad para transmitir de manera transversal el
conocimiento científico, desde sus fundamentos científicos hasta los recientes desarrollos
biotecnológicos.