COLEGIO DE CIENCIA Y HUMANIDADES PLANTEL SUR

BIOLOGÍA 1
ACTIVIDAD EXPERIMENTAL
“EXTRACCIÓN DE CLOROFILA”
Nombre: Velázquez Cuevas Christopher Andrew Grupo: 325A

Antecedentes

La clorofila es el principal pigmento fotosintético que se encuentra en la membrana tilacoidal delos

cloroplastos, asociada a proteínas que forman los fotosistemas y los complejos antena. Las plantas
terrestres tienen dos tipos de clorofila: a y b, las cuales difieren en su estructura y propiedades
espectrales. Además de clorofila, las membranas de los cloroplastos contienen carotenos y otros
pigmentos en menor proporción (feofitina y proteínas con grupo hemo). Tanto las clorofilas como
los carotenos son solubles en solventes orgánicos de polaridad alta a moderada, como la acetona
o el metanol.
Las preparaciones acetónicas de clorofila tienen un color verde esmeralda intenso, en las que se
puede apreciar el fenómeno de fluorescencia bajo condiciones adecuadas de iluminación. Los
pigmentos se pueden separar por cromatografía en papel.

Objetivo

Obtener un extracto de pigmentos fotosintéticos a partir de hojas de espinaca y reconocer las

propiedades de la mezcla de clorofilas y carotenos.

Resultados esperados

Obtener un extracto acetónico color verde esmeralda. Al iluminar desde el ángulo superior o inferior
del tubo o frasco, se debe apreciar un brillo rojizo que corresponde a la fluorescencia de la clorofila
ya disociada de los fotosistemas.
La separación por cromatografía en papel de este extracto debe producir al menos dos bandas
verdes y una amarillenta, que corresponden a las clorofilas a y b, y a los carotenos,
respectivamente.

Materiales y método
 Hojas de espinaca o de otra planta de hojas delgadas y color verde oscuro intenso
 Toallas de papel
 Acetona (quitaesmalte comercial incoloro) 10 mL
 Gasa
 Papel filtro o cartulina (5 X 5 cm)
 Embudo
 Frasco pequeño con tapa (de preferencia ámbar o envuelto en papel aluminio)
 Frasco grande de boca ancha con tapa
 Refrigerador
 Lámpara
 Cámara digital
Extracción de los pigmentos

o Lavar la espinaca al chorro de agua para remover la tierra y secar suavemente sobre hojas
de papel.
o Seleccionar las mejores hojas y separar manualmente la lámina foliar del tejido vascular (las
“venas”).
o Romper rápidamente la lámina foliar en pedazos pequeños con las manos, no usar
cuchillo.
o Depositar una cantidad moderada de hojas (medida aproximada una cucharadacafetera)
dentro del frasco ámbar y añadir la acetona.
o Cerrar el frasco sin apretar demasiado la tapa y guardar en el refrigerador por una hora.
o Filtrar a través de 4 capas de gasa al frasco de boca ancha.
o Observar y anotar las características del extracto acetónico. Debe ser transparente pero de
color verde esmeralda.
o Colocar la lámpara por debajo del frasco, encenderla y observar el frasco. La mezcla debe
presentar un brillo rojizo si la concentración es suficientemente alta de clorofilas. Este brillo
corresponde a la fluorescencia de la clorofila (ver Figura 1). Tomar fotografías.

Separación cromatográfica de los pigmentos

o Introducir el papel filtro de manera que el papel toque la superficie del líquido sin llegar al
fondo.
o Colocar la tapa del frasco sin enroscarla para permitir una evaporación lenta deldisolvente.
o Dejar que ocurra la separación de pigmentos por capilaridad, observar cada 5 minutos y
tomar fotografías.
o Retirar el papel filtro cuando el frente de corrida rebase la mitad de la altura del papel filtro.
o Colgar el papel filtro cerca de una ventana para que se seque y fotografiar ya seco.

Figura 1. Fluorescencia de un extracto acetónico de clorofila. El color rojizo se aprecia más

en la proyección sobre el papel sobre la mesa.
Resultados.

o Anexar fotos de la obtención del extracto de pigmentos fotosintéticos a partir de hojas de

espinaca y acetona.
o Anexar fotos del brillo rojizo al exponer el frasco a la lámpara

o Anexar fotos de la colocación del papel filtro o cartulina en el extracto de pigmento.

o Anexar fotos del papel filtro seco
Cuestionario de evaluación

1. ¿Cuáles son las materias primas, necesarias para que se realice la fotosíntesis

Las materias primas necesarias para la fotosíntesis son dióxido de carbono (CO2) y agua (H2O).

2. ¿Cuáles son los productores finales de la fotosíntesis

Los productores finales de la fotosíntesis son los carbohidratos, como la glucosa, y el oxígeno (O2).

3. ¿Cuál es el papel de la luz de la fotosíntesis?

El papel de la luz en la fotosíntesis es proporcionar la energía necesaria para convertir el dióxido

de carbono y el agua en carbohidratos y oxígeno. La luz es absorbida por pigmentos fotosintéticos,
como la clorofila, para llevar a cabo este proceso.

4. ¿En qué consiste la fase luminosa?

La fase luminosa de la fotosíntesis es la etapa inicial en la que la luz es capturada por la clorofila y
se convierte en energía química en forma de ATP y NADPH, mientras se libera oxígeno como
subproducto.

5. ¿Por qué la vida sobre la tierra depende de la fotosíntesis?

La vida en la Tierra depende de la fotosíntesis porque este proceso es la base de la cadena
alimentaria, ya que las plantas y otros organismos fotosintéticos son los productores primarios que
proporcionan alimento y oxígeno a la mayoría de los seres vivos en el planeta.

6. ¿Cuál es la diferencia entre clorofila A y B?

La diferencia principal entre clorofila A y B radica en las longitudes de onda de luz que absorben.
La clorofila A absorbe principalmente en las regiones de luz azul y roja, mientras que la clorofila B
absorbe en las regiones de luz azul y roja lejana

7. ¿Qué otros pigmentos presentan las plantas además de la clorofila?

Además de la clorofila, las plantas pueden contener otros pigmentos fotosintéticos, como los
carotenoides (que son responsables de los colores amarillos y naranjas en las hojas) y las
xantofilas.

8. ¿En qué consiste el fenómeno de fluorescencia?

El fenómeno de fluorescencia en las plantas ocurre cuando la clorofila emite luz visible después de
haber absorbido luz ultravioleta. Esto puede observarse en ciertas condiciones de laboratorio.

9. ¿En qué consiste el fenómeno de separación por cromatografía?

La separación por cromatografía es un proceso que se utiliza para separar y analizar los
componentes de una mezcla, como los pigmentos de las plantas. Consiste en hacer pasar la mezcla
a través de una fase estacionaria, donde los componentes se separan en función de su afinidad
por la fase móvil y la fase estacionaria, lo que permite su identificación y cuantificación.

Discusión y conclusión

En conclusion, la fotosíntesis es un proceso vital para la existencia en la Tierra, ya que constituye

el fundamento de la cadena alimentaria al transformar dióxido de carbono y agua en carbohidratos
y oxígeno, aprovechando la energía lumínica. La clorofila A y B, como pigmentos clave, absorben
distintas longitudes de onda de luz, y, además, las plantas contienen otros pigmentos, como los
carotenoides. La fase luminosa, el primer paso de la fotosíntesis, involucra la captura de energía
luminosa y la generación de ATP y NADPH.

Por otro lado, la cromatografía emerge como una técnica esencial en la exploración de pigmentos
vegetales y otros compuestos, permitiendo su separación y análisis. La fluorescencia, un fenómeno
intrigante, se manifiesta cuando la clorofila emite luz tras la absorción de luz ultravioleta. La
fotosíntesis ostenta un papel crucial para la vida en nuestro planeta, ya que sustenta la diversidad
biológica y el bienestar de la vida en la Tierra al ser el pilar de la producción de alimentos y oxígeno.
Referencias bibliográficas.

Instituto Nacional del Cáncer (s.f.). Fotosíntesis. Diccionario de cáncer.

https://www.cancer.gov/espanol/publicaciones/diccionarios/diccionario-cancer/def/fotosintesis

Khan Academy (s.f.). Introducción a la fotosíntesis. https://es.khanacademy.org/science/ap-

biology/cellular-energetics/photosynthesis/a/intro-to-photosynthesis

Ecología Verde (s.f.). Fotosíntesis: ¿Qué es, fases e importancia?

https://www.ecologiaverde.com/fotosintesis-que-es-fases-e-importancia-2948.html

National Geographic (s.f.). Fotosíntesis: el gran invento de la evolución en las plantas.

https://www.nationalgeographic.com.es/medio-ambiente/fotosintesis-el-gran-invento-de-la-
evolucion-plantas_18885