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INSTITUTO TECNOLÓGICO BOLIVIANO CANADIENSE

``EL PASO``

ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DEL YOGURT


GRIEGO
CARRERA: QUÍMICA INDUSTRIAL

ASIGNATURA: BROMATOLOGÍA, MICROBIOLOGÍA INDUSTRIAL I (BMI-I)

NIVEL: 300-B

DOCENTE: LIC. FANNY ESCALERA CLAROS

ESTUDIANTES: BOLIVAR CARRION WHARA ANDREA

HERBAS MONTECINOS JHESICA NICOL

LOPEZ ALVAREZ JENNIFER

ORDOÑES ZUBIETA OLIVER JHONATAN

QUISPE MAMANI YUMILKA

TORREZ ZUBELZU KATERIN

FECHA DE REALIZACIÓN: 22-06-2023

FECHA DE ENTREGA: 12-06-2023

EL PASO - COCHABAMBA I-20231


I.T.B.C. "EL PASO" QUÍMICA INDUSTRIAL MATERIA: BMI

ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DEL YOGURT GRIEGO


INTRODUCCIÓN
El yogur griego es un producto lácteo preparado por medio de la acidificación de la
leche. Esta acidificación se logra a través de la inoculación de las bacterias
Streptococcus salivarius ssp. thermophilus y Lactobacillus delbruekii ssp. bulgaricus.
Por tanto en el laboratorio de microbiología se realizó la preparación de medios de
cultivos para el análisis microbiológico del yogurt griego que se elaboró anteriormente
en el laboratorio.
1. OBJETIVOS
1.1. OBJETIVO GENERAL
● Realizar el análisis microbiológico del yogurt griego elaborado por los
estudiantes del instituto ITBC, para determinar si este producto elaborado
es adecuado para el consumo de la población, asi mismo se determinará
la inocuidad alimentaria del producto.
1.2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
● Preparar medios de cultivo para el análisis microbiológico del yogurt
griego.
● Realizar el conteo de unidades formadoras de colonias en la muestra de
yogur elaborada.
2. FUNDAMENTO TEÓRICO
YOGURT GRIEGO
El yogur griego se cuela, lo que elimina el suero líquido, junto con algunas de las
sales y azúcares disueltos en él. El resultado es un yogur que tiene una textura
más densa, espesa y cremosa; también es más rico en proteínas que el yogur
estilo convencional.
MEDIOS DE CULTIVOS PARA EL ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO
AGUA PEPTONADA
El agua de peptona tamponada es un medio de cultivo que sirve
como diluyente y permite el crecimiento de microorganismos.
El agua de peptona tamponada se utiliza principalmente en
muestras de alimentos u otros materiales, para pruebas de indol

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y como medio base para estudios de fermentación de carbohidratos.


Diluyente y medio líquido para el pre-enriquecimiento no selectivo de muestras
de alimentos según las normas ISO 6579, 6785, 6887 y 8261.
PLATE COUNT
El agar de recuento en placas de agar listo para el uso
que permite determinar la cantidad total de gérmenes
en la industria de alimentos y bebidas. Este medio,
también conocido como agar de recuento de bacterias o
agar de extracto de levadura, dextrosa y peptona de
caseína, cumple las directrices de las normas EN ISO
4833 e ISO 17410 y los requisitos de la Asociación
Americana de Salud Pública (APHA) y del Manual de
Análisis Bacteriológico de la FDA.
PAPA DEXTROSA
Agar Dextrosa y Papa es un medio utilizado para el
cultivo y cuenta de hongos y levaduras a partir de
muestras de alimentos, productos lácteos y
cosméticos.
Agar Dextrosa y Papa puede ser suplementado con
antibióticos o ácidos para inhibir el crecimiento
bacteriano. Este medio es recomendado para realizar
recuento colonial. También puede ser utilizado para
promover el crecimiento de hongos y levaduras de
importancia clínica. La base del medio es altamente
nutritiva y permite la esporulación y la producción de
pigmentos en algunos dermatofitos. Algunos procedimientos señalan bajar el pH
del medio a 3.5 ± 0.1 con ácido tartárico al 10 %, para inhibir el crecimiento
bacteriano.
La infusión de papa y la dextrosa promueve el crecimiento abundante de hongos
y levaduras, el agar es adicionado como agente solidificante.

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BAIRD PARKER
El Baird Parker Agar (Medio base) es un medio de
cultivo selectivo para la detección y enumeración de
estafilococos en una variedad de muestras.
Este medio permite una buena diferenciación de las
cepas coagulasa positivas. Generalmente, la flora
acompañante en la muestra inicial queda inhibida por
las elevadas concentraciones de litio, glicina y piruvato
que contiene la composición del Baird Parker Agar. El
litio y la glicina exaltan el crecimiento de estafilococos.
ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DEL YOGURT GRIEGO
El objetivo del análisis microbiológico es determinar los microorganismos y las
bacterias presentes en una muestra del alimento a analizar.
Análisis de los productos en el momento de la producción y antes de que lleguen
a los estantes, así como a los establecimientos de restauración.
Comprobación de los productos colocados en los almacenes de las cadenas
minoristas.
Análisis de las toallitas en las manos del personal de empresas y cadenas de
distribución. También se comprueba el equipo y los utensilios utilizados.
Los exámenes microbiológicos periódicos permitirán responder a tiempo a
cualquier irregularidad. Este enfoque responsable evita la aparición de
enfermedades localizadas entre los consumidores y su posterior propagación a
nivel epidemiológico.
Normas de muestreo
Las normas regulan no sólo el proceso de análisis, sino también la correcta toma
de muestras. No hay que subestimar la importancia de este procedimiento, ya
que un muestreo incorrecto puede reducir considerablemente la precisión de los
resultados de las pruebas. La complejidad del proceso aumenta aún más por el
hecho de que cada tipo de alimento tiene sus propios requisitos.
Métodos de muestreo para las pruebas microbiológicas

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El muestreo consiste en pesar o medir el volumen: el primero es válido para los


productos sólidos y secos, mientras que el volumen se refiere a los productos de
consistencia líquida. Para ello se utiliza un recipiente estéril de forma adecuada.
Puede ser un frasco, un tarro o una placa de Petri. A continuación, el recipiente
se cierra con un corcho o una tapa y se cubre con papel estéril.
Una vez finalizado el muestreo, se etiquetan con la fecha de muestreo, el
nombre del producto y de la empresa, y la dirección de la prueba. La muestra se
sella y se envía al laboratorio. Si las muestras son tomadas por especialistas de
laboratorio, pueden entregarlas al centro en su propio transporte.
Preparación de la prueba
Antes de iniciar el proceso de pruebas, se realizan preparativos en el laboratorio
para garantizar unas condiciones óptimas. En primer lugar, se preparan los
utensilios y los materiales. Todos los artículos nuevos se hierven en una solución
de ácido clorhídrico y se tratan con agua destilada. Las placas de Petri y otros
utensilios se esterilizan en su estado envuelto.
En el segundo paso, se preparan los reactivos y las soluciones nutritivas. Se
utiliza agua destilada como base. En primer lugar, se prepara una solución de
bicarbonato de sodio, cuya función es neutralizar las muestras y reducir el nivel
de error. También se necesita una solución de ácido clorhídrico, una solución
isotónica de cloruro de sodio y una solución tampón de fosfato concentrada.
Además de preparar los reactivos y el equipo, hay que garantizar unas
condiciones ambientales óptimas antes de realizar los análisis. Por ejemplo, la
temperatura del aire ambiente no debe superar los +25 °C y la humedad relativa
debe variar entre el 30-80%. También se controlan los niveles de presión
atmosférica. Los ajustes recomendados están entre 84 y 106 kPa.
Requisitos de seguridad
A la hora de realizar las pruebas, es importante garantizar unas condiciones
óptimas que cumplan los requisitos y permitan realizar el análisis de la muestra
de producto con la mayor eficacia posible. Por ejemplo, la sala del laboratorio
debe estar equipada con la ventilación obligatoria de suministro y escape. La
zona de trabajo debe ser controlada periódicamente para comprobar los niveles

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de contaminantes. Además, la sala debe cumplir los requisitos de seguridad


contra incendios.
Un factor importante que influye en la precisión de los resultados es la
cualificación del operador que realiza las mediciones. Los especialistas con
experiencia en un laboratorio microbiológico, que han recibido formación en
materia de seguridad y están familiarizados con todos los métodos que se
aplican en el estudio, deben estar autorizados a llevar a cabo el procedimiento.
Un análisis microbiológico completo de los alimentos se divide en varios
procedimientos, cuyo objetivo es identificar grupos patógenos específicos. Todos
ellos se clasifican en tres categorías:
Bacterias aeróbicas mesófilas y aeróbicas facultativas
Microorganismos patógenos y condicionalmente patógenos
Bacterias de deterioro (pueden ser levaduras o mohos)
El análisis puede realizarse en cualquier fase y debe ser iniciativa de la empresa
productora.
Determinación de las bacterias coliformes
Uno de los principales objetivos de la prueba es determinar los coliformes
Bacillus, que pertenecen al grupo E. coli. Esta es una de las categorías más
comunes de patógenos que se encuentran frecuentemente en los alimentos. El
método utilizado para detectarlos se basa en la inoculación de un producto
seleccionado o su dilución en medio líquido con lactosa y bilis. Durante la
incubación de los cultivos, se controlan los signos de crecimiento de las
bacterias coliformes. Para confirmar si las bacterias detectadas son
Bacteroidetes, se sumergen fragmentos de la muestra en tubos de ensayo con
medio líquido de confirmación.
Detección de estafilococos
Asimismo, durante las pruebas microbiológicas se analizan las muestras para
detectar la presencia de Staphylococcus aureus coagulasa-positivo y, por
separado, de Staphylococcus aureus. La prueba debe determinar la presencia
de microorganismos en productos de consistencia seca, el producto se inocula o
se diluye con la incubación en un medio líquido no selectivo. Para los alimentos

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de consistencia líquida o pastosa, la inoculación se realiza en medios nutritivos


selectivos.
Determinación de levaduras y mohos
El análisis, cuyo objetivo es determinar los niveles de levadura y moho, se
realiza no sólo en productos alimentarios, sino también en ingredientes
alimentarios funcionales que contienen probióticos. Para examinar las muestras
se utilizan medios nutritivos a los que se ha añadido neomicina, cloranfenicol y
clortetraciclina. Después de verter los cultivos en placas de Petri, se agita el
medio y se deja endure
3. MATERIALES Y REACTIVOS

MATERIALES

Cajas de Petri
El uso más común de estos
instrumentos es el de ser
contenedores para el cultivo de
células, bacterias, mohos y otros
tipos de microorganismos.

Asa drigalski
Material de vidrio que sirve para
esparcir, dispersar y rayar el
sustrato de crecimiento y las
bacterias en las superficies de
trabajo, tarimas y placas de Petri.

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Tubos de prueba
Estos tubos presentan tapa de
Bakelita color negro con guarnición
de goma autoclavables son
utilizados para el transporte y el
cultivo.

Vidrio de reloj
Se utiliza en química, física o
biología para medir la masa o el
peso de productos sólidos en
cantidad, evaporar.

Matraz Erlenmeyer de 250ml


Es un recipiente con una forma
cónica con una boquilla cilíndrica,
ampliamente utilizado en
laboratorios de química y física. Se
utiliza para contener y medir líquidos
o sustancias químicas.

Pipetas graduada
Se utiliza para tomar volumen de
soluciones donde no se requiere de
alta precisión. Se emplean en los
laboratorios para medir volumen o
transferir cantidades de líquido de
un recipiente a otro.

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Pipeta volumétrica
Se utilizan en muchos laboratorios
para transferir y dispensar una única
cantidad específica de líquido con
un grado de precisión muy elevado.

Pera de succión
Es un aparato que se utiliza en los
laboratorios con el fin de succionar
un líquido. Se suele utilizar para las
pipetas y para los cuentagotas.

La Rejilla de Asbesto
La Rejilla de Asbesto es la
encargada de repartir la temperatura
de manera uniforme cuando esta se
calienta con un mechero.

Papel aluminio
El papel de aluminio es
imprescindible para almacenar
muestras en el congelador,
autoclavar, incubar, sellar muestras,
etc.

Papel kraft
Usado en laboratorios para proteger
superficies y como envoltura para
autoclavar material de laboratorio.

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Gradilla metálica
Sirve para facilitar el soporte y el
manejo de los tubos de ensayo. De
este modo, los tubos se mantienen
en posición vertical, evitando que se
derramen las muestras que
contienen.

Piseta
Un frasco cilíndrico de plástico o
vidrio con tapa que contiene un tubo
flexible que se utiliza para dirigir
algún disolvente que se encuentre
en su interior.

Mechero Bunsen
Es un instrumento utilizado en los
laboratorios científicos para calentar,
esterilizar o proceder a la
combustión de muestras o reactivos
químicos.

Espátula
Se utiliza para tomar pequeñas
cantidades de compuestos que son,
básicamente, polvo.

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EQUIPOS

Balanza electrónica
Son instrumentos de pesaje de
funcionamiento no automático que
utilizan la acción de la gravedad
para la determinación de la masa.

Autoclave
Es un recipiente metálico de
paredes gruesas con cierre
hermético que permite trabajar con
vapor de agua a alta presión y alta
temperatura que sirve para
esterilizar instrumental (material
médico, de laboratorio, etc.) o
alimentos.

Incubadora
Es un dispositivo que sirve para
mantener y hacer crecer cultivos
microbiológicos o cultivos celulares.
La incubadora mantiene la
temperatura, la humedad y otras
condiciones en grado óptimo

Hornilla eléctrica
Es un instrumento que se usa para
secar y esterilizar recipientes de
vidrio, los cuales provienen de un
lavado de laboratorio.

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REACTIVOS

Agua destilada
La mayor aplicación del agua
destilada suele ser en los
laboratorios, siendo utilizada como
reactivo o solvente.

Plate Count
Plate Count Agar (PCA) es el medio
de cultivo para el recuento en placa
de microorganismos aerobios tanto
en superficies como en cualquier
tipo de alimento o muestra
ambiental.

Papa dextrosa
Es un medio utilizado para el cultivo
y cuenta de hongos y levaduras a
partir de muestras de alimentos,
productos lácteos y cosméticos.

Baird Parker
El agar de Baird-Parker es un tipo
de agar utilizado para el aislamiento
selectivo de especies de
estafilococos gram positivos.

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Agua peptona
El agua de peptona tamponada es
un medio de cultivo que sirve como
diluyente y permite el crecimiento de
microorganismos.

4. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVOS
PLATE COUNT
1. Pesar 0.8 gramos de Plate count y añadir en un matraz Erlenmeyer.
2. Añadir 50ml de agua destilada en el matraz Erlenmeyer.
3. Mezclar la mezcla y calentar. Tres veces tiene que estar en ebullición.
4. Tapar con papel aluminio y papel kraft el borde de la boca del matraz
Erlenmeyer. Amarrar con hilo el borde e identificar el medio de cultivo.
PAPA DEXTROSA
1. Pesar 1.95 gramos de Papa dextrosa y añadir al matraz Erlenmeyer.
2. Añadir 50ml de agua destilada al matraz Erlenmeyer.
3. Remover la mezcla y calentarla. Tres veces remover en ebullición.
4. Tapar con papel aluminio y papel kraft el borde de la boca del matraz
Erlenmeyer. Amarrar con hilo el borde e identificar el medio de cultivo.
BAIRD PARKER
1. Pesar 3.15 gramos de Baird Parker y añadir al matraz Erlenmeyer.
2. Añadir 50ml de agua destilada en el matraz Erlenmeyer.
3. Remover la mezcla y calentarla. Tres veces remover en ebullición.
4. Tapar con papel aluminio y papel kraft el borde de la boca del matraz
Erlenmeyer. Amarrar con hilo el borde e identificar el medio de cultivo.
5. Introducir los tres medios de cultivos al autoclave.
6. Sacar los medios de cultivo del autoclave y refrigerarlo.
ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DEL YOGURT GRIEGO

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1. Pesar 1.5 gramos de AP y prepararla en 100ml de agua destilada.


2. Esterilizar las cajas Petri, pipetas graduadas, volumétricas y el agua
peptonada.
3. Introducir al autoclave para esterilizar, una vez esterilizados sacar del
autoclave con mucho cuidado.
4. Plaquear las cajas Petri cerca del mechero Bunsen.
5. Una vez preparadas las muestras, colocar a incubación.
6. Realizar el conteo de UFC.
5. RESULTADOS
Se hizo el conteo de unidades formadoras de colonias de 5 UFC.
El yogur griego es considerado inocuo y apto para el consumo según normas
establecidas para el yogur.
6. OBSERVACIONES
● Al introducir los medios de cultivo en el autoclave estos tienen que estar
envueltos de papel kraft ya que si chocan entre matraces producirán que
estos se clisen.
● El equipo del autoclave es importante saber su técnica de uso.
● Las cajas de Petri tienen que estar bien esterilizadas.
● Se tuvo complicación al pipetear el yogur griego ya que este al ser espeso
no se podía pipetear por ende se usó otro método, para realizar el análisis
del yogurt, por eso en vez de pipetear se pesó la cantidad.
● Se observó que las muestras que contenían los diferentes agar dio un
buen resultado en la incubación, ya que no se proliferaron porque el
proceso se elaboró inocuamente e higiénicamente.
7. CONCLUSIONES
A través de análisis microbiológico realizado en el yogur griego elaborado por
estudiantes del instituto ITBC. Se llegó a la conclusión de que el yogur griego
elaborado con inocuidad en el laboratorio es aceptable para el consumo, ya que
al realizar el análisis microbiológico se observó que sólo se formo 5 unidades
formadores de colonias, por ende nuestro yogurt esta en el rango establecido
para que las personas puedan consumir.

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8. BIBLIOGRAFÍA
- https://www.lacteoslatam.com/yogurt-griego-sin-azucar/#:~:text=%C2%BF
Qu%C3%A9%20es%20el%20yogur%20griego,que%20el%20yogur%20e
stilo%20convencional.
- https://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0212-161120030
00400006
- https://www.inilab.es/productos/microbiologia/medios-de-cultivo/deshidrata
dos/agua-de-peptona/#:~:text=El%20agua%20de%20peptona%20tampon
ada,estudios%20de%20fermentaci%C3%B3n%20de%20carbohidratos.
- https://www.doehler.com/es/nuestro-portafolio/soluciones-integrales/soluci
ones-en-servicios/medios-de-cultivo-para-la-deteccion-de-microbios/portaf
olio-de-productos-dmdr/agar-de-recuento-de-bacterias.html#:~:text=Plate
%20Count%20Agar%20(agar%20de%20recuento%20en%20placa)&text=
El%20agar%20de%20recuento%20en,industria%20de%20alimentos%20y
%20bebidas.
-

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ANEXOS I

Fuente propia Fuente propia


Fuente propia

Medios de cultivo como ser Medios de cultivo en el Medios de cultivo en


Plate Count Agar autoclave. ebullición. Tres veces en
Papa Dextrosa Agar ebullición.
Baird-Parker Agar

ANEXOS II

Fuente propia Fuente propia Fuente propia

Preparación del agua Esterilización de cajas Preparación de la muestra


peptonada. Petri, pipetas graduadas, del yogurt para el análisis
pipetas volumétricas y el microbiológico.
agua peptonada.

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Fuente propia
Fuente propia Fuente propia

Plaqueado en las cajas Siembra con asas drigalski Muestras de análisis listas
Petri para el aná en las muestras. para la incubación.

ANEXOS III

BAIRD PARKER AGAR PAPA DEXTROSA AGAR ( PLATE COUNT


(ESTAFILOCOCOS) MOHOS Y LEVADURAS) (AEROBIOS MESÓFILAS)

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ANEXOS
Medios cultivo
A grandes rasgos, un medio de cultivo microbiológico es una sustancia líquida o sólida
que permite el crecimiento de colonias de bacterias en su superficie o en su interior. En
este sentido, los medios pueden ser caldos (líquidos) o los conocidos como agares
(sólidos), una sustancia que se obtiene de las paredes celulares de distintas algas y
que, después de diluirse en agua y enfriarse, adquiere una consistencia gelatinosa,
perfecta para sembrar en ella colonias de bacterias.
En microbiología, sembrar significa inocular o introducir una muestra (que puede ser,
por ejemplo, agua de un río) en un medio de cultivo determinado con el fin de estimular
el crecimiento de las bacterias presentes en la muestra y así obtener colonias que sean
visibles en este medio.
Y es que aunque parezca una obviedad, las bacterias no pueden verse. Lo que sí que
pueden verse son las colonias que forman cuando, en estos medios de cultivo que
reúnen todas las características necesarias para su replicación “en masa”, hay miles de
millones de bacterias. Y cada especie bacteriana da lugar a unas colonias con
propiedades únicas (color, forma, consistencia, textura, tamaño…), por lo que estos
medios de cultivo nos dan la posibilidad de conocer muchas cosas (o, al menos, hacer
una primera aproximación) de qué bacteria (o bacterias) hay en nuestra muestra.
Además, otra cosa de gran interés de los medios de cultivo es que permiten aislar la
bacteria en cuestión. Pero, ¿esto de qué sirve? Pues básicamente para, en cuanto
localicemos la colonia que nos interesa (hay que tener en cuenta que en un mismo
medio, después de sembrar la muestra, pueden haber muchas colonias distintas),
recoger una porción de esta y sembrarla en otro medio nuevo, para así hacer crecer
solo la bacteria que nos interesa.
Más allá de esto, la variedad de medios de cultivo es enorme. Todos comparten la
característica de ser caldos o agares, pero cada uno tendrá unos nutrientes
determinados en su interior. ¿De qué dependerá esto? Sin duda, de la bacteria que
esperemos aislar. Dependiendo de qué queramos encontrar, utilizaremos un medio de
cultivo u otro.

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Los medios de cultivo disponen de sustancias que inhiben el crecimiento de las


bacterias que no nos interesan y nutrientes específicos que sabemos que
incrementarán enormemente la tasa de reproducción de aquellas que sí que queremos
que se desarrollen.
Dependiendo de cómo de estricta es esta inhibición (cuantas más sustancias
inhibitorias, más delgado será el rango de especies que pueden crecer), tendremos
medios de cultivo en los que unas pocas especies pueden crecer, otros en los que
pueden desarrollarse varias y, por último, algunos en los que pueden crecer muchas.
De hecho, hay algunos medios que simplemente estimulan las gram negativas e
inhiben las gram positivas. O viceversa.
¿Cuáles son los principales medios de cultivo?
Existen muchas clasificaciones de los medios de cultivo: según la consistencia, según
la composición, según las sustancias inhibitorias, según los nutrientes… Pero en el
artículo de hoy nos quedaremos con la clasificación que responde a su utilidad.
En este sentido, los medios de cultivo pueden ser selectivos o diferenciales. Los
selectivos son, quizás, los más comunes y son los que permiten seleccionar (de ahí el
nombre) el crecimiento de una (o unas) especie bacteriana concreta e inhibir el de las
demás. Los diferenciales, por su parte, son aquellos medios en los que, inoculando una
muestra, crecen distintas comunidades bacterianas, pero gracias a las propiedades del
medio, podemos diferenciarlas entre ellas, es decir, permite una determinación de la
especie. Los selectivos, aíslan; los diferenciales, identifican.
1. Medios selectivos
Como hemos dicho, los medios selectivos son aquellos caldos o agares que estimulan
el crecimiento de una o unas especies de bacterias concretas e inhiben el de las otras.
Es decir, estos medios selectivos son los que se utilizan cuando queremos estudiar una
muestra en la que sabemos que habrá muchas comunidades bacterianas distintas,
pero solo nos interesa recuperar una.
En este contexto, utilizar un medio selectivo que inhibe las bacterias de nuestra
microbiota y estimule solo el de la posible especie patógena (muchas veces, ya
sembramos con el objetivo de encontrar una especie concreta, pues la mayoría de

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cuadros clínicos están causados casi siempre por las mismas especies de gérmenes)
es la mejor, por no decir la única, opción.
1.1. Agar MacConkey
El agar MacConkey es un medio de cultivo que inhibe el crecimiento de las bacterias
gram positivas y estimula la reproducción de los bacilos gram negativos, los cuales
suelen estar detrás de infecciones urinarias, diarreas, enfermedades gastrointestinales,
bacteriemias (bacterias en la sangre), peritonitis e incluso el tifus, el cólera o la peste.
1.2. Agar sangre
Como su propio nombre indica, el agar sangre dispone de sangre en su composición, la
cual suele ser de ovejas, caballos o, a veces, humanos. Es utilizado para estudiar la
función hemolítica de distintos patógenos, es decir, su capacidad para destruir los
eritrocitos (glóbulos rojos) cuando circulan por el torrente sanguíneo. Dependiendo de
lo que añadamos, permitirá el crecimiento de unas especies concretas, siendo un
medio muy selectivo.
1.3. Agar chocolate
El agar chocolate es el medio de cultivo que se obtiene al calentar el agar sangre. Sea
como sea, el más utilizado es aquel en el que se añade vancomicina (un antibiótico) y
distintos nutrientes para estimular el crecimiento únicamente de “Neisseria
gonorrhoeae” y “Neisseria meningitidis”, bacterias responsables de la gonorrea y
meningitis, respectivamente.
1.4. Agar Sabouraud
El agar Sabouraud es un medio de enriquecimiento y aislamiento de distintas especies
de hongos, levaduras y mohos. Por lo tanto, es útil cuando no queremos detectar
bacterias (de hecho, tienen distintos antibióticos para impedir su desarrollo), sino este
tipo de microorganismos, sean patógenos o no.
1.5. Caldo tetrationato
El caldo tetrationato es un medio líquido (a diferencia de los agares sólidos que hemos
ido viendo) que contiene sales biliares y otras sustancias inhibitorias que impiden el
desarrollo de las bacterias gram positivas y el de algunas gram negativas, pues solo
nos interesa que crezcan las bacterias que disponen de una enzima determinada, que
es la tetrationato reductasa (de ahí el nombre). Este medio de cultivo es muy útil, pues,

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para el aislamiento de colonias de “Salmonella”, responsable de enfermedades de


transmisión alimentaria.
1.6. Caldo selenito
El caldo selenito es otro medio de cultivo líquido para el aislamiento de “Salmonella”,
aunque en este caso su método de acción no se basa en detectar la enzima anterior,
sino en inhibir (mediante el selenito) el crecimiento de otras bacterias presentes en
nuestro tracto digestivo.
1.7. Agar EMB
El agar EMB es un medio de cultivo sólido muy útil para el aislamiento de
enterobacterias, es decir, aquellas que habitan de forma natural nuestros intestinos
pero que, ante determinadas situaciones, pueden pasar a comportarse como
patógenos. “Escherichia coli” es el claro ejemplo de ello, y, además, este medio permite
que se observen claramente sus colonias, las cuales desarrollan un color brillante
negro verdoso.
1.8. Agar SS
El agar SS es un medio de cultivo sólido utilizado para el aislamiento de, además de
“Salmonella”, “Shigella”, una bacteria que normalmente se contagia a través de
alimentos o agua contaminada y que provoca una infección que cursa con diarrea (la
cual suele contener sangre), fiebre y dolor abdominal.
1.9. Agar Vogel-Johnson
El agar Vogel-Johnson es un medio de cultivo sólido diseñado para el aislamiento de
“Staphylococcus aureus”, una bacteria que puede causar muchos tipos de infecciones
distintas, desde enfermedades de la piel (es lo más común) hasta infecciones óseas,
pasando por neumonías, bacteriemias, endocarditis (infección del corazón) e
intoxicaciones alimentarias. Inhibe el crecimiento de todas las gram negativas y el de
algunas gram positivas.
1.10. Agar manitol sal
El agar manitol sal, también conocido como manitol salado, es un medio de cultivo
sólido que sigue siendo utilizado para el aislamiento de “Staphylococcus aureus”,
aunque en este caso el poder inhibitorio sobre el resto de bacterias es más fuerte. Es
decir, es más selectivo que el anterior.

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1.11. Agar BCYE


El agar BCYE es un medio de cultivo sólido especialmente diseñado para el
aislamiento de “Legionella” y “Nocardia”, dos géneros de bacterias responsables de
una neumonía grave (potencialmente mortal) y de una infección pulmonar que puede
diseminar, en personas inmunodeprimidas, a otros órganos (piel, cerebro, corazón…),
respectivamente.
1.12. Agar BHI
El agar BHI es un medio de cultivo sólido que vuelve a ser útil para el aislamiento de
hongos, aunque en este caso se centra en la detección de aquellos que actúan como
patógenos. De nuevo, dispone de varios antibióticos para inhibir el crecimiento de las
bacterias.
1.13. Agar Baird-Parker
El agar Baird-Parker es un medio de cultivo sólido diseñado para el aislamiento de
“Staphylococcus aureus”, aunque en este caso permite el crecimiento de otras
especies de estafilococos, siempre que sean coagulasa positivos, es decir, que
dispongan de esta enzima conocida como coagulasa.
1.14. Caldo EC
El caldo EC es un medio de cultivo líquido diseñado para permitir el crecimiento de
coliformes, un grupo de distintos géneros de bacterias que sirven como indicador de la
contaminación fecal tanto de aguas como de alimentos.
1.15. Agar verde brillante
El verde brillante es una sustancia inhibidora que impide el crecimiento de todas las
bacterias gram positivas y de la mayoría de gram negativas. En este sentido, el agar
verde brillante es un medio de cultivo sólido utilizado para el aislamiento de distintas
especies de “Salmonella”
1.16. Agar TCBS
El agar TCBS es un medio de cultivo sólido que contiene Tiosulfato, Citrato y Sales
Biliares. De ahí el nombre. Sea como sea, estas sustancias estimulan el crecimiento
selectivo de distintas especies de “Vibrio”, un género bacteriano que provoca
enfermedades gastrointestinales y donde destaca “Vibrio cholerae”, responsable del
cólera.

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I.T.B.C. "EL PASO" QUÍMICA INDUSTRIAL MATERIA: BMI

2. Medios diferenciales
Como hemos mencionado anteriormente, los medios diferenciales son aquellos en los
que permitimos el crecimiento de distintas comunidades bacterianas, pero, gracias a
las propiedades del medio, podemos diferenciarlas entre ellas
Pero, ¿cómo? Básicamente, induciendo a las bacterias presentes en la muestra a
desarrollar distintas reacciones químicas, las cuales se manifestarán con un cambio de
color en nuestro medio de cultivo o con la observación de fenómenos como la
movilidad de colonias o la formación de gas. De este modo podemos diferenciar
especies de bacterias.
2.1. Medio TSI
El medio TSI es un medio de cultivo diferencial en el que se busca determinar la
capacidad de la bacteria para degradar el azúcar y formar gas y sulfuros de hidrógeno.
Dependiendo de lo que observemos (hay perfiles que nos permiten comparar y saber
ante qué nos encontramos), podremos determinar qué bacteria había en la muestra.
2.2. Citrato de Simmons
El citrato de Simmons es un medio de cultivo diferencial útil para, valga la redundancia,
diferenciar entre distintas especies de coliformes. El medio se basa en determinar la
capacidad de las bacterias para utilizar el citrato como fuente de carbono. Si no es
capaz de usarlo, el medio se mantendrá verde. Pero si es capaz, pasará a ser azul.
2.3. Caldo urea
El caldo urea es un medio de cultivo diferencial que permite, de nuevo, diferenciar entre
distintas especies. Se basa en determinar la capacidad de la bacteria de degradar la
urea. Si la bacteria tiene la enzima necesaria, el color pasará a ser rojo, mientras que si
no dispone de ella, se mantendrá en el color original.
2.4. Medio SIM
El medio SIM es un medio de cultivo diferencial que determina la capacidad de la
bacteria para formar indol (un compuesto químico orgánico), producir sulfuro de
hidrógeno y moverse. Dependiendo del perfil obtenido, estaremos ante una especie u
otra.

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