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RECUENTO LEUCOCITARIO

I. PRINCIPIO:
La sangre anticoagulada se deposita en un líquido que permite evidenciar los
leucocitos, manteniéndolos visibles, mientras que los eritrocitos son hemolizados.
El recuento del número de leucocitos o glóbulos blancos se expresa por mm3
(milímetro cúbico).

II. EQUIPOS:
- Microscopio.
- Hemocitómetro (Cámara de Neubauer).
III. MATERIALES:
- Pipeta de glóbulos blancos (De Thoma). Presenta cerca del extremo superior una
marca de 11, inmediatamente continúa una dilatación (bulbo) que contiene una
perla que funciona como mezcladora, luego sigue el extremo más largo de la
pipeta (tallo) que está dividida en 10 partes, con 2 marcas: 1 (parte final del bulbo)
y 0,5 (a la mitad del tallo). Se le acopla a su extremo superior 1 tubo de goma y
una bombilla para aspirar.
- Diluyente de glóbulos blancos: Solución de Turk al 1%.
- Contador manual (Sólo si fuera necesario).
RECUENTO LEUCOCITARIO(MÉTODO
MANUAL)
IV. PROCEDIMIENTO
1. Una vez obtenida la muestra, se procede a aspirar la
sangre con la pipeta de glóbulos blancos hasta la
marca de 0,5.
2. Introducir la pipeta en el tubo que contenga
solución de Turk y absorber hasta la marca de 11
(no debe haber burbujas).
3. Tapar ambos extremos y proceder a mezclar
manualmente o en un rotador automático por 2 ó 3
minutos.
4. Monte la laminilla de vidrio en la cámara para
recuento que debe estar limpia y seca.
5. Agitar la pipeta y descartar las cuatro primeras 33 36
gotas para luego colocar una gota pequeña de esta
solución en la cámara.
6. Deje reposar por espacio de 3 minutos para que las
células se sedimenten. 3
7. Enfocar con objetivo de 10x y contar en 4 cuadrados Leucocitos = 7,3 x 10 / mm3
grandes angulares. 39 38

V. RESULTADOS: Leucocitos = 7,3 x 103/ mm3 VI. VALORES DE REFERENCIA: 5000 - 10 000 leucocitos / mm3
VALIDACIÓN
- En el área de hematología se manejan 3 niveles de controles: control bajo, control normal y
control alto.
- Su periodicidad es diaria.
- El control de calidad interno se debe tratar de la misma forma que las muestras de pacientes.
VALIDACIÓN
 Controles usado:
3
- Control Bajo 3mL (Rcto: 6.98 x 10 leucocitos/mm3)
3
- Control Normal 3mL (Rcto: 3.12 x 10 leucocitos/mm3)
3
- Control Alto 3mL (Rcto: 16.24 x 10 leucocitos/mm3)
 Periodicidad: Diaria
 Conservación y estabilidad: 2 – 8 °C
Guardar los tubos verticalmente.
No se debe congelar, ni dejar en la puerta de la nevera.
VALIDACIÓN
1. Se debe atemperar los controles durante 15 minutos y posteriormente se deben invertir cuidadosamente
20 veces antes de usar.

2. Abrir el tubo cuidadosamente y repetir el procedimiento antes mencionado.

3. Tapar el tubo y refrigerarlo. Preferiblemente dejarlos en posición vertical.

4. Repetir con cada nivel.

5. Escribir los resultados obtenidos en cada nivel en los formatos "Observaciones y Correctivos del Control
de calidad Interno Área Hematología y Registro Diario Control de Calidad Interno Área Hematología"
Se empleó la estimación de errores al azar: La medición de
este criterio se realiza mediante la lectura de una serie de
determinaciones de una misma muestra, de tal modo que,

VALIDACIÓN podemos expresar gráficamente la existencia de errores al


azar mediante una distribución normal.

RECUENTO MANUAL PROMEDIO 6.84


N° (CONTROL NORMAL) DESV. ESTANDAR: 0.24
PROMEDIO
LIM. SUPERIOR: 7.08
1 6.55 6.84 LIM. INFERIOR: 6.59
2 6.80 6.84 COEFICIENTE DE VARIACIÓN 0.036
3 6.60 6.84
4 7.00 6.84 RECUENTO DE LEUCOCITOS
5 6.90 6.84 CONTROL NORMAL
6 6.70 6.84 7.40
7.20
7 6.65 6.84
7.00
8 6.55 6.84 6.80
9 6.60 6.84 6.60
6.40
10 6.70 6.84
6.20
11 6.85 6.84 6.00
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
12 7.25 6.84
RECUENTO MANUAL PROMEDIO LIMITE SUPERIOR LIMITE INFERIOR
13 7.15 6.84
14 7.05 6.84 INTERPRETACIÓN:
15 7.20 6.84 Si valor de x ≤ 2DS VALOR SATISFECHO
Si valor de x > 2DS o ≤ 3DS VALOR ACEPTABLE
Si valor de x ≥ 3DS VALOR NO SATISFECHO
Se empleó la estimación de errores al azar: La medición de
este criterio se realiza mediante la lectura de una serie de
determinaciones de una misma muestra, de tal modo que,

VALIDACIÓN podemos expresar gráficamente la existencia de errores al


azar mediante una distribución normal.

RECUENTO MANUAL PROMEDIO 3.05


N° (CONTROL BAJO) PROMEDIO
DESV. ESTANDAR: 0.16
LIM. SUPERIOR: 3.21
1 2.80 3.05
LIM. INFERIOR: 2.89
2 3.00 3.05 COEF. DE VARIACIÓN: 0.05
3 2.75 3.05
4 3.05 3.05 RECUENTO DE LEUCOCITOS
5 3.10 3.05 CONTROL BAJO
6 3.15 3.05 4.00
3.80
7 3.00 3.05 3.60
3.40
8 3.15 3.05 3.20
3.00
9 2.95 3.05 2.80
10 2.95 3.05 2.60
2.40
11 2.90 3.05 2.20
2.00
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
12 3.05 3.05
13 3.25 3.05 RECUENTO MANUAL #REF!
LIMITE SUPERIOR LIMITE INFERIOR
14 3.30 3.05
INTERPRETACIÓN:
15 3.30 3.05
Si valor de x ≤ 2DS VALOR SATISFECHO
Si valor de x > 2DS o ≤ 3DS VALOR ACEPTABLE
Si valor de x ≥ 3DS VALOR NO SATISFECHO
Se empleó la estimación de errores al azar: La medición de
este criterio se realiza mediante la lectura de una serie de
determinaciones de una misma muestra, de tal modo que,

VALIDACIÓN podemos expresar gráficamente la existencia de errores al


azar mediante una distribución normal.
RECUENTO MANUAL PROMEDIO 16.19

(CONTROL ALTO) DESV. ESTANDAR: 0.17
PROMEDIO
LIM. SUPERIOR: 16.36
1 16.25 16.19
LIM. INFERIOR: 16.02
2 16.05 16.19 COEF. DE VARIACIÓN: 0.0102
3 16.00 16.19
4 16.05 16.19
RECUENTO DE LEUCOCITOS
5 15.90 16.19 CONTROL ALTO
6 15.95 16.19 16.50
7 16.25 16.19 16.40
16.30
8 16.40 16.19 16.20
16.10
9 16.30 16.19 16.00
15.90
10 16.25 16.19 15.80
15.70
11 16.35 16.19 15.60
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
12 16.35 16.19
RECUENTO MANUAL PROMEDIO
13 16.40 16.19
LIMITE SUPERIOR LIMITE INFERIOR
14 16.30 16.19
15 16.05 16.19
INTERPRETACIÓN:
Si valor de x ≤ 2DS VALOR SATISFECHO
Si valor de x > 2DS o ≤ 3DS VALOR ACEPTABLE
Si valor de x ≥ 3DS VALOR NO SATISFECHO
Exactitud: El laboratorio debe confirmar la precisión del
método comparando los resultados con el método de
VALIDACIÓN referencia.

RECUENTO RECUENTO RECUENTO


N° RECUENTO AUTOMATIZAD N°
MANUAL MANUAL AUTOMATIZ.
O
1 6.55 6.89 1 2.80 2.89
RECUENTO MANUAL DE LEUCOCITOS
2 6.80 7.14 RECUENTO DE LEUCOCITOS 2 3.00 3.06 Gráfico de Dispersión
3 6.60 7.21 Gráfico de Dispersión 3 2.75 2.03 Control Bajo
4 7.00 7.24 Control Normal 4 3.05 3.18
5 6.90 7.31 4.00
9.00 5 3.10 3.25
6 6.70 7.22 6 3.15 3.31 3.50
8.50
7 6.65 7.11 7 3.00 2.78 3.00
8 6.55 7.13 8.00 2.50
8 3.15 3.07
9 6.60 6.95 7.50 9 2.95 2.91 2.00
10 6.70 7.01 10 2.95 3.08 1.50
7.00
11 6.85 7.09 11 2.90 3.12 1.00
6.50
12 7.25 7.06 12 3.05 3.20 0.50
13 7.15 7.01 6.00
13 3.25 3.35
-1 1 3 5 7 9 11 13 15 0.00
14 7.05 7.03 -1 1 3 5 7 9 11 13 15
14 3.30 3.27
15 7.20 7.00
DES. RECUENTO MANUAL RECUENTO AUTOMATIZADO 15 3.30 3.22 RECUENTO MANUAL LIMITE SUPERIOR
ESTAN. 0.23 0.11 DES.
ESTAN. 0.16 0.31
COEF.
VARIA. 0.03 0.02 COEF.
VARIA. 0.05 0.10
Exactitud: El laboratorio debe confirmar la precisión del
método comparando los resultados con el método de
VALIDACIÓN referencia.

RECUENTO RECUENTO
N° MANUAL AUTOMATIZADO

1 16.25 16.31 RECUENTO LEUCOCITARIO


2 16.05 16.29 GRÁFICO DE DISPERSIÓN
3 16.00 16.13
Control Alto
4 16.05 15.94 16.80

5 15.90 15.94 16.60


6 15.95 16.23
16.40
7 16.25 16.03
8 16.40 16.69 16.20
9 16.30 16.37
16.00
10 16.25 16.45
11 16.35 16.48 15.80

12 16.35 16.32 15.60


13 16.40 16.21
15.40
14 16.30 16.19 0 2 4 6 8 10 12 14 16
15 16.05 15.91
RECUENTO MANUAL RECUENTO AUTOMATIZADO
DES. ESTAN. 0.17 0.21

COEF. VARIA. 0.01 0.01


CONCLUSIONES
- Los resultados obtenidos nos muestran que para el método evaluado ninguna de las lecturas
fue mayor a 2DS, por lo tanto podemos decir que el método es válido, siempre y cuando, se
cumpla el protocolo estandarizado.

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