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RECINTO UNIVERSITARIO RUBÉN DARÍO

FACULTAD DE CIENCIAS E INGENIERÍA


DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
CARRERA QUÍMICA INDUSTRIAL

Bioquímica Industrial

Informe de laboratorio #1

Tema: Detección cualitativa de carbohidratos.

Elaborado por:

Br. Cinthya Massiel Zapata Aburto #19045386

Br. Francer Alejandro Paizano Jaime #20047333

Br. Luis Humberto Pérez Díaz #19045474

Br. Pamela Margina Reyes. #21044616

Br. Paola Lizbeth Acuña. #21043626

Docente:
Ing. Rolando Barillas.

Managua, 4 de septiembre de 2023

I. Introducción
Los carbohidratos o hidratos de carbono son compuestos orgánicos formados por elementos
como el carbono, hidrógeno y oxígeno, llamados también nutrientes energéticos. Son
considerados como la fuente de energía más importante de nuestro cuerpo.
Aproximadamente el 60% de las calorías que ingerimos deben provenir de los
carbohidratos; su principal función es suministrar energía al cuerpo, especialmente al
cerebro y al sistema nervioso.
La mayor parte de la materia seca del tubérculo (papa) se encuentra en forma de almidón
azúcares y otros polisacáridos. El 75 % de la materia seca de la papa está compuesta por
almidón. Cuando la papa se consume caliente, el almidón es rápidamente digerido por el
organismo; si se consume fría, la digestibilidad del almidón se reduce. La fibra alimentaria
representa 1-2% del total de la papa y se encuentra perfectamente en la piel. La
concentración de azúcares simples es baja (0.1 0.7%) siendo los más importantes la
glucosa, fructosa y sacarosa.

Los carbohidratos de la leche están representados en su mayoría por la lactosa, el


único carbohidrato libre presente en todas las leches, que se encuentra en cantidades
importantes. Se sintetiza en la glándula mamaria y tiene un sabor que es relativamente poco
azucarado, poco soluble y posee un efecto reductor. Dentro de la composición química
de la leche, la lactosa representa el 4.9%aproximadamente, y es conocida como el
azúcar de la leche
La detección cualitativa de carbohidratos es un proceso mediante el cual se identifican la
presencia o ausencia de carbohidratos en una muestra, pero no se cuantifica la cantidad
exacta. Esto se hace generalmente a través de pruebas químicas o bioquímicas que revelan
la presencia de grupos funcionales de carbohidratos, como grupos aldehído o cetonas, o
mediante la observación de reacciones de coloración específicas que indican la presencia de
azúcares.
Por ejemplo, una prueba común de detección cualitativa de azúcares es la prueba de
Benedict, que detecta la presencia de azúcares reductores como la glucosa. Si la solución se
vuelve de color rojo ladrillo después de realizar la prueba, indica la presencia de azúcares.
Este tipo de detección es útil en diversas aplicaciones, como en la identificación de
carbohidratos en alimentos o en análisis clínicos. La prueba de Lugol (yodo): Se utiliza
para detectar la presencia de almidón. Cuando se añade yodo a una solución que contiene
almidón, la solución se vuelve de color azul oscuro o negro. La prueba de Fehling es una
prueba química que se utiliza para detectar la presencia de azúcares reductores, como la
glucosa, en una solución. Esta prueba es especialmente útil para identificar azúcares
aldehídos y cetosas que pueden reducir el reactivo de Fehling.
La prueba de Fehling
Solución de Fehling A: Contiene sulfato cúprico en solución acuosa.
Solución de Fehling B: Es una solución alcalina que contiene tartrato de sodio y potasio.
El procedimiento típico para realizar la prueba de Fehling implica mezclar cantidades
iguales de las soluciones A y B y luego agregar la muestra que se desea analizar. Si la
muestra contiene azúcares reductores, estos reducirán el ion cúprico (Cu²⁺) presente en la
solución de Fehling, resultando en la formación de un precipitado de óxido de cobre (I),
que es de color rojo ladrillo o rojo. La intensidad del color rojo puede variar según la
cantidad de azúcares reductores presentes en la muestra.
Si la muestra no contiene azúcares reductores, no se producirá el cambio de color ni la
formación del precipitado característico.
La prueba de Fehling es una prueba cualitativa que se utiliza en química analítica y en la
identificación de azúcares en alimentos y muestras biológicas. Es importante tener en
cuenta que esta prueba solo detecta la presencia de azúcares reductores y no cuantifica la
cantidad exacta presente en la muestra.
La prueba de Lugol
También conocida como la prueba de yodo o reactivo de Lugol, es una prueba química
utilizada para detectar la presencia de almidón en una muestra. Esta prueba se basa en la
capacidad del yodo para formar un complejo azul con el almidón.
La prueba de Lugol es comúnmente utilizada en laboratorios de química y biología para
identificar la presencia de almidón en alimentos, tejidos vegetales y otras muestras. Es una
prueba cualitativa y sencilla que proporciona una indicación rápida de la presencia o
ausencia de almidón en una muestra.
El reactivo de Benedict
También conocido como solución de Benedict o prueba de Benedict, es una solución
química utilizada para detectar la presencia de azúcares reductores en una muestra,
especialmente glucosa y otros monosacáridos o disacáridos que pueden ser convertidos en
azúcares reductores. Esta prueba es comúnmente utilizada en química analítica y en
laboratorios de biología y bioquímica.
La intensidad del cambio de color puede indicar la cantidad relativa de azúcares reductores
en la muestra. La prueba de Benedict se utiliza a menudo en la identificación de azúcares
en alimentos y en experimentos de laboratorio para determinar la presencia de estos
azúcares en diversas muestras.
Objetivos
Objetivo general

 Determinar la presencia de carbohidratos en cada muestra a partir de pruebas


cualitativa.

Objetivo específico

 Preparar reactivo de Benedict, Lugol y Fehling.


 Identificar por medio de una prueba de Benedict una estimación de la
cantidad de azúcar reductora presente en la muestra.
 Identificar por medio de una prueba de Fehling la presencia de azúcares
reductores en la muestra.
 Identificar por medio de una prueba de Lugol la presencia de polisacáridos
en una muestra.
 Conocer a fondo la función de estos reactivos químicos, poniéndolos en
práctica a través de una prueba de laboratorio.
II. Materiales y reactivos

Cristalería y materiales Equipos Reactivos

Tubos de Ensayo Baño maría Yodo

Pipeta 1ml Balanza Glucosa (C6H12O6)0.5%,


analítica

Pipeta 5 ml Fructosa (C6H12O6) 0.5%

Gotero Hidróxido de Sodio (NaOH)

Succionador para pipeta Citrato de Sodio (Na3C6H5O7)


serológica

Gradilla para tubos de ensayo Carbonato de Sodio (Na2CO3 )

Sulfato de Cobre (II) (CuSO4)

Tartrato mixto de potasio y sodio (Sal de


Seignette)
(KNaC4H4O6·4H2O)

Yoduro de potasio
III. Procedimiento
IV. Tabla de Resultados.

Observaciones por prueba

Carbohidrato
Benedict Fehling Lugol

Al realizarle la prueba de
Muestra #1 Se realizó la prueba Al agregarle a la papa la Lugol a la papa, para
de Benedict, en el solución de Fehling (A y B), carbohidrato, no fue
Papa cual, al agregarle la este tornó a una tonalidad azul, necesario realizar
solución a la papa, se y se procedió a calentar, calentamiento a través de
obtuvo una tonalidad mediante baño María, baño María. La papa al
de color azul, al obteniendo finalmente una estar en contacto con dicha
calentarlo, este dio tonalidad de color verde claro. solución, se tornó
una tonalidad verde El poco e indiferente cambio primeramente a un color
con pequeñas de tonalidad en esta muestra, se café rojizo, para
tonalidades puede dar por la falta de posteriormente obtener un
amarillas. Si la papa azucares reductores en esta color negro constante. El
contiene azúcares muestra de papa, ya que está reactivo Lugol se utiliza
reductores como la compuesta mayormente de para detectar almidones,
glucosa, la prueba almidón. que son polímeros de
con el reactivo glucosa que forman
Benedict daría como cadenas largas en la
resultado un cambio estructura de la papa. La
en el color de la reacción positiva con
solución, de azul a Lugol indica que la papa
verde, amarillo o contiene almidón en
incluso rojo, cantidades significativas.
dependiendo de la El color azul oscuro o
concentración de negro que se forma en
azúcares presentes. presencia de almidón es
Cuanto más intenso característico de esta
sea el cambio de prueba.
color, mayor será la
concentración de
azúcares reductores
en la papa.

Muestra #2 Se realizó la prueba ------- -------


de carbohidratos con
Leche la solución de
Benedict a una
muestra de leche, el
cuál al calentarla se
obtuvo un cambio de
color a amarillo, el
cuál indica una
prueba positiva a
carbohidrato, como
azucares reductores,
en este caso la
lactosa. En la prueba
de Benedict, el
reactivo cambia de
color según las
cantidades de
azucares reductores
presentes, entre mas
cercano al color rojo,
mayor cantidad de
azúcares reductores.

Muestra #3 -------- --------- Los resultados obtenidos


en el cambio de tonalidad
Almidón a café oscuro, sugieren que
la papa está compuesta
principalmente por
almidón y contiene una
cantidad insignificante de
azúcares reductores. Esto
es coherente con la
composición típica de las
papas, donde el almidón es
el principal carbohidrato
de almacenamiento. Las
papas suelen tener niveles
bajos de azúcares
reductores en comparación
con otros alimentos ricos
en azúcares como frutas y
dulces.

Muestra #4 --------- Mediante la prueba de Fehling, -------


la sacarosa no mostró ningún
Sacarosa cambio, esto pudo ser debido a
la concentración de sacarosa,
los reactivos de Fehling
podrían no haber detectado
suficiente azúcar para
reaccionar y producir cambios
visibles.

 Muestra # 1 Papa:
Una prueba positiva de carbohidratos en la papa con los reactivos Fehling, Benedict y
Lugol se vería de la siguiente manera:
1. Prueba con Reactivo Benedict:
- Si la papa contiene azúcares reductores como la glucosa, la prueba con el reactivo
Benedict daría como resultado un cambio en el color de la solución, de azul a verde,
amarillo o incluso rojo, dependiendo de la concentración de azúcares presentes. Cuanto más
intenso sea el cambio de color, mayor será la concentración de azúcares reductores en la
papa.
2. Prueba con Reactivo Fehling:
- El reactivo Fehling es similar al reactivo Benedict y se utiliza para detectar azúcares
reductores. Una prueba positiva con Fehling también mostraría un cambio de color en la
solución, indicando la presencia de azúcares reductores en la papa.
3. Prueba con Reactivo Lugol (Yodo):
- La prueba con Lugol se utiliza para detectar almidones en la papa. Si la papa contiene
almidones, la solución con Lugol cambiará de color de marrón o amarillo a un tono azul
oscuro o negro, indicando la presencia de almidones.
Como grupo de laboratorio, obtuvimos resultados poco perceptibles para las pruebas de
carbohidratos con los reactivos Fehling y Benedict, pero positivo para el reactivo Lugol en
una muestra de papa, esto sugiere que la papa contiene almidón, pero no azúcares
reductores en cantidades significativas. Por lo tanto, como discusión de resultados:
1. Resultado positivo para Benedict:
- El reactivo de Benedict se utilizó para detectar azúcares reductores presentes en el
carbohidrato empleado para el análisis (Tubérculo: Papa), como lo son la glucosa y la
fructosa que poseen grupo aldehído libres, que reducen los agentes oxidantes débiles como
el cobre en el reactivo Benedict. El doble enlace en el grupo carbonilo actuó como una
fuente de electrones, que fueron perdidos por el azúcar reductor y ganados por el otro
agente químico. El reactivo de Benedict contiene ion cúprico Cu +2 complejado con citrato
en solución alcalina, estos iones se reducen (aplicación de calor como catalizador) a óxido
cuproso Cu +1 con pH básico alto. El resultado obtenido en la prueba fue positivo y poco
perceptible, ya que se capturó la aparición del color verde que indica una pequeña cantidad
de estos azúcares reductores.
 Reacción de Benedict antes de calentar la solución:
O
Reactivos de Benedict oxidado + R-C – H (Azúcar reductor)

 Reacción de Benedict después de calentar la solución:


O
Reactivo de Benedict reducido + R-C – O-H (Azúcar oxidado)

2. Resultado positivo para Fehling


El reactivo de Fehling se utilizó para detectar azúcares reductores presentes en el
carbohidrato empleado para el análisis (Tubérculo: Papa), como lo son la glucosa y la
fructosa que poseen grupo aldehído libres, los cuales experimentan su poder reductor en su
grupo carbonilo, este se oxidó a un ácido carboxílico, reduciendo a la sal de cobre +2
(aplicación de calor como catalizador) a óxido de cobre +1, en un medio alcalino lo cual
facilitó que el azúcar este en forma lineal, para que su grupo aldónico pueda reaccionar con
el ion cúprico . Tomando en cuenta que reaccionó con un monosacárido, se obtuvo un color
verde, indicando una prueba positiva y la poca presencia del azúcar en el carbohidrato. Un
aspecto importante en esta reacción es que la forma aldehído puede detectarse fácilmente,
aunque exista en muy pequeña cantidad.
CuSO4
D-Glucosa Ac. D-Glucónico (Ácidos aldónicos) + Cu2O
NaOH, H2O
Fehling

3. Resultado positivo para Lugol:


- El reactivo Lugol se utilizó para detectar almidones, que son polímeros de glucosa que
forman cadenas largas de poliyoduro a partir de la reacción del almidón presente en la
estructura de la papa. Una solución de yodo-diyodo disuelto en una solución acuosa de
yoduro de potasio, donde los iones I3 se sitúan dentro de la macromolécula de almidón
(estrictamente de la amilosa). El resultado positivo en la reacción con Lugol indicó que la
papa contiene almidón en cantidades significativas, ya que se obtuvo un color negro
característico de esta prueba, debido a que el yodo se introduce entre las espiras de la
molécula de almidón.
En resumen, los resultados sugieren que la papa está compuesta principalmente por
almidón y contiene una cantidad insignificante de azúcares reductores. Esto es coherente
con la composición típica de las papas, donde el almidón es el principal carbohidrato de
almacenamiento.
4. Muestra # 2 Leche: Positivo para la prueba de Benedict.
El reactivo de Benedict se utilizó para detectar la presencia de azúcares reductores, como la
glucosa y la lactosa, ya que contiene su OH anomérico libre. Cuando se mezcla con una
muestra que contiene estos azúcares en medio alcalino, el ion cúprico el Cu+2 (otorgado
por el sulfato cúprico) que tiene color azul, se reduce (aplicación de calor como catalizador)
por el efecto del grupo aldehído del azúcar, a Cu +1 correspondiente al óxido cuproso Cu2O
que precipita de color naranja, indicando la cantidad de azúcares presentes. El medio
alcalino facilitó que el azúcar este de forma lineal, puesto que el azúcar en solución forma
un anillo piranósico. Una vez que el azúcar este lineal, su grupo aldehído puede reaccionar
con el ion cúprico.
Se obtuvo una prueba positiva, lo que indica que la leche contiene lactosa, lo cual es
esperado y normal en la leche de mamíferos. Esto es relevante en la industria alimentaria
para verificar la autenticidad de productos lácteos y para asegurarse de que no se hayan
agregado azúcares o sustitutos de la lactosa.
5. Muestra #3 Almidón - Lugol:
El reactivo Lugol se mezcló con el almidón y se produjo una reacción positiva, ya que al
formarse las cadenas de poliyoduro I3, que se enlazan con el almidón en el interior de las
hélices del polímero. En concreto, es la amilosa del almidón la que se une a las moléculas
de yodo, haciendo que cambien las propiedades de absorción de la luz, de forma que se
obtiene dicha coloración oscura e intensa. La solución pasó de un color amarillo-amarillo
claro a un color negro. En resumen, una prueba positiva de carbohidratos con la solución de
Lugol indica la presencia de almidón en la muestra.
6. Muestra #4 Sacarosa – Fehling:
Una prueba negativa de carbohidratos para la sacarosa utilizando la solución de Fehling
implica que no se detectó la presencia de sacarosa en la muestra analizada. La sacarosa es
un disacárido compuesto por glucosa y fructosa, y no posee carbonos anoméricos libres por
lo que carece de poder reductor. En este caso lo más idóneo era hidrolizar la sacarosa,
mediante la adición de un ácido (HCl) y en caliente, para que se incorpore una molécula de
agua y se descomponga en los monosacáridos que la forman (glucosa y fructosa), que si son
reductores.

V. Cuestionario.
1. ¿Cuáles son sus funciones biológicas de los carbohidratos?
Los carbohidratos son una clase de biomoléculas esenciales para la vida y desempeñan
diversas funciones biológicas en los organismos. Algunas de sus principales funciones
incluyen:
Fuente de energía: Los carbohidratos son una fuente primaria de energía para los
organismos. Cuando se metabolizan, se convierten en glucosa, que es utilizada por las
células para obtener energía a través del glucólisis y la respiración celular.
Almacenamiento de energía: En forma de glucógeno en animales y almidón en plantas, los
carbohidratos sirven como una reserva de energía que se puede movilizar cuando el
organismo lo necesita. El glucógeno se almacena en el hígado y los músculos, mientras que
el almidón se almacena en órganos de almacenamiento de plantas, como tubérculos.
Estructura: Los carbohidratos también tienen un papel importante en la estructura y el
soporte de organismos. Por ejemplo, la celulosa es un polisacárido que forma la pared
celular de las plantas, proporcionando rigidez y protección. La quitina es otro polisacárido
que forma el exoesqueleto de insectos y otros artrópodos.
Reconocimiento celular: Los carbohidratos desempeñan un papel fundamental en el
reconocimiento celular y la comunicación. Las glicoproteínas y glucolípidos en la
superficie de las membranas celulares están adornados con cadenas de carbohidratos que
son importantes para la identificación de células y la interacción entre células.
Regulación metabólica: Algunos carbohidratos, como la insulina, son hormonas que
desempeñan un papel clave en la regulación del metabolismo de la glucosa en el cuerpo. La
insulina, por ejemplo, ayuda a controlar los niveles de glucosa en sangre.
Protección y lubricación: Los mucopolisacáridos, como el ácido hialurónico, se encuentran
en tejidos conectivos y líquidos sinoviales, proporcionando lubricación y amortiguación en
las articulaciones y otras estructuras.
2. ¿Cuáles son los monosacáridos de mayor importancia a nivel industrial?
A nivel industrial, los monosacáridos más importantes incluyen:
Glucosa: La glucosa es el monosacárido más significativo a nivel industrial. Se utiliza en
una variedad de aplicaciones, como la producción de alimentos y bebidas, la fermentación
para la producción de alcohol y bioplásticos, y como fuente de carbono en la biotecnología.
Fructosa: La fructosa es otro monosacárido importante en la industria alimentaria. Se utiliza
en la producción de jarabe de maíz de alta fructosa (HFCS, por sus siglas en inglés), que es
un edulcorante común en alimentos y bebidas procesados.
Galactosa: La galactosa es menos común en aplicaciones industriales que la glucosa y la
fructosa, pero se utiliza en la producción de ciertos productos lácteos, así como en la
fabricación de productos farmacéuticos y en la investigación biológica.
Xilosa: La xilosa es un monosacárido que se utiliza en la producción de xilitol, un
edulcorante natural. También se utiliza en la producción de productos químicos industriales
y bioplásticos.
Ribosa y desoxirribosa: Estos monosacáridos son esenciales en la síntesis de ácidos
nucleicos (ADN y ARN) y se utilizan en aplicaciones farmacéuticas y biotecnológicas.
Estos monosacáridos son fundamentales en una variedad de procesos industriales, desde la
producción de alimentos y bebidas hasta la fabricación de productos químicos y
farmacéuticos. Su versatilidad los hace esenciales en muchas aplicaciones industriales y
comerciales.
3. ¿Cómo se forma el enlace glucosídico?
El enlace glucosídico es un tipo de enlace químico que se forma entre dos monosacáridos
(azúcares simples) durante una reacción de condensación o deshidratación. Este tipo de
enlace es característico de los carbohidratos y es importante en la formación de disacáridos
(como la sacarosa) y polisacáridos (como el almidón y la celulosa). Aquí se explica cómo
se forma el enlace glucosídico:
Reacción de condensación o deshidratación: La formación del enlace glucosídico ocurre
cuando dos monosacáridos se combinan en una reacción de condensación o deshidratación.
En esta reacción, una molécula de agua (H2O) se elimina de los dos monosacáridos que se
están uniendo.
Grupos funcionales: Los monosacáridos tienen grupos funcionales que son importantes
para la formación del enlace glucosídico. Estos grupos son el grupo hidroxilo (-OH) y el
grupo aldehído o cetona, dependiendo del tipo de monosacárido.
Unión de los grupos funcionales: Durante la reacción de condensación, el grupo hidroxilo (-
OH) de un monosacárido reacciona con el grupo hidroxilo de otro monosacárido. Esta
reacción elimina una molécula de agua y crea un enlace covalente entre los dos
monosacáridos.
Formación del enlace: El enlace covalente formado entre los dos monosacáridos se llama
enlace glucosídico. La configuración específica del enlace glucosídico dependerá de qué
grupos funcionales de los monosacáridos estén involucrados y de su posición en la
estructura.
Por ejemplo, en la sacarosa, que es un disacárido formado por glucosa y fructosa, el enlace
glucosídico se forma entre el grupo hidroxilo (-OH) de la glucosa y el grupo hidroxilo de la
fructosa, eliminando una molécula de agua en el proceso.
La formación de enlaces glucosídicos es fundamental en la construcción de carbohidratos
más complejos, como disacáridos y polisacáridos, y desempeña un papel crucial en la
estructura y función de estas moléculas en organismos vivos.
VI. Conclusión
Al final de la práctica hemos aprendido que procedimientos utilizar para reconocer los
carbohidratos, las características que se presentan en ellos una vez que han entrado en
contacto con otros reactivos que ayudan en su identificación, y el cambio que presentan
luego de su interacción.
Las pruebas cualitativas de carbohidratos son importantes por varias razones:
Identificación de sustancias: Estas pruebas permiten identificar la presencia o ausencia de
carbohidratos en una muestra. Esto es esencial para caracterizar la composición química de
un compuesto o sustancia desconocida.
Detección de componentes específicos: Las pruebas cualitativas pueden ayudar a
determinar qué tipo de carbohidrato está presente en la muestra, ya sea azúcares reductores,
almidones u otros carbohidratos. Esto es útil para comprender mejor la naturaleza de la
sustancia.
Control de calidad: En la industria alimentaria y farmacéutica, las pruebas cualitativas de
carbohidratos son cruciales para garantizar la calidad y autenticidad de los productos. Por
ejemplo, pueden utilizarse para detectar la presencia de azúcares no deseados o adulterantes
en alimentos.
Investigación científica: En la investigación científica, estas pruebas son fundamentales
para estudiar la composición de muestras biológicas, alimentos, materiales y más. Ayudan a
los científicos a comprender mejor la estructura y función de los carbohidratos en diversas
aplicaciones.
Diagnóstico médico: En el campo médico, las pruebas cualitativas de carbohidratos pueden
utilizarse para diagnosticar trastornos metabólicos, como la diabetes, al detectar la
presencia de glucosa en la sangre o la orina.
Educación y aprendizaje: En entornos educativos, estas pruebas son herramientas valiosas
para enseñar conceptos de química y bioquímica, permitiendo a los estudiantes comprender
la importancia de los carbohidratos en la biología y la nutrición.
En resumen, las pruebas cualitativas de carbohidratos desempeñan un papel esencial en
diversos campos, desde la investigación científica hasta la industria y la medicina. Ayudan
a determinar la presencia y el tipo de carbohidratos en las muestras, lo que puede tener
implicaciones significativas para la calidad, la seguridad y la comprensión de diferentes
sustancias y productos.

VII. Anexos

Anexo #1 Anexo #2

Resultados obtenidos de las diferentes pruebas realizadas Resultado negativo de la prueba de Fehling, utilizando
para la detección cualitativa de carbohidratos. como carbohidrato disacárido la sacarosa.

Anexo #3
Anexo #4
Reactivos a utilizar para la detección cualitativa de
Prueba positiva de Benedict para leche.
carbohidratos
Anexo #5

Prueba 1 positiva de Benedict para azucares reductores en Anexo #6


tubérculo papa. Muestra de almidón soluble para prueba de lugol.
Prueba 2 positiva para azucares reductores en tubérculo
papa.

Prueba 3 positiva para almidón en tubérculo papa.

Anexo #7

Muestra de sacarosa para prueba de Fehling.


VIII. Referencias Bibliográficas

 Skoog, West, Holler y Crouch (2001), Química Analítica, 7ª Ed.


 Mathews, van Holde y Ahrem (2002). Pearson Education,
Bioquímica , 1 vol, 3ª ed.

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