Laboratorio II: EXTRACCIÓN DE MUESTRA DE SANGRE Y OBTENCIÓN DE

SUERO Y PLASMA SANGUÍNEO MEDIANTE CENTRIFUGACIÓN.

Resumen
Esta práctica experimental tuvo como objetivos principales conocer la extracción de
plasma y suero sanguíneo, y la importancia de la técnica de centrifugación al
momento de analizar esta u otra muestra biológica, esto con el fin de conocer los
diversos biomarcadores, los cuales son utilizados para obtener información que
tiene importancia en el diagnóstico, seguimiento y tratamiento de diversas
condiciones de salud. Se llegó a los resultados usando compuestos como el
anticoagulante EDTA K3, que permitió analizar la muestra en las tres fases que la
componen, y compararla con la muestra sin anticoagulante, llegando a la conclusión
de que ambos ayudan a la determinación de estos biomarcadores que tienen
relevancia en las ciencias de la salud.
Palabras clave: Plasma, Suero, Diagnóstico, Anticoagulante, Biomarcadores.

Abstract
The main objectives of this experimental practice were to learn about the extraction
of plasma and blood serum, and the importance of the centrifugation technique when
analyzing this or any other biological sample, in order to learn about the different
biomarkers, which are used to obtain information that is important in the diagnosis,
follow-up and treatment of various health conditions. The results were obtained using
compounds such as the anticoagulant EDTA K3, which allowed to analyze the
sample in the three phases that compose it, and to compare it with the sample
without anticoagulant, reaching the conclusion that both help in the determination of
these biomarkers that have relevance in health sciences.
Key words: Plasma, Serum, Diagnostic, Anticoagulant, Biomarkers.

Introducción.
La sangre es un vehículo líquido de comunicación vital, entre los distintos tejidos del
organismo, actúa como transporte de hormonas desde las glándulas endocrinas
hasta los tejidos diana, transporte de productos de desecho, resultantes del
metabolismo celular desde los lugares de producción hasta los de eliminación
aparte de estas funciones la sangre está constituida por células sanguíneas,
plaquetas, plasma y numerosas proteínas, es por esto que mediante su análisis en
el laboratorio se puede extraer información sobre los correctos parámetros
biológicos del ser humano. (1)
La extracción de muestra de sangre y la obtención de suero y plasma sanguíneo
mediante centrifugación son procedimientos fundamentales en el ámbito de la
medicina y la investigación clínica. Estos procesos permiten obtener componentes
valiosos de la sangre humana que son esenciales para el diagnóstico y seguimiento
de diversas condiciones de salud, así como para la investigación de enfermedades y
la evaluación de la función orgánica. Durante esta práctica se tuvo como objetivo
principal aprender a extraer el suero y el plasma de la sangre humana, esto con el
fin de conocer los biomarcadores y su importancia en las ciencias de la salud, los
biomarcadores son sustancias medibles en la sangre u otros fluidos corporales que
proporcionan información sobre un proceso biológico normal o anormal, una
condición de salud o una respuesta al tratamiento, estos biomarcadores pueden ser
proteínas, enzimas, hormonas, ácidos nucleicos (como el ADN y el ARN) y muchos
otros componentes biológicos.

1. Metodología
1.1. Obtención de suero sanguíneo
Se extrajeron 5mL de sangre y se agregó en un tubo sin anticoagulante, se dejó en
posición vertical aproximadamente por 30 minutos a una temperatura ambiente para
la coagulación de la sangre y luego se centrifugó durante 15 minutos.
1.2. Obtención del plasma sanguíneo
Se extrajeron 5mL de sangre y se agregó en un tubo con anticoagulante (EDTA-K3),
luego se intervino suavemente para favorecer la mezcla, se procedió a centrifugar la
muestra por 15 minutos.

2. Resultados
2.2. Obtención de suero sanguíneo.
En la Fig. 1 se observó el tubo de ensayo con la tapa de color rojo, el cual se dividio
en dos capas, en la parte superior del tubo (sobrenadante) se observa una
sustancia liquida con un color naranja claro y en el sobre fondo del tubo
(precipitado) se observa un liquido de color rojo claro y en medio de esto se puede
ver un coágulo de sangre con un color rojo intenso. Al momento de voltear el tubo
los líquidos se unieron pero el coágulo se quedó en el fondo del tubo.

2.1. Obtención de plasma sanguíneo

En la Fig. 2 se observó el tubo de ensayo con la tapa de color lila,en la parte
superior del tubo una capa liquida de color casi transparente amarillenta, en el fondo
del tubo se logró observar una capa liquida de color rojo intenso y en medio de
estas dos capas liquidas se observa una pequeña capa de color blanco. Al momento
de voltear o mover el tubo todo se volvió una sustancia homogénea.

3. Análisis
La sangre está constituida por muchas enzimas, para mencionar algunas se
encuentran la seudocolinesterasa, lipoproteína lipasa, así como componentes de la
cascada de eventos en la coagulación de la sangre y en la disolución del coágulo.
Otras enzimas se liberan hacia el plasma desde de la muerte o la lesión celular,
estas últimas no tienen función fisiológica en el plasma, su presencia o
concentración en la sangre es útil para ciertos diagnósticos y pronosticar
enfermedades que puedan afectar un tejido.
3.1. Suero
El suero sanguíneo se obtiene al eliminar el restante de la coagulación de la sangre
(figura 1) este suero es el equivalente al plasma sanguíneo pero no contiene
proteínas que favorecen la coagulación, este líquido se encuentra suspendido en las
células sanguíneas y es esencial para mantener el equilibrio homeostático del
cuerpo. Este suero es una mezcla compleja de productos de desechos metabólicos,
agua, proteínas, electrolitos, hormonas, lípidos etc, también ayuda a la transmisión
de impulsos nerviosos y contracción muscular, posee proteínas como las globulinas
y albúminas, esta última teniendo como funciones regular la presión osmótica
sanguínea y actúa como transportador de hormonas y medicamentos. Las
globulinas se dividen en alfa y beta cuya función es transportar sustancias, y las
gammaglobulinas que generalmente son anticuerpos, este suero contiene hormonas
que son sustancias que tienen la función de ser mensajeros en el organismo.
en la medicina este suero sanguíneo es usado como una herramienta de
diagnóstico, ayuda a la detección de enfermedades como cáncer y diabetes,
detectar patógenos y presencia de anticuerpos, con respecto a la fabricación de
medicamentos es usado para crear suero antiofídico, es usado para la producción
de inmunoglobulinas para darle tratamiento a enfermedades infecciosas e
inmunológicas (3)
3.2. Plasma sanguíneo
Al momento de obtener el plasma sanguíneo, como se puede ver en la figura 2, se
observaron estas 3 fases que corresponden al plasma sanguíneo (Figura 2, A),
glóbulos blancos y plaquetas (Figura 2, B) y glóbulos rojos (Figura 2, C). Este
resultado se obtuvo gracias a la centrifugación de la muestra, que permitió separarla
en las fases que las componen. Parte clave del proceso fue el anticoagulante
EDTA-K3 (sal tripotásica del ácido etilén- diamino - tetraacético), este es uno de los
anticoagulantes más usados en los laboratorios con el fin de conservar la muestra
sanguínea, cabe resaltar que la elección del anticoagulante depende del test o el
equipo a realizar, el EDTA-K3 es usado para hemogramas, banco de sangre y otras
pruebas, lo que este hace es inhibir el proceso de coagulación eliminando el calcio
de la sangre, impide la activación de la trombina, la conversión del fibrinógeno en
fibrina, por tanto la coagulación sanguínea, reduce la activación plaquetaria, es por
esto que es idóneo para recuento de plaquetas, hematíes, entre otros exámenes,
debido a que conserva la morfología de las células sanguíneas. Se observaron
óptimos resultados por la utilización adecuada de este anticoagulante, el uso
excesivo de este puede afectar la morfología de los eritrocitos y leucocitos, por lo
tanto afectar el análisis de la muestra. (4) En la primera fase se observó el plasma
(Figura 1, A) contiene albúmina, fibrinógeno, inmunoglobulinas, lípidos,
lipoproteínas, hormonas, vitaminas y sales; por otra parte la capa leucocitaria es
casi imperceptible, y representa alrededor del 1% (Figura 2, B), como tercera y
última fase se puede observar lo que corresponde a las hematíes o recuento de
glóbulos rojos. (4)

4. Conclusión

Se aplicaron adecuadamente las técnicas de extracción de muestra de sangre y

obtención de suero y plasma sanguíneo a través de centrifugación, se pudo
observar que el suero es el componente líquido de la sangre obtenido después de la
coagulación mientras que el plasma es el componente líquido de la sangre obtenido
antes de que ocurra la coagulación. Se comprendió la importancia de la extracción
de suero y plasma en el ámbito clínico para el diagnóstico y seguimiento de
diversas enfermedades, y la importancia de conocer los biomarcadores que son los
parámetros que ayudan a identificar alguna patología.

5. Preguntas

1. Explique las diferencias entre plasma y suero sanguíneo.

El plasma y el suero se obtienen de una porción líquida de la sangre. Una sustancia llamada
fibrinógeno es esencial en la coagulación de la sangre, cuando se separan el suero y
plasma de la sangre, el plasma aún conserva el fibrinógeno mientras que el suero carece de
esta sustancia, el plasma hace el 55% del volumen total de sangre, mientras el suero
contiene 6-8% de las proteínas que forman la sangre, el plasma contiene los factores de
coagulación y agua, mientras que el suero contiene proteínas como la albúmina y las
globulinas. (5)

Max. D Gray (2017) Serum and Plasma (How you can Tell the Difference between Serum
and Plasma (onehowto.com)

2. ¿En qué tipo de análisis clínicos se utilizan el suero y el plasma sanguíneo

El plasma sanguíneo se puede usar para hacer análisis de glucosa, calcio y electrolitos en
sangre, además también sirve para medir la función renal

Los análisis de suero sanguíneo se pueden usar para evaluar la función de órganos como el
hígado, los riñones, el corazón y la tiroides, así como para detectar y monitorear
enfermedades como la diabetes y ciertos tipos de cáncer.

Clínica Universidad de Navarra (2023) (Análisis de sangre - Análisis de sangre | NHLBI,

NIH) (6)

3. ¿Cuándo se extrae una muestra de sangre, qué factores influyen en el análisis de

los resultados? ¿Cómo funciona el EDTA en la sangre?

MEDICAMENTOS
La mayoría de los medicamentos pueden tener efectos secundarios en los resultados de las
pruebas de laboratorio. Por ejemplo, las medicinas destinadas a reducir los niveles de
colesterol pueden impactar la función hepática, y en muchos casos, llevar a respuestas
elevadas en las mediciones de transaminasas y bilirrubinas.

ALCOHOL

El alcohol puede tener varios efectos en el cuerpo que podrían influir en los resultados
aumento en el nivel de la glucosa, se pueden presentar daños en el hígado y aumentar
los niveles de enzimas hepáticas en el torrente sanguíneo.

ALIMENTOS

Es importante determinar qué ingirió el paciente horas o días previos a la realización

de una prueba, aunque generalmente se entiende que se debe acudir en ayunas

El EDTA

Funciona como agente anticoagulante al unirse a iones metálicos en la sangre, lo que

previene la coagulación y permite la preservación y el análisis adecuado de las muestras en
pruebas de laboratorio

Este anticoagulante permite una mejor preservación de los componentes celulares, las
sales de EDTA causan pérdida de agua de las células afectando el tamaño de los glóbulos
rojos porque son hiperosmolares. Existen tres formas salinas de este agente quelante:
EDTA disódico (EDTANa2), dipotásico (EDTAK2) y tripotásico (EDTAK3)

(7)

Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires (22 Mayo 2018) Influencia de los
anticoagulantes EDTAK2 y EDTAK3

4. ¿Qué otros anticoagulantes se utilizan en los tubos para la extracción de sangre?

Anticoagulan FUNDAMENTO
te

EDTA Actúa como quelante (secuestrante) de Ca++, el cual desempeña

un papel muy importante para que se lleve a cabo el proceso de
coagulación, impidiendo así la formación de fibra.
 Heparina Potencializa la formación de complejos entre la antitrombina III y
proteasas de serina: Ixa, IXa y Xia (sustancias que desempeñan un
papel muy importante en la formación de coágulo) evitando así la
formación del coágulo.

Citrato de El citrato de sodio se une al calcio (Ca++) presente en la sangre,

Sodio provocando que desaparezcan los iones de calcio del plasma y
evitando así la coagulación sanguínea.

OXALATO Su modo de acción se basa en su capacidad para formar

complejos insolubles con el calcio presente en la sangre, cuando
se agrega a la muestra de sangre, el oxalato se combina con los
iones de calcio presentes en la sangre para formar un compuesto
insoluble llamado oxalato de calcio

Tabla 1

5. Investigue los diferentes biomarcadores presentes en sangre y su importancia en

el diagnóstico de diferentes enfermedades

Los biomarcadores se encuentran diferenciados en tres tipos: Biomarcador de exposición,

el cual evalúa en un organismo la presencia de una sustancia exógena,

Biomarcador de Efecto, que evalúa la alteración bioquímica, fisiológica o de

comportamiento producida en el organismo que puede ser asociada con una enfermedad.

Biomarcadores de Susceptibilidad, es un indicador de la capacidad heredada o adquirida

de un organismo para responder a la exposición a una sustancia xenobiótica.

Exposición Excreción de metabolitos en orina

Aductos de ADN

Aductos de albúmina

Aductos de hemoglobina

Efecto Recuento de eritrocitos, leucocitos y

trombocitos

Inhibición de enzimas del grupo HEMO

Niveles de proteínas en orina

 Marcadores de citotoxicidad

Niveles de células necróticas

Niveles de anticuerpos

Susceptibilidad Polimorfismo de enzimas

Polimorfismo de la glutation-tranferesa

Polimorfismo genético

Tabla 2

Sandra S. Arango. Biomarcadores para la evaluación de riesgo en la salud humana. Rev.

Fac. Nac. Salud Pública 2011

6. Identifique y clasifique los tipos de biomarcadores carcinógenos.

BIOMARCADORES CANCERIGENOS CLASIFICACION

Beta-2 microglobulina marcador tumoral Se utiliza para evaluar la función renal y el

pronóstico en enfermedades como el
mieloma múltiple y algunos tipos de
linfomas.

Antígeno carcinoembrionario (CEA) Se utiliza principalmente para el

seguimiento de cánceres colorrectales. Sin
embargo, también puede estar elevado en
otros tipos de cánceres, como el de
páncreas, pulmón, mama y ovario. Se usa
para monitorear la respuesta al tratamiento
y detectar recurrencias.

Análisis de CA 125 Es un marcador tumoral que se asocia

principalmente con el cáncer de ovario. Se
utiliza para el diagnóstico y seguimiento de
este tipo de cáncer, pero también puede
estar elevado en otras condiciones
benignas y malignas, como la
endometriosis y algunos cánceres de
mama y pulmón.

AFP (alfafetoproteína) Se usa para para ayudar a diagnosticar

el cáncer de hígado
 CA-125 (antígeno del cáncer 125) Averiguar si el tratamiento del cáncer está
dando resultado

• Averiguar si el cáncer ha
reaparecido después de haber
terminado el tratamiento

Tabla 3

INSTITUCIÓN NACIONAL DEL CÁNCER (2021) Pruebas de biomarcadores para el

tratamiento de cáncer - NCI (cancer.gov)

6. Bibliografía
1.Julia Reiriz Palacios (2015) Doctora en Medicina. Especialista en Neurología
SISTEMA INMUNE Y LA SANGRE
2. Murray R. y col. Bioquímica de Harper Ilustrada, Manual Moderno, México,
2004, 16 edición.
3. Clínica Universidad de Navarra (2023) (Análisis de sangre - Análisis de
sangre | NHLBI, NIH)

4.Patricia E. Jaramillo-Arbeláez, Jannet Zapata-Bailarín, Yeny C.

Mesa-Vásquez, Mariana Ochoa-Ochoa, Karen L. Arévalo-Acosta. Comparación
de parámetros hematológicos y morfología celular en muestras de sangre con
EDTA K2 y EDTA K3. Editora Médica Colombiana S.A., 2020.