TEMA 3:

TÉCNICAS DE FIJACIÓN DEL Olga M. García

COMPLEMENTO
Fernández

2º CURS O DE GRA DO S UPERIOR EN LABORATORIO

CLÍN ICO Y BIOMÉDICO
 CONTENIDOS

• Introducción.
• Vías de activación del
complemento.
• Enfermedades asociadas.
• Técnicas de fijación del
complemento.

APROBADO: 6,63

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 INTRODUCCIÓN
El sistema del complemento constituye el principal
efector de la inmunidad humoral innata, aunque también
participa en la respuesta adaptativa. Está formado por
un grupo de proteínas (30-40) que pueden ser solubles
(plasma) o insolubles (de membrana).
Lisis de bacterias, virus y células

Facilita la opsonización
FUNCIONES:
Eliminación de complejos inmunes

Activación de la respuesta
inflamatoria 3
 INTRODUCCIÓN
La mayor parte de los componentes del sistema del
complemento se sintetizan en los hepatocitos, aunque
también se producen cantidades importantes los
monocitos, macrófagos tisulares y células epiteliales.
Proenzima
Casi todos los
F. inhibidor
componentes circulan
Escisión
en el suero de manera proteolítica
inactiva y se pueden
activar mediante tres
vías diferentes.
Sitio activo
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 VÍAS DE ACTIVACIÓN DEL S.C.
Las proteínas del complemento se designan con la
letra C seguida de un número (C1, C2, C3 o C4). Los
fragmentos peptídicos que se forman por la activación
se les denomina con letras minúsculas: a (fragmento
pequeño) y b (fragmento más grande). Y si tienen
actividad enzimática se añade una línea ( ).
1. VÍA CLÁSICA
Requiere de la participación de cationes de magnesio
y calcio como cofactores de la activación.
2. VÍA ALTERNATIVA
Los componentes del complemento se llaman
factores: factor B, factor D, factor H, o factor P.
3. VÍA DE LAS LECTINAS 5
 VÍAS DE ACTIVACIÓN DEL S.C.
1. VÍA CLÁSICA
Comienza con la formación de complejos Ag-Ac y la
generación de una respuesta inmune adaptativa
(principalmente IgM, IgG1, IgG2 e IgG3).
La formación del
complejo Ag-Ac
induce cambios de
conformación en la Fc Ca2+
Mg2+
de la Ig, exponiendo
un sitio de unión para
el complejo C1.

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 VÍAS DE ACTIVACIÓN DEL S.C.
1. VÍA CLÁSICA
El fragmento escinde a C4 en dos fragmentos:
C4a y C4b. Si C4b es capaz de unirse a la membrana
de la célula blanco, se le une el componente C2 a su
sitio de unión.
De nuevo el fragmento
, gracias a su actividad
proteolítica, escinde a C2
en dos fragmentos: C2a y
C2b.
El complejo resultante
se encargará de convertir
a C3 en una forma activa. 7
 VÍAS DE ACTIVACIÓN DEL S.C.
1. VÍA CLÁSICA
La convertasa de C3 hidroliza a estas dando lugar a
dos fragmentos: C3a y C3b. El C3b se une a la
convertasa C3 dando lugar a la convertasa de C5
(C4b2a3b) que escindirá a C5 en C5a y C5b.

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 VÍAS DE ACTIVACIÓN DEL S.C.
2. VÍA ALTERNATIVA
Esta vía es capaz de generar productos activos
similares a los de la vía clásica sin necesidad de
complejos Ag-Ac para su iniciación.
Debido a que no se
requiere anticuerpo, la vía ¿CÓMO SE PRODUCE LA
alternativa participa en la INICIACIÓN?
respuesta inmune innata. C3b
En esta vía se incluyen
cuatro proteínas séricas:
C3, factor B, factor D y
properdina.
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 VÍAS DE ACTIVACIÓN DEL S.C.
2. VÍA ALTERNATIVA
A la C3b unida a la membrana se une el factor B,
formando el complejo C3bB. Pero sobre este complejo
actúa el factor D que escinde al factor B en Ba y Bb,
este último se une al complejo dando lugar a C3bBb.

Este complejo tiene

actividad enzimática y es
la convertasa de C3.

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 VÍAS DE ACTIVACIÓN DEL S.C.
2. VÍA ALTERNATIVA
El complejo C3bBb es inestable y el factor P o
properdina es el encargado de estabilizarlo.
Posteriormente, al fragmento se une otro fragmento C3b
dando lugar al complejo C3bBb3b.

= C4b2a3b
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 VÍAS DE ACTIVACIÓN DEL S.C.
3. VÍA DE LAS LECTINAS
Al igual que en el caso de la vía alternativa, esta vía
no requiere de la formación de complejos Ag-Ac para
su activación.
Debido a que no se
requiere anticuerpo, la Proteasas
vía alternativa participa asociadas
en la respuesta inmune Lectina de unión
a manosa
innata.
Manosa
En esta vía se
necesita lectina que se Superficie
bacteriana
une a manosas de la
superficie bacteriana. 12
 VÍAS DE ACTIVACIÓN DEL S.C.
3. VÍA DE LAS LECTINAS
La lectina escinde a C2 y C4, formando un complejo
C4b2a, es decir, convertasa de C3. A partir de aquí
conseguimos crear el complejo C4b2a3b, es decir,
convertasa de C5.

C4b2a3b

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 VÍAS DE ACTIVACIÓN DEL S.C.
4. VÍA COMÚN
Las tres vías de activación del sistema del
complemento convergen en la creación de una
convertasa de C5 activa.
C5b va a iniciar el complejo de ataque a la
membrana (MAC).

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 ENFERMEDADES ASOCIADAS
Existen enfermedades asociadas a deficiencias
genéticas en uno o varios componentes del sistema
del complemento.
Deficiencia Síndromes
C1, C2 y similares al lupus
eritematoso
C4 sistémico

Septicemias
Deficiencia graves
de C3 (neumocócicas y
meningocócicas)

Deficiencia Infecciones por

C1, C6, C7 meningococos y
Neisseria sp.
y C8 15
 TÉCNICAS DE FIJACIÓN DEL
COMPLEMENTO
Estas técnicas están basadas en la capacidad de
unión de los componentes del sistema del
complemento a los complejos Ag-Ac.
Permiten evaluar la actividad de todos los
componentes o de alguno en particular.

Técnicas de Técnicas de
una etapa dos etapas
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 TÉCNICAS DE FIJACIÓN DEL
COMPLEMENTO
-TÉCNICA DE UNA ETAPA

Hemoglobina

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 TÉCNICAS DE FIJACIÓN DEL
COMPLEMENTO
-TÉCNICA DE DOS ETAPAS

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